Способ прогноза рецидивирующего течения рожи

 

Изобретение относится к иммунологии . Цель изобретения - повышение точности прогноза. Взвесь лимфоцитов вносят в лунки и инкубируют с антилимфоцитарной сывороткой. В лунки добавляют кроличий комплемент и инкубируют . Затем удаляют вазелиновое масло и добавляют трипан голубой. Определяют антигены главного комплекса гистосовместимости. При наличии антигена В,5 прогнозируют рецидивирующую форму рожи.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (И) (5!) 4 G 01 N 33 53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4188628/28-14 .(22) 09. 02. 87 (46) 15. 02. 89. Бюл, М 6 (71) Ростовский медицинский институт (72) Л.Д. Левина, Ю.M. Амбалов, J1.È. Малышева и А,I!. Коваленко (53) 615.375(088.8), (56) Авторское свидетельство СССР

N 10681 кл. А 61 К 39/00, 1980. (54) СНОСОВ ПРОГНОЗА РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО

ТЕЧЕНИЯ РОЖИ

Изобретение относится к медицине и может найти применение в практическом здравоохранении для прогнозирования часто рецидивирующей формы рожи на основе исследования в крови генетически наследуемых антигенов системы HLÀ.

Цель изобретения — повышение точности прогнозирования часто рецидивирующей формы рожи.

Способ осуществляют следующим образом.

У больного рожей, поступившего в стационар, в первый же день берут из вены 4-5 мл венозной крови и дефибринируют ее путем помешивания стеклянной палочкой в течение 7-8 мин до образования сгустка фибрина. Затем 2 мл дефибринированной крови смешивают с равным объемом среды

Хенкса и наслаивают осторожно пастеровской пипеткой на градиент плотности верографин-фиколла. Последний готовят путем смешивания 87-ного (57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения — повышение точности прогноза. Взвесь лимфоцитов вносят в лунки и инкубируют с антилимфоцитарной сывороткой. В лунки добавляют кроличий комплемент и иикубируют. Затем удаляют ваэелиновое масло и добавляют трипан голубой.

Определяют антигены главного комплекса гистосовместимости. При наличии антигена В прогнозируют рецидивирующую форму рожи. водного раствора фиколла и 32,8%-ного водного раствора урографина в сост- С» ношении 10: 24 плотностью 1,0761,077. Операцию проводят в пробирке диаметром 12-15 мм, куда помещают

2,5 мл смеси верографин-фиколла.

Центрифугируют 30-40 мин при 200g, после чего отсасывают осторожно

"белое облачко" лимфоцитов, образовавшихся в интерфазе, и переносят его в мерную центрифужную пробирку;

Добавляют 2 объема трис-буфера и .центрифугируют 10 мин при 200 g.

Надосадочную жидкость удаляют, а осадок ресуспензируют в растворе Хенкса (0,3-0,5 мл), доводя концентрацию лимфоцитов до 2-4 10 в 1 мл. С это6

ro момента суспензия лимфоцитов готова для реакции. Антигены системы и

HLA определяют методом микролимфоцк тотоксической реакции по Терасаки, используя для этого набор отечественных антилимфоцитарных сывороток.

Панель включает 120 типирующих сыво30 з 14588 роток, содержащих антитела к 17 ап. тигенам сублокуса А, к 25 антигенам сублокуса В и к 8 антигенам сублокуса С. Типирующие сыворотки раскапывают в лунки планшетов Терасаки под ваэелиновое масло и замораживают (-20 С) до момента использования.

Перед использованием сыворотки раэмораживают при комнатной температуре. 10

Лимфоцитарную взвесь раскапывают микрошприцом Терасаки в планшеты по 1р 1 на лунку и инкубируют при 22 С

30 мин вместе с типирующей сывороткой. В каждую лунку добавляют 5 1 15 свежеразмороженного кроличьего комплемента и инкубируют при комнатной температуре 1 ч. После этого встряхиванием удаляют из планшетов ваз елиновое масло и закапывают в каждую 20 лунку 1р! трипана голубого, Спустя

10 мин избыток краски удаляют встряхиванием и учитывают реакцию. Клетки, пораженные цитотоксическими антителами, окрашены в голубой цвет и 25 имеют нечеткие контуры вследствие начавшегося лизиса. Интенсивность лимфоцитотоксической реакции оценивают по. следующей шкале: 100-81% гибель клеток — резко выраженная положительная реакция; 80-41% гибель клеток — выраженная положительная реакция; 41-31% гибель клеток — положительная реакция; 30-21% гибель клеток — сомнительная реакция; 20-0% гибель клеток — отрицательная реакция.

Пример 1. Больная Г., 72 года. Находилась в 5 инфекционном отделении больницы скорой медицинской 40 помощи Р 1 им, Н,А. Семашко r. Ростов-на-Дону по поводу первичной эри тематозно-буллезной рожи левой голени. Поступила на 3-й день болезни с типичными проявлениями заболева- ния. При исследовании крови был выявлен следующий набор антигенов HLA:

A>, A» В7, В . Отсутствие у больной антигена HLA В позволило прогнозировать малую вероятность развития часто рецидивирующей формы рожи .

Больная получала общепринятую терапию рожи. На 15 день болезни была выписана из стационара. В течение последующих 2,5 лет диспансерного наблюдения рецидивов заболевания не зарегистрировано.

П р и и е р 2. Больной В., 37 лет, поступил на лечение в 1-й день болеэ2б

4 ни с диагнозом первичной рожи правой . голени, эритематозной формы. Заболел остро с повышения температуры тела до 39, 2 С, появления симптомов итоксикации и характерного для рожи поражения кожи в области правой голени, При исследовании крови в наборе лейкоцитарных антигенов был выявлен и антиген HLA Вэ (А,; А„; Вв, В ).

Сделано заключение о повышенном рис— ке часто рецидивирующего течения рожи.- Спустя Ь дней больной по семейным обстоятельствам был выписан из стационара. От проведения рекомендованного противорецидивного лечения отказался. Через 3 мес возник реци див заболевания. Лечился амбулаторно. В течение последующих 1,5 лет наблюдения возникло еще три рецидива рожи, появились признаки развивающейся слоновости правой нижней конечности.

Преимуществом предлагаемого способа по сравнению с прототипом является возможность прогнозирования у впервые заболевших рожей наиболее неблагоприятной, часто рецидивирующей формы заболевания. Из 50 больных первичной рожей у 5 больных развилась часто рецидивирующая форма заболевания, не выявленная с использованием известного способа. В то же время с использованием предлагаемого способа иэ 101 обследованных больных у

14 больных с неблагоприятным прогнозом развилась в дальнейшем часто ре, цидивирующая форма рожи. Кроме того, использование генетических показателей, а именно антигенов системы

HLA, позволяет по сравнению с извест— ными способами значительно сократить сроки проведения исследования и осуществлять прогнозирование часто рецидивирующей формы рожи в первые часы заболевания, т,е. сразу при поступлении больного в стационар. Таким образом, предлагаемый способ позволяет прогнозировать в самые ранние сроки болезни развитие часто рецидивирующей формы рожи при наличии в крови больного генетически наследуемого антигена НЬА Вэ . Выявление у больных первичной рожей этого антигена свидетельствует о высокой, генетически обусловленной вероятности развития частых рецидивов заболевания. Это является основанием для .назначения уже в раннем периоде

5 1 болезни противорецидивного лечения с рекомендациями проведения его повторных курсов в поликлинических усло виях.

458826 6 ванием, отличающийся

l тем, что, с целью повьппения точности прогноза, из исследуемой крови выделяют лимфоциты, обрабатывают антилимфоцитарной сывороткой, определяют антигены главного комплекса гистосовместимости и при наличии антигена

В . прогнозируют рецидивирующую фор-. му рожи.

Формула иэ обр етения

Способ прогноза рецидивирующего течения рожи, включающий забор крови

v больных с последующим ее исследоСоставитель В. Литовченко

Редактор С. Лисина Техред Л. Сердюкова Корректор M. Самборская

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Заказ 367/51 Тираж 788 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-. 35, Раушская наб., д. 4/5