Способ получения макролидных соединений

 

Использование: в сельском хозяйстве, в частности в качестве нематодных средств для лечения животных и людей, пораженных эндопаразитами, и/или грибковой инфекцией, а также в качестве пестицида. Сущность изобретения: продукт - макролидные соединения ф-лы (I), где R¹ - изопропил; R²= OR⁵; R³ = Н, OR⁵= OC(O)R⁶, OR⁶= C₁-C₄ не- или замещенный фенилом или феноксигруппой алкил или C₃-C₅-циклоалкил, или OR⁷, где R⁷= C₁-C₄-алкил, не- или замещенный C₃-C₅-циклоалкилом, или C₃-C₅-алкенил; OR⁴ - ОН, OC(O)R^4a, где R^4a-C₁-C₄-алкил. Реагент 1: соединение формулы I, где R² и OR⁴ - один или оба являются ОН. Реагент 2: соединение формулы: R⁶ - С(О)ОН или R^4a - С(О)ОН, или R⁷Y, где Y = Cl, Br, J. Соединения формулы I снижают количество глистов более, чем на 80%, при дозе 10 мг/кг. Структура соединений формулы I.

Изобретение относится к способу получения новых макролидных соединений формулы I.

Известно получение антибиотиков S541, которые можно выделить из продуктов ферментации вида Streptomyces. Антибиотики S541 представляют собой группу родственных соединений, имеющих неполную форму (I) (Ia) Итак, как описано в данном описании, выявлена дополнительная группа соединений, обладающих антибиотической активностью, которые можно получить посредством химической модификации антибиотика S541 или путем выделения их из культуры микроорганизмов рода Streptomyces.

Новые соединения предлагаемого изобретения обладают антибиотической активностью и/или применяются как промежуточные продукты при получении других активных соединений и/или при выделении или очистке соединений антибиотиков S541.

Соединения настоящего изобретения представляют собой замещенные гидроксильные аналоги антибиотиков S 541, которые имеют гидроксильную или замещенную гидроксильную группу в положении 5.

Таким образом, в одном варианте настоящего изобретения предлагаются, в частности, соединения формулы (I) где R¹ - изопропил; R² - группа OR₅; R³ представляет собой атом водорода; OR⁵-группа является -OCOR⁶-группой, где R⁶ - C₁-C₄-алкил, необязательно замещенный феноксигруппой или фенилом, или С₃-С₅-циклоалкил, или OR⁷, где R⁷ - C₁-C₄-алкил, необязательно замещенный С₃-С₅-циклоалкилом, или С₃-С₅-алкенил; OR⁴ является ОН или -OCOR^4a-группой.

Особенно важными активными соединениями предлагаемого изобретения являются соединения формулы (II), в которых: R¹ является изопропильной группой; R² - пропионоксигруппой; R³ - атомом водорода и OR⁴ представляет гидроксильную группу; R¹ является изопропильной группой; R² является этоксигруппой, R³представляет атом водорода и -OR⁴ является гидроксильной группой; и R¹ является изопропильной группой; R² - н-пропоксигруппой; R³ - атом водорода и OR⁴ - гидроксильная группа.

R¹ является метильной группой; R² - ацетоксигруппа, R³ - атом водорода и OR⁴ гидроксильная группа.

R¹ является этильной группой; R² представляет ацетоксигруппу; R³ - атом водорода и OR⁴ - гидроксильная группа.

R¹ является этильной группой; R² ацетоксигруппа; R³ атом водорода и OR⁴ представляет собой гидроксильную группу.

R¹ является изопропильной группой; R² - ацетоксигруппа; R³ - атом водорода и OR⁴ - гидроксильная группа.

Как указывалось ранее, соединения предлагаемого изобретения могут применяться в качестве антибиотиков и/или как промежуточные соединения для получения других активных соединений и/или при выделении и очистке соединений антибиотиков. S541. В том случае, когда предлагаемые соединения приходится использовать как полупродукты, R² и/или -OR⁴ могут быть защищенными гидроксильными группами. Ясно, что такая группа должна иметь минимальное количество дополнительных функциональных групп, чтобы избежать дополнительных реакционных цепей и должна быть такова, чтобы стало возможным избирательно восстанавливать из нее гидроксильную группу.

Предлагаемые соединения обладают антибиотической активностью, например антигельминтной активностью, например против нематодов, и в частности, анти-эндопаразитарной и анти-эктопаразитарной активностью.

Эктопаразиты и эндопаразиты заражают людей и целый ряд животных и, особенно, имеют широкое распространение среди сельскохозяйственных животных: свиней, овец, крупного рогатого скота, коз и домашней птицы, лошадей и домашних животных, например собак и кошек. Паразитарная инфекция домашнего скота, приводящая к анемии, недостаточности питания и потере массы, является основной причиной экономических потерь во всем мире.

К представителям эндопаразитов, заражающих указанных животных и/или людей относятся Ancylostoma, Ascaridia Ascaris, Aspicularis, Brugia, Bunostomum, Capillari, Chabertia, Coopenia, Dictyocaulus, Pirofilaria Dracunculus, Enterobius, Haemonchus, Heterakis, loa, Necator, Nematodirus, Ne- matospiroides, Neligomoroides, Nippo- strongylus, Oestophagostonum, Onchocerea, Ostertagia, Oxyuris, Parascanis, Strongylus, Strongyloides, Syphacia, Toxascuris, Toxocara, Trichonema, Trichostrongylus, Trichinella, Trichuris, Uncinaria и Wuchareria.

Примерами эктопаразитов, заражающих животных и/или людей являются членистоногие энтопаразиты, например жалящие насекомые: падальная муха, блохи, вши, клещи, сосущие насекомые, искодовые клещи и другие двухкрылые насекомые-вредители.

К примерам такого рода энтопаразитов, заражающих животных и/или людей относятся: Ambylomma, Boophilus, Chorioptes, Culliphore, Demodex, Demallenia, Der- matobia, Gastrophilus, Haematobia, Haema- topinus, Haemophysalis, Hyalomma, Hyper- derma, Ixodes, Linognathus, Lucitia, Melopha- gus, Oestrus, Otobius, Otodectes, Psorerga- tes, Psoroptes, Rhipicephal Sarcoptes, Sto- moxys и Tabanus.

Обнаружено, что предлагаемые соединения эффективно действуют как in vitro, так и in vivo, против широкого ряда эндопаразитов и эктопаразитов. В частности, обнаружено, что соединения настоящего изобретения активно действуют против нематодов, таких как Haemonchus contortus, Ostertagicira meineta, Irichostrongylus colubiformis, Dictyeaulus viviparis, Ceoperia oncophera, Ostertagia ostertagi, Nematospiroides dibius и Nippostrongulus braziliensis и паразитарных клещей, как, например Sarcoptes sp и Psoroptes sp. Таким образом, предлагаемые соединения находят применение при лечении животных и людей с эндопаразитарной и/или эктопаразитарной инфекциями.

Виды паразитов меняются в соответствии с хозяином (животным и доминирующим местонахождением инфекции. Следовательно, например, возбудители Haemonchus contortus, Ostertagia circunicineta и Trichostrongylus colubiformis обычно поражают овец и, преимущественно, локализуются в желудке и тонкой кишке, в то время как Dictyocaulus viviparis, Cooperia oncophora и Ostertagia ostertagi обычно поражают крупный рогатый скот и локализованы, главным образом, в легких, кишечнике или желудке.

Антибиотическая активность предлагаемых соединений может быть продемонстрирована, например, своей активностью in vitro против свободно живущих нематодов, например Caenorhabioditis elegans.

Кроме того, заявленные соединения имеют применения в качестве противогрибковых веществ, например против штаммов Candida, например Candida alleicans и Candida glabrata, и против дрожжей, таких как Saccharomyces carlsbergensis.

Соединения настоящего изобретения, кроме того, имеют применение в борьбе с вредителями-насекомыми, клещами и нематодами и в сельском хозяйстве, садоводстве, лесоводстве, здравоохранении и хранении продуктов. Ими можно успешно обрабатывать вредителей почвы и сельскохозяйственных культур, включая хлебные злаки (например, пшеницу, ячмень, маис, рис), овощи (например, сою), фрукты (например, яблоки, виноград, и цитрусовые), наряду с корнеплодами (например, сахарную свеклу, картофель). Характерными примерами таких вредителей являются фруктовые клещи и тля, например Aphis fabae, Aulacorthum circum flexum, Myrus persicae, Nephotettix cineticeps, nilpawata lugens, Panonychus ulmi, Phorodon humuli, Phyltocoptruta oleivora, Tetranychus urticae и представители рода Trialeuroides нематоды, например представители рода Aphelencoides, Olobodera, Heteroder Meloidogyne и Panagrellus чешуйчатые, например Heliothi Plutella и Spodoptera долгоносик каландрина, как например Anthonomus grandis и Sitophlus granarius, хрущаки мучные, например Tribolium castaheu, мухи, например Musca domestica, муравьи Рихтера; моли-минеры узкокрылые; Pear psylla; трипсы табачные; таракановые, например Blatella germanica и Periplaneta americana, москитные, например Aedes aegypti.

В соответствии с настоящим изобретением, предложены соединения формулы (II), как указывалось выше, которые могут быть использованы в качестве антибиотиков. В частности, их можно использовать при лечении животных и людей, пораженных эндопаразитарной, эктопаразитарной и/или грибковой инфекциями, и в качестве пестицидов для борьбы с вредителями-насекомыми, клещами и нематодами, в сельском хозяйстве, садоводстве или лесном хозяйстве. Их можно применять, кроме того, обычно в качестве пестицидов в других обстоятельствах, например в хранилищах, зданиях или других общественных местах или местах локализации сельскохозяйственных вредителей. По-существу предлагаемые соединения могут быть применены либо к хозяину (животному или человеку, либо к культурным растениям или другой растительности), либо к самим вредителям или месту их расположения.

Заявленные соединения могут быть применены для приема в любой удобной форме при использовании в ветеринарии или практической медицине. Таким образом, настоящее изобретение содержит в пределах своего объема фармацевтические композиции, содержащие соединение, согласно заявленному изобретению, пригодное для применения в ветеринарии или терапии. Такие композиции могут быть представлены при использовании в традиционной форме с помощью одного или нескольких подходящих носителей или наполнителей. Предлагаемые композиции содержат составы в форме, особенно пригодной для парентерального (в том числе, введение внутрь молочной железы), орального, ректального, местного применения в виде имплантата, для применения при глазных, ушных или заболеваниях мочеполовой системы, подходящими способами и агентами для приготовления состава соединений настоящего изобретения, пригодного для использования в ветеринарии или терапии, являются известные способы для соединений антибиотиков S541.

Заявленные соединения можно применять в комбинации с другими фармацевтически активными ингредиентами.

Суммарная суточная доза предлагаемых соединений, применяемая как в ветеринарии, так и в терапии, будет соответ- ственно в интервале 1-2000 мг/кг массы тела, предпочтительно 50-1000 мг/кг причем указанные дозировки можно принимать в дробных дозах, например 1-4 раза в день.

Заявленные соединения можно составлять в любой удобной форме, пригодной для земледелия или садоводства. Таким образом, настоящее изобретение включает в пределах своего объема составы, содержащие соединение, предназначенное для применения в земледелии или садоводстве. Такие рецептуры включают сухие или жидкие формы, например дусты, включая пылевидные субстраты или концентраты, порошки, в том числе растворимые или смачиваемые порошки, гранулы, включая микрогранулы и диспергируемые гранулы, таблетки, текучие вещества, эмульсии, например разбавленные эмульсии или эмульгируемые концентраты, пропиточные составы, например составы для пропитки корней и семян, протравливатели семян, семенные гранулы, масляные концентраты, масляные растворы, инъекции, например инъекции в ствол, растворы или опрыскивания, дымы и туманы.

Подходящие способы и агенты для составления рецептуры предлагаемых соединений для применения в садоводстве или земледелии выключают те, которые раскрыты в известном патенте для антибиотиков S541.

При составлении рецептуры концентрация активного вещества обычно составляет от 0,01 до 99 мас.% и более, предпочтительно от 0,01 до 40 мас.%.

Промышленные (товарные) продукты обычно приготовлены в виде концентрированных композиций, которые при использовании разбавляют до требуемой концентрации, например от 0,001 до 0,0001 мас.%.

При использовании в ветеринарии или в садоводстве и земледелии, и в случае, когда предлагаемые соединения являются продуктами, образуемыми посредством ферментации, желательно использовать весь бродильный бульон в качестве источника активных соединений. Кроме того, может быть пригодным использование обезвоженного бульона (содержащего мицелий) или мицелия, отделенного из бульона и пастеризованного, или более предпочтительно высушенного. При желании, указанный бульон или мицелий могут быть сформулированы в композиции, как указывалось выше, включающие традиционные инертные носители, наполнители или разбавители.

Антибиотические соединения предлагаемого изобретения могут вводиться и применяться в комбинации с другими активными ингредиентами.

В частности, предлагаемые соединения антибиотика могут использоваться вместе с соединениями антибиотиков S541 или с другими антиобиотиками настоящего изобретения. Это может возникнуть, например, в случае, когда неочищенные продукты брожения взаимодействуют согласно способу настоящего изобретения без предшествующего или последующего отделения, указанное может быть предпочтительным, например, при использовании соединений в земледелии, где важно обеспечить (сохранить) низкую себестоимость продукции.

Соединения формулы I получают взаимодействием соединения формулы I, где один или оба из радикалов R² и OR⁴ являются гидроксильной группой, с гидроксилзамещающим реагентом формулы
R⁶COOH или R^4aCOOH, (II) где R⁶ и R^4a имеют вышеуказанные значения, или его реакционноспособным производным, или соединением формулы
R⁷Y, (III) где R⁷ имеет вышеуказанные значения;
Y - атом хлора, брома или йода.

Реакцию ацилирования можно проводить в водной или безводной реакционной среде, предпочтительно при температуре в интервале от -20 до +100^оС, например от -10 до +50^оС.

Формилирование можно проводить с применением активированного производного муравьиной кислоты, например, N-формилимидазола или ангидрида муравьиной кислоты при стандартных условиях реакции.

Введение сульфонильной группы может осуществляться с помощью реакционноспособного производного сульфокислоты R⁸O₃H такого как сульфонилгалоид, например хлорид R⁸SO₂Cl или ангидрид сульфокислоты. Сульфурилование предпочтительно проводить в присутствии подходящего кислотного связующего агента, как указывалось выше.

Этерификацию можно осуществлять с использованием реагента формулы R⁷Y (где R⁷ имеет вышеуказанные значения, а Y представляет уходящую группу, такую как атом хлора, брома или йода, или гидрокарбонилсульфонилоксигруппу, такую как метилсульфонилокси или толилсуль- фонилокси, или галоидалканоилоксигруппу, например дихлорацетокси). Реакция может сопровождаться образованием алкоголята магния при использовании реагента Гриньяра, такого как галоидметилмагний, например йодметилмагний или галоидтриалкил- силилметилмагний, например хлортриметилсилилметилмагний с последующей обработкой реагентом R⁷Y.

При желании, реакция может проводиться в присутствии соли серебра, например оксида серебра, перхлората серебра, карбоната серебра или салицилата серебра, или их смесей, причем указанная система может быть особенно подходящей, когда этерификацию проводят в присутствии галоидалкила (йодметила).

Этерификацию можно соответственно проводить в растворителе, таком как простой эфир, например диэтиловом простом эфире.

Образование ацеталей может осуществляться посредством реакции с циклическим или ациклическим простым виниловым эфиром. Указанный способ особенно пригоден для получения тетрагидропираниловых простых эфиров с использованием в качестве реагента дигидропирана, или 1-алкоксиалкильных простых эфиров, такого как 1-этоксиалкильный простой эфир, применяя в качестве реагента виниловый простой эфир. Указанную реакцию желательно проводить в присутствии сильно кислотного катализатора, например минеральной кислоты, такой как серная кислота, или органической сульфокислоты, такой как п-толуолсульфокислота, в негидроксильном, безводном растворителе.

Безводные растворители, которые можно использовать в вышеуказанных реакциях, включают кетоны (например, ацетон), амиды (например, N,N-диметилформамид, N, N-диметилацетамид или гексаметилфосфоранид, простые эфиры (например, циклические простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан, и ациклические простые эфиры, например диметоксиэтан или диэтиловый простой эфир), нитрилы (например, ацетонитрил), углеводороды, такие как галоидзамещенные углеводороды (например, метиленхлорид) и сложные эфиры, например этилацетат, а также смеси двух или более указанных растворителей.

Введение синильной группы может осуществляться путем взаимодействия с силилгалогенидом (например, хлоридом), преимущественно в присутствии основания, такого как имидазолтриэтиламин или пиридин с использованием растворителя, например диметилформамида.

Во многих случаях, например, когда 5,23-дигидроксисоединение формулы (III) применяют в качестве целевого материала образуется смесь 5-однозамещенных и 5,23-двузамещенных производных. Однако их можно отделить с использованием общепринятых методов, например хроматографией (хроматографией на силикагеле или препаративной тонкослойной хроматографией).

Промежуточные соединения антибиотиков S541 формулы (III), где OR⁵является гидроксильной группой и OR⁴ представляет гидроксильную или метоксильную группу, могут также быть получены с использованием способов ферментации и выделения, например, как описано в известном патенте. Другие промежуточные соединения формулы (III) можно получить из указанных соединений, используя описанные выше способы для получения соединений формулы (II).

Настоящее изобретение далее представлено следующими препаратами и примерами. Все температуры приведены при 0^оС.

Соединения обозначены со ссылкой на источник "Факторы", которые представляют собой перечисленные ниже соединения формулы (см. таблицу).

(V)
Факторы А, В, С, D, E, F можно получить уже известным способом.

П р и м е р 1. 5-Феноксиацетокси- и 5,23-дифеноксиацетокси-фактор А.

Фактор А (2,0 г) в растворе дихлорметана (25 мл) и пиридина (0,35 моль) при 0^оС обрабатывают раствором феноксиацетилхлоридом (0,5 мл) в дихлорметане. Через 18 ч при температуре 3^оС полученный раствор обрабатывают пиридином (1,0 мл) и феноксиацетилхлоридом (1,0 мл) в дихлорметане (5 мл). Раствор тщательно перемешивают при температуре 0-5^оС в течение 30 мин, прежде, чем вылить в воду со льдом. Простой эфир (100 мл) вводят в раствор и смесь перемешивают в течение 20 мин. Водный слой экстрагируют простым эфиром. Эфирный слой объединяют, последовательно промывают водой и соляным раствором, высушивают и выпаривают. Остаток очищают хроматографией на колонке из диоксида кремния смесью дихлорметана с ацетоном (40:1) c выходом названных соединений в виде смеси (1,8 г моноацил:диацил = 6:1), которую разделяют высокоэффективной препаративной жидкостной хроматогра- фией с обратной фазой, получая 5-феноксиацетокси фактор А, δ (CDCl₃) содержит 6,8-7,4 (м; 5Н) и 4,6 (с; 2Н) м/з включает 746, 728, 710, 594 и 576, и 5,23-дифеноксиацетокси фактор А, δ (CDCl₃) содержит 6,8-7,4 (м, 10Н), 4,60 (с, 2Н) и 4,70 (с, 2Н).

П р и м е р 2. 5-Феноксиацетокси-23-(4-метилфенокситиокарбонилокси)-фактор А.

5-Феноксиацетокси-фактор А (747 мг) в дихлорметане (10 мл) при 0^оС в атмосфере азота обрабатывают пиридином (0,81 мл), а затем 4-метилфенилхлортиоформиатом (0,75 г) в дихлорметане (2 мл). Полученный темный раствор тщательно перемешивают в течение 15 мин при 0^оС и затем в течение еще 22 ч без охлаждения. Полученную смесь выливают в холодную воду и соляной раствор (рассол) и экстрагируют простым эфиром. Соединившиеся слои простого эфира промывают водой и соляным раствором, высушивают и выпаривают. Остаток очищают хроматографией на колонке диоксида кремния и препаративной жидкостной хроматографией с обратной фазой с получением названного соединения (430 мл), δ (CDCl₃) содержит: 3,34 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,97 (д, 10, 1Н), 4,72 (с, 2Н), 5,4 (м, 1Н), 5,59 (д 6, 1Н), и 6,9 до 7,4 (м, 9Н), м/з включает 728, 616, 576, 466, 464, 448, 354, 297, 247, 219 и 151.

П р и м е р 3. 5-трет-Бутилдиметилсилилоксиацетокси-фактор А.

Фактор А (2,144 г) в безводном простом эфире (25 мл) и пиридине (2,5 мл) при 0^оС в атмосфере азота обрабатывают с прибавлением по капле трет-бутилдиметилсилилоксиацетилхлорида (1,2 г) в простом эфире (10 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 50 мин при 0^оС прежде, чем обработать по капле опять кислотным хлоридом (1,10 г) в простом эфире (10 мл). Полученную смесь тщательно перемешивают при температуре 0^оС в течение 60 мин и выливают в холодную воду и простой эфир. Водный слой промывают простым эфиром. Соединившиеся органические слои промывают водой и соляным раствором, высушивают и выпаривают. Полученный остаток очищают посредством хроматографии на диоксиде кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (25:1) в качестве элюата с получением названного соединения, δ (CDCl₃) включает: 0,09 (с, 6Н), 0,78 (д 6, 3Н), 0,90 (с, 9Н), 0,93 (д 6, 3Н), 0,97 (д 6, 3Н), 1,83 (д 6, 3Н), 1,51 (с, 3Н), 1,59 (с, 3Н), 1,74 (с, 3Н), 3,32 (м, 1Н), 3,52 (д 10, 1Н), 3,64 (м, 1Н), 3,74 (д 10, 1Н), 3,82 (м, 1Н), 4,32 (с, 2Н), и 5,57 (д 5, 1Н); м/з содержит 784, 766, 748, 595, 577, 484, 466, 354, 314, 297, 265, 247, 237, 219 и 151.

П р и м е р 4. 5-трет-Бутилдиметилсилилокси-фактор А.

Фактор А (250 мг) и имидазол (163 мг) в сухом диметилформамиде (10 мл) обрабатывают трет-бутилдиметилсилилхлоридом (197 мг). Полученный раствор тщательно перемешивают в течение 2 ч и выливают в холодную воду. Указанную смесь тщательно экстрагируют простым эфиром, и соединившиеся экстракты эфира высушивают и выпаривают. Остаток очищают хроматографией на диоксиде кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (10:1) в качестве элюата с получением названного соединения (235 мг), δ (CDCl₃) содержит: 0,13 (c, 6H), 0,80 (д 6, 3), 0,92 (с, 9Н), 0,96 (д 6, 3Н), 1,00 (д 6, 3Н), 1,03 (д, 6, 3Н), 1,53 (с, 3Н), 1,60 (с, 3Н), 1,80 (с, 3Н), 3,37 (м, 1Н), 3,56 (д 10, 1Н), 3,64 (м, 1Н), 3,75 (д 10, 1Н) и 4,43 (д 5, 1Н); м/з содержит 726, 708, 691, 651, 633, 466, 448, 354, 314, 297, 265, 247, 219 и 151.

П р и м е р 5. 5-Ацетокси и 5,23-диацетокси-фактор А.

Фактор А (3,0 г) в пиридине (20 мл) при температуре -5^оС обрабатывают кислотным ангидридом (8 мл) и полученный раствор оставляют при 3^оС в течение 20 ч. К раствору добавляют бензол (100 мл) и полученную смесь сгущают в вакууме. Остаточное масло хроматографируют на диоксиде кремния, используя в качестве элюата смесь дихлорметана с ацетоном (40:1), получая 5-ацетат фактора А (2,06 г), содержащий 5,23-диацетат (10%). Полученные соединения отделяют препаративной жидкостной хроматографией с обратной фазой с получением 5-ацетокси фактора (79% выхода). λ_max (Et OH) 244,5 нм (E', 4,62); δ (CDCl₃): содержит 2,14 (с, 3Н); м/з содержит 654, 594 и 576 и 5,23-диацетокси фактора А (6,5% выхода);δ (CDCl₃) содержит 2,01 (с, 3Н), и 2,13 (с, 3Н); м/з содержит 696 и 636.

П р и м е р 6. 5,23-Диацетокси-фактор А.

Раствор фактора А (600 мг) в сухом пиридине (1,0 мл) обрабатывают избыточным количеством кислотного ангидрида (0,50 мл) и несколькими кристаллами 4-N,N-диметиламинопиридина. Через 24 ч при комнатной температуре раствор выливают в простой эфир и затем поочередно промывают органическую фазу с помощью 2 н. соляной кислотой, насыщенным раствором бикарбоната натрия и, наконец, соляным раствором. Выпаривание просушенного органического слоя обеспечивает камедь, которую очищают хроматографией через колонну Merch Kieselgel 60 с диоксидом кремния (45 г) размером 230-400 меш. Элюирование колонны смесью дихлорметана с эфиром (9:1) дало названное соединение в виде бесцветной пены (560 мг), [α]_D²⁶ + 169^o (c, 0,48, CHCl₃).

Соединение примера 7 получено аналогичным способом:
П р и м е р 7. 5,23-Диацетокси-фактор С.

Т. пл. 211-213^о, [α] _D²² + 200^o (c, 0,40, CHCl₃); λ_max^EtOH 238,5 (30, 400) и 245 нм (ε_max 32, 500); ν_max 3440 (OH) и 1718 см^-1 (ацетокси и сложный эфир); δ (CDCl₃) содержит 4,90 (м, 1Н), 4,04 (д.6 Гц, 1Н), 3,96 (д, 10 Гц, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,32 (м, 1Н), 2,14 (с, 3Н), 1,75 (с, 3Н), 1,67 (д 6 Гц, 3Н), 1,60 (с, 3Н), 1,52 (с, 3Н), 0,99 (д, 6 Гц, 3Н), и 0,71 (д, 7 Гц, 3Н), м/з = 668 (М⁺), из фактора С (312 мг).

Реакционную смесь выливают в этил, а не в простой эфир и в заключании кристаллизуют на порошкование диизопропиловым эфиром.

П р и м е р 8. 23-Ацетокси-фактор А.

К перемешанному и охлажденному (0-5^о) раствору соединения примера 6 (530 мг) в метаноле (10 мл) вводят по каплям водный раствор (1 мл) гидроокиси натрия (30 мг). Через 1,3 ч смесь выливают в этилацетат и органическую фазу, затем промывают поочередно 2 н. соляной кислотой; водой и в конце соляным раствором. Выпаривание просушенной органической фазы дает желтую смолу, которая в дихлорметане вводится в хроматографическую колонку Merch Kieselgel 60, с добавлением в тот же самый растворитель - диоксид кремния (50 г), размером частиц 230-400 меш. Элюирование смесью дихлорметана с простым эфиром (9: 1) дало названное соединение, которое получено в виде почти бесцветного твердого вещества путем выпаривания раствора н-пентана. Указанное вещество (330 мг) имеет [α]_D²³ + 166^o (c, 0,64, СHCl₃), λ_max^EtOH 239 (26,500) и 245 нм (ε_max 29,300); ν_max (CHBr₃) 3540, 3460 (OH) и 1712 см^-1 (сложного эфира);δ (CDCl₃) содержит 4,89 (м, 1Н), 4,27 (м, 6 Гц, 1Н); 3,93 (д, 6 Гц, 1Н), 3,91 (д, 10 Гц, 1Н), 3,55 (м, 1Н), 3,25 (м, 1Н), 2,01 (с, 3Н), 1,85 (с, 3Н), 1,59 (с, 3Н), 1,51 (с, 3Н), 1,03 (6 Гц, 3Н), 0,98 (д, 6 Гц, 3Н), 0,94 (д, 6 Гц, 3Н), и 0,69 (д, 7 Гц, 3Н); м/з = 654 (М⁺).

Соединение примера 9 получено аналогичным путем:
П р и м е р 9. 23-Ацетокси-фактор С.

[α] _D²³ + 139^o (c 0,52, CH₂Cl₂): λ_max^EtOH 244,5 нм (ε_max 29,400); ν_max (CHBr₃) 3550, 3480 (OH); 1716 (сложный эфир и ацетат) и 1255 см^-1(ацетат); δ (CDCl₃) cодержит 4,91 (д, 3 Гц, 1Н), 2,03 (с, 3Н), и 1,64 (д, 7 Гц, 3Н) и 1,60 (с, 3Н), м/з = 626 (M⁺).

Из соединения примера 7 в виде белого аморфного твердого вещества.

П р и м е р 10. 5-Ацетокси-23-метилсульфонилокси-фактор А.

Раствор 5-ацетокси фактор А (3,46 г) в пиридине (30 мл) охлаждают в ледяной бане и обрабатывают метансульфониевым ангидридом (2,2). Через 30 мин смесь подогревают до температуры окружающей среды и еще через 60 мин разделяют между этилацетатом и 2 н. соляной кислотой. Органическую фазу отделяют и промывают последовательно 2 н. соляной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и в заключении насыщенным соляным раствором. Органический раствор высушивают (Na₂SO₄) и растворитель выпаривают с выходом пены, которую хроматографируют через колонку на диоксиде кремния (Merck Art) 9385), добавленного в смесь гексана (пределы кипения 60-80^о) с ацетилацетатом (3: 1) и элюируют в том же растворителе. Соответствующие фракции основного компонента соединяют и растворитель выпаривают с получением названного соединения в виде пены (2,08 г).

[α]_D²² + 154^o (c = 0,56; CHCl₃), λ_max^CHCl3 247 нм (ε 29070); ν_max(CHBr₃) 3550, 3470 (OH) и 1735, 1715 (cложный эфир:); δ (СDCl₃) содержит 4,90 (м, 1Н), 3,05 (с, 3Н), и 2,16 (с, 3Н).

П р и м е р 11. 23-Тозилокси-фактор В.

Фактор В (250 мг), тозиловый ангидрид (204 мг) и несколько кристаллов 4-N, N-диметиламинпиридина перемешивают в сухом пиридине (0,5 мл) в течение 24 ч. Смесь вливают в простой эфир и органическую фазу промывают последовательно 2М соляной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и, наконец, соляным раствором. Выпаривание высушенного (Na₂SO₄) эфирного слоя дает неочищенный продукт, в который в дихлорметане вводят в хроматографическую колонку на силикагеле (50 г Merck Kieselgel 60, 203-400 меш. ), включенного в тот же растворитель. Осуществляют элюирование и смеси дихлорметана с простым эфиром (9:1) основного компонента, который добавочно очищают препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией. Названное соединение получено в виде смолы [α]_D²³ + 173^o (0,84, СHCl₃); λ_макс. (Et 235 (30,000) и 244,5 нм (ε_макс. 30,800); ν_макс. 1708 см^-1 (эфир); δ (CDCl₃) содержит 7,82 (д, 10 Гц, 2Н), 7,29 (д, 10 Гц, 2Н), 4,83 (к, 3 Гц, 1Н), 3,50 (с, 3Н) и 2,43 (с, 3Н); м/з = 1752 (М⁺).

П р и м е р 12. 5-Ацетокси-23-н-бутокси-фактор А.

Карбонат серебра (лг) добавляют к раствору 5-ацетокси-фактора А (325 мг) в сухом простом эфире с последующим введением йодбутана (0,5 мл) и перхлората серебра (550 мг). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч, когда вводят соллидин (0,5 мл). После перемешивания в течение еще 20 мин, смесь фильтруют и фильтрат промывают поочередно с помощью 2 н. соляной кислоты, насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и воды. Высушенную органическую фазу выпаривают почти досуха и масло очищают хроматографией на колонке из Merck Kieselgel 60 c размерами пор 230-400 меш. Элюирование из колонки смесью гексана с этилацетатом (3:1) дает названное соединение в виде бесцветной пены (276 мг).

[α]_D²² + 160^o (c, 0,94, СHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245 нм.

П р и м е р 13. Фактор А-23-гемиоксалат.

Фактор А (ха 70% очистки) и карбонат кальция (1,5 г) перемешивают дихлорметаном (20 мл) при температуре 21^оС и к полученной суспензии добавляют в избытке однократно оксалилхлорид; (1,0 мл). Через 4-5 мин указанную смесь обрабатывают водой (15 мл) и еще через 5 мин 2 М соляной кислотой (10 мл) и этилацетатом (70 мл). Органическую фазу отделяют, промывают водой и соляными раствором и далее обрабатывают обесцвечивающим углем. Через 5-10 мин образованный органический раствор отфильтровывают через фазоразделительную бумагу и фильтрат десорбируют из растворителя. Остаток в простом эфире (50 мл) очищают путем фильтрования через "Гифло" и, удаляя растворитель, получают бледно-желтую пену. Порошкование указанного вспененного материала диизопропиловым эфиром (7 мл) дает названное соединение в виде кристаллического твердого вещества (750 мг) после промывания твердого вещества диизопропиловым эфиром и н-пентаном.

ν_макс. (CHBr₃) 3360-3600 (OH), 1805 (кислотный мономер) и 1720 см^-1(кислотный димер и сложные эфиры): δ (СDCl₃) содержит 4,30 (д, 5 Гц, 1Н) и 5,14 (м, 1Н).

П р и м е р 14. Фактор А.

Раствор 23-гемиоксалат-фактора А (500 мг) в дихлорметане (30 мл) энергично перемешивают с водным раствором гидроксида натрия (1,54 г в 30 мл Н₂О) в течение 2 ч при 21^оС. Органическую фазу собирают, водную фазу промывают небольшим количеством дихлорметана. Органические фазы соединяют, промывают с помощью 2М HCl, затем высушивают (Na₂SO₄) и десорбируют из растворителя с получением названного соединения (430 мг) в виде вспененного вещества. Указанное соединение продемонстрировано в качестве фактора А при сравнении получения высокоэффективной жидкостной хроматографией с аналогичным образцом фактора А.

П р и м е р 15. Фактор А, 5-гемисукцинат.

Раствор фактора А (306 мг) и сукцинового ангидрида (60 мг) в сухом пиридина (0,5 мл) перемешивают при 22^оС в течение 24 часов. Смесь разбавляют простым эфиром и промывают органическую фазу с помощью 2N соляной кислоты и соляного раствора. При выпаривании высушенного эфирного слоя получают вспененное вещество, из которого выделяют посредством высокоэффективной жидкостной препаративной хроматографии с обратной фазой названное соединение. Полученный продукт в эфире осаждается в виде белого аморфного твердого вещества (86 мг) при введении дополнительно п-пентана.

[α] _D²² + 125^o (c, 0,44, CHCl₃), λ_макс^EtOH 245 нм, (ε_макс. 30,700), ν_макс. (CHBr₃) 3490 (OH), 3,300-2,200 (CO₂H). 1730 (кислотный карбонил) и 1710 см^-1 (сложный спирт); (CDCl₃) содержит 2,74 ( 4Н), м/з = 712 (М⁺).

П р и м е р 16. 5-Ацетокси-23-этилоксалилокси-фактор А.

Раствор 5-ацетокси-фактор А (320 мг) и избыточный этилоксалилхлорид (0,5 мл) в сухом дихлорметане (6 мл) смешивают в присутствии карбоната кальция (300 мг) в течение 1 ч. Образованную смесь, разбавленную простым эфиром, выливают в насыщенный бикарбонат натрия и затем перед выливанием в этилацетат, перемешивают в течение 20 мин. Упаривание высушенной (Na₂SO₄) органической фазы делает смолу (325 мг), которая в дихлорметане вводится в хроматографическую колонку из Merck Kiezelgel 60, причем диоксид кремния (25 г) с размером частиц 70-230 меш, добавлен в тот же растворитель. Элюирование из колонки дихлорметаном и затем смесью дихлорметана с простым эфиром (95:5) дает названное соединение (265 мг) в виде белого вспененного вещества, [α] _D²³ + 157^o (c 0,41, CHCl), λ_макс^EtOH 245 нм (ε_макс. 32,800); ν_макс. (CHBr₃) 3530, 3480 (OH), 1760 и 1735 см^-1 (сложные эфиры); δ (CDCl₃): 5,4-5,6 (м, 2Н), 5,05 (м, 1Н), 4,32 (к, 7 Гц, 2Н); 2,13 (с, 3Н), и 1,35 (м, 7 Гц, 3Н).

П р и м е р 17. 23-Метилоксалилокси-фактор А.

Раствор 5-ацетокси-23-этилоксалилокси-фактора А (50 мг) в метаноле (1 мл), содержащий концентрированную серную кислоту (0,01 мл) выдерживают при 21^оС в течение 17 ч. Затем смесь выливают в этилацетат и органическая фаза действует в качестве нейтрального продукта. Указанный продукт очищают хроматографией через колонку из Меrск Kieselgel-60 на диоксиде кремния (15 г) с размером частиц 70-230 меш, использующих в качестве элюирующих растворителей первоначально дихлорметан, а затем смесь дихлорметана с эфиром (9: 1). Названное соединение получено в виде бесцветной смолы (25 мг), [α] _D²³ + 147^o (x, 0,28, СHCl₃), λ_макс.^EtOH 245 нм (ε_макс. 26,000); ν _макс. (CHBr₃) 3550, 3480 (0H), 1763, 1737 и 1710 см^-1 (сложные эфиры); δ (CDCl₃), 4,29 (т., 7 Гц, 1Н), 5,09 (м, 1Н), и 3,88 (с, 3Н).

П р и м е р 18. 5-Ацетокси-23-циклопропилкарбонилокси-фактор А.

Раствор 5-ацетокси-фактора А (140 мг) и пиридина (1 мл) обрабатывают хлоридом циклопропенкарбоксиловой кислоты (0,08 мл). Через 3 ч реакционную смесь разделяют между этилацетатом и 2 н. соляной кислоты. Органическую фазу отделяют и промывают последовательно с помощью 2 н. соляной кислоты и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический раствор высушивают (Na₂SO₄) и растворитель упаривают с получением масла, которое хроматографируют в колонке из диоксида кремния Merck Ar 9385; 80 мл), введенного в смесь гексана (пределы кипения 60-80^о с этилацетатом (3:1) и элюируемого таким же растворителем. Соответствующие фракции основного компонента объединяют и выпаривают растворитель с получением названного соединения в виде вспененного вещества (70 мг).

[α] _D²² + 143^o (c = 0,54; CHCl₃); λ_макс.^CHClз 250,2 (ε = 20310); ν_макс (CHBr₃) 3550, 3470, (OH) и 1733, 1712 (сложный эфир); δ (CDCl₃): 2,16 (c, 3H), 3,33 (м, 1Н), 3,88 (д, J 10 Гц, 1Н), 5,01 (м, 1Н) и 5,5-5,6 (м, 2Н). Соединения примера 19 получают аналогичным путем.

П р и м е р 19. 5-Ацетокси-23-циклопентилкарбонилокси-фактор А.

5-Ацетокси фактора А (0,28 г) и циклопентилкарбонилхлорида (0,2 мл) дают названное соединение в виде вспененного вещества (0,17 г), [α]_D²² + 149^o (c = 0,475; СHСl₃); λ_макс^.CHClз); 250,2 нм (ε =19900); ν_макс.(CHBr₃) 3480 (OH).

П р и м е р 20. 23-Циклопропилкарбонилокси фактор А.

Перемешанный раствор 5-ацетокси-23-циклопропилкарбонилокси-фактора А (230 мг) в метаноле (15 мл) охлаждают в ледяной бане и обрабатывают 3%-ным водным раствором гидроксида натрия (0,5 мл). Через 5 ч, в течение которых реакционная смесь нагревалась до комнатной температуры, раствор разделяли между этилацетатом и 2 н. соляной кислотой. Органическую фазу отделяют, промывают 2 н. соляной кислотой (х 2), высушивают (Na₂SO₄) и выпаривают растворитель. Остаток хроматографируют на колонке двуокиси кремния (Merck Art 9385; 150 мл), введенного в смесь гексана (пределы кипения 60-80^оС) с этилацетатом и элюируемого тем же растворителем. Соответствующие фракции основного компонента объединяют и выпаривают растворитель с выходом названного сложного эфира в виде вспененного вещества 170 мг), [α]_D²² + 146^o (c = 0,46; СHCl₃); λ_макс. 250,2 нм (ε= 20090); ν_макс. (CHBr₃) 3550, 3480 (OH) и 1709 (эфир сложный); δ (CHCl₃): 3,26 (м, 1Н), 3,88 (д, 10 Гц, 1Н), 4,29 (m, J 7 Гц, 1Н) и 5,01 (м, 1Н).

Соединения примера 21 получают аналогичным способом:
П р и м е р 21. 23-Циклопентилкарбонилокси-фактор А.

Отщепление защитной группы 5-ацетокси-23-циклопентилкарбонилокси фактора А (0,25 г) дают названный сложный эфир в виде вспененного вещества (0,215 г). [α] _D²⁰ + 141^o (c = 0,63; СHCl₃); λ_макс.^CHCl3 250,2 нм (ε = 19990); ν_макс (CHBr₃) 3550, 3480 (OH) и 1710 (сложный эфир); δ (CDCl₃): 2,74 (к, J Гц, 1Н), 3,26 (м, 1Н), 3,91 (д, J 10 Гц, 1Н), 4,30 (m, J Гц, 1Н), 4,95 (м, 1Н).

П р и м е р 22. 23-Циклопропилкарбонилокси-5-метоксикарбонилокси фактор А.

Раствор 23-циклопропилкарбонилокси фактора А (0,1 г) в сухом дихлорметане (15 мл) охлаждают в ледяной бане и обрабатывают пиридином (0,2 мл) с последующей обработкой 1М раствором метилхлорформата в дихлорметане (0,3 мл). Через 20 мин раствор разбавляют дихлорметаном и промывают 2 н. соляной кислотой, затем высушивают сульфатом натрия и выпаривают растворитель. Осадок хроматографируют в колонке из двуокиси кремния (Merck Art 9385; 100 мл), входящего в смесь гексана (60-80^оС) с этилацетатом (3:1) и элюированным тем же самым растворителем. Соответствующие фракции основного компонента объединяют, и растворитель выпаривают с выходом названного соединения в виде вспененного вещества (0,106 г).

[α] _D²⁰ + 149^o (c = 0,63; CHCl₃) λ_макс^CHCl3 250,2 нм; ν_макс(CHBr₃) 3470 (OH), 1745 λ_макс (карбонат), 1710 (сложный эфир), 998 (С-О); δ (CDCl₃) содержит (с, 1Н), 5,01 (м, 1Н), 3,88 (д, J 10 Гц), 353 (с, 3Н); 0,67 (д, J Гц, 3Н).

П р и м е р 23. Фактор А, 5-ацетат, 23-изобутират.

Раствор фактора А, 5-ацетат (131 мг), изобутирилхлорида (0,05 мл), пиридина (0,1 мл) и 4-диметиламинопиридина (25 мг) в сухом дихлорметане (10 мл) перемешивают при 20^оС в течение 16 ч. Раствор разбавляют дихлорметаном (30 мл), промывают 2 н. соляной кислотой и высушивают сульфатом магния) и упаривают досуха. Остаток очищают хроматографией на Kieselgel 60 (15). Элюирование из колонки смесью светлой нефти с этилацетатом (4:1) дают названное соединение (5,7 мг) в виде бесцветного вспененного продукта.

[α] _D²⁰ + 159^o (c 0,61, CHCl₃) λ_макс. (EtOH) 2,44 нм (ε = 30,400); ν_макс. (CHBr₃) 3480 (OH), и 1713 см^-1 (сложный эфир),δ (CDCl₃) cодержит 5,5-5,6 (м, 2Н), 4,95 (м, 1Н), 3,93 (д, 10 Гц), 2,55 (септит, J Гц, 1Н), 2,17 (с, 3Н), 1,20 (д, J 7 Гц, 6Н) и 0,70 (д, J 7 Гц, 3Н).

П р и м е р 24. Фактор А, 5-23-ди-н-бутирата.

Раствор фактора А (306 мг), н-бутирового ангидрида (0,33 мг) и 4-диметиламинопиридина (244 мг) в пиридине (5 мл) перемешивают при 20^оС в течение 18 ч, а затем выливают в смесь этилацетата и 2 н. соляной кислоты (50 мл каждого). Органическую фазу промывают 2 н. соляной кислотой, насыщенным бикарбонатом натрия (25 мл), и соляным раствором (25 мл), и высушивают (сульфатом магния) и упаривают досуха. Остаток очищают хроматографией на Kieselgel 60 (40 г). Элюирование из колонки смесью светлой нефти с этилацетатом (5: 1) дают названное соединение (200 мг) в виде бесцветного вспененного вещества.

[α] _D²⁰ + 144^o (c, 1,13, CDCl₃), ν_макс (EtOH), 245 нм (ε = 31800), ν_макс. (CHBr₃) 1720 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) cодержит 5,5-5,6 (м, 2Н), 4,94 (м, 1Н), 3,92 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,39 (m, J 7 Гц, 2Н), и 0,70 (д, J 7 Гц, 3Н), м/з = 752 (М⁺).

Соединения примеров 25-27 получают аналогичным способом:
П р и м е р 25. Фактор А, 5-ацетат, 23-пивалоат (70 мг).

[α]_D²⁰ + 159^o (c 0,69, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε = 29,900), ν_макс (CHBr₃) 3470 (OH) и 1730 и 1710 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) содержит 5,5-5,6 (н, 2Н), 4,95 (м, 1Н), 3,91 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,16 (с, 3Н, 1,22 (с, 9Н), и 0,68 (д, J 7 Гц, 3Н) из фактора А, 5-ацетата (131 мг) и пивалоилхлорида (0,06 мл).

П р и м е р 26. Фактор А, 5-ацетат, 23-бензоат (180 мг).

[α] _D²⁰ + 153^o (c 0,59, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 236 нм (ε = 36,200), ν_макс. (CHBr₃) 3460 (OH) и 1730 и 1707 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) содержит 8,21 (д, J 7 Гц, 2Н), 7,56 (m, J 7 Гц, 1Н), 7,44 (м, J 7 Гц), 5,5-5,6 (м, 2Н), 4,07 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,17 (с, 3Н) и 0,75 (д, J 7 Гц, 3Н), из фактора А, 5-ацетат (327 мл) и ангидрид бензольной кислоты (339 мг).

П р и м е р 27. Фактор А, 5,23-дибензоат (370 мг) и 5-бензоат (200 мг).

Из фактора А (613 мг) и бензоилхлорида (0,35 мл); начальные фракции дают названный дибензоат.

[α] _D²⁰ + 86^o (c 0,65, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 2,36 нм (ε 46,200), ν_макс. (CHBr₃) 3480 (OH), 1710 (сложные эфиры), и 1602 и 1585 см^-1(фенил), δ (CDCl₃): 8,2-8,0 (м, 4Н), 7,7-7,5 (м, 2Н), 7,46 (м, J 7 Гц, 4Н), 5,61 (с, 1Н, 4,07 (д, J 10 Гц, 1Н) и 0,76 (д, J 7 Гц, 3Н).

Последующие фракции дают названный бензоат [α] _D²⁰ + 80^o (c, 0,61, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 2,37 нм (ε 39,200), ν_макс. (CHBr₃) 3500 (OH), 1712 (cложные эфиры), и 1601 и 1585 см^-1 (фенил), δ (CDCl₃): 8,09 (l, 1H).

П р и м е р 28. Фактор А, 5-хлорацетат.

Раствор фактора А (123 мг) и пиридина (0,1 мл) в сухом дихлорметане (5 мл) перемешивают при температуре 0^оС и вводят хлорацетилхлорид (0,3 мл 1М раствор в дихлорметане. Полученный раствор перемешивают при 0^оС температуре в течение 15 мин и затем добавляют еще хлорацетилхлорид (0,1 мл 1М раствора) и продолжают перемешивание дополнительно в течение 15 мин. Раствор разбавляют дихлорметаном (50 мл), затем промывают 2 н. соляной кислотой (2 х 20 мл), и насыщенным бикарбонатом натрия (20 мл), и высушивают (сульфатом магния), и упаривают досуха. Остаток (140 мг) очищают хроматографией в колонке из Kieselgel-60 (15 г). Элюирование из колонки смесью светлой нефти с этилацетатом (4:1) дает названное соединение (90 мг) в виде бесцветного вспененного вещества.

[α] _D²⁰ + 143^o (c, 1,11, CDCl₃), λ_макс. (EtOH) 245,5 нм (ε 30,400); ν_макс. (CHBr₃) 3500 (OH), 1760 (хлорацетат) и 1710 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃): 5,5-5,6 (м, 2Н), 4,18 (с, 2Н), са, 3,81 (м, 1Н), 3,74 (д, J 10 Гц, 1Н) и 0,80 (д, 7 Гц, 3Н); м/з = 688 (М⁺, 35 Cl).

Cоединения примеров 29, 39 и 44 получают аналогичным образом.

П р и м е р 29. Фактор А, 5-бромацетат (447 мг).

[α] _D²⁰ + 132^o (c 0,77, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245,5 нм (ε 31500), ν_макс (CHBr₃) 3495 (OH), 1730 (бромацетат) и 1712 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) включает 5,5-5,6 (м, 2Н), 3,97 (д, J 12 Гц, 1Н), 3,90 (д, J 12 Гц, 1Н), 3,81 (м, 1Н), 3,75 (д, J 10 Гц, 1Н) и 0,81 (д, J 7 Гц, 3Н), из фактора А (613 г) и бромангидрида бромуксусной кислоты (0,13 мл).

П р и м е р 30. Фактор А, 5,23-дихлорацетат.

Смесь фактора А, 5-хлорацетата (365 мг), хлорангидрида хлоруксусной кислоты (0,21 мл) и карбоната кальция (265 мг) в сухом дихлорметане (15 мл) перемешивают при 20^о в течение 48 ч. Полученную суспензию разбавляют дихлорметаном (50 мл), затем промывают 2 н. хлористоводородной кислотой и насыщенным бикарбонатом натрия, высушивают (сульфат магния) и выпаривают досуха. Остаток очищают хроматографией на колонке Kieselgel 60 (30 г). Элюирование колонки смесью петролейный эфир: этилацетат (4:1) дает названное соединение (167 мг) в качестве бесцветной пены, [α]_D²⁰ + 151^o (c 1,17, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 245,5 нм (ε 29400), ν_макс. (CHBr₃) 3470 (OH) и 1725 см^-1 (сложные эфиры), δ (CDCl₃) включает 5,5-5,6 (м, 2Н), 5,00 (м, 1Н), 4,17 (с, 2Н), 4,10 (д, J 15 Гц, 1Н), 4,02 (д, J 15 Гц, 1Н), 3,92 (д, J 10 Гц, 1Н), 0,73 (д, J 7 Гц, 3Н), м/з = 764 (М⁺, 35Cl). Соединения примеров 31, 32 и 40 получают аналогичным образом.

П р и м е р 31. Фактор А, 23-метоксиацетат (92 мг).

[α] _D²⁰ + 157^o (c 0,75; CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244 нм ( 32300); ν_макс. (CHBr₃) 3560 и 3480 (ОН), 1740 (метоксиацетат) и 1712 см^-1(сложный эфир), δ (CDCl₃) включает 5,01 (м, 1Н), 4,28 (т, J 7 Гц, 1Н), 4,01 (с, 2Н), 3,89 (д, J 10 Гц, 1Н), 3,46 (с, 3Н) и 0,71 (д, J 7 Гц, 3Н), из фактора А (184 мг) и метоксиацетилхлорида (0,3 мл).

П р и м е р 32. Фактор А, 23-феноксиацетат (112 мг).

[α] _D²⁰ + 129^o (c 0,75, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε 25,900), ν_макс. (CHBr₃) 3550 и 3470 (ОН), и 1745 и 1708 см^-1 (сложные эфиры), δ (CDCl₃) включает 7,30 (т, J 8 Гц, 2Н), 7,00 (т, 8 Гц, 1Н), 6,94 (д, J 8 Гц, 2Н), 5,02 (м, 1Н), 4,68 (д, J 16 Гц, 1Н), 4,58 (д, J 16 Гц, 1Н), 4,30 (д, J 7 Гц, 1Н), 3,92 (д, 10 Гц, 1Н) и 0,67 (д, J 7 Гц, Н) из фактора А (184 мг) и феноксиацетилхлорида (0,3 мл).

П р и м е р 33. Фактор А, 5,23-ди-(2,2,2-трихлорэтил)карбонат (362 мг).

[α] _D²⁰ + 110^o (c 0,94, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε 28000); ν_макс. (CHBr₃) 3550 и 3460 (ОН), 1750 (карбонат), и 1710 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) включает 5,60 (с, 1Н), 4,89 и 4,75 (ABg, J 12 Гц, 2Н), 4,85 (м, 1Н), 4,81 и 4,71 (ABg, J 14 Гц, 2Н), и 0,79 (д, J 7 Гц, 3Н), из фактора А (306 мг) и 2,2,2-трихлорэтилхлорформата (0,14 мл).

П р и м е р 34. Фактор А, 23-(2,2,2-трихлорэтил)карбонат.

Раствор фактора А, 5,23-ди-(2,2,2-трихлорэтил)карбоната (200 мг) в диоксане (10 мл) перемешивают при температуре приблизительно 20^о и добавляют 1М гидроксида натрия (0,5 мл). Получаемый раствор перемешивают в течение 30 мин, затем прибавляют еще 1М гидроксид натрия (1 мл) и перемешивание продолжают в течение 1 ч. Раствор разбавляют этилацетатом (50 мл), промывают 2 н. хлористоводородной кислотой, высушивают (сульфат магния) и выпаривают досуха. Остаток хроматографируют на колонке Kieselgel 60 (15 г). Элюирование колонки смесью петролейный эфир: этилацетат (2:1) дает названное соединение (80 мг) в качестве бесцветной пены, [α]_D²⁰ + 142^o (c, 0,92, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε 29200), ν_макс. (CHBr₃) 3560 и 3500 (ОН), 1745 (карбонат) и 1710 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) включает 5,40 (с, 1Н), 4,80 и 4,70 (ABg, J 14 Гц, 2Н), 4,28 (м, 1Н) и 0,79 (д, J 7 Гц, 3Н).

П р и м е р 35. Фактор А, 5-ацетат, 23-(2,2,2-трихлорэтан)карбонат (385 мг).

[α] _D²⁰ + 140^o (c, 1,07, CHCl₃) λ_макс. (EtOH) 245,5 нм, (ε 29200); ν_макс. (CHBr₃) 3300-3620 (OH), 1738 (карбонат), и 1720 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) включает 5,53 (с, 1Н), 4,81 и 4,70 (ABg, J 14 Гц, 2Н), 4,84 (м, 1Н), 3,98 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,16 (с, 3Н) и 0,79 (д, J 7 Гц, 3Н), из фактора А, 5-ацетата (393 мг) и 2,2,2-трихлорэтилхлороформата (2 мл 1М раствора в дихлорметане).

П р и м е р 36. Фактор А, 5,23-ди-н-бутират.

Раствор фактора А (306 мг), н-масляного ангидрида (0,33 мл) и 4-диметиламинопиридина (244 мг) в пиридине (5 мл) перемешивают при 20^о в течение 18 ч и затем вливают в смесь этилацетата и 2 н. хлористоводородной кислоты (50 мл каждого компонента). Органическую фазу промывают 2 н. хлористоводородной кислотой, насыщенным бикарбонатом натрия (25 мл) и рассолом (25 мл), высушивают (сульфат магния) и выпаривают до сухости. Остаток очищают хроматографией на колонке Кieselgel 60 (40 г). Элюирование колонки смесью петролейный эфир: этилацетат (5:1) дает названное соединение (200 мг) в качестве бесцветной пены.

[α] _D²⁰ + 144^o (c 1,13, CHCl₃) λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε 31800), ν_макс. (CHBr₃) 1720 cм^-1 (сложные эфиры), δ (CDCl₃) включает 5,5-5,6 (м, 2Н), 4,94 (м, 1Н), 3,92 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,39 (т, J 7 Гц, 2Н), 2,28 (т, J 7 Гц, 2Н) и 0,70 (д, J 7 Гц, 3Н), м/з = 752 (М⁺).

П р и м е р 37. Фактор А, 23-н-бутират.

Раствор фактора А, 5,23-ди-н-бутирата (160 мг) в метаноле (10 мл) перемешивают при 0^о и прибавляют 1М гидроксид натрия (10,25 мл). Получаемый раствор перемешивают в течение 90 мин при температуре 0-5^о, затем прибавляют еще 0,25 мл 1М гидроксида натрия и перемешивание продолжают в течение 4 ч. Раствор вливают в смесь этилацетата (50 мл) и 2 н. хлористово- дородной кислоты (25 мл), органическую фазу промывают водой, рассолом, высушивают (сульфат магния) и выпаривают до сухости. Остаток очищают хроматографией на колонке Kieselgel 60 (20 г). Элюирование колонки смесью петролейный эфир: этилацетат (2: 1) дает названное соединение (68 мг) в качестве бесцветной пены. [α] _D20 + 164^o (c 1,03, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244,5 нм (Е 29600); ν_макс. (CHBr₃) 3550 и 3470 (ОН), и 1710 см^-1(сложные эфиры); δ (CDCl₃), включает 4,93 (м, 1Н), 4,28 (т, J 7 Гц, 1Н), 3,91 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,28 (т, J 7 Гц, 2Н), 1,65 (м, 2Н), 0,94 (т, J 7 Гц, 3Н) и 0,69 (д, J 7 Гц, 3Н), м/з = 682 (М⁺).

Соединение примера 38 получают аналогичным образом:
П р и м е р 38. Фактор А, 23-метилкарбонат (155 мг).

[α] _D²⁰ + 169^o (c, 0,81, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 245 нм (Е 26600); ν_макс. (CHBr₃) 3300-3610 (OH), 1735 (карбонат), и 1710 см^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) включает 5,40 (с, 1Н), 4,28 (м, 1Н), 3,94 (д, J 10 Гц, 1Н), 3,77 (с, 3Н), и 0,76 (д, J 7 Гц, 3Н); м/з = 670 (М⁺), из фактора А, 5-ацетата, 23-(2,2,2-трихлорэтил)карбоната (300 мг).

П р и м е р 39. 23-Деокси-фактор А, 5-метилкарбонат (57 мг).

[α]_D²⁰ + 152^o (c, 0,6, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 244,5 нм (Е 28200); ν_макс. (CHBr₃) 3530 и 3460 (ОН), 1740 (карбонат) и 1707 см^-1 (сложный эфир); δ (CDCl₃) включает 5,55 (с, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 3,42 (д, J 10 Гц, 1Н) и 0,69 (д, J 4 Гц, 3Н), из 23-деокси-фактора А (90 мг) и метилхлорформата (0,3 мл 1М раствора в дихлорметане).

П р и м е р 40. Фактор А, 23-хлорацетат (193 мг).

[α] _D²⁰ + 162^o (c, 1,04, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε 28900); ν_макс. (CHBr₃) 3320-3620 (OH), 1748 (хлорацетат), и 1710 см^-1 (сложный эфир); δ (CDCl₃) включает 5,42 (с, 1Н), 4,28 (м, 1Н), 4,09 и 4,01 (ABg, J 15 Гц, 2Н), 3,91 (д, J 10 Гц, 1Н) и 0,73 (д, J 7 Гц, 3Н), м/з = 688 (М⁺, 35Cl) из фактора А (306 мг) и хлорангидрида хлоруксусной кислоты (0,2 мл).

П р и м е р 41. Фактор А, 5,23-дипропионат (387 мг).

[α] _D²⁰ + 157^o (c, 0,96, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 244,5 нм (ε 30200); ν_макс. (CHBr₃) 3500 (OH) и 1720 см^-1 (сложные эфиры); δ (CDCl₃) включает 5,52 (с, 1Н), 3,93 ( , J 10 Гц, 1Н), 2,43 (g, J 7 Гц, 2H), 2,32 (д, J 7 Гц, 2Н), 1,18 (т, J 7 Гц, 3Н), 1,16 (т, 7 Гц, 3Н) и 0,70 (д, J 7 Гц, 3Н), м/з = 7,24 (М⁺), из фактора А (613 мг) и пропионового ангидрида (0,5 мл).

П р и м е р 42. Фактор А, 23-пропионат (155 мг).

[α] _D²⁰ + 168^o (c, 1,03, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244,5 (ε 30600); ν_макс. (CHBr₃) 3550 и 3480 (ОН), и 1710 см^-1 (сложный эфир); δ (CDCl₃) включает 5,39 (с, 1Н), 4,27 (м, 1Н), 3,91 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,31 (д, J 7 Гц, 2Н0, 1,14 (т, J 7 Гц, 3Н), и 0,69 (д, 7 Гц, 3Н), м/з = 668 (М⁺), из фактора А, 5,23-дипропионата (327 мг), аналогичным образом для соединения примера 37.

П р и м е р 43. Фактор А, 5-метилкарбонат, 23-кетон (830 мг).

[α] _D²⁰ + 132^o (c 0,82, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε 29800), ИК- и ЯМР-спектры аналогичны тем, которые имеют соединение, описанное в примере 34, из фактора 4, 23-кетона (916 мг) и метилхлороформата (0,23 мл).

П р и м е р 44. Фактор А, 5-бензилкарбонат, 23-кетон (57 мг).

[α] _D²⁰ + 99^o (c 0,4, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245,5 нм (ε 29600); ν_макс. (CHBr₃) 3600, 3550 и 3480 (ОН), 1740 (карбонат) и 1715 см^-1(сложный эфир и кетон); δ (CDCl₃) включает 7,5-7,2 (м, 5Н), 5,57 (с, 1Н), 5,21 (с, 2Н), 3,70 (д, J 10 Гц, 1Н), 2,49 (с, 2Н) и 0,86 (д, J 6 Гц, 3Н), из фактора А, 23-кетона (92 мг) и бензилхлороформата (0,05 мл).

П р и м е р 45. 5-Ацетокси-23-н-бутокси-фактор А.

Карбонат серебра (1 г) прибавляют к раствору 5-ацетоксифактора А (325 мг) в сухом эфире с последующим йодбутаном (0,5 мл) и перхлоратом серебра (550 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч, после чего прибавляют коллидин (0,5 мл). После перемешивания в течение еще 20 мин смесь отфильтровывают и фильтрат промывают последовательно 2 н. хлористоводородной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой. Высушенную органическую фазу выпаривают почти до сухости и масло очищают хроматографией на колонке Merck Kieselgel 60 c размером 230-400 меш (100 мл). Элюирование колонки смесью гексан:этилацетат (3:1) позволяет получить названное соединение в качестве бесцветной пены (276 мг, 78%). [α]_D²⁰ + 160^o (c, 0,94, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε_макс. 28300); δ (CDCl₃) включает 3,16 (м, 1Н), 3,43 (м, 1Н), 3,59 (м, 1Н).

П р и м е р 46. 5-Ацетокси-23-циклопропилметокси-фактор А.

[α] _D²¹ + 174^o (c 1,74, CHCl₃), λ_макс. (Еt0Н) 244 нм (Е 28360), ν_макс. (CHBr₃) 3470 (OH), 1732, 1710 (cложные эфиры) и 998 см^-1 (С-О), δ (CDCl₃) включает 5,5-5,6 (м, 2Н), 3,96 (д, J 10, 1H), 3,49 (м, 1Н), 3,37 (дв. д. J 10, 1H), 3,17 (дв.д. J 10, 1H), 2,16 (с, 3Н), 0,76 (д, J 7, 3H), 0,44 (м, 2Н), 0,22 (м, 2Н), из 5-ацетокси-фактора А и бромметилциклопропана, аналогичным образом для соединения примера 12.

П р и м е р 47. 5-трет-бутилдиметилсилокси-23-метокси-фактор А.

Раствор йодметилмагния в простом эфире 30,35 мл (3М раствора) прибавляют при комнатной температуре под азотом к магнитно перемешанному раствору 5-бутилдиметилсилилокси-фактора А (239 мг в сухом гексаметилфосфортриамиде (18 мл) с бурным выделением газа. Через 30 мин прибавляют йодметан (0,4 мл), полученную смесь перемешивают в течение 5 ч, разбавляя простым эфиром (100 мл) и промывая обильно водой. Эфирный раствор затем промывают рассолом (50 мл) и высушенную органическую фазу выпаривают. Полученную пену (280 мг) очищают хроматографией на колонке Merck Kieselgel 60 c размером 230-400 меш (80 мл). Элюирование смесью гексан:этилацетат (5:1) позволяет получить названное соединение в качестве бесцветной пены (46%), [α]_D²¹ + 142^o (c 1,13, CHCl₃), λ_макс.(EtOH) 244 нм (ε_макс. 27900); ν_макс. (CHBr₃) 3460 (OH), 1708 (широкий; сложный эфир) и 995 см^-1 (С-О); δ (CDCl₃) включает 4,42 (м, 1Н), 3,92 (д 10, 1Н), 3,3-3,4 (м, 2Н), 3,32 (с, 3Н), 0,92 (с, 9Н), 0,75 (Д 7, 3Н) 0,12 (с, 6Н).

Соединение примера 48 получают аналогичным образом:
П р и м е р 48. 5-трет-Бутилдиметилсилилокси-23-н-пропилокси-фактор А.

[α] _D²¹ + 153^o (c 1,16, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε_макс. 29950); ν_макс. (СHBr₃) 3460 (OH), 1705 (сложный эфир) и 995 см^-1 (С-О); δ (CDCl₃) включает 4,44 (м, 1Н), 3,96 (д, 10, 1Н), 3,56 (м, 1Н), 3,45 (м, 1Н), 3,14 (м, 1Н), 0,93 (с, 9Н), 0,75 (д 7, 3Н), 0,13 (с, 6Н) из 5-трет-бутилдиметилсилилокси-фактора А и 1-йодпропана.

П р и м е р 49. 5-Ацетокси-фактор D (923 мг).

[α] _D²¹ + 143,9^o (с, 0,9, CHCl₃); λ_макс.(EtOH) 239 (28700) и 245 нм; (ε_макс. 31000); ν_макс. (CHBr₃) 3490 (OH), 1730 и 1710 (сложный эфир); δ (CDCl₃) 0,81 (д, 7 Гц, 3Н), 0,99 (д, 7 Гц, 3Н), 1,00 (т, 7 Гц, 3Н); 1,53 (с, 3Н), 1,59 (с, 3Н), 1,75 (с, 3Н), 2,16 (с, 3Н), 3,32 (м, 1Н), 3,65 (м, 1Н), 4,04 (д, 6 Гц, 1Н) и 5,53 (м, 2Н), м/з = 640 (M⁺), из фактора D (2,5 г) и уксусного ангидрида (0,47 мл), аналогичным образом для соответствующего соединения примера 5.

П р и м е р 50. 5,23-Диацетокси-фактор D (286 мг).

Т. пл. 147-149^о (ромба из пентана в простом эфире [α]_D²¹ + 152,6^o (c 0,9, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 232,5 (21500) 238 (26600), и 244,5 нм (ε_макс. 28300), ν_макс. (CHBr₃) 1720^-1 (сложный эфир), δ (CDCl₃) 0,72 (д, 6 Гц, 3Н), 0,99 (д, 6 Гц, 3Н), 1,01 (т, 7 Гц, 3Н), 1,53 (с, 3Н), 1,60 (с, 3Н), 1,75 (с, 3Н), 2,02 (с, 3Н), 2,15 (с, 3Н), 3,31 (м, 1Н), 4,04 (д, 6 Гц, 1Н), 4,91 (м, 1Н) и 5,5-5,6 (м, 2Н), м/з = 682 (М⁺), из фактора D (439 мг) и уксусного ангидрида (0,25 мл), аналогичным образом для соединения примера 6.

П р и м е р 51. 23-Ацетокси-фактор D (127 мг).

[α] _D²¹ + 150^o (c 0,5, CHCl₃); λ_макс.(EtOH) 238 (29200) и 244,5 нм; (ε_макс. 15600); ν_макс. (CHBr₃) 3300, 3590 (OH) и 1710 cм^-1 (сложный эфир); δ (CDCl₃) 0,72 (д, J 7 Гц, 3Н), 0,99 (д, J 7 Гц, 3Н), 1,01 (т, J 7 Гц, 3Н), 1,53 (с, 3Н), 1,6 (с, 3Н), 1,86 (с, 3Н), 3,26 (м, 1Н), 3,95 (с, J 6 Гц, 1Н), 4,26 (т, J 6 Гц, 1Н), и 4,01 (м, 1Н), м/з = 640 (M⁺), и/ 5,23-диацетокси-фактора D (207 мг), аналогичным образом для соединения примера 8.

П р и м е р 52. Фактор А, 23-фенилацетат (240 мг).

[α] _D²⁰ + 140 (c, 0,92, CHCl₃); λ_макс. (CHBr₃) 3550 и 3470 (ОН) и 1730 см^-1 (сложные эфиры); δ (СDCl₃) включает 7,32 (с, 5Н), 5,0 (м, 1Н), 4,29 (т, J 7 Гц, 1Н), 3,83 (д, J 10 Гц, 1Н), 3,62 (с, 2Н) и 0,54 (д, J 7 Гц, 3Н) получают способом, аналогичным для соединения примера 32 из фактора А (306 мг) и фенилацетилхлорида (0,33 мл).

П р и м е р 53. 23-Этокси-фактор А.

Раствор 5-ацетокси-23-этокси-фактора А (306 мг) в метаноле (18 мл) охлаждают в ледяной бане, затем вводят 1 н. водный раствор гидроксида натрия (1 мл) и полученный раствор светло-желтого цвета перемешивают в ледяной бане в течение 1,25 ч. Раствор разбавляют этилацетатом (80 мл), затем последовательно промывают 1 н. хлористоводородной кислотой, водой и соляным раствором. Высушенную органическую фазу выпаривают и полученную в результате этого смолу очищают хроматографией на Merck Kieselgel 60 с размером частиц двуокиси кремния 230-400 меш. (200 мл). Элюирование из колонки 15% -ным этилацетатом в дихлорметане дает названное соединение в виде бесцветной пены (623 мг) [α]_D²¹ + 178 (c, 1,13, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε_макс. 29400); δ (CDCl₃) включает 4,29 (т, 7, 1Н), 5,65 (м, 1Н), 3,47 (м, 1Н), 3,26 (м, 2Н), 1,15 (т, 7, 3Н).

Соединения примеров 54-57 получены аналогичным образом.

П р и м е р 54. 23-н-бутокси-фактор А (61%) получают в виде бесцветной пены.

[α] _D²¹ + 161 (c, 1,47, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε 33100); δ (СDCl₃) включает 4,30 (т, 7, 1Н), 3,60 (м, 1Н), 3,43 (м, 1Н), 3,17 (м, 1Н) из 5-ацетокси-23-н-бутокси-фактора А.

П р и м е р 55. 23-н-Пропокси-фактор А (83%) получают в виде бесцветной пены.

[α] _D²¹ + 165^o (c 1,01, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 2,45 нм (ε 30,970), (CDCl₃) включает 4,29 (т, 7; H), 3,55 (м, 1Н), 3,13 (м, 1Н), из 5-ацетокси-23-н-пропокси-фактора А.

П р и м е р 56. 23-Метокси-фактор А (66%) получают в виде бесцветной пены [α]_D²¹ + 175^o (c 101, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 244 нм ( 19,10); δ (СDCl₃) включает 4,29 (т, J 7; 1H), 3,40 (м, 1Н), 3,33 (с, 3Н) из 5-ацетокси-23-метокси-фактора А.

П р и м е р 57. 23-Циклопентилокси-фактор А (75%) получают в виде бесцветной пены.

[α] _D²¹ + 160^o (c 1,65, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 244 нм (ε 19,800); δ (CDCl₃) включает 4,29 (т, J 7, 1H), ca 3,96 (невидимый м, 1Н), 3,95 (д, J 5, 1H), 3,91 (д, J 10, 1H), 0,69 (д, 7, 3Н) из ацетокси-23-циклопентилокси-фактора А.

П р и м е р 58. (а) 5-ацетокси-23-аллилокси-фактор А.

Салицилат серебра (872 мг) добавляют к раствору 5-ацетокси-фактора А (207 мг) и аллилиодида (1,0 мл) в сухом простом эфире (25 мл), и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 дней, после чего фильтруют. Фильтрат выпаривают с получением желтого масла, которое очищают хроматографией на колонке Merck Keiselgel 60, 230-400 меш. Элюирование смесью дихлорметан с этилацетатом (19:1) даст названное соединение в виде бесцветной пены (105 мг).

[α] _D²¹ + 152^o (c, 1,00, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε 22000); δ (CDcl₃) включает 3,54 (м, 1Н), 4,14 (м, 1Н).

Аналогичным образом получают следующие соединения:
(b) 5-Ацетокси-23-н-пропилокси-фактор А, получают из 5-ацетокси-фактора А и н-пропилиодида. При очистке хроматографией на колонке Merck Keiselgel 60 с размером частиц двуокиси кремния 230-400 меш. и элюировании смесью гексана с этилацетатом (3: 1) получают названное соединение в виде бесцветной пены.

[α] _D²¹ + 160^o (c 0,75, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245 нм (ε, 27600);δ (CDCl₃) включает 3,33 (с, 3Н), 3,39 (м, 1Н).

(с) 5-Ацетокси-23-метокси-фактора А получают из 5-ацетокси фактора А и метилйодида. Названное соединение получают в виде бесцветной пены.

[α] _D²¹ + 159^o (c, 0,98, CHCl₃), λ_макс. (EtOH) 245 нм, (ε, 27600), δ (CDCl₃) включает 3,33 (с, Н), 3,59 (м, 1Н).

П р и м е р 59. 5-Ацетокси-23-этокси-фактор А получают из 5-ацетокси-фактора А и этилйодида. Названное соединение выходит в виде бесцветной пены.

[α] _D²¹ + 1,670 (c 1,02, CHCl₃); λ_макс. (EtOH) 245 нм, (ε, 28070),δ (CDCl₃) включает 3,25 (м, 1Н), 3,46 (м, 1Н), 3,64 (3м, 1Н), получаемое способом, аналогичным для соединения примера 12.

Испытание соединений (1) является основным тестом на нематоцидальную активность. По мнению заявителя все соединения, рассматриваемые в примерах, являются активными в этом тесте, однако, в настоящее время, заявитель не может это подтвердить экспериментально. Испытания (2) и (3) являются более конкретными; соединения примеров 6, 8, 18, 20, 21, 23, 32, 37, 42, 46, 52-55, 58а, 58b, 59 являются активными в этих испытаниях.

Исходя из этого сравнения, можно ожидать, что и другие соединения рассматриваемой заявки обладают указанными преимуществами.

При этом следует отметить, что соединения (авермектины и милбемицины) принадлежат к другим видам соединений. В частности, они имеют другой заместитель (простую алкильную группу) в 25-положении, по сравнению с незамещенной группой соединений настоящего изобретения, и этот факт может повлиять на свойства соединений непредсказуемым образом. Кроме того, 25-заместители соединений настоящей заявки не могут быть образованы путем стандартных модификаций соединений прототипов.

Кроме того, следует заметить, что соединения прототипов являются незамещенными или имеют простую ОН-группу в 23-положении, а также имеют лишь встречающихся в природе заместителей (ОН или метокси) в 5-положении. В указанных прототипах нет каких-либо указаний на то, что эти группы могут быть модифицированы, как это предполагается в настоящей заявке.

1. Активность против Caenorhabditis elegans.

Соединения настоящего изобретения исследовали на их активность против свободноживущей нематоды Caenorhabditis elegans. Растворы или суспензии соединений приготавливали в метаноле, а серийные разведения делали (400 мкг/мл и ниже) в 20%-ном пропиленгликоле. Каждые 10 мкл полученных растворов смешивали с 20 мкл водного раствора, содержащего 100-200 Caenorhabditis elegans личинок, и полученный раствор выдерживали в течение 20 ч при комнатной температуре.

В описанном выше тесте соединения, рассматриваемые в примерах, в основном, через 20 ч оказывали уничтожающее - парализующее действие на >98% гусениц при концентрации <10 мкг/мл.

2. Активность против Nematospiroides dubius.

Определяли эффективность соединений настоящего соединения против Nematospiroides dubius, которыми заражали мышей. Самок мышей СР/H 18-22 г заражали 100 < 3-личинок N. dubius и инфекцию личинками доводили до зрелости (обычно за 3 недели). Затем мышей обрабатывали путем лишь одного перорального введения соединения настоящего изобретения в одно из 3/4. Соединения вводили в виде раствора в пропиленгликоле. Затем мышей оставляли по крайней мере на 3 дня, обычно на 5 дней, для дозревания инфекции, после чего мышей забивали и удаляли тонкую кишку. Вырезанную часть тонкой кишки расщепляли тупоконечными ножницами для выделения слизистой оболочки тонкой кишки. Взрослые личинки собирали с помощью модифицированного аппарата Baarnmann. Время миграции составляло 5 ч, и во время этого периода миграции личинок поддерживалась температура 37^оС. Через 5 ч нейлоновую марлю, через которую мигрировали нематоды, исследовали через 2 х - увеличительное стекло. Затем подсчитывали количество нематод, задержанных марлей, и пропущенных через марлю, получая тем самым общее количество нематод для каждой мыши, и результаты сравнивали с контрольными.

Таким образом, с помощью указанной процедуры установили, что при использовании дозы соединений настоящего изобретения в 10 мг/кг можно достичь значительного снижения количества нематод у обработанных мышей. Например, соединения примеров 6, 8, 18, 20, 21, 23, 32, 37, 42, 46, 52-55, 58А, 58В и 59 показали процент снижения количества нематод у обработанных мышей, по сравнению с контрольными более чем 80%.

3. Активность против различных экто- и эндопаразитов для различных животных.

(а) С помощью лишь одной дозы (800 мкг/кг) соединения примера 53, введенной внутривенно или подкожно, достигалось полное уничтожение Cooperia oncophera у телят, зараженных этим гельминтом.

(с) соединение примера 53 является абсолютно эффективным при его пероральном введении в дозе 200 мкг/кг лошадям, инфицированным Parascoris.

(d) Соединение примера 53 является таким же эффективным, как и Ивермектин, при уничтожении как личинок, так и взрослых особей Osteitagia ciraimcineta, Trichostrongylus axei, Haemonchus contortus, Nematodirus spathiger, Cooperia curticei, Trichostrongylus vitrinus, при пероральной дозе введения 200 мкг/кг.

(е) Соединение примера 53 обладает абсолютной эффективностью при обработке собак, зараженных Тохоса, путем перорального введения дозы 150 мкг/кг указанного соединения.

(f) Соединение примера 53, введенное подкожно свиньям, зараженным Oesophagostomum, в дозе 800 мкг/кг показало эффективность >98%.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МАКРОЛИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ общей формулы I

где R₁ - изопропил;
R₃ - водород,
R₂ - группа OR₅, где OR₅ является - OCOR₆-группа, где R₆ - C₁ - C₄-алкил, необязательно замещенный феноксигруппой или фенилом, или C₃C₅-циклоалкил, или OR₇, где R₇ - C₁ - C₄-алкил, необязательно замещенный C₃ - C₅-циклоалкилом, или C₃ - C₅-алкенил;
OR₄ - OH или - OCOR_4a-группой, где R_4a - C₁ - C₄-алкил,
отличающийся тем, что осуществляют реакцию соответствующего соединения формулы I, где один или оба из радикалов R₂ и OR₄ являются гидроксильной группой, с гидроксилзамещающим реагентом общей формулы II
R₆COOH или R_4aCOOH,
или его реакционноспособным производным, или соединением общей формулы III:
R₇Y,
где R₆, R₇ и R_4а имеют указанные значения;
Y - хлор, бром или йод.

Приоритет по признакам:
30.04.85 при R₁ - изопропил, R₂ - OR₅, R₃ - H, где OR₅ - OCOR₆-группа, где R₆ - C₁ - C₄-алкил, необязательно замещенный феноксигруппой или фенилом, или C₃ - C₅-циклоалкил, OR₄ - гидроксильная группа или - OCOCR_4а-группа, где R_4a - C₁ - C₄-алкил;
12.03.86 при R₁ - изопропил, R₂ - OR₅, R₃ - H, где OR₅ - OCOR₆-группа, где R₆ - C₁ - C₄-алкил, необязательно замещенный феноксигруппой или фенилом, или C₁ - C₅-циклоалкил, или OR₇-группа, где R₇ - C₁ - C₄-алкил, необязательно замещенный C₃ - C₅-циклоалкилом или C₃ - C₅-алкенил; OR₄ - гидроксильная группа или - OCOR_4а-группа, где R_4a - C₁ - C₄-алкил.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2