Комплексное соединение индометацина с глицирризиновой кислотой, проявляющее противовоспалительную активность

 

Изобретение касается комплексных органических веществ, в частности комплекса индометацина с глицерризиновой кислотой, обладающего противовоспалительной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание нового более активного комплекса с малой токсичностью. Синтез ведут реакцией индометацина с глицерризиновой кислотой в водном эталоне при 50°С. Токсичность ЛД<SB POS="POST">50</SB> 1300 мг/кг. Новый комплекс более активен на карагениновый отек лапок крыс при дозе 5 мг/кг (через 3 ч 0,97±0,25 против 0,39±0,1 для индометацина при дозе 10 мг/кг). 4 табл.

.э и4ОЙЫ1

":iA! LH ftIU= I

: г.,1 Л1,1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А ВТОРСНОМ1(СВИДЕТЕЛЬСТВУ

° \

° °

° °

МФ

ГОСУДАРСТ8ЕННЬЮ НОМИтят

AO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

f1PH ГННТ СССР (21) 4640005/31-04 (??) 23,01.89 (46) 30,12 ° 90. Гнал. Р 48 (71) Институт химии Бащкирского научного центра АН СССР (72) Л,А,Балтина, Р.М.Кондратенко, Х,М.Насыров, Ф.С,Варудий, 1П.И.Муринов и .Г.А.Толстиков (53) 547.689.6(088.8) (56) Насыров Х.М,, Лазарева Л.Н.

Изучение противовоспалительной активности производных глицирризиновой кислоты. — фармакология и токсикология, 1980. 43(4), с. 399-404.

Насыров Х.М., Балтина Л.А., Кондратенко P.11., Толстиков Г.А, Исследование. противовоспалительной активности ряда уреидопроизводных пентаацетилглицирризиновой кислоты, — Химико-фармакологический журнал, 1985, 8, с, 971-974, Насыров Х,У, Лазарева Л.Н, Влияние современных противовоспалительных средств Hà репаративнун стадию воспаления, — фармакология и токсикология, 1984, Ф 1> с. 84-88.

Мащковский М.Л. Лекарственные средства. Ч. 1, изд. IX М.: Медицина, 1984, с. 199, К!варц Г,ч,, Скобаев P.Ä. Соотнощение антизкссудативного, анальгетического и жаропонижающего компонента в действии Hpñòåðîèäíûõ противовоспалительных препаратов. — ц армаколо гия и токсикология, 1982, - 1, с.46-49..Л0„„1616925 А 1 щ) С 07 3 63/00 А 61 К 31/705 (54) КОМПЛЕКСНОЕ СОГДИНЕНИЕ ИНЛОМЕТАЦИНА С ГЛИЦИРРИЗИНОВйй КИСЛОТОЙ, ПРОЯВЛЯ1011iFE ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНУ1п АКтИВНОСТЬ (571 Изобретение касается комплексных орг-нических веществ, в частности комплекса индометацина с глицирризиноной кислотой, обладающего противовоспалительной активностью и может быть использовано в медицине, Цель изобретения — создание нового, более активного комплекса с малой -.îêñè÷íîñòüè. Синтез ведут реакцией индометацина с глицирризиновой кислотой в водном этаноле при 50 0, Токсичность ЛП 1300 мг/кг. Новый комплекс более активен на карагениновый отек. лапок крис при дозе 5 мг/KI (через 3 ч 0,97+0„?5 против 0,39 0,1 для индометацина при дозе 10 мг/кг).

4 табл.

16169%5

Изобретение относится к новым химическим соединениям, а именно к комплексу индометацина (l-пара-хлорбензоил-5-метокси-2-метилиндол-3-уксус, 5 ной кислоты! с глицирризиновой кислото формулы СООе !

О ,о

2 м < з

О-- б — (,7-с1 !

5 проявляющему противовоспалительную активность, Цель изобретения — поиск нового производного глицирризиновой кислоты менее токсичного соединения, об- 20 ладающего высокой противовоспалительной активностью и не раздражающего слизистую оболочку желудка.

Поставленная цель достигается комплексным соединением 1-пара-хлор- 25 бенэоил-5-метокси-2-метилиндол-3уксусной кислоты с глицирризиновой кислотой вышеуказанной формулы (I) проявляющий противовоспалительную активность, Комплекс (I) получают вза. имодействием индометацина с глицир ризиновой кислотой н растворе водного этанола при 50 С, Фармакологические свойства соединения (Х) были изучены в Башкирском медицинском институте им, 15-летияВЛКСМ.

Острую токсичность определяли на мьпнах при введении внутрь в дозах 500, 1000, 1100s 12001 1400, 1500 мг/кг. Е,Р, комплекса (I) со" ставила 1300 (1210-1396) мг/кг, ЕЛ О глицирризиновой кислоты равняется

680 мг/кг, 1Л о индометацина (II)

390 мг/кг. Таким образом, комплекс

1 (Е) в 2 раза менее токсичен, чем глицирриэиновая кислота, и в 3 раза менее токсичен, чем препарат сравнения индометацин (II) (Р<0,05) .

Противовоспалительная активность комплекса (I) изучена на крысах на двух моделях воспаления. О противовоспалительной активности соединения (I) судили по угнетению каррагенино- вого отека лапок крыс в динамике и

И и 11 !5 по уменьшению массы влажного и высушенного" ватного тампона, имплантированного в подкожную клетчатку, В качестве препарата сравнения служил индометацин (II) взятый в среднеэффективной дозе (!О мг/кг). Компатекс (Х) изучали в дозах 5 и 10 мг/кг.

Отек лапок измеряли онкометрически через 3,6,24 и 48 ч. На модели каррагенинового отека (табл.2) установлено, что комплекс (I) обладает более вы раженным противовоспалительным действием, чем индометацин при введении в равных дозах (!О мг/кг). На модели имплантации ватного шарика противовоспалительная активность комплекса (I) в дозе 10 мг/кг аналогична эффекту инцометацина в той же дозе, как по влиянию на экссудацию, так и пролиферацию (табл,2), На мышах изучено влияние комплекса (Х} на состояние слизистой оболочки желудка в сравнении с индометацином в дозах 10 мг/кг, В группе животных, получавших комплекс (I), слизистая оставалась без повреждений, в то время.как у животных, получавших индометацин, были обнаружены множественные изъявления как слизистой оболочки желудка, так и кишечника и на 11-е сутки 3-е животных из !О-ти погибли, Таким образом, комплекс (I) не обладает ульцерогенным действием.

Пример l. Влияние комплекса (Х) на каррагениновый отек лапок крыс, Опыты проводили на 24 белых крысах, разделенных на 4 группы по 6 в каждой, Животные первой и второй групп внутрь получали комплекс (I) в дозах 5 и 1О мг/кг соответственно, третья группа — индометацин в дозе

10 мг/кг, четвертая группа служила контролем (крысам внутрь вводили дистиллированную воду в том же объеме, ч го и животным опытных групп).

Через 30 мин после введения препаратов крысу субплантарно инъецировали

О,! мл 2%-ной взвеси каррагенина. Далее через 3, 6, 24, 48 и 72 ч измеряли отек лапок онкометрически, Результаты опытов приведены в табл,! °

Установлено, что в контроле воспалительный отек возникал. сразу через

30 мин после введения каррагенина, максимум которого наблюдался через

24 ч и сохранялся до 72 ч. В группе животных, получавших индометацин, величина отека всегда была меньше, чем в контроле во все сроки наблюдения (р (0„05-0,001), В группе живот1616925

Пример ? ° Влияние комплекса (Т) на экссудативную и пролифера.тивную фазы воспаления, Опыты проводили на ?4 крысах, разделенных на 4 группы по 6 в каждой, Всем животным под легким эфирным наркозом (30 мг/кг) вживляли в подкожную клетчатку стерильный ватный тампон массой 50 мг, после чего в.течение 7 дней крысы получали внутрь препараты, укаэанные н табл.2.

По истечении этого срока животных забивали хлороформным наркозом, извлекали ватные тампоны, взвешивали с точностью 1 мг, что составляло массу влажного тампона. Далее 4

11 Il влажные тампоны помещали в термостат при 60 С и высушивали до по— о стоянной массы и взвешивали — показатель сухого" тампона, Разница в массе "влажного" и "сухого" тампа- 5 на являлась показателем экссудативной фазы воспаления, а разница между массой "сухого" тампона и первоначальной его массой (50 мг) являлась показателем пролидеративной фа- 5 зы воспаления °

40

Результаты опытов представлены в табл.2. ных, получавших комплекс. (I) в дозе

5 мг/кг, статистическое угнетение отека наблюдали лишь к 72 ч. При увеличении дозы до 10 мг/кг отмечалу

5 отчетливое противовоспалительное действие, выраженность которого была выше, чем у животных, получавших индометацин в той же дозе. Так например, на третий час наблюдения в этой группе крыс прирост отека лапок составил в среднем 0,12!0,09 мл, а в rруппе .животных, получавших индометацин (i,39+0,! 0 мл (P C 0,05). На 6-й и

24-й часы измерения регистрировали !5 аналогичную картину. К 48 ч опыта в группе животных, получавших комплекс (Т), отек лапок полностью ликвидировали, в то время как в группе животФ, ных, получавших индометацин, отек регистрировали у всех животных и составил в среднем 0,34+0,10 мл (Р для .х (0,01). Таким образом, комплекс индо;:етацина с глицирриэиновой кис лотой проявляет противовоспалительное действие, превосходящее активность индометацина при введении в равных дозах.

Как видно иэ данных табл,2, индометацин и комплекс (I) уменьшают массу экссудата и пролиферата, однако угнетение экссудативной и пролиферативной фазы воспаления комплексом (I) í дозе 5 мг/кг оказалось статистически недостоверным, С увеличением дозы соединения до 10 мг/кг наблюдалось повышение противовоспалительной активности и оНо было аналогично эффекту индометацина в той же дозе °

Пример 3. Изучение влияния комплекса (I) и индометацина на состояние слизистой оболочки желудка, Опыты проводили на 30 мышах, которые подразделяли на 3 группы (10 в каждой) ° 111ивотным в течение 12 дней внутрь вводили комплекс (I) r дозе

10 мг/кг (первая группа), второй гр ппе — индометацин в той же дозе, а третья группа мышей служили контролем, По истечении этого срока животных забивали хлороформным наркозом, вскрывали, извлекали желудок и исследовали состояние слизистой оболочки желудка на предмет обнаружения язв и эрозий, в случае наличия их подсчитывапи..

Результаты опытов приведены в табл.3. ю

Как видно из данных табл,3. з группе животных, получавших индометацнп, обнар жены дефекты в слизистой оболочке желудка, а в группе животных, получавших комплекс. (Т), как и в контроле, слизистая оставалась беэ повреждений. Кроме того, в группе мышей, получавших индометацин, уже на 7-10-е сут отмечали поносы, животные худели и на 11-е сут 3-е живот- . ных иэ 10-ти пали. При вскрытии были обнаружены множественные дефекты не слизистой желудка, Н0 шечника. Таким образом, комплекс индометацина (I) не обладает ульцерогенным действие"1.

П р и и е р 4 ° Изучение острой токсичности комплекса (I).

Острая токсичность комплекса (I} изучена на 36 мы ах, разделенных на

6 групп, при введении внутрь в дозах

1 указанных в табл ° 4. За животными вели наблюдение в течение 14 дней. В группах животных„ получавших комплекс (Т) в дозах 500, 1000, 1100 мг!кг, не наблюдали гибели, а в 4-6-й груп1616925

r0

СН,-С,. ! ОН

N СНз !

О=С С1

НО СО ОН

ОН НО

Таблица

Препарат и доза, мг/кг

Величина отека лапок, мл, онкометрически через, ч з j () (6 24 48 72

Комплекс (Т}

Индометацин

Кантроль

О, 21Ф0,08

0,49+ О, 10

1 „37+0,29 0,97+0,! 4

О, 16йО, 09 0,26+0, 07

О, 97+0,25

0,1? Н),044

0,16t0 06

0,34+0 10

Ор511-0,16" 0,48+0,13

0,13+0,?7 1,37+0,3!

0,34«+О, 10

0,88+0,25

0,34+0,10

1, 02+0, 25

Г бозначены статистически достоверные результаты.

Таблица

I

; 1!асса

Доза, мг/кг

Препарат продиферата, мг

Комплекс

35,6451 45+6,4

209+?2 ?9+2,9

10 пах отмечали дозу - зависимая гибель мышей. Полученные результаты обрабатывали по Литчфйльду-Уилкоксо". ну.

1.0,!6 = 12?0, 1Л)5 = !. 300, ЬЭ,=1525, значение Р =1,1!5, значение У I.D =

6 .o

=1,074, ЗДГ = 1396, НДГ = 1210. Сле- довательно, средняя смертельная доза (Ll gp) для мышей при введении внутрь составляет 1300(1210-) 396) мг/кг.

1.Пяо для глицирризиновой кислоты равняется 680 .мг/кг, 1Ю индометацина

"390 мг/кг. Таким образом, предлагаемый комплекс (Х) в 2 раза менее ток (.H H, чем глицирризиновая кислотА,, и в 3 раза менее токсичен чем ин9 f дометацин (Р (0,05)..

Пример 5. Полу ение кощлекс-20 но! о соединения (Х). 1„64 г (2 ммоль) глициррнзиновой кислоты растворяют при перемешивании в 50 мл зтанола (96%-ного), добавляют 0,45 r индометацина, 40 мл воды и перемешивают 25 при 70 0 ? ч, Упаривают растворитель в вакууме, остаток сушат в вакууме масляного насоса, Получают 2,0 r (99%) комплекса (Х) в виде аморфного вещества желтоватого цвета. 30

ИК,, см : 3550-3200(0H), 3000-7850(CH), 1700(СООН), 1690, 1660(0=0), 1615(Р), 1525(СН аром,).

У4,61макс50% Ft0H:229 нм (lg Я

4,38); 261 им (lg f 4,31), 267 нм оg Я 4,27), Pgg -56,6 (c 0,03, 50% К ЮН);

Т.пл. 7188-191 С.

Найдено, %: С 63,67; Н 7,10;

М 1,55.

С а11щ80201!С1, Вычислено, %: С 63,48, Н 6,40;

И 1%14;

Таким образом, предлагаемое комплексное соединение (Т) является менее токсичным, где глнцирризиновая кислота, обладает высокой противовоспалительной активностью и не раздражает слизистую оболочку желудка. формула изобретения

Комплексное соединение индометацина с глицирризиновой кислотой формулы СООН проявляющее противовоспалительную активность.

1616925

Продолжение табл. 2

9 ° Ф

-232215

76+6,1

Обозначены статистически достот верные результаты.

Таблица 3

Препарат Лоза, мг/кг

Число дефектов

Уровень значимости.Индоме тацин

10 15,3+1,80 P для х С0 0l

Комплекс (Е)

Контроль

I0 О

Таблица 4

Слагаемые для х

Наблюдаемый эффект

Ожидаемый эффект, 7, Разница

Доза, мг/кг

ЗО.

3,3

3,4

2,3

Составитель Й.Федосеева

Редактор Н.Киштулинец Техред М,Иоргентал Корректор В,Гирняк

Заказ 1356 Тираж 225 Подписное рЪ

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Ó êãîðîä, ул. Гагарина,!01

500 О/6

1000 О/6

1100 О/Ь

1200 2/6

1400 4/6

1500 5/6

Индометацин 10 227127

4Контроль Дистил- 418+48 лированная. вода

Наблюдаемыйй эффект, 7

О

О

33,3

66,6

83 3

0,0053

0,0054, 0,0035

0,0142x6=, =0,0752х2 - (3,84