Способ моделирования хронического среднего отита

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и может быть использовано для моделирования хронического среднего отита. Сущность способа заключается в инфицировании полости среднего уха лабораторного животного введением культуры стафилококка. Перед инфицированием у животного вызывают иммунодефицит путем подкожного введения эмульсии гидрокортизона ацетата 2,5% в дозе 20 мг/100 г массы тела, а через 3 суток после инфицирования формируют стойкую перфорацию барабанной перепонки путем многократного прокола и расширения полученного дефекта перепонки к периферии. Использование данного изобретения позволит усовершенствовать способ моделирования хронического гнойного среднего отита.

 

Изобретение относится к области экспериментальной медицины, а именно к моделированию хронического гнойного среднего отита, и может найти применение при изучении механизмов патогенеза и для оценки эффективности различных способов лечения его.

Известен способ моделирования хронического среднего отита у кроликов породы шиншилла путем помещения в предварительно травмированную слуховую буллу марлевого тампона, пропитанного 0,2 мл взвесью культуры стафилококка (Меланьин В.Д., Ботпаев А.К. Репаративная перестройка формалинизированных костных гомотрансплантатов после хирургической облитерации барабанной буллы кроликов. Вестник оториноларингологии. - 1977. - №3. - С.35-41).

Данный способ не позволяет получить воспалительный процесс, приближенный к клиническому течению моделируемой патологии, так как инородное тело в полости среднего уха вызывает дополнительные альтеративные изменения вследствие нарушения кровоснабжения и давления на ткани.

Известен также способ моделирования хронического воспаления среднего уха у собак путем введения в полость среднего уха методом тимпанальной пункции 0,3 мл раствора скипидара, вызывающего асептический некроз, с последующим введением в барабанную полость 0,5 мл взвеси стафилококка (Баранов В.П. Морфологические изменения аллотрансплантатов наковальни в условиях хронического гнойного отита в эксперименте. Вестник оториноларингологии. - 1977. - №3. - С.31-34).

При данном сочетании химического и инфекционного воздействий на ткани среднего уха не учитываются известные механизмы развития патологического процесса при хроническом среднем отите, что ограничивает применение данной модели для разработки новых способов лечения и не позволяет получить достоверные морфологические результаты.

Задачей изобретения является усовершенствование способа моделирования хронического гнойного среднего отита.

Поставленная задача решается тем, что в способе моделирования хронического среднего отита, включающем инфицирование полости среднего уха лабораторного животного (крысы) введением культуры стафилококка, перед инфицированием вызывают иммунодефицит путем введения эмульсии гидрокортизона ацетата 2,5% в дозе 20 мг/100 г массы тела и через 3 суток после инфицирования формируют стойкую перфорацию барабанной перепонки путем прокола ее и расширения полученного дефекта к периферии.

Способ моделирования хронического гнойного воспаления среднего уха осуществляют следующим образом.

Для моделирования хронического среднего отита используют белых беспородных половозрелых крыс-самцов массой 180-220 г. Выбор крыс-самцов диктуется необходимостью получения стабильных результатов, исключая влияние циклических изменений, характерных для организма самок. Это позволяет стандартизировать условия проведения экспериментальных исследований.

Необходимым условием для развития клинической картины среднего отита у крыс является предварительное создание у них системного иммунодефицита, что достигается путем однократного подкожного введения животному в область спины эмульсии гидрокортизона ацетат 2,5% в дозе, многократно превышающей среднетерапевтическую. Доза введения на 1 животное составляет 20 мг/100 г массы тела. Через 3 суток после введения гидрокортизона крысе в условиях эфирного наркоза с помощью стерильного инсулинового шприца с иглой под контролем отоскопии проводят прокол барабанной перепонки. Направление прокола соответствует направлению хода наружного слухового прохода. После вкола конец иглы свободно находится в просвете барабанной полости, не достигая медиальной стенки ее. При правильном положении иглы из шприца в полость среднего уха под небольшим давлением медленно вводят суточную культуру Staphylococcus aureus. Данный патоген является наиболее частым микроорганизмом, высеваемым из полости среднего уха в условиях хронического отита, в том числе и после оперативного лечения. Высокая вирулентность золотистого стафилококка и резистентность его к факторам неспецифической и специфической иммунной защиты макроорганизма приводят к длительному персистированию гнойного процесса в полости среднего уха, что способствует хронизации заболевания. Культуру стафилококка готовят путем разведения в стерильном 0,9% растворе натрия хлорида и концентрацией 1×10⁹ микробных тел в 1 мл. Доза введения составляет 150 млн. микробных тел (0,15 мл) на одно животное. В течение всего времени введения контролируют состояние крысы, так как резкое изменение тонуса мышц конечностей, появление судорог свидетельствуют о неправильном положении иглы во внутреннем ухе или полости черепа. Через 3 суток после инфицирования среднего уха с помощью стерильной инъекционной иглы от инсулинового шприца под контролем зрения производят разрушение барабанной перепонки с целью формирования стойкого анатомического дефекта ее путем многократного прокола перепонки и расширения полученного дефекта к периферии. К этому сроку в полости среднего уха у животного формируется очаг гнойного воспаления и через созданную перфорацию при отоскопии отмечается появление гнойных или гнойно-геморрагических выделений из слухового прохода. Таким образом, создаются условия для повторного дополнительного инфицирования барабанной полости микробной флорой из наружного слухового прохода, что является неотъемлемым патогенетическим механизмом развития хронического среднего отита.

По предлагаемому способу была получена модель хронического гнойного воспаления среднего уха у 30 из 35 крыс, использовавшихся в эксперименте. Эксперимент проводят на белых крысах-самцах массой 180-220 г, которых методом случайных чисел делят на опытную и контрольную группы. Животным опытной группы подкожно в область спины вводят 2,5% эмульсию гидрокортизона ацетата в дозе 20 мг/100 г массы тела однократно. Через 3 суток животным обеих групп транстимпанально под контролем зрения в направлении барабанной полости вводят суточную культуру Staphylococcus aureus. Через 3 суток производят разрушение барабанной перепонки.

После инъекции гидрокортизона животные теряют массу тела (до 18-23% за 14 суток), снижается их двигательная активность, аппетит, наружные покровы становились грязными, у ряда животных отмечаются явления гнойного блефарита. На 2-3 сутки после инфицирования в опытной группе животных отмечают появление гнойных или гнойно-геморрагических выделений из слухового прохода на стороне инфицирования. В 10% случаев в опытной группе животных развиваются отогенные внутричерепные осложнения с соответствующей неврологической симптоматикой, в 10% наблюдений отмечают признаки лабиринтита в период от 9 до 12 дней после инфицирования.

Животные из контрольной группы внешне выглядели здоровыми.

Забивают животных под эфирным наркозом через 7 и 14 суток после начала эксперимента. При осмотре вскрытой барабанной полости в опытной группе отмечают отек и инфильтрацию тканей стенки барабанной полости, утолщение и воспалительные проявления по периферии разрушенной барабанной перепонки, гнойный экссудат с неприятным запахом в просвете барабанной полости. При осмотре регионарных (поверхностные, лицевые, задние) лимфатических узлов на стороне инфицирования отмечают гиперплазию их, отек, инфильтрацию клетчатки вокруг лимфоузлов. На противоположной стороне отмечают гипоплазию лицевых и задних лимфоузлов, тогда как поверхностные находились в состоянии умеренного отека и инфильтрации. Выявлена гипоплазия отдаленных лимфатических узлов (подвздошных) в опытной группе. У животных контрольной группы при вскрытии обнаружены скудные изменения в виде инфильтрации разрушенной барабанной перепонки, экссудата в барабанной полости не было. Со стороны регионарных лимфоузлов отмечают умеренную гиперплазию всех групп лимфатических узлов на стороне инфицирования. При посеве на питательную среду с отпечатков лимфатических узлов (поверхностные, лицевые и задние) выявлен рост колоний грамположительной кокковой флоры в 90% наблюдений на стороне поражения в опытной группе.

Способ моделирования хронического среднего отита, включающий инфицирование полости среднего уха лабораторного животного введением культуры стафилококка, отличающийся тем, что перед инфицированием вызывают иммунодефицит путем подкожного введения эмульсии гидрокортизона ацетата 2,5% в дозе 20 мг/100 г массы тела и через 3 суток после инфицирования формируют стойкую перфорацию барабанной перепонки путем многократного прокола ее и расширения полученного дефекта к периферии.