Способ определения иммуногенности вакцин против хламидиозов сельскохозяйственных животных

 

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для определения протекчианой активности инактивированных и живых вакцин прзтиз хяамидиозз овец. Цель изобретения - повышение достоверности за счет стандартизации способа. Способ заключается в том, что иммуногенность вакцин против хламидиозя оценивают про результатам реизоляции хлэмидий из регионарных лимфатических узлов (подчелюстИзобрзтение относится к ветеринарии и может быть использовано для контроля иммуногенной активности инактипировзнных и живых вакцин из аттенуированных штаммов против хламидиозов сельскохозяйственных животных. Известен способ оценки иммуногенности (протехтивной способности) хламидиозных вакцин по серологическим показателям сыворотки кооэн ммунизировонных лэбоные , заглоточные) и паренхиматозных органов (печень, селезенка) от вакцинированных морских свиних после контрольного заражения их эпизоотическим штаммом возбудителя. 8 качестве индикаторной системы используют 7-суточные развивающиеся куриные эмбрионы, зараженные в полость желточного мешка суспензией из вышеназванных органов. Если вакцина индуцирует напряженный иммунитет, то хламидии эпизоотического штамма элиминируются из организма подопытного животного и, соответственно, развивающиеся куриные эмбрионы, зараженные суспензией из органов этих морских свинок, остаются живыми весь срок наблюдения. В случае выработки недостаточной резистентности возбудитель находит условия для размножения в обозначенных органах, поэтому выявляется в индикаторной системе - развивающихся куриных эмбрионах, вызывая их гибель. Выявление хламидий осуществляют микроскопией окрашенных по Стэмпу мазков-отпечатков из стенок желточных мешков погибших эмбрионов. Хламидий легко обнаруживают в виде красных точек на зеленом фоне препарата. 3 табл. раторных животных, преимущественно в реакции связывания комплемента (РСК). Серологические исследования сыворотки кроаи иммунизированных хлэмидисзными вакцинами животных не отражают прямых коррелятивных связей между уровнем комплементсвязывающих антител в кроаи и напряженностью иммунитета. При изучении динамики накопления компл - мент связывающих антител а крови больных (Л с о о о со N3

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕС",ИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕН-!ь! Й КОМИТЕТ

ПО ИЗОГРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЛвЛ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4329952/13 (22) 18.04.90 (46) 23.01,92. Бюл. М 3 (71) Институт биохимии и физиологии им. акад. Vi.Н. 3ахарьева (72) Б.Н.Гусев, О.И.Волошина, Ж.M.Èáðàåâ, А.К.Осмоналиев и А.Ю,Беклешова (53) 615.371.372(088.8) (56) Байтурина О,Ш.. Мырзабекова Ш.Б., Арзымбетов Д,Е. Серологические реакции при хламидиоэе овец. — Ветеринария. 1984, М 4, с.60 — 61. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИУМУНОГЕННОСТИ BAKL|MH ПРОТИВ ХЛАУИДИОЗОВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ

ЖИВОТНЫХ (57) Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для определения протект ивной активности инактивированных и живых аакц н против хламидиоза овец, Цель изобретения — повышение достоверности за счет стандартизации способа. Способ заключается в том, что иммуногенность вакцин против хламидиоза оценивают про результатам реизоляции хламидий из регионарных лимфатических узлов (подчелюстИзобретение относится к ветеринарии и мол.ет быть использовано для контроля иммуногенной активности инактивированных и живых вакцин иэ аттенуированных штамл ов против хламидиозов сельскохозяйственных животных.

Известен способ оцснки имл уногенности (протективн=й способности) хламидиозных вакцин по серологическим показателям сыворотки коса: ь,ммунизированных лабо„„5Q„., 1736632 А1 (я)5 А 61 К 39/118, С 12 Q 1/00 ные, заглоточные) и паренхиматозных органов (печень, селезенка) от вакцинированных морских свино:с после контрольного заражения их эпизоотическим штаммсм возбудителя. В качестве индикаторной системы используют 7-суточные развивающиеся куриные эмбрионы, зараженные в полость желточного мешка суспензией из вышеназванных органов. Если вакцина индуцирует напряженный иммунитет, то хламидии эпиэоотического штамма элиминируются vç организма подопытного животного и, соответственно, развивающиеся куриные эмбрионы, зараженные суспензией иэ органов этих морских свинок, остаются живыми весь срок наблюдения. В случае выработки недостаточной реэистентности возбудитель находит условия для размножения в обозначенных органах, поэтому выявляется в индикаторной системе— развивающихся куриных эмбрионах, вызывая их гибель. Выявление хламидий осуществляют микроскопией окрашенных по

Стэмпу мазков-отпечатков из стенок желточных мешков погибших эмбрионов. Хламидий легко обнаруживают в виде красных точек на зеленом фоне препарата. 3 табл.

Ъ раторных живстн ых, преимущественно в реакции связывания комплемента (PCK).

Серологические исследования сыс оротки крови иммунизированных хламидисзными вакцинами животных не отражают прямых коррелятивных связей между уровнем комплементсвяэывающих антител в крови и напряженностью иммунитета. При . изучении динамики накоплен;1я комплмент связывающих антител в крови больных

170%32

35

;,,;а",ст1 .лх и ppt::, I, -алас:,з, тЗо!,э !" ГО эи3 0 О . 1 1 3 . б Ог I. ;": I и c o ë 3! ".-!! I I i 1 . ти х f I o!; ýI ., T . с Й с и р с т .. - ", и! е "»(1, «t ",. "!: ц11О н н О Г а процесса и о1: р-бGT .0;1;с: с :«ги1ст11 обнару:кена отсутста1О заш,,т«1О11 функции этих; .. «11тел про ..1: хла«111д1 .Оз 1сго аборта

O L Gt l

ИзоеcTGH cil "cсб ксит-рслг и«1му11огеиI I GcT11 хл 5« идис 3« ь!х а- кц1 il по Tt f30я ол е« . и ю

I.nt;IIë-; с:;х при=-!!а .GB засслеоа«и1я о оидэ абортс . у оакц1л .:",,Оо"ll 1ых 11 и«1«акт ib!x

::. ;аoi,"ых пссг а «:Оит10n«.исго: аражсния

Э« I1ЗО!), 11ЧЕСК 1t 1 t а1Л1 ".О! ССЗС lД!1 1I с.:Л Я., ЛЯ

1 биологического конт 1оля им,"..1"«1сгеннссTL! хла, : 11д11сз«111х в:. -«н и«l maL .!e всего и: t tonbyют беp=tлеииых I.;Орс;,:их со1п1ск.

Однако оценка имму;1сгениссти вакцин на пр11о11тых и пита fиых беремеи 1L!x морск11x со11нках 10 проявлен ..о клинических призна;DLI после ко;1трольисгс зэраже11ия

ЭПИЗООтИ ЕСКИМ О:таММОМ,лаЛО ДССтООЕРна всгадствие раэ«1сго проявления забслеоа«11,я и, ссответс;оекис, характера проявления кn.1íических гризнаксо хламидиозного аборта у овец 11 F. Gpc;"1x свинок, Ipot.,å того, метод биологического контрогя вакцин иа n,",Горэтсрных животных ие стандартен, псс«.ольку иа результаты влияют ttозраст, пол. питаи to, содер.канле животных.

Цель«О изобретения яол.",ется повышение достоверности аа счет стандартизации способа.

Пример 1, >,ве группы морских свинок оакцииируют п;.",".раль«1О препаратом аттеиуирпоаиксгс шт-".;..;1э хламидий (:::иоая вакцина) а аборта с -" ц. Перзую l pупг1у морских

cLII«ioI;, а также L «.Tàxòíbtõ случают с сгмца, .1 и 1ерез ..., ttb посла Ракцииации их заража«от зпизсстическ 1м шта ".,Ом. Иммуноге«t! IGCTb оак.,11 и в этой группе сцекивают тр,":рлциаииым с lccсбсм гс физиологическому cocTG1и1и«з:-:ак«„11«1ирсваниых l1HHTBKтных : L IGT». .". после контрольного

ЗаРЗ1КЕ«,11Я. г ЕЭУ..bTarbf СПРЗДЕЛЕ«111Я ИММУНОГЕИИОСтИ жt c.-й а1-гону1 рС ":Itíå ft ВакЦИны традициси ым методом (исход беременности у =а L, -1иирсоаи«1«:x и интакткых « ..Ооск11х с .и10к после контрольного зара;:.:еи1я эпи. :. GTè-веским шта:, мом) приг.=",a!« ft табл.1.

Во гторой Оуппе в . .ц11и11сооаннь1х морск1 х солне- и:.1муисгениссть оцгл1иаа«от пс радлэга= . io . i спсссбу.

В табл.2 пр :а = -""..,b. pe,г> "",ьтаты апредел», ил 11«1муисг-..;и1С,T -. ж11всй аттенуирог.; I<к а :! оакц1:i, . Г . > п«,"„ti".: с."«1G «у спсcGvу (."О1 . Гз,ция хла . . .1 .111з сргач1 о D 1кц11«1иР. ;. и, х и v;I тч =, х;1С ;...;В.;;:Ок исле I..n«ITI".onьного зара>кения эпиэоотичеСКИМ ШTat1 O ).

Б Itc росм Опыте (гобл.1) среди оакцинирооа11ных морских со11нок абортов нет, одна".о Однозначно судить об иммуногенности препарата невозможно, так как в контроле у и :«такт«1ых свинок эпизсотичсский штамм также не вызывает «борты, Предложенный способ определения ик1мучогениости вакцин (табл.2) позволяет получить достоверное заключение. Контроль срабатывает всегда, так как на размножение хламидий зпизсотического штамма в органах иитакт11ых морских свинок ие оказывают влияния посторс«1«1ие причины (возраст, пол, питание, содержание животных, различия о проявлении и-исгенеза инфекции и т.д.) и нет сомнений, Iio о органах оакцииирооаиных

> иоотных хгамидии не выявляются лишь по той причине. что их организм приобрел выраженну о устойчивость к инфицироваIlllio эпиэоотическим штаммом возбудителя, поэтому мо;кно сделать вывод об иммуногенности профилактического препарата.

П р и и е р?. Эффективность предлагаемого способа определения иммуноген Ioсти проверена «:э двух инактивирооанных вакцлиах — корпускулярной, приготовленной по методике Стзмпа из частично очищен«1ых и концентрированных дифференциальным центрифугирооанием хламидий убитых 0,5%-ным формалином, и вакцине из растворимого аитигена. Обе вакцины изгoTGBnPHbl из штамма "2T" хламидий аборта овец. Инфекциончый тито исходной биомассы хламидий 10

ЗЛДьс/0,3 мл. В качестве адь«соанта использовано вазелинооое масло с 4% ланопина.

Две группы беременных морских свинок оакцинируют подкожио каждым из вариантов вакцины и через 30 сут после иммунизации их зэража1от перорально эпизсстическим штаммом. Через 15 сут после контрольного заражения животных усыпляют эфиром, о асептических условиях извлекают региоиасиые лимфатическле узлы и паренхиматсзные органы. 10%-ной суспензизй органов заража«от 7-суточные разоивающ11еся куриные эмбрионы по 0,3 мл в пслссгь желточисго мешка, Сравнительные данные по иммуногенности инактиви„сванных вакцин против хламидиозного аборта овец приведены в табл.3.

Таким образом, вариант вакцины из корпускулярного антигена индуцирует в организме привитых животных напряженный иммунитет; ни у одного из вакцинирооэн