Способ получения полимерного гранульного анионита

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ змульгатор СПАН формулы (21) 4301214/05 (22) 26,08.86 (46) 30.06.91. Бюл. М 24 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов (72) O.À.Ãðoìîàà, А.П.Гаврюченкова.

Т.А.Хрущева, Л.Н.Цуканова, С.Ф.Белая и

А.Г.Болдырев (53) 678,744.13 (088.8) (56) Остерман Л,А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М.: Наука, 1985, с.535.

Патент США М 4237218, кл, С 08 F

18/00, опублик. 1980.

Изобретение относится к химии и технологии полимеров, а именно к способу получения гранульного анионита, и может быть использовано в хроматографии для разделения биополимеров.

Цель изобретения — повышение предела эксклюзии по белкам до 10 дальтон.

fl р и м е р (контрольный). В стеклянной емкости на 500 мл приготавливали раствор диэтиламинозтилметакриламида (ДЕАЕМ) (26 ч) в 0,2 н. раствора хлористого натрия (360 ч) и оттитровывали до рН 76 н. НО, В раствор вводили И, N -метиленбисакрила1 мид (БИС) (14ч) и инициатор — персульфат аммония (ПС) (0,8 ч). которые растворяли при нагревании а течение 2 мин.

В термостатируемый реактор емкостью

1,5 л, снабженный механической мешалкой с регулируемым числом оборотов, холодильником и трубкой для барботироаания арго„„, 0 „„1659427 A l (я)я . С 08 F 220/56, С 08 J 5/20 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИМЕРНОГО

ГРАНУЛЬНОГО АНИОНИТА (57) Изобретение относится к области химии полимеров и позволяет получать аниониты для процессов хроматографического разделения биополимеров с пределом зксклюзии до 10 . Это достигается радикальной суспензионной сополимеризацией мономера—

N,N-p e avneoaeemnvexaxpvnavvpa со сш и вател ем —, N, N -метиленбисак рилами1 дом а присутствии инициатора — персульфата аммония при нагревании, причем процесс проводят предварительно раство. ряя сомономеры в 0,3 — 3,0 н водном растворе хлорида натрия. 3 табл. на, помещали тридекан (600 ч), содержащий са2 (о с,,а,,)а 7Н33 С00 ОЯ

ОН М проводили барботаж аргоном в течение 0,5 ч и вводили реакционную смесь, приготовленную в стеклянной емкости, при непрерывном перемешивании 300 об/мин в . M течение 15 мин при комнатной температуре; далее включали обогрев реактора при 0 С и вводили N, N, N, N -тетраметилзтиленди! I амин (ТЕМЕД) с помощью пипетки. Процесс сополимеризации проводили в течение 3 ч.

Далее мешалку выключали, гранулы переносили в фильтр и отмывали от тридекана водой с детергентом, только водой и рассеивали на ситах, выделяя фракции 20—

50,50 — 100 (70%) и 100 — 200 мкм.

1659427

Таблица 1

Пример

Обьем порового пространства

Концентрация NaCI, П редел зксклюзии (по декстрану), дальтон

Сорбент

Поверх- Средний ность, диаметр м /гм пор, нм

1 (контр.)

3

5

7

8 (контр.)

9 (контр.)

10 (по прототипу) ДЕАЕ-Солоза АГ-1

ДЕАЕ-Солоза АГ-3

ДЕАЕ-Солоза АГ-4

ДЕАЕ-Солоза АГ-5

ДЕАЕ-Солоза АГ-6

ДЕАЕ-Солоэа АГ-7

ДЕАЕ-Солоза АГ-2

ДЕАЕ-Солоза АГ-0

ДЕАЕ-Солоза АГ-8

Сополимер акриламида с БИС диметиламинопропилметакриламидом

0,2

0,5

1,7

2,0

2,5

3,0

0,3

4,0

100 10

250 10

200 10

300 10

100 10

100 10

100 10

20 10

100 10

156

119

108

98

81

168

0,42

0,60

0,65

0,63

0,62

0,60

0,57

0,20

0,60

12 й24

15 + 0,5

18 + 1,0

21 + 1 0

25+ 1,0

42 «й10

12 ="0,5

3 + 2,0

40 "= 10,0

500 - 10

0,58

23 12,0

Анионит представляет собой сфериче- ские гранулы белого цвета с хорошей гидродинамикой в режиме хроматографии.

Обменная емкость по аминогруппам ОЕ=3,1 мг-экв/г сухого сорбента.

Свойства представлены в табл,1.

Предел эксклюзии по декстранам—

100Х10 даЛЬтОН (MLlm при Kd -О,5= 20Х10 з з

,дальтон). 6

Анионитам присвоено название Солоза

: А.Г.

Пример 2. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров испольэовали 0,5 н раствор хлористого натрия, Предел эксклюзии по декстранам

250х10 дальтон (MLlm при Kd - о,5= 40х10 з з дальтон).

Пример 3. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 1,7 н раствор хлористого натрия.

Предел эксклюзии по декстоанам 2х10 дальтон (MLlm при Kd - o,5=80õ 10 дальтон), П риме р4.Тоже, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров испольэовали 2,0 н раствор хлористого натрия.

Предел эксклюзии по декстранам

> 2х10 дальтОн (MUm при Kd - о,5=. 300х10

6 з дальтон).

Пример 5. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 2 5 н раствор хлористого натрия.

Предел эксклюэии по декстранам >10 (MLrm при Kd- 0,5=500х10 Дальтон). з

Пример 6. То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 3,0 н раствор хлористого натрия.

5 Предел эксклюзии по декстранам > 10 (MUm при Kd - О,5=10 Дальтон).

Пример.7. Данные приведены в табл,1, Пример 8 (контрольный), То же, что в

10 примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали воду, Предел эксклюзии,по декстранам

40х10 дальтон (MUm при кд - о,5= 10х10 дальтон).

15 Пример 9 (контрольный). То же, что в примере 1, только в качестве растворителя мономеров использовали 4 н раствор хлористого натрия.

Предел эксклюзии по декстранам >10

20 (MUm при Kd - о,5=10 дальтон).

Условия получения анионитов приведены в табл.2..

Данные по хроматографированию биополимеров на анионите приведены в табл,3, 25

Формула изобретения

Способ получения полимерного гранульного анионита путем радикальной суспензионной сополимериэации N,N30 диэтиламиноэтилметактриламида с N,N метиленбисакриламидом в присутствии персульфата аммония при нагревании, отличающийся тем, что, с целью повышения предела эксклюзии по бел35 кам до 10 дальтон. сополимеризацию проводят в 0,3 — 3,0 н водном растворе хлористого натрия.

1659427

Таблица 2

Таблица 3

Составитель Л.Чупова

Редактор Л.Веселовская Техред МЛИоргентал . Корректор А,Осауленко

ЗаКаз 1818 Тираж 325 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул,Гагарина, 101