Способ определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей
Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей. Целью изобретения является повышение точности способа. Цель достигается тем, что у детей дополнительно в сыворотке крови определяют активность фосфолипазы А и при значении активности фермента (в ед. фосфолипазной активности) 1,25-1,40, 1,4-1,55, 1,80-1,90 вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени воспалительного процесса при периодической болезни у детей. 1 фиг., 2 табл.
СОКЭЗ СОНЕ ВСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)л G 01 N 33/68
ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
В (2 1) 4705102 /1 4 (22) 14.06.89 (46) 15,10.91. Бюл, М 38 (71) Ереванский институт усовершенствования врачей (72) П,А.Казарян и Ф.Х.Антонян (53) 612.016(088,8) (56) Казарян П.А. Обмен и взаимопревращения фосфолипидов, триглицеридов и глюкозы при хроническом воспалительном бронхолегочном процессе. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА
ПРИ ПЕРИОДИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ У ДЕТЕЙ
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике периодической болезни (ПБ) у детей.
На чертеже представлены данные по изменению активности фосфолипазы А в сыворотке крови при ПБ у детей в зависимости от тяжести заболевания; а — стадия ремиссии, б — стадия приступа.
Целью изобретения является повышение точности способа.
Цель достигается тем, что в известном способе определения степени активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей путем исследования сыворотки крови определяют активность фосфолипазы А и при значении активности фермента (в ед. фосфолипазной активности)
1,25; 1,55; 1,84 — 2,0 вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени воспалительного процесса при периодической болезни у детей.
„„SU „„ 1684686 А1 (57) Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей, Целью изобретения является повышение точности способа.
Цель достигается тем, что у детей дополнительно в сыворотке крови определяют активность фосфолипазы А и при значении активности фермента (в ед. фосфолипаэной активности) 1,25 — 1,40, 1,4 — 1,55, 1,80 — 1,90 вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени воспалительного процесса при периодической болезни у детей. 1 фиг., 2 табл, Способ осуществляют следующим образом.
1,0 мл сыворотки крови инкубируют в течение 15 мин при 60 С в водяном термостате. К 0,5 мл ин куби рован ной сы воротки добавляют 0,5 мл 1 ь-ного раствора трипсина и выдерживают 1 ч при 0 С. К 0,5 мл инкубированной смеси добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и выдерживают в течение 1 ч в термостате при 37 С, Затем добавляют 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция (для прекращения реакции) и титруют 0,1 н. раствором NaOH в присутствии фенолфтэлеина.
Холостой опыт. К 0,5 мл сыворотки добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и
0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция.
Титруют, как и в предыдущем опыте (0,1 н.
NaOH) до появления бледно-розового окрашивания.
Реактивы (фосфолипидную массу) готовят следующим образом.
1684686
На 1 г ячеистого желтка добавляют
10 мл раствора хлороформетанол (2:1). Сосуд с раствором ставят на магнитную мешалку на 30 мин, Затем верхний слой удаляют, а нижний слой сушат в токе газового азота. Рабочий раствор субстрата готовят во время опыта. К 7 мг фосфолипидной массы прибавляют 3 мл 0,5мл трис-NaCI-буфера. (рН 8,0), который затем смешивают с
9 мл раствора натриевой соли деэоксихолиевой кислоты, Расчет проводят по формуле о — хо — — — х 2 х 1 =- ул. сед. фосфолипаэы хо
А в 1 мл сыворотки где (о — опыт; хо - холостой опыт), Исследования проводили у 29 больных детей с ПЕ. Контролем служили данные, полученные у 17 практически здоровых детей.
В сыворотке крови указанным выше способом определяют активность фосфолипазы А, Статическая обработка полученных данных проводилась по Стьюденту и Фишеру
Результаты проведенных исследований, приведенные е табл,1, 2 и на чертеже, свидетельствуют о значительном увеличении активности фосфолипазы А в сыворотке крови больных детей различными формами
ПБ как в стадии ремиссии, (а) так и во время приступа (б). Примечательно что степень изменения активности фосфолипазы А умеренная (при значении активности фермента 1,25 1,40), выраженная (1,46-1,75) и резкая (1,80-2,00) находится в прямой зависимости от тяжести заболевани (легкая, средняя и тяжелая степени соответственно). Умеренные изменения наблюдаются при торакальной форме БП (II) вне приступа — в стадии ремиссии, выраженные — при адбоминальной и смешанной формах 111, а резкие — при ПБ. осложненной амилоидозом (IV). На чертеже столбики I обозначают группу здоровых лиц, Способ иллюстрируется следующими примерами:
ГI р и м е р 1. Больной П,Ж„ 11 лет, обследовался в Республиканской детской клинической больнице г.Еревана (РДКБ) в
1987 г. Мальчик от 5-х родов, беременность и роды протекали нормально. В анемнеэе не отмечаются частые ангины, ОРЗ, наследственность отягощена — отец болел периодической болезнью (ПБ) с 4-летнего возраста.
Настоящее заболевание началось в возрасте 5 лет. Предлагаемая причина заболевания не обнаружена. Приступы заболевания чаще возникают в связи с простудой, приемом острой пищи. Наблюдаются приступообразные острые боли в груди переменной локализации (больше в правой
5 половине грудной клетки), иррадируюущие в правое плечо и сочетающиеся с повышением температуры до 39 С, Приступы сопровождаются выраженной потливостью, ознобом, одышкой. Длительность присту10 пов составляе 1 -2 дня, в течение года они наблюдаются 10-12 раз, несколько учащаясь зимой.
Состояние при поступлении средней тяжести, кожные покровы бледные. Со сторо15 ны сердца и легких вне приступа патологии не обнаруживается, во время приступа тоны сердца учащены, умеренно приглушены, в легких справа (на месте локализации болей) дыхание ослаблено, кратковременный, неж20 ный шум трения плевры, умеренное укорочение перкуторного звука, Живот мягкий безболезненный (в том числе во время приступов). Печень и селезенка во время приступа не прощупываются. Стул и
25 мочеиспускание в норме.
Из лабораторных данных: лейк. 9,5 х
r10 /л, нетрофилеэ — 75, лимфопения—
22, СОЭ вЂ” 22 мм/ч. Биохимический анализ крови беэ особенностей, СРП ""++", повы30 шение скаловой кислоты 0,260 ед, опт, пл, Со стороны мочи патологии не обнаружено, На ЭКГ -- синусовая тахикардия, признаки повышения электрической активности миокарда левого желудочка. На рентгенограм"5 ме грудной клетки во время приступа умеренное утолщение плевры справа.
На основании анамнеза, клиники и лабораторных испытаний у ребенка диагностирована периодическая болезнь, 40 торакальная (грудная) форма, С целью выявления диагностической значимости предлагаемого метода в сыворотке крови была определена активность фосфолипаэы А предложенным выше cnoco Пример 2, Больной А.В„12 лет, 50 обследовался в РДКБ в 1988 r. Мальчик от 1-й беременности, 1-х родов, Масса при рождении 3,950. Перинатальный анамнез без особенностей, В 6 лет перенес корь. а в 7 лет — эпилемический паротит, в 8 лет — ветряную 55 оспу и аппендэктомию. В родословной случаев ПБ не обнаружено. Заболевание началось в 8-месячном возрасте с приступов болей в животе и повышения температуры. Боли в животе носили разлитой характер. температура 10 поднималась до 38-39"С. Болевой симптом отличается постоянством локализации, боли всегда локализуются в правом подреберье, иррадируются в левое и правое плечи. Приступы сопровождаются диспептическими явлениями (тошнота, рвота с примесью желчи), диэурическими явлениями. Спустя 5 лет от начала заболевания во время приступов болей в животе отмечалось послабление стула (понос). Длительность приступов обычно составляла 1 — 3 сут, частота приступов в месяц колеблется от 0 до 2 раз, в среднем до 5 раз. Их частота увеличилась в зимне-весенний период, а также в связи с простудой, 3а час до начала приступа проявлялась нейровегетативная аура: покраснение щек, подавление настроения. Состояние при приеме средней тяжести, кожные покровы бледные, чистые. Зев спокойный, в легких отклонений нет. Границы сердца в пределах нормы. Тоны сердцз звучные, во время приступа тахиаритмичные. Живот вне приступа мягкий, безболезненный при пальпации. Во время приступа пальпация невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц. После стихания болей печень пальпируется на 2 см ниже реберной дуги. Стул и мочеиспускание во время приступов учащены. Из лабораторных данных . лейкоциты 6,7 10 /л, лимфоциты 38%, СОЭ 23 мм/час, СРП "+>" сиаловые кислоты — 260 ед.опт. пло, трансаминазы: АсАТ вЂ” 0,3- 0,72 мкмольчл. АлАТ/0,45-1,06 моль/ч.л./. Анализ мочи без особенностей, склонность к никтурии. Сонография: стенки желчного пузыря утолщены. Холецистография: моторика желчного пузыря не нарушена. Эзофагогастродуоденоскопия — картина выраженного поверхностного гастрита, эрозивного дуоденита. На основании клинико-лабораторных данных и анамнеза был поставлен диагноз: периодическая болезнь. абдоминальная форма. Осложнения: поверхностный гастрит, аэроэивный дуоденит. С диагностической целью была определена активность фосфолипазы А, которая была равна во время приступа 1,84 ед., вне приступа — 1,55 ед., что соответствует средней тяжести воспалительного процесса. Пример 3, Больной И.А., 12 лет, обследовался в РДКБ в 1987 г. 88 г. Мальчик от 2-й беременности, 2-х родов, Перинатальный анамнез без особенностей, Перенесенные заболевания: кишечная инфекция неясной этилогии (1 г.), свинка (5 лет), в 4 года — аппендэктомия, Случаев ПБ среди родственников не наблюдалось, 20 Заболевания началось в возрасте 1,5 годя Предлагаемая причина заболевания кишечныи токсикоз (понос). Приступы забо левания чаще возникают в связи с приемом пищи, эмоциональным стрессом, Период предвестников отмечается всегда за 1-2 дня до начала приступа в виде пожелтения и помутнения склер. Длительность приступа 1 — 3 дня, в течение месяца наблюдалось от 0 до 3 обострений, в с реднем за год — около 8. Начальными проявлениями заболевания в период приступа были абдоминалгия, повышение температуры от 39 до 40 . Приступам часто сопутствуют явления диспепсии (понос, рвота), а также артропатии (боли в коленных суставах). В момент приступа моча темнеет, отмечаются учащенное мочеиспускание, озноб. Боли в животе острого характера, переменчивые, чаще локализованы в левом и правом подреберье. На пятом году заболевания у мальчика к болям в животе присоединились боли в нижних отделах грудной клетки, больше слева, иррадирующие в плечо. При болях в грудной клетке температура была не всегда. В течение 1 мес ребенок получал колхицин. В течение года приступов не было, а затем возобновились. Приступ купируется приемом амидопирина, энтеросептола. Состояние при поступлении тяжелое, кожные покровы бледные с землистым QTтенком. Отеки на лице, нижних конечностях, туловище. Со стороны легких на фоне жесткого дыхания единичные хрипы. в нижних отделах легких ослабленное дыхание, Границы сердца в пределах возрастной нормы. Тоны сердца приглушены, ритмичны, систолический шум на верхушке, АД 110/70, Аппетит умеренный, язык с беловатым налетом, живот мягкий, умеренный асцит, безболезненный вне приступа, в момент обострения — болезненность и напряжение мышц передней брюшной стенки. Печень выступает на 2 см ниже реберной дуги. Стул полуоформленный с непереваренными остатками пищи. Анализы. Со стороны гемограммы — постоянное ускорение СОЭ (во время приступа 66 м/ч, вне — 58 мм/ч), тенденция к лей коцитозу (10,2-13,6 10 /л), нейтрофилез (до 74%), лимфопения (24%) анемия — Нв— 84 г/л эр. 2,59 10 /л. Отмечалось диспроте12 инэмия/ гипоальбуминэмия, а1, а2 гиперглобулинэмия, наличие СПР ("++", "+++") СК (130, 280 ед, пт. пл,), увеличение содержания липопротеидов (65 — 120 ед.), остаточного азота (32 — 47 ммоль/л), Обнаружены сдвиги в гуморальном (IgA 350 мл%, ig M — 180 мл%, 18845)8fj l9G 1400 мл ь) клеточном (Т лимфоциты 47® иммунитете. Со стороны мочи — постоянная протеинтурия (3,3-6. Г) -8, 25 ). Суточнзя экскреция форменных элементов крови с мочой — в пределах нормы. Ilo пробе Зимницкого максимальная относительная плотность 1028, минимальная — 1015, никтурия, дуодензльное зондирование без особенностей. На ЭКГ обнаружена легкая синусовэя аритмия (72 уд/мин), повышение электрической активности миокарда левого желудочка. На ФКГ отмечается снижение амплитуды 1 тона, систолический шум очень малой амплитуды, который носит функционал ьныи характер. На рентгенограмме легких обнаружены очаговые тени, в особенности справа, с инфильтративными оттенками. Справэ нерезко выражены явления выпота. На контрастной ypor рамме некоторое стззировзние шейки правой почки, отмечаются до бавочные сосуды справа нэ уровне верхнего и среднего полюсов. По д- IHblM эндоско пиии картина поверхностного гзстродуо денита. При сонографическом исследовании почек с обеих сторон паренхима отечная, рыхлая, диффузно изменена. Исследоязние биоптатз из слизистой 1олстой кишки выявило диффузную лимфогистиоцитэрную инфильтрацию, при дополнительных окрасках на эмилоид (конко-рот, генциан-виолет) определяются фибриллярные нити красного цвета вокруг сосудов и в базальных мембранах слизистой, характерные для амилоида. У ребенка диагностирована периодическая болезнь, смешанная форма, осложнения: амилоидоэ почек (нефротическая стадия), хронический поверхностный гастродуоденит. С целью выяснения диагностической значимости предлагаемого метода в сыворотке крови была определена активность фосфолипазы А. Ак гиг)ность фермента была 2 ед. г)не приступа, 2,24 — во время приступа, что соответствует тяжелой степени воспэлительно о процесса. Пример 4. Больной Г.В., 10 лет, обследовался в РДКБ. Мальчик от первой беременности, первых родов. Масса при рождении 3200 г. В три года перенес инфекционный гепатит, часто болеег ОРЗ. Наследственность отягощена, младший брат страдает периодической болезнью. Заболевание началось в 6-месячном возрасте с приступов болей в животе и повышения 1емпературы до 38 С. Приступы заболевания чаще возникают в связи с простудой, эмоциональным стрессом. Спустя 7 лет от нзчзлз заболевания присоединилась артропа) ия, а через 8 летторэкалгия. Приступам всегда сопутствовали явления диспепсии - тошнота, рвота, метеоризм, задержка стула. За несколько 5 часов до начала приступа всегда проявлялась нейровегетзтивная аура: возбуждение, капризность. Длительность приступов в среднем 1 день, частота приступов 1--2 раза в месяц, в год 12 раз. 10 Состояние при приеме — средней тяжести. кожные покровы бледные с серовэтоземлистым оттенком. Зев спокойный, в легких отклонений нет. границы сердца в пределах нормы, тона несколько приглуше15 ны. Живот вне приступа мягкий, печень пальпируется на 2 см ниже реберной дуги. Во время приступа пальпация живота невозможна из-за резких болей и выраженного дефзнса мышц. Мочеиспускание во время 20 приступа учагцено Лабораторные данные: со стороны гемогрзммы Н — 130 г/л, эр. 3,89 10 /л, лейк. -- 9,3 10 /л, неитрофилез 71 $, СОЭ во время приступа 35 мм/ч, вне приступа — 11 25 мм/ч, отмечалась диспротеинемия: гипозльбуминэмия, а, ар гиперглобулинэмия, наличие СПР (4 ), СК вЂ” 230 ед. опт. пл. /) -липопротеиды — 45 ед., ост. азот — 17 ммоль/л, креатинин 44,2 ммоль/л. Со стороны мочи: 30 общий анализ мочи в пределах нормы, по пробе Зимницкого — максимальная отн. плотн. 1027, минимальная — 1015 никтурия. Урохолецистография: отмечается гипермоторная функция желчного пузыря. 35 Слева почка несколько ротирована, справа пиэлоэктазия, стазирование верхних полюсов с двух сторон, Мочеточники и мочевой пузырь в норме, Ээофагогастродуоденоскопия: картина 40 поверхностного гастрита, дуоденита. У ребенка диагностирована периодическая болезнь, смешанная форма. Осложнения: поверхностный гастродуоденит. дискинезия ж/в путей по гипермоторному 45 типу. Нэ основании указанных выше функциональных и клинико-лабораторных данных состояние больного — средней тяжести. Однако активность фосфолипазы А в сыворот50 ке крови составляла 1,84, что свидетельствует о тяжелой степени воспалительного процесса. В последующем было установлено, что у больного периодическая болезнь была осложнена амилоидоэом, 55 1аким образом, при использовании только способа-прототипа невозможно правильно определить степень тяжести процесса. а определение фосфолипазы А позволило уточнить (исправить) величину 1684686 7а блица 1 Изменение активности фосфолипазы А в сыворотке крови при различных формах периодической болезни у детей вне приступа (И + м) осложненные ГБ амилоидозом Неосложненные формы ПБ Брюшная Здоровые Смешанная Грудная 1,31- 0,1 и = 6 1,55 0,08 1,45 0 07 1,90 М 0,08 и =- 6 1,12Й 0 02 п = 17 п= 9 n=17 активности процесса (степень тяжести заболевания), Пример 5. Больной П.Г., 14 лет неоднократно обследовался в РДКБ г.Еревана (1984, 1986, 1988, 1989 гг.), Мальчик от 5 первой беременности, первых родов. Масса ребенка при рождении 2700 г. Перинатальный анамнез беэ особенностей, В анамнезе отмечены эпидемический паротит, корь, тонзилэктомия по поводу хронического тон- 10 зиллита, В родословной случаев ПБ не обнаружено. Заболевание началось в 3-летнем возрасте с приступов болей в животе и повышения температуры до 39,5 С, 15 Приступы заболевания чаще возникают в связи с приемом пищи, простуды, За несколько часов, иногда за сутки до начала приступа проявлялась нейровегетативная аура: общая слабость, недомогание, Дли- 20 тельность приступов обычно составляет 2 — 3 дня, в течение месяца они проявлялись от 1 до 3 раз, в год — до 12. При приеме состояние средней тяжести, кожные покровы бледные, сухие. Зев 25 спокойный. В легких отклонений нет. На верхушке сердца нежный систолический шум. Живот мягкий, пальпация безболезненная, печень выступает иэ-под реберной дуги на 2 см, Во время приступа пальпация 30 невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц. Анализы: Нв — 126 ед. Эр 3,71 10 2/л, Л вЂ” 9,9 10 /л, сегм. 69, лимф, 28, мон, 2оь, СОЭ вЂ” 22 мм/ч, общий белок — 80 г/л, ост. азот 21,4 ммоль/л, /3 35 -липопротеиды — 55 ед. трансаминазы, АСТ вЂ” 0,5 ммоль/л, АЛТ g,75 ммоль/л, СРП (+++), СК 300 ед, опт. плоти.; анализ мочи Аддисса-Каковского-Л-18 10, Эр 30 ° 10, проба 4 4 Зимницкого — склонность к никтурии. Урохолецистография: моторика желчного пузыря не нарушена. Пилоэктазия справа, а слева — стазирование чашечек средних полюсов. Мочеточник и мочевой пузырь в норме. Эзогастродуоденоскопия: картина поверхностного гастрита,дуоденита, дуоденогастрального рефлюкса (ДГР). У ребенка диагностирована периодическая болезнь, абдоминальная форма. Осложнение: поверхностный гастродуоденит, ДГ . Итак, на основании приведенных данных состояние больного средней тяжести, активность фосфолипазы А в сыворотке крови — 2,0, что указывает на тяжелую степень заболевания и высокую степень активности воспалительного процесса, что и подтверждает в дальнейшем осложнение заболевания амилоидоэом, Обобщая все изложенное, можно заключить, что введение нового показателя (фосфолипазы А) позволяет уточнить степень активности. воспалительного процесса и степень тяжести заболевания. Формула изобретения Способ определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей, включающий медико-биологическое обследование и биохимический анализ крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови дополнительно измеряют активность фосфолипаэы А и при ее значении 1,25, 1,55 и 1,84 — 2,0 усл. ед. вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени активности воспалительного процесса, 12 1б)МбМ ;(и> (! п;(2 ((! тlll(llo(:тl (1> ((1>».lit l!1 1»!, (II (ll!I(>p()т(е кр >ни f(pll нор(! >;(:((ее(,(>(1 Г>() не н (! ч де т(((;((> (! I(os!I(Ilp()!(), (Il! f > I > . ((((, Ill;I (, (g (1 1 >:(((н,(е Здор г>ьч ((11(>(: (Ip. "(е (е и((я 1, 1 2 - - О, 0 2 n = 17 и = 11 1 р и ((е ч а и и с . 1 (— пг> cpo (((I(I((If<> (I! ((ыc;((> .(еч еl(lf! с (((>нтрг> не((; Рg ((Л C: Р (НН Е I! ((10;(;11 I II (К, ((> l(((! Е(li (5(Г,(а Н Н((((И И >ГНЕ К(НтРО. (Я; 1 > tlo (p;1(1(I< Il l(10;lл н(l ...;Ioг:(< ;lo ">Of!(Ill Г (гoflггрг>лГ((, 1,5 I П fff JV f Il И 1V Составитель А. Arypeee Техред М.Моргентал Корректор М. Макси((ишинец Редактор А. Маковская Заказ 3503 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета Ilo изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва. Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент" г. Ужгород ул.Гагарина, 101 1 7(- 11 Ъ ( (1 (\(> 1 (1, .? ) — (1, (17 т»: (1 1 rs () () >) > и = 11
