Патент ссср 205017

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2050I7

Союе Соеетские

Социалиотичеокил

Реопуйлие

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 04.VI 11.1964 (№ 916 376/23-26) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 08.II.1973. Бюллетень № 10

Дата опубликования описания 18.ГЧ.1973

Л!. Кл. С 07с 99/02

Комитет по делам изооретений и открытий при Соеете Миниотрое

CGQP

УДК 547.466:66.087 (088.8) Авторы изобретения

А. И. Рязанов, 3. В. Гольцева, Л. Г. Андронова, В. Г. Брудзь, П. В. Селиверстов, Л. М. Буторина, P. T. Хлебородова, Н. 3. Варшавская, Г. Д. Петренко, Г. И. Антюфеева и Е. П. Крысин

Всесоюзный научно-исследовательский институт химических реактивов и особо чистых химических веществ

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ ИЗ БЕЛКОВОГО СЫРЬЯ

Известный способ получения аминокислот из белкового сырья состоит в том, что сырье гидролизуют, отделяют глутаминовую кислоту, а затем и другие кислоты известными химическими методами. Однако получаемые при этом способе аминокислоты имеют низкую степень чистоты.

Предлагаемый способ позволяет получать аминокислоты с высокой степенью чистоты, полнее использовать сырье, он более прост по сравнению с известными и, кроме того, дает возможность разделять любой гидролизат.

С целью повышения степени чистоты продукта предлагается белковое сырье, например гидролизат желатины, подвергать электродиализу в каскаде многокамерных электродиализаторов с ионообменными диафрагмами при рН 6 вЂ, и полученные при этом фракции аминокислот обрабатывать органическими кислотами с последующим электродиализом образовавшихся солей.

Согласно предлагаемому способу в первую очередь гидролизат разделяют на фракции (кислые в смеси с основными и нейтральные), а затем фракции — на отдельные аминокислоты.

На фиг. 1 дана схема разделения гидролизата на аминокислотные фракции; на фиг.2— схема разделения и концентрации кислых и основных аминокислот.

В бокс 1 заливают гидролизат желатины (рН 6 — 7) или другого белкового сырья, а в боксы II u III — дистиллированную воду.

При помощи насосов 1 — 8 осуществляют циркуляцию гидролизата через электродиализатор Эл, дистиллированной воды из бокса II через электродиализаторы Эл2 и Эл, и дистиллированной воды из бокса III черезэлектродиализаторы Эла и Эл2, Таким образом, в схеме взаимосвязаны все рабочие электродиализаторы, благодаря чему возможны учет рН изоэлектрических точек кислых, нейтральных и основных аминокислот и характера диффузионного переноса различных аминокислот через катионо(МК-40) и анионообменные (MA-40) мембраны, а также разделение гидролизата на три аминокислотные фракции.

Нейтральная фракция аминокислот, содержащая пролин, оксипролин, глицин, а-алании, лейцин, валин и др., концентрируется в боксах 1 — 111. Предкатодные и преданодные камеры электродиализатора Элз являются концентрирующими по отношению к кислым,и основным аминокислотам.

Для разделения смеси основных и кислых аминокислот этот электродиализатор связывают с дополнительным пятикамерным электродиализатором Эл4, снабженным насосом 4.

30 Применение запорных мембран в этом диали205017

50 заторе позволяет получать чистую фракцию основных аминокислот в предкатодной егокамере и чистую фракцию кислых аминокислот в преданодной.

Основная фракция аминокислот содержит аргинин,и лизин, кислая — глутаминовую и аспарагиновую кислоты. Производительность установки 100 л(сутки гидролизата, разделенного на фракции при 25 электродиализуемых камерах, напряжении 200 в на электродиализаторах и рабочем токе 12 а через каждый электродиализатор.

Из основной фракции, содержащей аргинин и лизин, получают l-аргинин реактивной квалификации предварительным выделением флавианата аргинина и электродиализом последнего в электродиализаторе типа Зл, для чего в среднюю камеру пятикамерного электродиализатора заливают раствор флавианата аргинина (рН 8), во все остальные камеры — дистиллированную воду. Процесс разделения .проводят при силе тока 1 а и напряжении 200 в. В предкатодной камере электродиализатора получают раствор аргинина, в преданодной — раствор флавиановой кислоты, которую возвращают в цикл для получения флавианата аргинина, Выход 1-аргинина, считая на загрузку флавианата аргинина, 32%. Степень его чистоты, %:

О.снов|ной продукт 99,9

Остаток после прокалки 0,05

Тяжелые металлы: свинец 0,003 железо 0,002

Маточные растворы, содержашие l-лиз ин и примесь флавиа новой KIHcJIоты, полученные после отделения флавианата аргинина, заливают в среднюю камеру электро)д иализатора

Зл4. В остальные камеры зал ивают дистиллированную воду. Процесс разделения I-лизина и флавиа новой кислоты ведут при силе тока н 1 а и напря>кещении 200 в. В п редкатод ной камере получают растворы l-лизи на, в преданодной — раствор флавиа повой кислоты, который пр именяют для выделения флав ианата аргинина. Упа1р иванием раствора из предкатодной камеры получают l-лизи и. Выход лизина определяется его содер>канием в исходном гидролизате.

Нейтральную фракцию аминокислот, содержащую пр олин и другие аи1инокислоты, iHcпользуют для выделения 1-пролина реактив5

35 ной квалификации. Для получения хр|оматографическ и чистого цролина его выделяют в в.иде пи кр ап а..

Полученный пикрат цролина растворяют в дистиллированной воде до полученыя насыщен ного раствора, который залнвают в среднюю камеру электродиализатора Эл4. В остальные камеры заливают д истиллирова нную воду. Раствор пикрата црюлина разделяют на п ролин и пикрино в ую кислоту при силе тока

2,5 а к напряжениями 100 в. Температура в камерах эле ктродиализагора не д олжна превышать 40 С. Процесс заканчивают, когда электрофорепраммы указывают HIB, отсутствие следов пи1к риновой кислоты в средней камере. Растворы средней и предкатодной камер, содержащие п ролин, сливают для упарывапия, ai раствор преданод ной камеры, содер>кащий пиири новую кислоту, упаривают и црименяют для получения новых партий пик,р ата цролина. Выход пролина, считая на запрузку его пи крата, 32%.

Из,кислой фракции а минокислот выделяют глутамяновую,и аспарапиновую,кислоты, для чего в концентр ироваыный раствор глутам инов ой и аспарапино вой кислот пропускают

НС1 дю насыщения. Глута мювоэую кислоту отделяют при 0 С в виде хлоргидрата, аспар а гин ову ю (хром атогр афически чистую)— в виде медной соли, которую затем разлагают методом эле кт род иал иза, Для этого, в катодную камеру пятикамерного электродиализатора заливают р аствор медной соли. Медь электролитически выделяется на катоде, аспас агиноваяя кислота концентрируется в предкатод ной камере. Выход а м|иноиислот определяют их содержанием в исходном гидролизате.

Предмет изобретения

Способ подуче н ия аминокислот из белковопо сырья, напр имер из гидролизата желатипы, отличающийся тем, что, с целью повышения степени чистоты продукта, гидролизат

>келатины подвергают электродиализу в каскаде многокамер ных элекпродиализа1торов с ионообменными диафрагмами при рН б — 7, и получен|ные п ры этом фракции аминокислот обрабатывают органическими кислотами с последующим электр одиализом образовавшихся солей.

205017

Составитель Н. Грехнева

Редактор Л. Ильина Техред 3. Тараненко Корректоры: И. Божко и С. Сатагулова

Заказ 1024/1 Изд. № 1265 Тираж 523 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Я-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2