Способ моделирования посттравматической эпилепсии

 

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Цель - повышение воспроизводимости способа. С этой целью животному в мозг билатерально вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови. Затем ежедневно 1 раз в день вводят пикротоксин в дозе 0,9-1,1, мг/кг. Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели посттравматической эпилепсии на 97% по сравнению с прототипом.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)4 С 09 В 23/28

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ж фиксируют в стереотаксическом аппарате. Скальпелем производят разрез мягких тканей головы в сагиттальном направлении. Находят переднезаднюю и ла- l теральную координаты структуры, предназначенной для введения крови. Sopмашиной высверливают в найденной точке отверстие, после чего в него вводят инъекционную иглу микроинъектора (внешний диаметр 0,5 мм) на необходи" CO мую глубину, также определяемую по стереотаксическому атласу. В течение 5 мин вводят 10-15 мл крови (2-3 мкл/мин).

После завершения введения остав ляют иглу в месте введения еще в течение 2-4 мин, после чего ее удаляют. Начиная со следующего дня после введения крови животному производят внутрибрюшинные ежедневные однократные введения пикротоксина в дозе

9,9-1,1 мг/кг, с последующей визуальной регистрацией поведенческих изменений.

Пример 1. У крысы линии Вистар массой 320 r из хвостовой вены

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ П(НТ СССР (21) 4325191/28-14 (22) 10. 11. 87 (46) 07. 09. 89. Бюл. й" 33 (71) Одесский медицинский институт им. Н.И.Пирогова (72) А.А.Шандра, Л.С.Годлевский и А.М.Мазарати (53) 615.475(088.8) (56) Hammond F..Ñ. et al. Epilepsia, 1980, и. 21, р. 3-14, Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, Цель изобретения — повышение воспроизводимости способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Крысу линии Вистар помещают в коробку с отверстием для хвоста, который опускают на 3-5 мин в теплую воду (40-50 С), Затем с помощью скальпеля надрезают кончик хвоста и опускают в пробирку, куда предварительно наливают бидистиллированную воду (0,2 мл). Не погружая кончик хвоста в воду, собирают в пробирку венозную кровь до объема 0,8 мл. Полученную лизированную кровь набирают в шприц микроинъектора, инъекционную иглу микроинъектора фиксируют в вертикальном положении водителя стереотаксического аппарата.

Крысу, у которой предполагается воспроизводить посттравматическую эпилепсию под эфирным рауш-наркозом

ÄÄSUÄÄ 1506470 А1

2 (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОЙ ЭПИЛЕПСИИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Цель — повьппение воспроизводимости способа.

С этой целью животному в мозг билатерально вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови. Затем ежедневно 1 раэ в день вводят пикротоксин в дозе

0,9-1,1 мг/кг. Применение способа позволяет повысить воспроизводимость модели посттравматической эпилепсии на 971 по сравнению с прототипом.

1506470

3 берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мл дистиллированной воды.

В дальнейшем эту кровь используют для введений в гиппокамп. Крысу-самца линии Вистар массой 270 г под эфир5 ным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате и по координатам (АР = -4,8, L = 3 5, Н = 3 5) вводят в гиппокамп билатерально по 12 мкл лизированной крови, при этом каждое введение осуществляется в течение

5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 1 мг/кг. Наблюдение в течение 30 мин после введения ПКТ показывает отсутствие эпилептиформных 20 реакций.

В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 4-го введения у крысы отмечаются замирания и миоклонические вздраги- 25 вания мышц морды и ушей в течение

15 мин. После 7-го введения пикротоксина у крысы развиваются клонические судороги всего тела, регистрирующиеся в течение 25 мин. 10-я инъекция вы- 30 зывает клонические судороги мышц передних конечностей, и после 17-го введения пикротоксина отмечается генерализованный клонико-тонический припадок (длительность 2,5 мин), заканчивающийся выраженной постприступной депрессией. В дальнейшем такие припадки возникают после каждого введения (всего произведено 20 введений), G также после окончания введе- 40 ния пикротоксина через 6,5 мес после последней инъекции эпилептогена.

Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии, имеющей хронический прогрессивный характер эпилептиформных проявлений.

Пример 2 ° У крысы линии Вистар массой 300 г из хвостовой вены берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мп дистиллированной воды.

Полученную лизированную кровь в даль«50 нейшем используют для введений в сенсомоторную кору. Крысу-самца линии

Вистар массой 310 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате и в область сенсомоторной коры билатерально вводят 15 мкл лизированной крови, при этом каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе

1,1 мг/кг. Наблюдение в течение

30 мин после введения показывает отсутствие эпилептиформных реакций.

В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 7-го введения пикротоксина у крысы отмечаются выраженные миоклонусы конечностей, вздрагивания мышц морды, ушей, наблюдающиеся в течение 20 мин.

После 15-ro введения у крысы отмечаются клонические судороги всего тела, продолжающиеся в течение 20 мин.

26-я инъекция приводит к развитию генерализованного клонико-тонического припадка длительностью 2 мин с последующей выраженной постприступной депрессией. Подобные припадки отмечаются после каждого последующего введения пикротоксина (всего произведено

30 введений), а также червз 6,5 мес после последнего введения эпилептогена. Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии с хроническим прогрессивным характером эпилептиформных проявлений.

Пример 3. У крысы линии Вистар массой 340 r из хвостовой вены берут 0,6 мл крови, к которой добавляют 0,2 мл дистиллированной воды.

В дальнейшем эту кровь используют для введений в гиппокамп. Крысу-самца линии Вистар массой 300 г под эфирным наркозом закрепляют в стереотаксическом аппарате, по координатам (АР

= -4,8, L = 3,5, Н = 3,5) вводят билатерально в гиппокамп по 10 мкл лизированной крови. Каждое введение осуществляется в течение 5 мин, после чего инъекционная игла находится в зоне введения еще в течение 2 мин. На следующий день после введения крови животному производят первое внутрибрюшинное введение пикротоксина в дозе 0,9 мг/кг. Наблюдение в течение

30 мин после введения эпилептогена показывает отсутствие эпилептиформных реакций.

В последующем инъекции этой дозы производят однократно ежедневно. После 7-й инъекции эпилептогена у крысы отмечаются замирания, миоклонические

1506470

Составитель А.Бобров

Техред М.Моргентал Корректор Э.Лончакова

Редактор В.Петраш

Заказ 5441/51 Тираж 469 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". г.ужгород, ул. Гагарина, 101 вздрагивания мышц морды, ушей, туловища, которые длятся до 20 мин, После

9-го введения у крысы развиваются клонические судороги всего туловища, регистрировавшиеся в течение 25 мин.

После 15-й инъекции пикротоксина у крысы развиваются клонические судороги передних конечностей (поза кенгуру), которые отмечаются в течение 30 мин от их возникновения, 20-я инъекция конвульсанта вызывает у крысы развитие генерализованного клонико-тонического припадка с падением животного на бок длительностью

1;5 мин с выраженной постприступной депрессией. Пикротоксин, введенный через 6,5 мес после последнего (20-ro) введения, вызвал развитие у крысы генерализованного клонико-тонического судорожного припадка. Таким образом, у крысы воспроизведена модель посттравматической эпилепсии, имеющей хронический прогрессивный

5 характер эпилептиформных проявлений.

Применение способа позволяет повысить воспроиэводимость модели посттравматической эпилепсии на 977 по сравнению с известным, 1О

Формула изобретения

Способ моделирования посттравматической эпилепсии путем введения животному в мозг крови, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью повышения воспроизводимости способа, билатерально в мозг вводят 10-15 мкл лизированной гомокрови, а затем 1 раэ

20 в день — пикротоксин в дозе 0,91,2 мг/кг.