Способ оценки иммунного статуса каракульских овец

 

Изобретение позволяет определить состояние иммунной системы новорожденных животных и тем самым проводить раннюю выбраковку нежизнеспособных больных животных . Цель изобретения - повышение точности и достоверности способа. Сравнивают активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей до и после введения внутрибрюшинно эритроцитов тестируемых животных. Через 1 сут после иммунизации из капли крови мьи шей готовят мазки. Если иммунный статус животного низкий, то средний цитохимический коэффициент активности миелопероксидазы уменьшается на 0,5-0,72 единицы. При высоком иммунном статусе животного активность фермента иммунизированной мыши уменьшается на 0,8-1,08 единиц, СПК. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ социАлистических

РЕСПУБЛИК (51)5 А 01 К 67/02

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4916054/15 (22) 04,03.91 (46) 07.05.93. Бюл. М 17 (71) Самаркандский государственный университет им. А.Навои (72) М.Д.Балаянц, С,А.Плескановская, Б.А.Аббасова и М.А.Риш (56) Меркурьева P.В. и др. Биохимические и цитохимические методы определения активности ферментов и фермент-субстратных систем различной клеточной покализации, Йошкар-Ола, 1986, с. 43.

Фримель Х., Брок И. Основы иммуноло. гии / Под ред. А.Н.Маца. М,; Мир, 1986, с.

138-139. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ИММУННОГО СТАТУСА КАРАКУЛЬСКИХ ОВЕЦ

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для определения слабых и нежизнеспособных животных по неспецифической резистентности поголовья крупного и мелкого рогатого скота.

Целью изобретения является повышение точности и достоверности оценки иммунного статуса животных, Цель достигается тем, что в качестве биохимического показателя используют активность миелопероксидазы мышей, определяемую до и после иммунизации эритроцитами исследуемых животных, и по уменьшению через 1 сут активности фермента на 0,50-0,72 единиц среднего цитохимического коэффициента судят о низком уровне, а по уменьшению на

0,8-1,08 — о высоком иммунном статусе животного.. Ж 1813388 А1 (57) Изобретение позволяет определить состояние иммунной системы новорожденных животных и тем самым проводить раннюю выбраковку нежизнеспособных больных животных. Цель изобретения — повышение точности и достоверности способа. Сравнивают активность миелопероксидаэы нейтрофилов мышей до и после введения внутрибрюшинно эритроцитов тестируемых животных. Через 1 сут после иммунизации из капли крови мышей готовят мазки. Если иммунный статус животного низкий, то средний цитохимический коэффициент активности миелопероксидазы уменьшается на 0,5-0,72 единицы. При высоком иммунном статусе животного активность фермента иммунизированной мыши уменьшается на 0,8-1,08 единиц, СПК. 1 табл.

Широко известно цитохимическое выявление активности миелопероксидазы в а нейтрофилах периферической крови челове- фр ка и млекопитающих, 6ВВЮЙ

Изобретение обладает новизной и существенными отличиями по сравнению с известной цитохимической реакцией определения миелопероксидазы в нейтрофилах перифери- Ж ческой крови человека и млекопитающих, 00 согласно которой проводят дифференцировку клеток миелоидного ряда в костном :мотыге;:;ф лых нейтрофилов и эозинофилов в крови, в:связи с чем используют при диагностике лейкозов, в то время как предлагаемый споСоб позволяет судить о состоянии иммунной системы тестируемых животных.

Реакция проводится на мазках периферической крови, приготовленных на предметных стеклах и фиксированных в течение

15.с в смеси спирт-формалин (9;1). Мазки

1813388 сидазы. Полученные данные приведены в таблице.

Как видно из этих данных, из 25 текстируемых животных, находящихся под наблюдением в течение 1 5 лет, пали 9 животных от пневмонии и хронического тимпанита, являющегося признаком альбиноидизма.

Павшие животные в 1-4-дневном возрасте согласно предлагаемому способу оценки

10 обладали низким иммунным статусом, т.е. активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами этих 9 животных, уменьшилась только на 0,5-0,72 единицы СЦК, Активность миело15 пероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами остальных 16 животных, уменьшилась на 0,8-1,08 единиц

СЦК. Все они остались живы, что говорит о достаточно высоком их иммунном статусе.

20 Таким образом, изобретение по сравнению с прототипом отличается высокой точностью определения, относительно просто, а самое главное позволяет прогнозировать течение и исход многих заболеваний, бакте25 риальных инфекций, протекающих на фоне низкого иммунного статуса, Формула изобретения

Способ оценки иммунного статуса кара30 кульских овец, включающий определение биохимического показателя, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности и достоверности способа, в качестве биохимического показателя используют

35 активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, определяемую до и после иммунизации эритроцитами исследуемых животных, и, по уменьшению через сутки активности фер-. мента на 0,50-0,72 единиц среднего цитохи40 мического коэффициента судят о низком уровне, а по уменьшению на 0,8-1,08 — о высоком иммунном статусе животного.

Активность миелопероксидазы в нейтрофилах мышей, единицы

С К

Животное через 1 сут после имм низа ии до иммунизаии

1-3 нев ные ягнята

1,0

1,04

1,02

1,06

1,06

1,10

1,06

1,0

1,04

0,9 .

0,96

1,08

1,04

0,84

0,8

0,96 1,0

0,86

Черный

1,9

2, 0

2,1

2,1

1,9

1,9

2,0

2,0

1,9

Жив

Серый промывают и инкубируют в течение 15-20 мин в среде следующего состава; 200 мг бензидина, 6 мл 96 -ного этилового спирта, 4 мл дистиллированной воды, 1-2 капли

З -ной перекиси водорода.

Реактив годен к употреблению в течение 10-12 сут.

После промывки проточной водой мазки окрашивают азур-эозином по Романовскому-Гимза 10 мин и микроскопируют с масляной иммерсией. Активность фермента вычисляют полуколичественным методом по KapIow и выражают средним цитохимическим коэффициентом (СЦК), Предлагаемый способ заключается в следующем.

Мышам вводят внутрибрюшинно суспензию эритроцитов {2 клеток Ilo гематокриту в 0,9 -ном растворе NaCI) тестируемых животных, Через день из капли крови мышей готовят мазки .и проводят цитохимическое выявление активности миелопероксидазы.

До введения антигена и начала выработки антител СЦК активности мреолопероксидаэы у мышей составлял 2,1 +. 0,9 единиц. После иммунизации через 1 сут наблюдается снижение активности фермента, При этом, чем выше иммунный статус животного, тем ниже падает активность миелопероксидазы нейтрофилов мышей, иммунизированных эритроцитами тестируемых животных, чем меньше падает активность, тем ниже иммунный статус организма животного. Более детально это видно на следующем примере, Пример. От 25 животных (в данном случае каракульские овцы) была взята кровь. Эритроциты отделили от плзмы и развели 0,9 g -ным NaCI до 2 -ной концентрации по гематокриту. По 0,5 мл таких суспензий были введены внутрибрюшинно 25 мышам, На мазках крови мышей через 1 сут цитохимически выявлена активность миелоперокСостояние животного через

1,5 года после тестирования

1В13388

Продолжение таблицы

Состоя ни тного че года пос тира ва

Активность миелопероксидэзы в нейтрофилах мышей, единицы

Животное до иммун ции

Серый

Летние овцематки, чер

2,0

2,1

Серая 2,1

2,1.Жи

0,9

0,97

0,96

0,98

Статистическая об аботка данных, М+м

0,9 0,08

0,94+0,07

2,0 0,18

1,99 0,12

1,06 0,09

1 02й0 09

Черные ягнята

Серыс ягнята

Ягнята павшие от пневмонии

Альбиноиды

1,36"-0,04

1,44+0,03

0,69 +.0,02

0 58+0,04

2,15 0,1

2,0+0,06

Примечание, К вЂ” разница СЦК активностей миелоперкосидазы мышей до и через 1 сут после иммунизации.

Составитель M. Балаянц

Техред M,Ìîðãåíòàë Корректор Л. Ливринц

Редактор А,Хорина

Заказ 1792 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

В1

Альбиноид

Альбиноид

Альбиноид

Альбиноид

Альбиноид

Альбиноид

Альбиноид

1,98

2,01

2,0

2,1

1,9

2,0

2,1

1,98

1,98

2,0

2,1

1,96

0,88

0,67

О;96

0,72

0,84

0,60

0,66

0,54

0,50

0,60

0,70

0,56

Жи

Пал от и нии

Жи

Пал от п нии

Жи

Пал

Пал