Способ прогнозирования лизиса аутодермотрансплантата

 

Изобретение относится к медицине , а именно к иммунологическим способам прогноза приживляемости яутодермотрансплантата . Целью изобретения является повьшение точности прогноза . Способ осуществляется следующим образом. У больных определяют количество розеткообразующих клеток: ранних, образующихся при 15-25°С в течение 5 мин восстановленных, образующихся при двухэтапной инкубации клеток при 37 С в течение 1,5 ч и затем при 15-25 С в течение 1 ч, и безосадочных, образующихся при 15- 25°С в течение 1 ч. При отношении ранних и восстановленных розеткообразующих клеток более 0,7 и/или при числе безосадочных розеткообразующих клеток свыше 4% прогнозируют возможность лизиса аутодермотрансплантата. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21 ) 405847 3/28-1 4; 4061 303/28-1 4 (22) 17.04.86 (23) 22.06.86 (46) 30.01.89. Бюл. М- 4 (71) Институт клинической иммунологии

СО АКК СССР (72) И.A. Волчек, В.С. Кожевников и В.П. Лозовой (53) 615.375(088.8) (56) Вестник хирургии, 1984, Ф 12, с. 48-49. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ЛИЗИСА

АУТОДЕРМОТРАНСПЛАНТАТА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологическим способам прогноза приживляемости ауто1

Изобретение относится к медицине, а именно к способам прогноза пересадки собственной кожи при ожогах, отморожениях, трофических язвах, длительно незаживающих ранах и обширных повреждениях кожи.

Цель изобретения — повышение точности прогноза.

Способ осуществляют следующим образом.

Для выделения мононуклеаров (MHK)

5 мл венозной крови стабилизируют гепарином (250 ед/мл) и наслаивают на 3 мл раствора верографин-фиколл (с = 1,082 г/смэ). После центрифугирования при 400 g в течение 40 мин

MHK собирают пастеркой с поверхности раствора и 3 раза отмывают: 1-й раз при 400 g 10 мин, 2-й при 200 g

ÄÄSUÄÄ 1455316 А1 (5Н 4 G 01 N 33 49/49 33/53 дермотрансплантата. Целью изобретения является повышение точности прогноза. Способ осуществляется следующим образом. У больных определяют количество розеткообразующих клеток: о ранних, образующихся при 15-25 С в течение 5 мин восстановленных, обра- зующихся при двухэтапной инкубации клеток при 37 C в течение 1,5 ч и о затем при 15-25 С в течение 1 ч, и безосадочных, образующихся при 1525 С в течение 1 ч. При отношении ранних и восстановленных розеткообразующих клеток более 0,7 и/или при числе безосадочных розеткообразующих клеток свыше 4Х прогнозируют возможность лизиса аутодермотрансплантата.

5 мин в забуферном растворе, 3-й— при 200 g 5 мин в среде 199.

Клетки суспендируют в 1 мл среды 199, подсчитывают в камере Горяева и раз5 водят средой 199 до концентрации

2,5х10 клеток/мл.

Венозную кровь барана хранят не более 2-х недель после забора с консервантом (1SZ от общего объема).

Используют трижды отмытые средой 199 (1-s. и 2-я отмывки при 200 g 5 мин, 3-я при 400 g 5 мин) эритроциты бара.на (ЭБ) в виде 1,5Х-ной суспензии.

Для определения ранних розеток (р = РОК) 0,2 мл МНК смешивают с

0,2 мл взвеси ЭБ, центрифугируют

5 мин при 200 я, инкубируют при 15о

25 С 5 мин. Перед подсчетом розеткообразующих клеток (РОК) удаляют з

t4

0,2 мл надосадочной жидкости, осадок суспендируют осторожным покачиванием пробирок (10-15 движений). Каплю полученной суспензии помещают на предметное стекло и накрывают покровным.

При 300-400-кратном увеличении под воздушной иммерсией подсчитывают количество лимфоцитов с 3 и более прикрепившимися ЭБ (розетки) на 100лимфоцитов.

Восстановление розетки: (в-РОК):.

0,2 мл MHK смешивают с 0,2 мл взвеси ЭБ, центрифугируют 5 мин при

200 g, инкубируют 1,5 ч при 37 С и

16-18 ч при 4 С. Далее повторяют описанные действия. После подсчета числа POK в крови обследуемых определяют отношение чисел ранних и восстановленных розеток и при величине этого отношения > 0,7 прогнозируют возможность приживления аутодермотрансплантата.

Способ безосадочного роэеткообразования (б-РОК): 0,2 мл МНК смешивают с 0,2 мл взвеси ЭБ. Инкубируют о при 15-20 С 1 ч, непрерывно перемешивая. Перед подсчетом РОК удаляют

0,2 мл надосадочной япщкости, осадок суспендируют осторожным покачиванием пробирок (10-15 движений). Каплю полученной суспензии помещают на . предметное стекло и накрывают покровным. При 300-400-кратном увеличении под воздушной иммерсией подсчитывают количество лимфоцитов с 3 и более прикрепившимися ЭБ (розетки) на

100 лимфоцитов.

Определив число POK оценивают их уровень. При б-POK 4X прогнозируют возможность приживления дермотрансплантата.

H p и м е р 1. Больной А. показана аутодермопластика. За сутки до операции определено количество POK р-РОК = 202, в-РОК = 243, - р-POK

= — = О 83. Прогнозировалось при24 живление.

Пример 2. У больного Б. за сутки до операции р-POK = 257, в-РОК= р-РОК 25

17Х вЂ” 1,47. Прогнози". в-PÎK 17

55316

4 ровалось приживление аутодермотрансплантата.

П р и м е 9 3. У больного Г. р-POK = 207, в-POK = ЗОБ, 20

= — = О 66. Прогнозировался лизис

30 аутодерматрансплантата.

П р и и е р 4. У больного Д.

10 р-POK 8 р-РОК = 87, в-РОК = 397, = 0,20. Прогнозировался лизис аутодермотрансплантата.

Пример 5. У больного Е. об15 ширный дефект кожи, показана аутодермопластика. За сутки до операции б-POK = 4X. Прогнозировалась приживление аутодермотранспланата.

Пример 6. У больного Ж. обширный дефект кожи б-POK = 137,Про1 гнозировался лизис аутодермотранс". плантата.

Прогнозирование по отношению р-POK

25 и в-РОК обеспечивает точность не ниже

96Й, Прогноз по б-РОК обеспечивает точность не ниже, чем на 987.

Комплексирование прогноза по отнор-POK шению и б-РОК позволяет еще в-РОК больше увеличить точность определения приживляемости аутодермотрансплантата.

Формула изобретения

Способ прогнозирования лиэиса аутодермотрансплантата, включающий

40 выделение у больных мононуклеарных клеток, инкубацию их с эритроцитами барана и определение числа розеткообразующих клеток, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повыше45 ния точности прогноза, у больных определяют количество ранних, восстановленных и безасадочных розеткообраэующих клеток, вычисляют отношение ранних и восстановленных розеток бО и при его значении большем 0,7 и/или при количестве беэосадачных розеток меньшем 4Ж, прогнозируют приживление аутадермотрансплантата.