Способ количественного определения фурагина

 

Использование: в аналитической химии при проведении фармакокинетических, химико-токсикологических и судебно-химических исследований. Сущность изобретения: пробу, содержащую фурагин, обрабатывают серной кислотой и водным раствором флороглюцина с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора при длине волны 481 нм. 6 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 К 21/78

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4875806/25 (22) 22.10.90 (46) 07.01.93. Бюл. № 1 (71) Курский государствен ный медицинский институт (72) А,С. Квач, О,О. Новиков и И.П. Павлик (56) Куринна Н.В. Спектрофотометрическое определение лекарственных препаратов на основе производных 5-нитрофурана. Фармацевтический журнал, 1973, №6, с,15 — 18.

Авторское свидетельство СССР ¹ 1695192, кл, G 01 N 21/78. 1989.

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для количественного определения фурагина как в чистом виде, так и в лекарственных формах.

Известен способ количественного определения лекарственных препаратов. В нем цель достигается обработкой анализируемой пробы 50%-ным раствором серной кислоты, Оптическую плотность окрашенного продукта измеряют при длине волныА=227 нм. Однако при анализе фурагина этим методом в чистом виде и в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: большой расход реактива, невысокая точность и чувствительность определения.

Наиболее близким техническим решением к изобретению является способ количественного определения гидантоина и его производных, где к раствору фурагина, приготовленного на концентрированной серной кислоте, прибавляют цветореагент, в качестве которого используют 0,2%-ный раствор хромотроповой кислоты, также при. Ы, 1786405 А1 (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУРАГИНА (57) Использование: в аналитической химии при проведении фармакокинетических, химико-токсикологических и судебно-химических исследований. Сущность изобретения: пробу, содержащую фурагин, обрабатывают серной кислотой и водным раствором флороглюцина с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора при длине волны 481 нм. 6 табл, готовленный на концентрированной серной кислоте. Полученную смесь нагревают на масляной бане при температуре 170 С в течение 4 мин. Оптическую плотность полученного раствора измеряют при длине волныА=540 нм. Однако при анализе фурагина этим методам в чистом виде и в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: трудоемкость процесса, необходимость нагревания до температуры

170 С и низкая чувствительность (см. таблицу сравнительных характеристик методом №1).

1(р

Целью изобретения является повыше1

1 ние чувствительности определения фураги- Дь на в чистом виде, в лекарственных формах.

Цель достигается тем, что проба. содержащая фурагин, обрабатывается химическим реагентом с последующим фотометрированием полученного окрашенного раствора. В качестве химического реагента используют водный раствор флороглюцина с обработкой пробы, содержащей фурагин, концент1786405 рированной серной кислотой. В качестве раствора сравнения используют раствор

"холостого опыта".

Сопоставительный анализ заявленного решения с прототипом показывает, что заявляемый способ отличается от известного тем, что с целью повышения чувствительности определения обработку продукта, содержащего фурагин, ведут вначале концентрированной серной кислотой, а затем водным раствором флороглюцина в следующем соотношении анализируемой пробы, кислоты, цветореагента 1,0;3,9:0,1 соответс1венно. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в диапазоне длин волн А = 470 †4 нм, Таким образом, заявленный способ соответствует критерию "ноВизна", Сравнение заявляемого решения с прототипом и с другими техническими решениями в данной области химии позволило выявить в них признаки, отличающие данное решение от прототипа (см, табл, %1), что

D = kx + Ь, 30

40 где Π— оптическая плотность;

k — коэффициент пропорциональности, который равен тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс;

x — содержание препарата в анализируемой пробе (мкг);

Ь вЂ” константа, указывающая, в каком месте прямая пересекает ось ординат.

С учетом рассчитанных параметров k u

b уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для фотоэлектроколориметрическог0 определения фурагина, имеет вид

D = 0,02х + 0,01.

2. Фотоколориметрическое определение фурагина в порошке.

Точную навеску анализируемого порошка фурагина (около 0,01 r) количественно переносят в мерную колбу на 250 мл, растворяют при нагревании s дистиллированной воде, охлаждают и общий объем раствора в мерной колбе доводят до метки дистиллированной водой, После тщательного перемешивания определенный объем полученного раствора вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 0,5 мл дисприменение которых обеспечивает перевод фурагина в окрашенные растворы, соответствующие значения молярного и удельного коэффициентов светопоглощения приведены в табл. Nò б, Для фурагина оптимальным фенолом является флороглюцин.

Пример 1. Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина на основе его реакции с флороглюцином, 1. Построение калибровочного графика.

В мерные колбы íà 25 0 мл вносят 1; 2;

2,5; 4; 5 мл стандартного раствора фурагина, тиллированной водой, прибавляют 19,5 мл содержащего 8,0 мкг фурагина в 1 мл, дово- концентрированной серной кислоты и дят объемы до 5 мл дистиллированной во- 0,5 мл 170-ного водного раствора флорогпозволяет сделать вывод о его соответствии критерию "существенное отличие".

Данное техническое решение предлагает использование нового реагента водного раствора флороглюцина. Оптимальные условия количественного определения описаны ниже, соответствующие удельные и молярные коэффициенты светопоглощения приведены s тTа б5л, N 1.

Химизм реакции количественного определения фурагина предположительно основан на образовании красителей Стенгауза.

Целый ряд работ указывают, что в среде

30 0-ной серной кислоты при нагревании происходит раскрытие фуранового кольца, которое входит в состав фурагина, с образованием продуктов распада, содержащих альдегидные группы, которые определяются после добавления фенолов с образованием окрашенных растворов, Условия количественного определения фурагина с рядом производных фенола, 5

25 дой, прибавляют по 19,5 мл концентрированной серной кислоты, по 0,5 мл 1 Д-ного водного раствора флороглюцина, -.ùàòåëüно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК вЂ” 2 при 4ф4,. = 490 4- 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.

Зависимость светопоглощения полученных растворов, окрашенных от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, представлена в табл.2. Светопогло цение окрашенных растворов подчиняется закону Бугерэ-Ламберта-Бера в пределах концентраций от 8 до 40 мкг фурагина в 25 мл фотометрируемого раствора.

Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, использованы для расчета уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий вид

1786405

D = 0,0048х -- 0,0056, люцина, перемешивают, охлаждают и через

20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК вЂ” 2 при светофильтре кафф, = 490 + 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм, В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.

Расчет содержания фурагина в пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного фотоэлектроколориметрического определения порошка фурагина, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.4. Из данных табл,4 следует, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в порошке с относительной ошибкой А =- + 2,09 „.

3. Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина в таблетках по 0,05 г.

Точную навеску порошка 10-ти тщательно растертых таблеток фурагина (около 0,01 r) растворяют при нагревании в дистиллированной воде в мерной колбе на

250 мл, охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр "синяя полоса", отбрасывая первый 20 мл фильтрата, Определенный объем фильтрата вносят в мерную колбу на

25 мл, доводят его до 5 мл дистиллированной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты, 0,5 мл 1 -ного раствора водного флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре Лэ ф, = 490 +. 10 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 50 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор

"холостого" опыта.

Расчет содержания фурагина в пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Резул ьтаты кол ичествен ного фотоэлектроколориметрического определения фурагина в таблетках по 0,05 г, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.5, Из данных табл.5 следует, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в таблет25

55 ках по 0,05 г с относительной ошибкой А =

= +.2,51 .

Пример 2. Спектрофотометрическое определение фурагина на основе его реакции с флороглюцином.

1, Построение калибровочного графика.

B мерные колбы на 25 мл вносят 1; 2;

2,5; 4; 5 мл стандартчого раствора фурагина, содержащего 40 мкг фурагина в 1 мл, доводят объемы до 5 мл дистиллированной водой, добавляют по 19,5 мл концентрированной серной кислоты, по 5 мл 1 -ного водного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СФ-46 при A, = 481 нм в кювете с тогщиной рабочего слоя 10 мм, В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.

Зависимость светопоглощения полученных окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, представлена в табл. 3, Светопог,îùåíèå окрашенных растворов подчиняется закону Byrepa-Ламберта-Бера в пределах концентраций от 40 до 200 мкг фурагина в

25 мл конечного фотометрического раствора, Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества взятого на выполнение реакции фурагина использованы для расчета параметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика. Оно имеет вид

Данные, полученные при построении калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина, использованы для расчета удельного Е1Д., и моля рного я)," коэффициентов светопоглощения определяемого раствора, образующегося при взаимодействии фурагина с флороглюцином (см, табл.1), 2. Спектрофотометрическое определение фурагина в порошке.

Точную навеску анализируемого порошка фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на 25 мл, растворяют при нагревании в дистиллированной воде, охлаждают и общий объем раствора в мерной колбе доводят до метки водой. После тщательного перемешивания определенный объем полученного раствора вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистиллированной водой, прибавля1786405

Таблица 1

Сравнительная характеристика методов количественного определения фурагина ют 19,5 мл концентрированной серной кислоты и 0,5 мл 1 /-ного раствора флороглюцина, тщательно перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую

IlRoTHoctb полученного окрашенного рас- 5 твора с помощью спектрофотометра СФ-46 при А= 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта, Расчет содержит фурагина в пробах про- 10 изводят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного спектро- 15 фотометрического определения порошка фурагина, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.4, Из данных табл,4 следует, что с помощью данного способа можно определять 20 содержание фурагина в порошке с относительной ошибкой А = +,56 $.

3. Спектрофотометрическое определение фурагина в таблетках по 0,05 r.

Точную навеску порошка 10-ти тщательно растертых таблеток фурагина (около 0,01 г) растворяют при нагревании в воде в мерной колбе на 250 мл, охлаждают и доводят до метки дистиллированной водой, тща- 30 тельно перемешивают, Полученный раствор фильтруют через фильтр "синяя полоса", отбрасывая первые 20 мл фильтрата, Определенный объем фильтрата вносят в мерную колбу на 25 мл, доводят его до 5 мл дистил- 35 лированной водой, прибавляют 19,5 мл концентрированной серной кислоты, 0,5 мл

1 ь-ного водного раствора флороглюцина, перемешивают, охлаждают и через 20 мин измеряют оптическую плотность получен- 40 ного окрашенного раствора с помощью спектрофотометра СФ-46 при 3. = 481 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор "холостого" опыта.

Расчет содержания фурагин;.: пробах производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного спектрофотометрического определения фурагина в таблетках по 0,05 г, рассчитанные по уравнению калибровочного графика, представлены в табл.5, Их данных табл.5 следует, что с помощью данного способа можно определять содержание фурагина в таблетках по

0,05 г с относительной ошибкой А = + 1,86 jo.

Результаты количественного определения фурагина представлены в табл.1 — 6. Данные табл,1 — 6 позволяют сделать вывод о том, что представленный способ целесообразно использовать для количественного определения фурагина в чистом виде в лекарственных формах.

Предлагаемый способ по сравнению с прототипом повышает чувствительность и точность определения. Сравнительные характеристики предлагаемого и известного способов приведены в табл.1, Формула изобретения

Способ количественного определения фурагина, включающий обработку анализируемой пробы концентрированной серной кислотой, добавление цветореагента и измерение оптической плотности окрашенного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения, в качестве цветореагента добавляют 1 -ный водный раствор флороглюцина при следующем соотношении анализируемой пробы, кислоты, цветореагента 1,0: 3,9:

; 0,1 соответственно, а оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в диапазоне длин волн А =- 490 "- 10 нм, 10

1786405

n=5 Х= 116

5 68,04 — 116 2,37

5 344 — (116 ) X=2 37

Х= 68,04 Х = 3344

В 3344 2 37 116 68 04

5 3344 — (116 )

Таблица 3

Зависимость оптической плотности окрашенного раствора от количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина.

Х= 580

Х= 2,752

Х = 397,46

Х = 83600 п=5

5 397,46 — 580 2,752 0 0 4

5 83600 — (580 )

 — 83600 2,752 — 580 397,46 0 0056

5 83600 — (580 ) Таблица 4

Результаты определения фурагина в порошке

Таблица 2

Зависимость оптической плотности окрашенного раствора от количества фурагина, взятого на выполнение реакции, и расчет параметров k и Ь уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина.

Продолжение табл, 4

Продолжение табл, 4 Г П ри бор

КФК вЂ” 2

СФ вЂ” 46

Таблица 5

Результаты определения фурагина в таблетках по 0,05 г

1786405

Продолжение табл. 5

¹ пlп

Прибор

250

2,5

250

2,0

250

3,0

250

2,0

250

2,0

Продолжение табл, 5

Навеска порошка истертых таблеток фурагина, взятого на анализ r

0,019165

0,029050

0,016040

0,026685

0,025550

Теоретическое содержание фурагина в ней (мкг) 10126,3

15349,2

8475,0

14100.0

13500,0

Объем раствора, полученного из навески порошка истертых таблеток фурагина, взятого на анализ мл

Объем раствора, взятого на выполнение реакции мл

Теоретическое содержание фурагина в пробе, взятой на анализ мкг

101,500

123,200

101,700

112,800

108,000

1786405

Таблица 6

Сравнительная характеристика способов количественного анализа фурагина на основе его взаимодействия с производными фенола

N и/и

Применяемый фенол

Длина волны на

СФ вЂ” 46 (н м) Условия проведения анализа резорцин

506

1018,01 26896,91 пирогаллол "А"

1128,14 29806,59

430 пирокатехин

1

14507,80

549,10

459 флороглю- К 5 мл пробы прибавляют 19,5 мл цин концентрированной серной кислоты и 0,5 мл 1 -ного водного раствора флороглюцина охлажК 4,5 мл пробы прибавляют 0,5 мл

10 7, -ного водно го раствора резорцина и 20 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и измеряют оптическую плотность против контроля.

К 5 мл пробы прибавляют 4 мл

0,27;-ного водного раствора пирогаллола "А" и 11 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают и доводят общий обьем до 25 мл водой, измеряют оптическую плотность против контроля.

К 5 мл пробы прибавляют 2 мл

5 /-ного водного раствора пирокатехина и 18 мл концентрированной серной кислоты, охлаждают, фотометрируют по контролю.

Удельный коэффициент светопоглощения

Молярный коэффициент светопоглощения