Способ определения дезадаптации населения к условиям окружающей среды

 

Способ определения дезадаптации населения к условиям окружающей среды. Использование: биохимические способы оценки состояния адаптации. Целью является повышение чувствительности способа. Сущность изобретения: измеряют активность глутатионредуктазы (ГР) и супероксидисмутазы (СОД) крови в динамике и по снижению СОД с одновременным увеличением ГР относительно контроля определяют дезадаптацию. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

0с

Cd

Ф

| р

| (21) 4905733/14 (22) 30.01.91 (46) 23,09.92. Бюл. М 35 (71) Ленинградский санитарно-гигиенический медицинский институт (72) А.Г.Шлейкин, В.В.Нечаев, Г.И.Васильева, М.А.Портяной и Н,С.Шляхецкий (56) Куликов В.Ю., Ким Л.Б., Кислородный режим при адаптации человека на крайнем

Севере, Новосибирск, 1987 г. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕЗАДАПТАЦИИ НАСЕЛЕНИЯ К УСЛОВИЯМ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Изобретение относится к биохимическим способам определения дезадаптации.

Известен способ определения дезадаптации путем выявления атрофических изменений клеточных структур. Однако данный способ является недостаточно чувствительным, так как выявляемые им изменения характерны для физиологических и патологических процессов, Известен способ определения неспецифической резистентности организма к действию экстремальных факторов внешней среды путем измерения теолдисульфидного отношения в клетках крови. Однако наличие возрастных и суточных колебаний определяемого данным способом показателя, зависимость тиолдисульфидного отношения от гелиофизических и сезонных факторов в физиологических условиях, а также прямое влияние на его величину ряда химических веществ не позволяют использовать данный

„„. Ж „„1763487 А1 (эй)э С 12 и 9/02, G 01 N 33/68 (57) Способ определения дезадаптации населения к условиям окружающей среды. Использование: биохимические способы оценки состояния адаптации, Целью является повышение чувствительности способа, Сущность изобретения: измеряют активность глутатионредуктазы (ГР) и супероксидисмутазы (СОД) крови в динамике и по снижению СОД с одновременным увеличением ГР относительно контроля определяют дезадаптацию. 1 табл. тест для определения дезадаптации населения.

Известен способ определения дезадаптации путем измерения конечного продукта перекисного окисления легнидов — малонового диальдегида (МДА) в плазме крови. Однако в способе-прототипе отсутствует корреляция между содержанием МДА в крови и заболеваемостью, что снижает его чувствительностьь.

Цель изобретения — повышение чувствительности способа, Цель достигается тем, что определяют активность глутатиогредуктазы (ГР) и супероксидаисмутазы (СОД) крови и по увеличению ГР одновременно со снижением СОД по сравнению с исходным периодом определяют дезадаптацию.

Способ осуществляется следующим образом.

Забор крови производится у практически здоровых лиц в то же время суток для исключения суточных изменений показате1763487 лей. Кровь получают путем укола мякоти пальца копьем-скарификатором одноразового пользования. Отбирают 0,05 мл крови в пробирку, содержащую 0,95 мл 0,1%-ного раствора трилона Б (рн 7,0) и выдерживают в течение 30 мин при+5 и 7 С, после чего гемолизат используют для определения ГР и СОД.

1. Определение активности глутатионредуктазы (4).

Реактивы: 1. Буферный раствор трисHCI 1 М, трилон Б 5 мм, рН 8,0

2. Глутатион окисленный 0,033 М, рН 7,0

3, НАДФ.Н 2 мМ.

Ход определения.

B пробирку вносят 0,15 мл буферного раствора,, 0,2 мл гемолиэата, 2,2 мл HzO u

0,3 мл окисленного глутатиона. Смесь инкубируют в течение 10 мин при 37 С, затем добавляют 0,15 мл НАД,Ф,Н и измеряют на спектрофотометре оптическую плотность проб при 340 нм, После этого пробы выдерживают точно 30 мин при 37 С и повторно измеряют оптическую плотность при той же длине волны.

Расчет: А ммоль Д 3 л.сек где 3 —; 1800 — время в с;

6,22 — коэффициент малярного светопоглощения; 0,2 — обьем гемолизата в мл.

2. Определение активности супероксиддисмутазы (5)

Реактивы; 1. Буферный раствор К-фосфатный 5 мМ, 10 мкМ трилон Б, рН 7,8.

2. Буферный раствор глининовый 0,1 М, 0,3 мМ трилон Б, рН 10,4.

3. Раствор адреналина 0,041; -ный, готовится за 1 ч до определения и подкисляется HCI (1:2) до рН 2,5.

Смесь этанола и хлороформа (2,5:1,5).

Ход определения, 0,2 мл гемолизата и 0,2 мл охлажденной смеси этанол-хлороформ вносят в пробирку с предварительно замороженным К-фосфатным буферным раствором (0,3 мл) и

-:-.-- встряхивают в течение 15 мин, Осадок отделяют центрифугированием при 8000 об/мин в течение 15 мин, В стеклянную пробирку вносят 1,5 мл глицинового буферного раствора 0,5 мл Кфосфатного буферного раствора, 0,4 мл адреналина и 0,1 мл надосадочной жидкости, после чего измеряют изменение оптической плотности при 480 нм на СФ-26 в течение 3 мин. Контрольная проба содержит все ингредиенты, кроме надосадочной жидкости, вместо нее добавляют 0,1 мл НгО.

g — Ай2::.Д

Д контр, Ед

A(мл) = х 700, где о где Т% — торможение окисления адреналина в ; А — активность СОД в условиях единицах; 700 — разведение крови.

3. Статистическая обработка результатов исследования проводилась с помощью

Т-критерия Стюдента (6).

Способ поясняется примером.

Пример. Кровь брали у практически здоровых женщин в возрасте 18-48 лет от 9 до 10 часов утра согласно описанию (см. выше) и рассчитывали средние величины и средние квадратичные отклонения (М + m).

Приведенные в таблице данные показывают, что предлагаемым способом состояние дезадаптации определяется в примерах

М 4 и 5. Подтверждением этому служит увеличение бронхолегочной заболеваемости у обследуемого населения более чем в 4 раза в периоды времени, соответствующие примерам 4 и 5 по сравнению с исходным уровнем, В таблице приведены также результаты определения МДА в плазме крови у тех же обследуемых по способу-прототипу. Из них следует, что содержание МДА в период, предшествующий подъему заболеваемости (пример 3), и во время повышенной заболеваемости населения (примеры 4 и 5) достоверно не отличалось от исходного уровня, Таким образом, по сравнению с прототипом предлагаемый способ является более чувствительным для определения дезадаптации к условиям окружающей среды.

Приведенные примеры подтверждают полезность предлагаемого способа для определения дезадаптации населения.

Способ может применяться при проведении экологических исследований, например в условиях промышленного региона, насыщенного предприятиями разного профиля, которые загрязняют окружающую среду. Способ не требует дорогостоящей аппаратуры и дефицитных реактивов и может быть освоен и внедрен в учреждениях здравоохранения.

Использование предлагаемого способа определения дезадаптации дает возможность своевременно выявлять изменения в группах риска и проводить соответствующие профилактические мероприятия для предупреждения массовой заболеваемости.

Формула изобретения

Способ определения дезадаптации населения к условиям окружающей среды пу1763487

Составитель А, Агуреев

Техред М.Моргентал Корректор Л. Ливринц

Редактор Н. Козлова

Заказ 3430 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 тем биохимическго исследования крови, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, дополнительно определяют активность глутатионредуктазы и супероксиддисмутазы и при повышении активности глутатионредуктазы с одновременным снижением супероксиддисмутазы относительно KQHTpoëÿ определяют дезадаптацию.