Способ дифференциальной диагностики стабильной и нестабильной стенокардии

 

Использование: медицина, в частности кардиология для диагностики двух клинических вариантов ишемической болезни сердца - стабильной и нестабильной стенокардии . Цель: повышение точности способа. Сущность изобретения: определяют активность фосфорилазы А2 тромбоцитов и при значении 0,31-0,44 мкМР/час/м активности фосфорилазы А2 диагностируют стабильную , а при значении 0,45 мк МР/час/мг и более - нестабильную стенокардию. Предлагаемый способ не требует специального оборудования, больших затрат времени и может быть широко использован в медицинской практике с точностью постановки диагноза 99%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/68

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4418133/14 (22) 01.02.88 (46) 07,11.92. Бюл. N 41 (71) Ленинградский научно-исследовательский институт кардиологии (72) В.А,Алмазов, И.Г,Стрижак и К.И.Шаныгина (56) Авторское свидетельство СССР

М 1138127, кл. А 61 В 10/00, 1983. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИИ СТАБИЛЬНОЙ И Н ЕСТАБИЛЬНОЙ СТЕНОКАРДИИ (57) Использование: медицина, в частности кардиология для диагностики двух клиничеИзобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и касается дифференциальной диагностики двух клинических вариантов ишемической болезни сердца— стабильной и нестабильной стенокардии, Известен способ диагностики стабильной и нестабильной стенокардии путем клинико-электрокардиографического обследования больных, Считается, что основной критерий диагностики — клинический, при котором учитывается характер болевого синдрома, его развитие во времени и т,п, Однако данный способ не обладает достаточной точностью, т.к. в его основе лежит субъективная оценка проявлений заболевания, а в ряде случаев, при атипичной клинической картине, его возможности еще более ограничены, Данные злектрокардиографического исследования малоинформативны, отсутствуют специфические изменения на

ЭКГ, а мониторирование больных, которое позволяет уточнить диагноз, требует дли, . Ж,, 1774263 А1 ских вариантов ишемической болезни сердца — стабильной и нестабильной стенокардии. Цель: повышение точности способа.

Сущность изобретения: определяют активность фосфорилазы А2 тромбоцитов и при значении 0,31-0,44 мкМР/час/м активности фосфорилазы Az диагностируют стабильную, а при значении 0,45 мк MP/час/мг и более — нестабильную стенокардию. Предлагаемый способ не требует специального оборудования, больших затрат времени и может быть широко использован в медицинской практике с точностью постановки диагноза 99%, тельного наблюдения и практически недоступно для широкого использования.

Известен способ диагностики стабильной и нестабильной стенокардии путем определения коэффициента интенсивности хемолюминесценции лейкоцитарной массы (авт. св, N- 1138127, кл. A 61 В 10/00, 1985), выбранный в качестве прототипа. Этот способ не достаточно специфичен и точен. Поскольку в данном способе применяется биофизический метод, требующий специальной аппаратуры и дефицитного реактива, возможности его широкого использования в лечебно-профилактических учреждениях проблематичны.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом.

Тромбсциты выделяют из 10 мл крови методом дифференциального центрифугирования, используя при этом посуду с несмачивающейся поверхностью.

1774263

35

Взятую натощак из локтевой вены широкой иглой кровь смешивают с 3,2 -ным раствором цитрата натрия в соотношении 9.

: 1, затем центрифугируют 10 мин при 120 д.

Богатую тромбоцитами плазму отсасывают полиэтиленовым шприцом от осажденных эритроцитов, переносят в другую пробирку и центрифугируют при 1200 д 20 мин.

Для удаления оставшихся эритроцитов полученный осадок суспендируют в 0,847ном растворе хлористого аммония в объеме, равном объемом исходной плазмы, выдерживают 10-15 мин в холодильнике и повторно центрифугируют при тех,же условиях.

Осадок тромбоцитов ресуспендируют в 2 мл раствора трис (рН вЂ” 7,0) и обрабатывают ультразвуковым дезинтегратором при 20 кГц в течение 30 с. Все процедуры проводят при

4ОС, Содержание белка определяют в 0,02 мл полученного гомогената, а активность фосфорилазы А в 0,2 мл (50-100 мкг белка) с использованием инкубационной среды, содержащей в 1 мл конечной концентрации:

2-глицерофосфата натрия 20, цистеин-НС

13, глюкоза-1-фосфат 10, а —. 10, ЗДТА—

5,1 g -ный раствор гликогена, общий объем

1 мл. Инкубацию проводят при 37 С в течение 20 мин.. В отличие от опытных проб в контрольные добавляют глюкозо-1-фосфат после осаждения белков 10Я,-ным раствором трихлоруксусной кислоты (1 мл). В 0,3 мл безбелкового фильтрата определяют содержание неорганического фосфора тритоновым методом на спектрофотометре при

660 нм (5). Активность фермента выражают в мкМР на 1 мг белка за 1 ч инкубации, Обследовано 70 больных в возрасте от

40 до 60 лет, из них 50 с нестабильной стенокардией, 20 — со стабильным течением стенокардии, Контрольную группу составили 20 практически здоровых лиц тех же возрастных групп.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больной В,. 58 лет, предьявлял жалобы на боли за грудиной сжимающего характера при физической нагрузке.

Боли проходят в покое. Длительность заболевания 5 лет. Электрокардиограмма без особенностей.

Активность фосфорилазы А в тромбоцитах 0,44 мкМР/ч/мг белка. Клинический диагноз: ишемическая болезнь сердца. Стенокардия напряжения. стабильное течение, Пример 2. Больная Б„61 год. При поступлении в клинику больная жаловалась на боли за грудиной, возникающие при небольшой физической нагрузке (через 100150 м ходьбы), Страдает стенокардией 6 лет.

Боли за грудиной возникали редко, при значительной физической нагруз.:е, Постоянной терапии у больной не было. Состояние ухудшилось за последние 5-6 недель, Приступы болей участились, стали возникать при незначительной физической нагрузке, боли купировались приемом нитроглицерина. На электрокардиограмме патологических изменений не выявлено, Активность фосфорилазы А в тромбоцитах — 0,45 мкМР/ч/мг белка. Клинический диагноз: ишемическая болезнь сердца. Нестабильная стенокардия.

Больной проведена терапия нитратами, аспирином. Через 2 недели самочувствие улучшилось, боли стали редкими. 1-2 раза в сутки, проходили самостоятельно. Стабилизации состояния соответствовало уменьшение активности фосфорилазы А в тромбоцитах до 0,31.

Пример 3. Больной К., 46 лет. Ишемической болезнью страдает 3 года. Дважды перенес инфаркт миокарда. В до- и постинфарктном периоде сохранялась стенокардия напряжения. На электрокардиограмме выявлены рубцовые изменения передней стенке левого желудочка. Исследование активности фосфорилазы А в тромбоцитах в период стабильного течения стенокардии выявил ее повышение до 0,44.

Через 2 года самочувствие ухудшилось, участились боли, стали более интенсивными, появились боли за грудиной в покое. Активность фосфорилазы А в тромбоцитах в этот период выросла до 0,67 мк мр/ч/мг белка.

Больной был госпитализирован с диагнозом: нестабильная стенокардия. На терапии (финоптин, нитраты} самочувствие улучшилось, стабилизировалось, На 14-е сутки пребывания в клинике активность фосфорилазы снизилась до 0,33 мкМР/ч/мг белка, что совпадало со стабилизацией течения стенокардии.

Способ дает возможность дифференцировать стадии развития заболевания, судить 0 степени дестабилизации, а также осуществлять надежный контроль за эффективностью терапии с точностью 99%.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики стабильной и нестабильной стенокардии путем исследования форменных элементов крови, отл ич а ю щи йс я тем,что, с целью повышения точности способа, в тромбоцитах определяют активность фосфорилазы

Ag и при значении этого показателя 0,31 —

0,44 мкМР/ч/мг диагностируют стабильную стенокардию, а при значении 0,45 M KM P /÷/ìã и более — нестабильную.