Способ профилактики хламидийной бронхопневмонии телят
Владельцы патента RU 2246309:
Государственное научное учреждение (ГНУ) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации (НИВИ НЗ РФ) (RU)
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для профилактики хламидийной бронхопневмонии телят. Телятам с 12-дневного возраста в качестве тетрациклинового препарата применяют фурациклин М и дополнительно пробиотик - окарин в течение 10 дней по следующей схеме: фурациклин М в дозе 0,4-0,5 г/кг живой массы 2 раза в сутки, окарин - в дозе 8×106 микробных клеток 1 раз в сутки на ночь. Данное изобретение способствует повышению функциональной активности нейтрофилов крови, увеличению содержания Т и В-лимфоцитов и активизации их функции, что в свою очередь способствует повышению естественной резистентности организма телят. 5 табл.
Изобретение относится к ветеринарии, касается способа профилактики хламидиоза, в частности хламидийной бронхопневмонии телят, и может быть использовано для повышения сохранности молодняка крупного рогатого скота.
Хламидиозы - группа контагиозных болезней млекопитающих, птиц и человека, вызываемых антигенно родственными и морфологически аналогичными микроорганизмами - хламидиями.
Хламидиозы характеризуются по патогенезу и клиническому проявлению как респираторные, энтеритные, урогенитальные, суставные, неврологические, глазные, а также общегенерализованно выраженные заболевания, поражающие все органы и системы. Они протекают остро, хронически и бессимптомно, причем больные длительное время остаются хламидионосителями.
Хламидийная бронхопневмония (респираторная форма болезни) чаще возникает у молодняка до 6-месячного возраста. По некоторым данным при респираторных инфекциях хламидийная бронхопневмония регистрируется в 70% случаев. Болезнь протекает в виде энзоотии, заболевают преимущественно телята с 15-20-дневного возраста и старше вследствие инфицирования респираторного тракта на фоне низкого гуморального (колострального) и клеточного иммунитета. Болезнь часто осложняется секундарной (вторичной) инфекцией вследствие активизации и проявления патогенного воздействия микроорганизмов - обитателей верхних дыхательных путей или транслоцированных из кишечника на фоне ослабления барьерных функций организма. При этом бронхопневмония протекает в тяжелой форме с летальным исходом до 30-40% и выше.
Известны способы лечебно-профилактического вмешательства при хламидиозах, включающие применение тетрациклиновых препаратов, обладающих хламидиостатическим действием, в частности биомицина при хламидийной бронхопневмонии (1).
Применяют кормовые антибиотики группы тетрациклинов (биовит, биотетракорм) с 20-30-дневного до 3-4-месячного возраста в дозе 10-15 г активного вещества на 1 кг живой массы 2 раза в день, чередуя препараты подекадно (2).
В качестве предпочтительного аналога нами рассматривается способ лечебно-профилактического вмешательства, включающий применение биовита-80 - препарата антибиотика хлортетрациклина с витамином B12 (3).
Общим недостатком известных способов является низкая профилактическая эффективность вследствие слабо выраженного влияния антибиотика на биохимические процессы у здоровых животных по сравнению с больными; появления вторичных дисбактериозов в результате нарушения кишечного микробиоценоза (количественная перестройка кишечного биоценоза и резкое изменение качественных характеристик у составляющих его сочленов) и антибиотикорезистентных штаммов. Кроме того, длительное применение тетрациклиновых препаратов сопровождается многочисленными побочными явлениями, связанными с поражением слизистых оболочек, подавлением местного иммунитета и факторов естественной резистентности.
Цель изобретения - повышение эффективности.
Поставленная цель достигается применением в качестве тетрациклинового препарата композиционного препарата фурациклин М в сочетании с препаратом окарин.
Фурациклин М - лечебно-профилактическое средство, содержащее композицию антибактериальных средств, представленную окситетрациклина гидрохлоридом, норсульфазолом, фурагином, и комбинацию витаминов, представленную тиамина бромидом и белатином в качестве источника витаминов группы В, которые не синтезируются в кишечнике телят до 3-4-месячного возраста, но необходимы для нормального пищеварения, регуляции обмена веществ, в частности белкового, стимуляции гемопоеза, повышения устойчивости организма к инфекции. При назначении антибиотиков и сульфаниламидов резко возрастает потребность организма в витаминах группы В (4).
Пробиотик окарин представляет собой лиофилизированную биомассу живых микробных культур - представителей нормальной микрофлоры кишечника здорового человека, включающих три штамма кишечных палочек и фекальный энтерококк. Микробы, входящие в состав препарата окарин, участвуют в формировании пристеночной микрофлоры кишечника, характеризуются низкой метаболической активностью и репродуктивностью, что обусловливает их антибиотикоустойчивость. Высокая адгезивность обеспечивает подавление роста патогенной и условно патогенной микрофлоры, способствуя росту бифидо- и лактобактерий (5).
Способ осуществляется следующим образом.
Телятам с 12-дневного возраста в течение 10 дней дают внутрь с молоком фурациклин М в дозе 0,4-0,5 г/кг живой массы 2 раза в сутки и окарин - в дозе 8×106 микробных клеток в 100 мл кипяченой и остуженной до температуры 38-39°С воды 1 раз в сутки на ночь.
Проверка заявленного технического решения на соответствие критерию “изобретательский уровень” показала, что ни в научной, ни в патентной литературе не выявлено совокупности признаков, указанной в отличительной части формулы изобретения. Сочетанное применение пробиотика окарина и композиционного препарата фурациклин М, отдельные компоненты которого обладают иммуносупрессорными свойствами, обеспечивает коррекцию ключевых нарушенных звеньев иммунной системы, преимущественно клеточного звена иммунитета, в результате повышения функциональной активности нейтрофилов крови, увеличения содержания Т- и В-лимфоцитов и активизации их функции, которое играет основную роль при хламидийных инфекциях.
Эффективность способа профилактики сочетанным применением фурациклина М и окарина определяли в условиях 3 хозяйств Нижегородской области с высоким уровнем комплементсвязывающих антител (от 1:16 до 1:256) у 50-60% здоровых животных, что свидетельствовало о наличии в этих хозяйствах латентной инфекции. Заболеваемость хламидийной бронхопневмонией у телят 15-20-дневного возраста составляла 57-63%. Диагноз подтверждали клиническими, патологоанатомическими методами и лабораторными исследованиями согласно “Методическим указаниям по лабораторной диагностике хламидийных инфекций у животных”, утвержденных департаментом ветеринарии МСХ РФ, 30.06.99 г. Ситуация усугублялась иммунодефицитами, которые выявляли у клинически здоровых телят 12-15-дневного возраста (таблица 1).
| Таблица 1 | ||
| Иммунный статус телят 12-15-дневного возраста | ||
| Показатели | Клинически здоровые телята неблагополучного хозяйства | Клинически здоровые телята благополучного хозяйства |
| Лейкоциты, 109/л | 6,3±0,5 | 6,9±0,3 |
| Лимфоциты, % | 45,0±1,5 | 59,2±1,6 |
| Т-лимфоциты, % | 18,9±1,2 | 29,7±1,3 |
| В-лимфоциты, % | 7,1±0,4 | 10,9±0,9 |
| Функциональная активность нейтрофилов крови в НСТ-тесте, % | ||
| - спонтанном | 6,8±0,9 | 8,2±0,3 |
| - индуцированном | 16,8±1,0 | 25,6±1,2 |
| Бактерицидная активность сыворотки крови, % | 36,2±1,8 | 60,0±1,6 |
| Лизоцимная активность сыворотки крови, % | 2,2±0,2 | 3,2±0,1 |
| β-лизинная активность сыворотки крови, % | 18,6±1,4 | 28,2±1,2 |
Как видно из таблицы 1, у клинически здоровых телят неблагополучного по хламидиозу хозяйства отмечались иммунные нарушения клеточного звена, в частности лимфопения, снижение функциональной активности нейтрофилов крови и основных показателей естественной резистентности по сравнению с телятами-аналогами благополучного по данному заболеванию хозяйства.
Так, относительное содержание лимфоцитов было ниже на 24, Т-лимфоцитов на 36,4, В-лимфоцитов на 34,9%, функциональная активность нейтрофилов крови в спонтанном тесте на 17, в индуцированном на 34,4%, бактерицидная активность сыворотки крови на 39,9, лизоцимная активность на 31,3, β-лизинная активность сыворотки крови на 34%.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1. Для определения действия препарата окарин в дозе 8×106 микробных клеток при однократном суточном приеме в течение 10 дней на иммунный статус телят в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по хламидийной бронхопневмонии, формировали 3 группы телят 12-дневного возраста по 10 голов в каждой. Телят всех групп кормили в соответствии с технологией выращивания. Телятам 1-й и 2-й групп 1 раз в сутки в течение 10 дней давали внутрь биовит-80 в дозе 0,25 г/кг живой массы, телятам 1-й группы дополнительно давали внутрь окарин в дозе 8×106 микробных клеток 1 раз в сутки на ночь в течение 10 дней. Телята 3-й группы препаратов не получали.
Иммунный статус телят после курса профилактики оценивали по абсолютному количеству лейкоцитов, относительному содержанию лимфоцитов (определяли общепринятыми методами), относительному содержанию Т- и В-лимфоцитов (определяли методом розеткообразования), по показателям функциональной активности нейтрофилов крови (определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия по А.Н.Маянскому и др., 1979), бактерицидной активности сыворотки крови (определяли по методу О.В.Смирновой, Т.А.Кузьминой, 1966), лизоцимной активности сыворотки крови (определяли по методу В.Г.Дорофейчук, 1968). Общепринятыми методами бактериологического анализа от всех телят исследовали пробы фекалий на предмет определения состояния нормобиоза кишечной микрофлоры. Результаты исследований представлены в таблицах 2 и 3.
| Таблица 2 | |||
| Иммунный статус телят после профилактического курса | |||
| Показатели | Группы телят | ||
| первая | вторая | третья | |
| Лейкоциты, 109/л | 8,9±0,2 | 8,0±0,5 | 6,9±0,4 |
| Лимфоциты, % | 52,0±1,2 | 50,3±0,9 | 45,1±0,5 |
| Т-лимфоциты, % | 25,9±0,4 | 21,7±0,3 | 17,0±0,9 |
| В-лимфоциты, % | 11,9±0,7 | 8,5±0,8 | 7,0±0,4 |
| Функциональная активность нейтрофилов крови (НСТ- тест), %: | |||
| - спонтанный | 7,8±0,3 | 7,0±0,3 | 6,1±0,2 |
| - индуцированный | 28,7±1,2 | 20,5±1,5 | 15,4±0,5 |
| Бактерицидная активность сыворотки крови, % | 43,4±1,4 | 36,0±1,1 | 32,1±0,9 |
| Лизоцимная активность сыворотки крови, % | 5,0±0,5 | 3,8±0,3 | 3,0±0,3 |
Из данных таблицы 2 видно, что сочетанное применение препарата биовит-80 и окарина телятам 1-й группы способствовало более выраженному повышению показателей иммунного статуса по сравнению со 2-й и 3-й группами. При этом абсолютное содержание лейкоцитов увеличилось на 11,3 и 29%, относительное содержание лимфоцитов - на 3,4 и 15,3%, Т-лимфоцитов - на 19,4 и 52,4%, В-лимфоцитов - на 40 и 70% соответственно, функциональная активность нейтрофилов крови в спонтанном тесте повысилась на 11,4 и 27,9%, в индуцированном - на 40 и 86,4%, бактерицидная активность - на 20,6 и 35,2%, лизоцимная активность сыворотки крови - на 31,6 и 66,7% соответственно.
| Таблица 3 | |||
| Результаты микробиологических исследований фекалий телят 22-дневного возраста | |||
| Показатели | Количество выделенных микроорганизмов, lg/г | ||
| Группы телят | |||
| первая | вторая | третья | |
| Резидентная микрофлора: | |||
| Бифидобактерии | 10-11 | 6-7 | 1-2 |
| Лактобактерии | 7-8 | 3-4 | 0-1 |
| Эшерихии | 6-7 | 6-8 | 7-9 |
| Энтерококки | 3-4 | 4-6 | 5-7 |
| Бактероиды | 2-4 | 2-5 | 4-6 |
| Клостридии | 1-2 | 2-3 | 2-5 |
| Кандиды | 0-1 | 1-2 | 3-4 |
| Транзиторная микрофлора: | |||
| Клебсиеллы | 0 | 0 | 0-1 |
| Цитробактеры | 0-1 | 1-2 | 1-3 |
| Энтеробактеры | 1-2 | 1-2 | 4-5 |
| Псевдомонады | 0 | 0 | 0 |
| Протеи | 0 | 1-2 | 2-4 |
Как видно из данных таблицы 3, сочетанное применение телятам 1-й группы препарата биовит-80 и окарина способствовало нормализации кишечного микробиоза со становлением доминирующего положения резидентной микрофлоры и основных по физиологической значимости ее представителей - бифидо- и лактобактерий. Преобладание бифидо- и лактобактерий в кишечнике обеспечивало иммуностимулирующий эффект и колонизационную резистентность, препятствуя размножению патогенных и условно патогенных микроорганизмов, их транслокации и возникновению эндогенной инфекции. Снижение количества бифидобактерий менее 7 lg/г и лактобактерий менее 2 lg/г кишечного содержимого телят 2-й и 3-й групп указывало на различной степени нарушения кишечного микробиоценоза.
Пример 2. Сравнительную эффективность заявленного и известных способов профилактики оценивали по результатам клинических и бактериологических исследований проб фекалий и носоглоточной слизи телят.
Подбирали 3 группы телят 12-дневного возраста по 43 головы в каждой. Телят кормили в соответствии с технологией выращивания. Телятам 1-й группы (опытной) в течение 10 дней давали внутрь фурациклин М и окарин по схеме: фурациклин М в дозе 0,5 г/кг живой массы 2 раза в сутки и окарин в дозе 8×106 микробных клеток 1 раз в сутки на ночь. Телятам 2-й группы (способ-прототип) - давали внутрь биовит-80 в дозе 0,25 г/кг живой массы 1 раз в сутки в течение 10 дней. Телятам 3 группы (базовый способ) вводили внутримышечно окситетрациклин в дозе 9 мг/кг живой массы 2 раза в сутки в течение 10 дней.
За подопытными телятами вели клинические наблюдения. Профилактическую эффективность оценивали по количеству заболевших телят, проценту сохранности и среднесуточному приросту живой массы за первый месяц жизни.
По окончании профилактических обработок провели бактериологические исследования проб фекалий на предмет обнаружения бифидобактерий с использованием среды Блаурока и лактобактерий - среды МРС-4. Носоглоточную слизь от живых и павших телят исследовали на предмет обнаружения бактерий с последующим определением их патогенности общеринятыми методами бактериологического анализа.
Результаты клинических исследований представлены в таблице 4.
| Таблица 4 | |||
| Сравнительная эффективность заявленного и известных способов профилактики хламидийной бронхопневмонии телят | |||
| Показатели | Группы телят | ||
| Первая - заявленный способ | Вторая - способ-прототип | Третья - базовый способ | |
| Количество телят, подвергнутых профилактической обработке, гол. | 43 | 43 | 43 |
| Из них заболело с признаками хламидийной бронхопневмонии, гол. (%) | 2(4,6) | 5(11,6) | 11(25,6) |
| Пало телят, гол. (%) | 0 | 1(2,3) | 3(7) |
| Профилактическая эффективность, % | 95,4 | 88,4 | 74,4 |
| Сохранность, % | 100 | 97,7 | 93 |
| Среднесуточный прирост живой массы за 1-й месяц жизни, г | 517 | 445 | 377 |
Как видно из данных таблицы 4, клинические данные подтвердили эффективность заявленного способа профилактики хламидийной бронхопневмонии телят в сравнении с прототипом и базовым способом, что выражалось в снижении заболеваемости на 7 и 21% соответственно, повышении их сохранности до 100 в сравнении с 97,7 и 93% соответственно и среднесуточного прироста массы тела за первый месяц жизни на 16,2 и 37% соответственно.
При бактериологических исследованиях проб фекалий у 22-дневных телят 1-й группы, получавших внутрь фурациклин М и окарин, количество бифидобактерий составило 9-12 lg/г, лактобактерий - 2-4 lg/г; у телят 2-й группы, получавших внутрь биовит-80, количество бифидобактерий составило 6-7 lg/г, лактобактерий - 1-2 lg/г; у телят 3-й группы количество бифидобактерий составило 2-4 lg/г, лактобактерий - 1-2 lg/г.
Результаты микробиологических исследований носоглоточной слизи телят представлены в таблице 5.
| Таблица 5 | |||
| Микробиологические показатели носоглоточной слизи телят | |||
| Группы телят | |||
| Выделенные микроорганизмы | 1-я (заявленный способ), n=43 | 2-я (способ- прототип), n=43 | 3-я (базовый способ), n=43 |
| Стафилококки | |  |  |
| Стрептококки |  |  |  |
| Пептококки |  |  |  |
| Эшерихии |  |  |  |
| Клебсиеллы |  |  |  |
| Пастереллы |  |  |  |
| Сальмонеллы |  |  |  |
| Псевдомонады |  |  |  |
| Всего |  |  |  |
Примечание: в числителе - количество выделенных культур, в знаменателе - количество патогенных культур.
Из данных таблицы 5 видно, что из верхних дыхательных путей телят 1 -и группы изолировано 80 непатогенных культур, представленных 5 родами микроорганизмов, в основном грамположительными кокками, при этом стафилококки обнаружены в 67,4% проб, стрептококки - в 60,5% проб, пептококки - в 48,8% проб, эшерихии и клебсиеллы - в 4,7% проб.
От телят 2-й группы выделено 106 культур микроорганизмов, представителей 7 родов, при этом 13,2% культур оказались патогенными. У телят 3-й группы микрофлора верхних дыхательных путей была представлена 8 родами, и из 172 выделенных культур были патогенными 55 или 32%.
Полученные результаты указывают на то, что на фоне снижения барьерных функций и резистентности организма у телят 2-й и особенно 3-й групп происходит активизация коменсалов - представителей условно патогенной микрофлоры, проявления ее патогенного воздействия, осложняющего хламидийную инфекцию.
Проведенные исследований подтвердили эффективность сочетанного применения фурациклина М и окарина при хламидийной бронхопневмонии в условиях длительного хламидионосительства, т.е. иммунологического прессинга. Предложенная комбинация позволяет существенно снижать побочные эффекты, обеспечивает иммунокоррекцию ключевых нарушенных звеньев иммунитета и повышение естественной резистентности организма.
Источники информации
1. Хламидиозы сельскохозяйственных животных./ Н.Э.Хазипов, Х.З.Гаффаров, Р.А.Игафикова и др. - М.: Колос, 1984. - С.94-95.
2. Сулейманов С.М. Предупреждение респираторных болезней телят//Ветеринария. - 1986, №11. - C.11-13.
3. Хламидиоз КРС и меры борьбы с ним. Методические рекомендации. Чебоксары, 2001. - С.47.
4. Наставление по применению фурациклина М в ветеринарии №13/5-2/1850.
5. Кульчицкая М.А. Современные аспекты биотехнологии пробиотиков//Проблемы ветеринарии на рубеже веков: Сб. научн. тр. НГСХА, Н. Новгород, 2001. - С.293-296.
Способ профилактики хламидийной бронхопневмонии телят, включающий применение внутрь тетрациклинового препарата, отличающийся тем, что телятам с 12-дневного возраста в качестве тетрациклинового препарата применяют фурациклин М и дополнительно пробиотик окарин в течение 10 дней по следующей схеме: фурациклин М в дозе 0,4-0,5 г/кг живой массы 2 раза в сутки, окарин - в дозе 8×106 микробных клеток 1 раз в сутки на ночь.
