Способ определения индивидуальной чувствительности больных ревматоидным артритом к лечению левамизолом

 

Изобретение относится к иммунологии и ревматологии. Цельповышение точности определения. Левамизол назначают при снижении активности спонтанных и индуцированных T-супрессоров и повышенном содержании восстановленных Е-розеткообразующих клеток. Через 2 мес определяют содержание спонтанных и индуцированных фитогемагглютинином T-супрессоров. Если эти показатели повышаются до нормы, то лечение продолжают. Способ позволяет уменьшить количество побочных явлений и сократить сроки лечения.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU „„1550422

А1 (1) G 01 N 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А BTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ ния а с

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4079444/28 — 14 (22) 20. 06, 86 (46) 15. 03. 90. Бюл. Р 10 (71) Институт клинической иммунологии

C0 AMH СССР (72) В.С. Ширинский, Н.М, Старостина и В.С. Кожевников (53) 61 5.375(088 .8) (56) Крель А.А. и др. Препарат "Декарис" в медицинской практике — Материалы симпозиума, М., 25-26.04.1979, с. 75-82. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ БОЛЬНЫХ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ К ЛЕЧЕНИф ЛЕВАМИЗОЛОМ

Изобретение относится к медицине, в частности к ревматологии, и может быть использовано для лечения больных ревматоидным артритом (PA) иммуностимуляторами.

Цель изобретения — повышение точности определения за счет снижения побочных явлений и сокращение сроков лечения.

Способ осуществляют следующим образом.

Известными методами больных PA отбирают для лечения левамизолом.

Целесообразнее это сделать по предлагаемому способу прогноза эффективности назначения левамизола при РА, Сначала у больных PA прогнозируют эффект от назначения препарата, По этому способу левамизол назначают больным со сниженной активностью

Т-супрессоров, спонтанных и индуцированных ФГА, и повышенным содержани2 (57) Изобретение относится к иммуйо= логии и ревматологии. Цель изобретения — повышение точности определения.

Левамизол назначают при снижении активности спонтанных и индуцированных

Т вЂ” супрессоров и повышенном содержании восстановленных Е-розеткообразующих клеток. Через 2 мес определяют содержание спонтанных и индуцированных фитогемагглютинином Т-супрессоров.

Если эти показатели повышаются до нормы, то лечение продолжают. Способ позволяет уменьшить количество побочных явлений и сократить сроки лече-. ем вЕ-РОК. Мононуклеарные клетки (MHK) периферической крови человека выделяют центрифугированием гепаринизированной веноэной крови в .градиенте плотности (1,077 г/мл) фиколаверографина. Собранные с интерфазы

MHK трижды отмывают фосфат-эабуференным физиологическим раствором (рН 7,27,3) и готовят клеточную суспензию в культуральной среде. Выход МНК в среднем составляет 1,2 10 клеток из 1 мл крови. Их разделяют на несколько проб. В одной из них опреде ляют изначальное количество восстановленных Е-розеткообразующих клеток (вЕ-РОК). Для этого свежие эритроциты барана (ЭБ) трехкратно отмывают в физиологическом растворе, далее готовят 17.-ную суспензию. Смесь

ЗБ,(0,2 мл) и MHK (0,2 мл 2,5»

«10 ь в мл) центрифугируют при

1000 об/мин 5 мин, инкубируют 90 мин

1550422 при 37 С и затем 16-18 ч при 4 С.

Надосадок сливают, клетки ресуспендируют и подсчитывают процентное содержание вЕ-POK.

В других пробах опрецеляют актив5 ность спонтанных и индуцированных

ФГА Т-супрессоров. Культивирование клеток осуществляют в герметически закрытых стеклянных флаконах иэ-под пенициллина. Равные взвеси MHK (1:IO кл/мл) в среде 199+207. сыво, ротки 4 группы крови соответственно

l инкубируют 24 ч,инкубируют ФГА 10 мкг/мл 72 ч. Затем первичную культуру лимфо- 1> цитов обрабатывают 30 MHH митомицином С. Лимфоциты трижды отмывают сре- дой 199 и вносят в культуры аллоген-ных доноров при соотношении клеток

1:1„ Вторичные культуры стимулируют

ФГА 10 мкг/мл.

Интенсивность пролиферации учиты вают через 72 ч по включению Н>-тими дина (удельная активность 1525 Кю/ммоль) в нуклеопротеидные фрак-.25 ции клеток, Н вЂ .тимидин добавляют за

4 ч до окончания культивирования.

Клетки отмывают однократно холодным фосфат-забуференным физиологически раствором, инкубируют в течение ночи 30 в 5Х-ном (в ес/объем) раств оре трихлор" уксусной кислоты. Нерастворимые фракции переносят на миллипоровые фильтры с диаметром пор 0,23 или 0,4 мкм, которые затем помещают в сцинцилляционные виалы. Радиоактивность экспериментального материала подсчитывают в сцинцилляционном счетчике. Эти показатели крови определяют перед началом лечения и при содержании вЕ-POK больше 37,57, изменении под действием левамизола на 4 и более, увеличении активности .спонтанных Т-супрессоров на 67. и более и индуцированных

ФГА Т-супрессоров — на 5,5 .и более,; левамизол назначают больным PA no

150 мг 1 раз в неделю, .(ерез 2 мес со дня начала лечения в периферической крови больных указанными методами определяют содержание спонтанных и ФГА индуцированных

T-.ñóïðåññîðoâ. В случае, если эти показатели повышаются до нормы, лечение продолжают.

Пример 1. Больная N., ЗЗ го-., да. Клинический диагноз. "классический

55 ревматоидный артрит, серопозитивный, активность 1 медленно прогрессирующее течение, рентгенологическая стадия III НФ-1. Активность неспецифических T-супрессоров до начала лечения: спонтанные 247., индуциров анные

ФГА 21 Х, посл е действ ия лев амиэ ола ин витро: спонтанные 427, индуцированные ФГА 377. Содержание вЕ-РОК до начала лечения 587, под действием левамиэола ин витро 46 . Больной назначен левамиэол по 150 мг 1 раз в неделю. Через 2 мес определена активность неспецифических Т-супрессоров: спонтанные 38Х индуцированные ФГА 347, т,е. произошло повышение от изначальных значений до пределов нормальных. Лечение было продолжено. Получен хороший клинический эффект в течение всего года приема препарата.

Пример 2. Больная Х., 41 год.

Клинический диагноз: классический ревматоидный артрит, активность 11, серопозитивный, медленно прогрессирующее течение, рентгенологическая стадия III, НФ-II. До начала лечения содержание вЕ-РОК 487, под действием левамизола ин витро 317. Активность неспецифических Т-сулрессоров до начала лечения: спонтанные 07, индуциров анные ФГА 1 1 Х иод действием левамизола ин витро: активность спонтанных T-супрессоров 237, индуцированных ФГА ЗОХ. Больной назначен декарис по 150 мг 1 раэ в неделю. Через

2 мес определена активность неспецифических Т-супрессоров: спонтанные

177, индуцированные ФГА 20Х, т.е. нормализации сниженной активности неспецифических T-супрессоров не произошло, тем не менее лечение было продолжено, но эффек та о т л еч ения не было. Оставалась выраженная боль в суставах, держалась утренняя скованность, сохранялась активность процесса и через 6 мес декарис был отменен.

Пределы числовых значений параметров определяют точностью аппаратуры, пригодной для медицинских целей.

Процент развития разнообразных побочных эффектов при лечении левамизолом колеблется от 20 до 747.. И хотя были предложены методы прогноза эффективности назначения препарата, вопрос контроля эффективности в процессе лечения не снимается. По известному способу срок лечения обычно длится.15504 год, некоторые авторы рекомендуют его сократить до 6 мес.

10 Составитель В, Литовченко

Редактор И, Касарда Техред Л,Олийнык Коррек тор М. Максимишинец

Заказ 269 Тираж 507 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д . 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, .ул. Гагарина, 101

По предлагаемому способу в случае отрицательного эффекта его можно сократить до 2 мес. Следовательно, способ позволяет сократить срок бесполезного, а иногда и вызывающего побочные эффекты, приема препарата у больных с отрицательным эффектом, на 4-10 мес. Это, в свою очередь, позволяет ускорить сроки лечения, снизить затраты на использование неэффективного препарата.

22 6

Формула изобретения

Способ определения индивидуальной чувствительности больных ревматоидным артритом к лечению левамизолом путем исследования Т-супрессоров в крови больных, отличающийся тем, что, с целью повьппения точности определения за счет снижения побочных явлений и сокращения сроков лечения, исследуют активность спонтанных и индуцированных,фитогемагглютинином Т-супрессоров после двух месяцев лечения и при показателях их, близких к норме, определяют организм чувствительным к лечению левамиэолом,