Штамм парамиксовируса кур, используемый для приготовления диагностических препаратов

 

Использование: вирусология, для получения диагностикума парамиксовирусов. Сущность изобретения: предложен штамм парамиксовируса птиц, который представляет собой дрейф-вариант вируса Юкейпа. Предложенный штамм может быть использован в качестве модели при изучении дрейфовых процессов у вирусов группы Юкейпа, а также как диагностический препарат при диагностике инфекций, вызванных вирусом этого серотипа. 1 табл.

союз совгтских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4875941/13 (22) 18.10.90 (46) 07.08,92. Бюл. М 29 (71) Институт микробиологии и вирусологии

АН КазССР (72) M.Х,Саятов, С.С.Ямникова, К.Д.Даубаева.

Т.Б.Шайхинова, В.Э,Тер-Погосян, Ф.Ж.Абишева и К.Х.Жуматов (56) Alexander D.J. Avian paramixovirus.—

The veterinary Bulletin, 1980, М 9, v. 50.. р, 737-752, Llpkind M., Shlhmanter Е. Antigenic

relatlonshlpsbetween avian paramyxovlruses.—

l 0uànt1tativå characterlctics Based on Haemagglutlnatlon and Neuraminldase inhibition tests.—

АгсЫчеэ of Virology, 1986, N. 89, рю 89-11.

Изобретение относится к вирусологии и может быть использовано для получения диагностикума парамиксовирусов.

Известны данные об изоляции парамиксовирусов от различных видов домашних и диких птиц.

В результате экологического изучения диких птиц было выявлено, что штамм вирусов Юкейпа(пара чиксовирус 2-го серотипа) является антигенно вариабельным, Gpнако отсутствуют сведения об изоляции от домашних птиц дрейф-вариантов вируса Юкейпа, отличающихся от прототипных штаммов по антигенным характеристикам . структур н ы х бел кое..

Цель изобретения — получение штамма вируса Юкейпа Курица/Алма-Ата/71/87, обладающего специфической иммуногенностью, позволяющей использовать его для приготовления диагностических препаратов при идентификации вновь выделенных парамиксовирусов птиц.

„„ Ж„„1752765 А1 (м)з С 12 N 7/00, А 61 К 39/145

2 (54) ШТАММ ПАРАМИКСОВИРУСА КУР, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ (57) Использование; вирусология, для получения диагностикума парамиксовирусов, Сущность изобретения. предложен штамм парамиксовируса птиц, который представляет собой дрейф-вариант вируса Юкейпа.

Предложенный штамм может быть использован в качестве модели при изучении дрейфовых процессов у вирусов группы Юкейпа, а также как диагностический препарат при диагностике инфекций, вызванных вирусом этого серотипа. 1 табл.

Предлагаемйй штамм Курица/АлмаАта/71/87 представляет собой вирус, родственный в антигенном отношении штамму

Курица/СССР/1/86. Новый штамм выделен от кур в сентябре 1987 г, при вирусологическом обследовании домашних птиц Алма-Атинской области Казахской CCP и хранится в коллекции Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР (депозит ГКВ N. 2230).

Антигенную структуру штамма изучали в РТГА с использованием набора референссывороток к парамиксовирусам 1-9 серотипов, а также к вирусам гриппа с гемагглютининами подтипов Н1-Н13 и нейраминидазой N. 1-9. Результаты, представленные в таблице показывают, что штамм, Курица/АлмаАта/71/87 проявил частичное, но не полное антигенное родство с эталонным вирусом

Курица/СССР/1/86.

Активность репродукции, Выделенный от кур вирус Курица/Алма-Ата/71/87 репродуцируется в системе куриного эмбриона

Э 1752765 4

Патогенные свойства. Штамм Курица/Алма-Ата/71/87 не проявляет патогенности для однодневных цыплят при интраназальном, внутрибрюшинном и интрацеребральном заражении.

Штамм, выделенный от кур, предназначен для производства парамиксовирусного антигена, который может быть использован при серологической диагностике, С этой целью штамм размножают путем заражеП р и м е ч а н и е. С референс-сывороткам к вирусам, содержащим гемагглютинины

Hi —.Н13, получены отрицательные результаты. при оптимальной (37 С) и повышенной (41

С) температурах до инфекционного титра

6-8 lg ЭИДм/0,2 мл. Штамм обладает высокой гемагглютинирующей (титр гемагглютинации 1/256 — 1/5.12) и иммуногенной активностью.

Гемагглютинирующая активность. Вирус обладает широким спектром агглютинации эритроцитов. Он одинаково хорошо агглютинирует эритроциты кур, уток, морской свинки, крысы и мыши, но не взаимодействует с эритроцитами барана, свиньи, лошади и крупного рогатого скота.

Терморезистентность (T56-ïðèçíàK).>.

Вирус, выделенный от кур, и прототипный . штамм Курица/СССР/1/86 обладают температурочувствительным гликопротеидом

HN (T56 — 5 мин).

Ингибиторочувствительность, Исследуемый штамм проявляет чувствительность к термолабильным ингибиторам сывороток кролика и мыши и термостабильным ингибиторам сыворотки морской свинки, но был резистентен по отношению к сывороточным ингибиторам барана. свиньи, уток, кур, крысы, Адсорбционно-элюирующая активность.

Представленный штамм, также, как и эталон

Курица/СССР/1/86, обладает слабой адсорбирующей активностью по отношению к формалинизированным эритроцитам кур. ния 9-10-дневных куриных эмбрионов в аллвнтоисную полость

Диагностическую иммунную сыворотку получают на кроликах породы шиншилла

5 или на белых крысах. В качестве антигена для иммунизации используют вирус. сконцентрированный центрифугированием при

24 об/мин в течение 2 ч. Титры гемагглютинации составляют 1/10000 — 1/20000.

10 Схема иммунизации, Первую иммунизацию проводят подкожно в область шейных и подколенных лимфатических узлов путем

15 — 20 точечных инъекций концентрированного антигена (100 мкг) в смеси с полным

15 адъювантом Фрейнда. Через 3 нед проводили повторную иммунизацию животных подкожно (с адъювантом) и внутривенно (без адьюванта) равным количеством антигена.

Кровь у животных берут из краевой вены уха

20 через 7 дней после второй иммунизации.

Иммунную сыворотку освобождают от неспецифических ингибиторов обработкой отечественным препаратом нейтраминидазы из нехолерного вибриона, Титр иммун25 ной сыворотки заявляемого штамма в РТГА с гомологичным антигеном составлял 1/20

480-1/40 960, с гетерологичными антигенами парамиксовирусов 1 — 4, 6-9 серотипов— реакции отрицательны.

30 Таким образом, предлагаемый штамм парамиксовируса Курица/Алма-Ата/71/87, выделенный от кур, и приготовленные на его основе диагностические препараты могут быть применены в вирусологической

35 практике для идентификации вновь изолированных штаммов парамиксовирусов и обнаружения антител в сыворотках различного происхождения.

Формула изобретения

40 Штамм парамиксовируса кур ГВК %2230, используемый для приготовления диагностических препаратов: