Способ количественного определения аскорбиновой кислоты
Использование: аналитическая химия. Сущность изобретения: пробу обрабатывают водным раствором нитротетразолиевого синего в присутствии щелочи, полученное соединение экстрагируют хлороформом с последующим фотометрированием экстрак та.3 табл.
СО4Х3 !:ОРР ГСКИХ
<-ОЦИ А 4 ИС1ИЧЕ СКИХ
РE<.fl /I ЛИК
ГОСУДАРСт ВЕнь4ОЕ Г4АТЕ F4TI IOE ВЕДОМСТВО СССР (ГОСFIA T E I IT СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4841564/04 (22) 12.07.90 (46) 30.11.92, Бюл, ¹ 44 (71) Ярославский государственный медицинский институт (72) А,X. Лайпанов. А.Н. Белозеров и Е.В, Серегина (56) Государственная фармакопея СССР, X изд. M. Медицина, 1968, с.43-44. Дейл 3., Мацек К. и Янака S. Жидкостная колоночная хроматография, М.: Мир, 1978, т,3, с.119 -200. Патент ФРГ N 971120, кл, G 01 N 21/78, 1984. Изобретение относится к анализу органических соединений, а именно к способам определения аскорбиновой кислоты (витамина С), и может быть использовано в контроле качества продукции, выпускаемой фармацевтическими производствами и изготавливаемой в аптеках. 4Известен способ определения аскорбиновой кислоты, заключающийся в обработке пробы раствором иодида калия в кислой среде с последующим титрованием раствором иодата калия. Недостатками данного, способа является малая селективность, визуальность определения точки эквивалентности при помощи индикатора — крахмала. Известен также способ —. хроматографического определения аскорбиновой кислоты. его недостатками являются длигельность и невысокая точность определения, Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ определения аскорбиновой кислоты, основанный на взаимодействии с реагентом „„50„„1778645 Al (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОГ1РЕДЕЛЕНИЯ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ (57) Использование: аналитическая химия. Сущность изобретения: пробу обрабатывают водным раствором нитротетразолиевого синего в присутствии щелочи, полученное соединение экстрагируют хлороформом с последующим фотометрированием экстракта. 3 табл. — 3-(4,5-диметилтиаэолил-2)-2,5-дифенилтетразол бромидом в присутствии фосфатно-цитратного буфера, а также использованием феназинметасульфата в качестве вещества. ускоряющего реакцию и полиэтиленгликолевого эфира октилфенола в качестве детергента, Недостатками данного способа являются его достаточная сложность и многостадийность, использование большого числа реактивов, длительность проведения анализа. Целью изобретения является упрощение способа и сокращение его длительности. Поставленная цель достигается тем, что в известном способе определения аскорбиновой кислоты, заключающемся в обработке пробы цветореагентом и фотометрированием раствора, обработку пробы проводят цветореагентом — водным раствором нитротетразолиевого синего в присутствии щелочи. полученное окрашен177Р645 ное соединение экстр, сируют хлороформом и фотометрированию подвергаю; экстракт. Достоинствами данного способа являются быстрота (одно определение занимает 7-10 мин), простота выполнения (число реактивов снижается с 4 до 2), селективность (экстракция позволяет определять аскорбиновую кислоту в присутствии других веществ, не обладающих окислительно-восстановительными свойствами), Проведенные предварительные исследования показали, что максимум светопоглощения продукта оеакции находится при длине волны 540 нм. Подчинение интенсивности окраски объединенному закону Бугера-Ламберта-Бера находится в интервале концентрации от 0.1 до 0,5 мг/мл, Изучение зависимости оптической плотности от времени показало, что стабильность окраски сохраняется в течение 1 ч. Пример 1. Определение аскорбиновой кислоты в субстанции. Точную навеску аскорбиновой кислоты (около 0,05 г) помещают в мерную колбу на 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят водой до метки. В делительную воронку помещают 2 мл 0,1 н, раствора едкого натра. 1 мл 0.1 -ного раствора нитротетразолиевого синего и 0,5 мл исследуемого раствора. Проводят экстракцию продукта реакции 3 порциями хлороформа (10,5.5 мл) в мерную колбу на 25 мл и доводят до метки хлороформом. Измеряют оптическую плотность экстракта на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при длине волны 540 нм, в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мл. В качестве раствора сравнения используют хлороформное извлечение (слепого) опыта. По результатам измерения оптической плотности исследуемого раствора и стандарта. содержащего известное количество аскорбиновой кислоты. рассчитывают количество последней в анализируемой пробе. В табл.1 приводятся данные 10 опытов по определению аскорбиновой кислоты в субстанции. Пример 2. Определение аскорбиновой кислоты в таблетках по 0.05 r. Одна таблетка содержит аскорбиновой кислоты 0,05 г, вспомогательных веществ до получения таблетки массой 0,2 r. Методика. Навеску хорошо измельченных таблеток (около 0,1) растворяют в дис5 55 тиллированной воде и фильтруют через складчатый фильтр в мерную колбу на 100 мл, доводят водой до метки. В делительную воронку помещают 2 мл 0,1 н. раствора едкого натра, 2 мл 0,1 раствора нитротетразолиевого синего и 1 мл исследуемого раствора препарата. Экстрагируют полученное окрашенное соединение 3 порциями хлороформа (10,5,5 мл) в мерную колбу на 25 мл, доводят до метки хлороформом. Полученный раствор подвергают фотометрированию так, как это было указано при определении субстанции и рассчитывают содержание аскорбиновой кислоты в перечете на среднюю массу 1 таблетки. Данные 5 определений аскорбиновой кислоты в таблетках представлены в табл.2, Пример 3, Определение аскорбиновой кислоты в 5 раствора для инъекций. Состав раствора для инъекций: аскорбиновой кислоты 50 г, натрия гидрокарбоната 23.85 г, натрия метабисульфата 1 г, воды для инъекций до 1 л. Методика. В делительную воронку помещают 2 мл О," н, раствора едкого натра, 1 мл 0,1 раствора нитротетразолиевого синего и 0,5 мл инъекционного раствора. Экстрагируют 3 порциями хлороформа (10,5,5 мл). как это указано в примерах 1 и 2. Рассчитывают содержание аскорбиновой кислоты в инъекционном растворе. Данные 5 опытов представлены в табл.3. Предлагаемый способ количественного определения аскорбиновой кислоты характеризуется простатой исполнения, экспрессностью. Он позволяет определять аскорбиновую кислоту в присутствии других веществ, не обладающих окислительно-восстановительными свойствами. Способ может быть рекомендован к применению в практике контрольно-аналитических лабораторий, фармацевтических производств и аптек. Формула изобретения Способ количественного определения аскорбиновой кислоты путем обработки пробы цветореагентом и фотометрирования раствора, отличающийся тем, что. с целью упрощения способа и сокращения его длительности, в качестве цветореагента используют водный раствор нитротетразолиевого синего, обработку ведут в присутствии щелочи, полученное соединение экстрагируют хлороформом и фотометрированию подвергают экстракт. Таблица 1 Таблvöà 2 Таблица 3
