Растворитель нестабилизированного фибрина
Изобретение относится к области физиологии и биохимии свертывания крови. Предлагаемое вещество может быть использовано в качестве растворителя нестабилизированного фибрина. Цель - повышение стабильности растворителя в организме, антиполимеризационного и антиагрегационного действия. Сущность изобретения заключается в использовании тимоптина в качестве природного растворителя нестабилизированного фибрина, не обладающего побочным действием на свертывание и оказывающего свое действие в низких концентрациях. Для этого в условиях "ин витро" используют концентрации тимоптина от 0,0001 до 100 мкг/мл, а в условиях организма в концентрациях от 0,05 до 100 мкг/кг. С целью получения деполимеризованного фибрина "ин витро" готовят пленку нестабилизированного фибрина смешиванием 0,25 - 1,5%-ного раствора фибрин-мономера с боратным буфером PH 7,4 - 7,6 в соотношении 1:4 - 1:9, на такую пленку нестабилизированного фибрина наносят по 0,1 - 0,2 мл раствора тимоптина, содержащего препарат от 10<SP POS="POST">-8</SP> до 10<SP POS="POST">-</SP>992 МГ. Пробы инкубируют при 37°С в течение 60 - 120 мин с последующим определением степени деполимеризации фотоэлектроколориметрическим методом.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК 11 Д A 61 К 35/14
ВСЕСЯ3ЯДЯ
ПАТЕЧТ11 1с1,п„щ
Б11БЛ119 1-,.„
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPHTHRM
Г1РИ ГКНТ СССР
H А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4375700/28-14 (22) 29.12,87 (46) 30,1 2.89. Бюл„ 11 48 (71) МГУ им, М.В.Ломоносова и Всесоюзный научно-исследовательский институт технологии кровезаменителей и гормонапьных препаратов (72) Б„А.Кудряшов, И,П. Ашмарин, В.Д.Зажирей, Л,А,Ляпина, В F..Ïàñòoðîíà и Ю.В.Буров (53) 612.015(088,8) (56) Биохимия животных и человека
1982, М 6, с. 64-73. (54) РАСТВОРИТЕЛЬ НЕСТАБИЛИЗИРОВАННОГО ФИБРИНА (57) Изобретение относится к области физиологии и биохимии свертывания крови, Предлагаемое вещество может быть использовано в качестве растворителя нестабилиэированнаго фибрина.. Цель повьш ение стабильности растворителя в организме, антипалимеризационного и антиагрегационнога действия, СущИзобретение относится к физиологии и биохимии свертывания крови, н частности к области пратинасвертывающего действия препаратов, и может быть применено в патофиэиологии, биохимии, фармакологии, гематологии.
Цель изобретения — повышение стабильности растворителя в организме, антиполимериэацианного, и антиагрегационного дейстния, Пример 1. Берут 0,257.-ный раствор фибри-манамера в количестве
„„SU„„! 532049 А1
2 ность изобретения заключается в использовании тимаптина в качестве природного растворителя нестабилиэированного фибрина, не обладающего побочным действием на свертывание и оказывающего свое действие в низких концентраII циях. Для этого в условиях ин витра используют концентрации тимоптина ат 0,0001 да 100 мкг/мл, а в условиях организма в концентрациях от
0 05 до 100 мкг/кг. С целью получения депалимеризованного фибрина ин витра" готовят пленку нестабилизированного фибрина смешиванием 0,25-1,57.-ного раствора фибрин-мономера с боратным буферам рН 7,4-7,6 в соотношении 1:41:9, на такую пленку нестабилиэированного фибрина наносят по 0,1-0,2 мл раствора тимаптина, содержащего прев г. парат ат 10 да 10 мг. Пробы инкубируют при 37 С н течение 60-120 мин с последующим определением степени деполимеризации фатоэлектроколориметрическим методом. 1 табл.
CO
0,2 мл добавляют 0,8 мл обратного бу- рфера рН 7,4. Пробы инкубируют при Ж
-,о .
3" С в течение 30 мин для образования нестабилизированнаго фибрина. Затем на пленку нестабилиэированного фибри- с на наносят 0,1 мл раствора тимоптина в 0,85%-ном растворе Na01 содержащего 0,0001 мкг препарата. Пробы ино кубируют в термостате при 37 С н теL чение 60 мин, после чего наблюдают появление жидкой фазы, свидетельствующей а возникновении деполимеризован1532049
Опыт — введение тимоптина в дозах, мгг/кг
Показатели крови
Контроль— введение физиологического раствора
100
401+37
112+7,5
335+34, 5
115+13,5
362123 ю 2
118 8, I
0 93 0,015
0,55+0,15
1)02+0,035
0,52 0,28 0,47+0,15
482+?9
581142
76 7, 8
57,8Н 2,5
32, 2+2, 5
%Статистический показатель достоверности P рассчитан при сравнении с соответствующими пробами контроля, Составитель Л„Сабурова
Редактор С,Лиснна Техред Л.Олийнык Корректор Э,Лончакова
Заказ 7980/10 Тираж 643 Подписное
РчИИПИ Государственного комитета ио изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательскии комбинат "Патент ", г.ужгород, ул. Гагарина,101 ного фибрина. Жидкую фазу удаляют и определяют степень деполимеризации (в 7) по разнице между уровнем белка в оставшемся после инкубации сгустке до и после воздействия препарата, используя фотометрический метод. Показано, что в данных условиях степень деполимериэацни составляет 267, Для определения деполимеризационного действия тимоптина на нестабилиэированный фибрин в условиях in vivo двум группам крыс с массой тела 180200 г внутримышечно вводят тимоптин
8-кратно через каждые 24 ч в дозах
1 и 100 мкг/Kl соответственно. Череэ
20 ч после последней инъекции у животных берут кровь шприцем иэ v. jugularis и определяют в плазме показатели свертывания и величину деполимеризации нестабилизированного фибрийа.
Время образования свободного тромбина, с
Антитромбин III Х
Агрегация тромбоцитов (индекс)
Уровень гепарина, ед/мл
Концентрация фибриногена, мг/Е
Деполимериэация нестабилизированного фибрина, мм
Полученные результаты йредставлены в таблице.
Как видно из данных, представлен5 ных в таблице тимоптин при многократВ ном введении животным не вызывает каких-либо достоверных изменений показателей свертывания крови, свидетельствующих о его ускорении. Однако препарат в дозах как 1, так и 100 мкг/кг достоверно увеличивает степень деполимеризации нестабилизированного фибрина в крови. Это действие тимоптина стабильно и обнаруживается как через
3, так и через 20 ч после последней инъекции. После однократной инъекции тимоптин имеет аналогичный эффект и не влияет на систему свертывания.
Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я
20 Применение тимоптина в качестве, растворителя нестабилиэированного фибрина,
