Способ обнаружения вирусных инфекций растений

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в растениеводстве и фитовирусологии. Цель изобретения - ускорение обнаружения процесса и снижение его трудоемкости. Для обнаружения вирусных инфекций листья здорового растения-стандарта помещают в инфракрасный спектрометр и регистрируют спектры в области 850 - 1750 мс<SP POS="POST">-1</SP> при скорости регистрации 160-400 см<SP POS="POST">-1</SP>/мин. Аналогичную операцию проводят с листом подсолнечника, зараженным вирусом табачной мозаики (на 5-й день после заражения, т.е. в период скрытой инфекции). Сравнивают полученные спектры. Зараженным считается образец, характеризующийся максимальной интенсивностью поглощения по сравнению со здоровым.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

В: f:"Ë 1 . !

%1 11. °

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЭОБРЕТЕНИЯИ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4241649/30-13 (22) 08.05.87 (46) 15.09.89 ° Бюл. ¹ 34 (71) Киевский государственный университет им. Т.Г.цевченко (72) Г.С.Литвинов, А.Л.Бойко и Е.A.Êîíäðàòþê (53) 631.52(088.8) (56) Мэттьюс P. Серология растительных вирусов. М., 1961, с. 16-17. (54) СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ РАСТЕНИЙ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в растениеводстве и фитовирусологии. Цель изобретения — ускореИзобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в растениеводстве и фитовирусологии, Цель изобретения — ускорение процесса обнаружения и снижение его трудоемкости.

Пример 1. Лист здорового растения подсолнечника помещают в держатель для пленочных образцов инфракрасного спектрометра, например

ИКС-24 (ЛОМО, СССР) или И-20 (Карл

Цейсс, Мена, ГДР), и производят регистрацию спектра в области 400— 3800 см-, при скорости регистрации

160-400 см - /мин.

Аналогичную операцию проводят с листом подсолнечника, зараженным вирусом табачной мозаики (на 5-й день после заражения, т.е. в период скрытой инфекции) °

„„SU„„1507253 A 1 (5ll4 А 01 G 7 00 С О1 N 21/35 ние обнаружения процесса и снижение

его трудоемкости. Для обнаружения вирусных инфекций листья здорового растения — стандарта помещают в инфракрасный спектрометр и регистрируют спектры в области 850-1750 см при скорости регистрации 160—

400 см /мин, Аналогичную операцию проводят с листом подсолнечника, за— раженным вирусом табачной мозаики (на 5-й день после заражения, т.е. в период скрытой инфекции) ° Сравнивают полученные спектры. Зараженным считается образец, характеризующийся максимальной интенсивностью поглощения по сравнению со здоровым.

Производят регистрацию спектра поглощения листа зараженного растения в области 400-3800 см . Сравнивают полученные спектры. ВыявляС ют, что они различаются в области

Ю

850-1750 см (12000-5700 нм) и не различаются достоверно в других спектральных областях инфракрасного ди- Я апазона. С

Спектр инфракрасного поглощения 4Ю листа здорового подсолнечника в интервале 850-1750 см представляет собой довольно широкую полоску, структура которой мало выражена, т.е. можно сказать с достаточной достоверностью о наличии максимумов поглощения с частотами около 1080 см (нуклеиновая кислота) и 1667 см (белок) с поглощением в 15,0 и 17,0 относительных единиц соответственно (с учетом уровня фонового погло3 15072 3 щения, определяемого базовой линией) .

Спектр инфракрасного поглощения листа подсолнечника (сорт Кировоград—

5 ский-11), зараженного подсолнечниковым штаммом вируса табачной мозаики, в интервале 850-1750 см значительно отличается от спектра здорового листа в качественном и количественном отношениях. Эти существенные различия проявляются, прежде всего, в общем виде спектров: у зпорового листа имеются 2 выраженных максимума поглощения (на частотах

1080 и 1669 см -"), а в спектре зараженного листа 9 максимумов, шесть из которых имеют частоты около

1069; 1152; 1396; 1534 и 1652 см

Вместе с тем различается поглощение на близких по частоте максимумах у здорового и зараженного листьев у зараженных листьев поглощение значительно больше. Отношение по.глощения у зараженных листьев на частотах 1069 .и 1652 см к поглощению здоровых листьев на тех же частотах составляет 2,4 и 1,7.

В целом чмеет место возрастание поглощения на частотах, отвечаю-- 30 ших содержанию белков нуклс.иновых кислот. Отношение интенсивностей поглощения на частотах

1652-1069 см у зараженных листьев равно 1,28, а на частотах 1667

1080 см у больных листьев равно

0,88, т.е. имеет место перераспределение поглощения в спектрах здорового и зараженного растений. При этом наблюдается также сдвиг макси- 40 мума поглощения у зараженного листа, т.е. (-15) см, и нуклеиновой кислоты с 1080 см - до 1069 см, т.е. частота снижается на 11 см . Наряду с изменением общего вида спект45 ров это служит диагностическим признаком вирусной инфекции в растениях.

Пример 2. Аналогично тому, как описано в примере 1, поочередно .

1 регистрируют спектры инфракрасного поглощения листа здорового томата (сорт Киевский) в интервале 850

1750 см и зараженного вирусом табачной мозаики (сорт Невский).

Сравнение спектров инфракрасного поглощения здоровых и зараженных листьев свидетельствует об их существенных различиях, В частности, спектр здоровых листьев имеет слабо выраженную структуру — отмечено только 3 максимума на частотах около

1089; 1442 и 1672 см . В то время как в спектре листа зараженного растения наблюдается структура из 8 пиков, лять иэ которых имеют высокую интенсивность поглощения (частоты:

1074; 1162; 1390; 1555 и 1667 см ), Показателем проявления структуры является отношение поглощения я максимуме и минимуме полосы поглощения. Они значительно различаются у здоровых и зараженных листьев. Например, отношение поглощений на частотах !089 (максимум) и 12 19 см (минимум), отвечающих нуклеиновой кислоте у эдоровь.х растений составляет

1,25, а у- больных — 1,85. На частотах 1442 (максимум) и 1510 см (минимум) у эдоровьн; растений 3То отношение равно 1, 17, а у зараженных (частоты 1401 и 1510 см ) — 1,75.

Для листьев томата также как под"олнечника регистрируется возрастание интенсивностей поглощения на основных полосах, отвечающих белкам

I и нуклеиновым кислотаь:: это возрастанио состав ляет и учетом фонового поглощения 1,2 на частоте около 107011000 см и 1,4 на частоте около

-1

1660 см . Сдвиг частоты имеет место для частот, отвечающих нуклеиновой кислоте (1089 — 1074 см ) и белку (14422 — 1401 см ).

Полученные данные подтверждены электронномикроскопическими и серологическими анализами.

Предлагаемый способ значительно упрощает процесс обнаружения вирусных инфекций и позволяет достичь желаемого результата с меньшими затратами труда и ср едст в .

Формула изобретения

Способ обнаружения вирусных инфекций растений, включающий измерение показателей у анализируемых растений и растения-стандарта и сравнение их, по результатам которого судят о наличии вирусной инфекции в растении, о т л и чающий с я тем, что, с целью ускорения обнаружения процесса и снижения его трудоемкости, в качестве показателя регистрируют инфракрасное поглощение листа

Составитель Л.Марченкова

Редактор Т.Парфенова Техред А.Кравчук Корректор :В.Кабаций

Заказ 5470/2

Тирах 621

Подписное

BHHHIIH Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГЕНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.у кгород, ул. Гагарина,101

5 растений в спектральной области

850-1750 см-, при этом зараженным вирусной инфекцией считают образец

1507253 6 характеризующийся перераспределением интенсивностей, по сравнению со 3доровым стандартом.