1, 3-дигидробензимидазол-2-илиденовые амины в качестве ингибиторов репликации респираторного синцитиального вируса

Настоящее изобретение относится к новым производным 1,3-дигидробензимидазол-2-илиденамина формулы (I) и его аддитивным солям, где каждый Alk независимо представляет собой C_1-6алкандиил; Q представляет собой атом водорода; C_1-6алкил, замещенный одним или двумя радикалами Ar²; C_1-6алкил, замещенный хинолинилом, морфолинилом или пирролидинонилом; -СО-Ar²; или Q представляет собой радикал, имеющий формулу (а), где t может принимать значение 2; R⁴ представляет собой амино; R¹ представляет собой морфолинил, пиридил или хинолинил, где каждый из указанных моноциклических или бициклических гетероциклов необязательно может иметь 2 заместителя, выбранных из гидрокси и C_1-6алкила; R² представляет собой Ar² или -СО-Ar²; где Q не является водородом, R³ представляет собой атом водорода; или где Q является атомом водорода, R¹ представляет собой водород или морфолинил и R³ представляет собой радикал, имеющий формулу (b), где R⁶ представляет собой атом водорода; R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо выбраны из C_1-6алкила, R^10a-O-C_1-6алкила; и R⁸ или R⁹ также могут представлять собой атомы водорода; R^10a представляет собой атом водорода; Ar¹ представляет собой фенил; Ar² представляет собой фенил или фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, гидрокси, C_1-6алкила, циано, нитро, гидрокси-С_1-6алкила, полигалогено-С_1-6алкила, C_1-6алкилоксила, гидрокси-C_1-6алкилоксила, C_1-6алкилоксикарбонила, Ar¹ и Ar¹O. Также изобретение относится к фармацевтической композиции на основе соединения формулы I и к способу получения соединения формулы I. Технический результат: получены новые производные 1,3-дигидробензимидазол-2-илиденамина, которые являются ингибиторами RSV. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 табл.

 

Настоящее изобретение относится к производным 1,3-дигидробензимидазол-2-илиденаминов, имеющим ингибиторную активность на репликацию респираторного синцитиального вируса (RSV), их получению и фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения в качестве активного ингредиента.

RSV человека, или Респираторный Синцитиальный Вирус, представляет собой крупный РНК-вирус, входящий в семейство Paramyxoviridae, подсемейство Pneumoviridae вместе с коровьим RSV вирусом. RSV человека вызывает ряд заболеваний дыхательных путей у людей всех возрастов по всему миру. Он представляет собой основную причину заболеваний нижних дыхательных путей в младенчестве и детстве. Более половины всех младенцев сталкиваются с RSV в свой первый год жизни и почти все в течение их первых двух лет. Инфекция у маленьких детей может приводить к легочным повреждениям, которые продолжают существовать годами и могут способствовать развитию хронических заболеваний легких в дальнейшей жизни (хроническое хрипящее дыхание, астма). Подростки и взрослые часто страдают от общего (сильного) насморка при RSV инфекции. В старости восприимчивость вновь возрастает, и RSV вовлечен во множество вспышек пневмонии у стариков, приводящих к существенной смертности.

Инфицирование вирусом из данной подгруппы не защищает от последующего заражения RSV из той же самой подгруппы в следующий зимний сезон. Реинфицирование RSV является общим, несмотря на существование только двух подтипов, A и B.

На данный момент испытаны только три препарата против RSV инфекции. Первый представляет собой рибавирин, нуклеозидный аналог, обеспечивающий аэрозольную обработку тяжелой RSV инфекции у госпитализированных детей. Аэрозольный способ применения, токсичность (риск тератогенного воздействия), стоимость и очень изменяющаяся эффективность ограничивают его использование. Другие два препарата, RespiGam® и паливизумаб, поликлональный и моноклональный иммуностимуляторы на основе антител, предназначены для профилактического применения.

Все другие попытки разработать безопасную и эффективную RSV вакцину к настоящему времени не увенчались успехом. Инактивированные вакцины не способны защитить от болезни и фактически в некоторых случаях осложняют течение болезни при последующем инфицировании. Живые ослабленные вакцины были опробованы с ограниченным успехом. Очевидно, что имеется потребность в эффективных, нетоксичных и простых в применении препаратах против репликации RSV.

WO-01/00615, WO-01/00611 и WO-01/00612 описывают серию производных бензимидазола, имеющих свойства ингибировать RSV. Настоящее изобретение предназначено для предоставления дополнительных RSV ингибиторных соединений, которые представляют собой производные 1,3-дигидробензимидазол-2-илиденового амина, структурно не родственные тем соединениям предшествующего уровня техники.

Настоящее изобретение относится к ингибиторам репликации RSV, которые могут быть представлены формулой (I)

также их аддитивным солям; и их стереохимическим изомерным формам; где

каждый Alk независимо от другого представляет собой C_1-6алкандиил;

Q представляет собой атом водорода; C_1-6алкил, замещенный одним или двумя радикалами Ar²; C_1-6алкил, замещенный хинолинилом, оксазолидинилом, тиазолидинилом, морфолинилом, тиоморфолинилом или пирролидинонилом; -CO-Ar²; или Q представляет собой радикал, имеющий формулу

где t может принимать значения: 1, 2 или 3;

R⁴ представляет собой амино, моно- или ди(C_1-6алкил)амино группу;

R¹ представляет собой Ar², -CO-Ar² или моноциклический или бициклический гетероцикл, выбранный из пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, тиоморфолинила, пиридила, пиразинила, пиридазинила, пиримидинила, фуранила, тетрагидрофуранила, тиенила, пирролила, тиазолила, оксазолила, имидазолила, изотиазолила, пиразолила, изоксазолила, оксадиазолила, хинолинила, хиноксалинила, бензофуранила, бензотиенила, бензимидазолила, бензоксазолила, бензтиазолила, пиридопиридила, нафтиридинила, 1H-имидазо[4,5-b]пиридинила, 3H-имидазо[4,5-b]пиридинила, имидазо[1,2-a]пиридинила и 2,3-дигидро-1,4-диоксино[2,3-b]пиридила;

где каждый из указанных моноциклических или бициклических гетероциклов необязательно может иметь 1, 2 или 3 заместителя, каждый из которых независимо от других выбран из группы, состоящей из галогенов, гидрокси, амино, циано, карбоксила, C_1-6алкила, C_1-6алкилокси, C_1-6алкилтио, C_1-6алкилокси-C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила, моно- или ди-(C_1-6алкил)амино, моно- или ди-(C_1-6алкил)амино-C_1-6алкила, полигалоген-C_1-6алкила, C_1-6алкилкарбониламино, C_1-6алкилоксикарбонила и -C(=O)-NR^5aR^5b;

R² независимо имеет те же значения, что и R¹, и дополнительно может представлять собой атом водорода;

где Q не является водородом, R³ представляет собой атом водорода; или где Q является атомом водорода, R³ представляет собой радикал, имеющий формулу:

где

R⁶ выбран из атома водорода, C_1-6алкила, Ar²C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила, (C_1-6алкилокси)-C_1-6алкила, амино-C_1-6алкила, моно- и ди-(C_1-6алкил)амино-C_1-6алкила, карбокси-C_1-6алкила, C_1-6алкилоксикарбонил-C_1-6алкила, аминокарбонил-C_1-6алкила, моно- и ди-(C_1-6алкил)аминокарбонил-C_1-6алкила;

каждый из R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбран из галогена, циано, C_1-6алкила, Ar¹-C_1-6алкила, циано-C_1-6алкила, C_2-6алкенила, циано-C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, циано-C_2-6алкинила, Ar¹, R^10a-O-, R^10a-S-, -N(R^5aR^5b), полигалогено-C_1-6алкила, R^10a-O-C(=O)-, N(R^5aR^5b)-C(=O)-, R^10a-O-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C_1-6алкила, R^10a-O-C(=O)-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C(=O)-C_1-6алкила, R^10a-C(=O)-NR^5b-, R^10b-C(=O)-O-, R^10b-C(=O)-O-C_1-6алкила; и R⁸ и/или R⁹ также могут представлять собой атомы водорода;

каждый из R^5a и R^5b независимо друг от друга представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

R^10a представляет собой атом водорода, C_1-6алкил или Ar¹-C_1-6алкил;

R^10b представляет собой C_1-6алкил или Ar¹-C_1-6алкил;

Ar¹ представляет собой фенил или фенил, замещенный 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из галогена, гидроксила, C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила, полигалогено-C_1-6алкила и C_1-6алкилоксила;

Ar² представляет собой фенил или фенил, замещенный 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из галогена, гидрокси, C_1-6алкила, циано, нитро, гидрокси-C_1-6алкила, полигалогено-C_1-6алкила, C_1-6алкилоксила, гидрокси-C_1-6алкилоксила, C_1-6алкилоксикарбонила, Ar¹ и Ar¹O.

Как использовано выше или далее в тексте, «C_1-4алкил» как группа или часть группы относится к насыщенным углеводородным радикалам с линейной или разветвленной цепью, содержащим от 1 до 4 атомов углерода, таким как метил, этил, 1-пропил, 2-пропил, 1-бутил, 2-бутил, 2-метил-пропил, трет-бутил; «C_1-6алкил» как группа или часть группы относится к насыщенным углеводородным радикалам с линейной или разветвленной цепью, содержащим от 1 до 6 атомов углерода, таким как группы, определенные для C_1-4алкила, и 1-пентил, 2-пентил, 1-гексил, 2-гексил, 3-гексил, 2-метилбутил, 3-метилпентил и им подобные; «C_1-2алкил» относится к метилу или этилу. Среди C_1-6алкилов предпочтительны C_1-4алкилы и C_1-2алкилы.

Подразумевается, что используемый в описании термин «C_3-6алкенил» как группа или часть группы включает ненасыщенные углеводородные радикалы с линейной или разветвленной цепью, имеющие по меньшей мере 1 двойную связь, и предпочтительно имеющие 1 двойную связь, и от 3 до 6 атомов углерода, такие как 1-пропенил, 2-пропенил (или аллил), 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-метил-2-пропенил, 1-пентенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 2-метил-1-бутенил, 1-гексенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 4-гексенил, 2-метил-2-пентенил, 1,2-диметил-1-бутенил и им подобные. Подразумевается, что используемый в описании термин «C_2-6алкенил» как группа или часть группы включает C_3-6алкенильные группы и этилен (винил). Термин «C_3-6алкинил» определен как ненасыщенные углеводородные радикалы с линейной или разветвленной цепью, имеющие 1 тройную связь и от 3 до 6 атомов углерода, такие как пропинил, бутин-1-ил, бутин-2-ил, пентин-1-ил, пентин-2-ил, гексин-1-ил, гексин-2-ил, гексин-3-ил, 2-метилбутин-1-ил и им подобные. Подразумевается, что используемый в описании термин «C_2-6алкинил» как группа или часть группы содержит C_3-6алкинильные группы и этинил.

C_1-4алкандиил определяет бивалентные насыщенные углеводородные радикалы с линейной или разветвленной цепью, имеющие от 1 до 4 атомов углерода, такие как, например, метилен, 1,2-этандиил (этилен), 1,3-пропандиил, 1,4-бутандиил, 1,2-пропандиил, 2,3-бутандиил, 1,5-пентандиил и им подобные. Подразумевается, что C_1-6алкандиил включает C_1-4алкандиилы и их высшие гомологи, имеющие от 5 до 6 атомов углерода, такие как, например, 1,5-пентандиил, 1,6-гександиил и им подобные. Среди C_1-6алкандиилов предпочтительны C_1-4алкандиилы.

Как использовано в описании ранее, знак (=O) относится к фрагменту карбонила, когда он присоединен к атому углерода, к фрагменту сульфоксида, когда он присоединен к атому серы, и к фрагменту сульфонила, когда два указанных обозначения присоединены к атому серы.

Термины карбоксил, карбокси или гидроксикарбонил относятся к группе -COOH.

Термин галоген охватывает фтор, хлор, бром или йод.

Упомянутый ранее и употребляющийся в дальнейшем, термин «полигалогеноC_1-6алкил» как группа или часть группы, например полигалогеноC_1-6алкилокси, относится к моно- или поли-галоген замещенному C_1-6алкилу, в частности C_1-6алкилу, имеющему один, два, три, четыре, пять, шесть или более атомов галогенов в качестве заместителей, такому как метил или этил, содержащий один или более атомов фтора, например дифторметил, трифторметил, трифторэтил. Также включены перфтор C_1-6алкильные группы, которые представляют собой C_1-6алкильные группы, где все атомы водорода заменены атомами фтора, например пентафторэтил. В случае более одного атома галогена, присоединенного к алкильной группе, определенной как полигалогеноC_1-4алкил, атомы галогена могут быть одинаковыми или разными.

Когда гидрокси-C_1-6алкильная или амино-C_1-6алкильная группа представляет собой заместитель при атоме кислорода или при атоме азота, предпочтительной является гидрокси-C_2-6алкильная группа, где гидроксильная группа и атом кислорода или атом азота разделены по меньшей мере двумя атомами углерода, или амино-C_2-6алкильная группа, где аминогруппа и атом азота разделены по меньшей мере двумя атомами углерода. Предпочтительными среди (C_1-6алкилокси)C_1-6алкильных или моно- или ди-(C_1-6алкил)амино-C_1-6алкильных групп, когда они представляют собой заместители при атоме азота, являются (C_1-6алкилокси)C_2-6алкильные или моно- или ди-(C_1-6алкил)амино-C_2-6алкильные группы, где C_1-6алкилокси группа и атом азота и моно или ди-(C_1-6алкил)амино группа и атом азота разделены по меньшей мере двумя атомами углерода.

Следует отметить, что положение радикала в любой части молекулы, использованное в определениях, может быть в любом месте любой части, пока она является химически стабильной.

Радикалы, использованные в определениях вариантов, включают все возможные изомеры, если не оговорено иное. В случае пиридила включены 2-пиридил, 3-пиридил и 4-пиридил; пентил включает 1-пентил, 2-пентил и 3-пентил.

Когда любой вариант встречается более одного раза в любом одном фрагменте, каждое его определение является независимым.

Всякий раз, когда в дальнейшем употребляется термин «соединения с формулой (I)», или «указанные соединения», или иной подобный термин, подразумевается включение соединений, имеющих формулу (I), их аддитивные соли и стереоизомерные формы.

В дальнейшем следует принимать во внимание, что некоторые соединения формулы (I) могут содержать один или более хиральных центров и существовать как стереохимические изомерные формы.

Употребленный выше термин «стереохимические изомерные формы» определяет все возможные соединения, состоящие из одинаковых атомов, связанных одинаковой последовательностью связей, но имеющие различные трехмерные структуры, которые не являются равнозначными, которыми могут обладать соединения формулы (I).

Если не оговорено или не указано иначе, химическое название соединения охватывает смесь всех возможных стереоизомерных форм, которые могут существовать для указанного соединения. Упомянутая смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры базовой структуры молекулы указанного соединения. Все стереохимические изомерные формы соединения настоящего изобретения и в чистом виде, и в виде смеси друг с другом подразумеваются включенными в объем настоящего изобретения.

Как указано в описании, чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений определены как изомеры, по существу свободные от других энантиомерных или диастереомерных форм базовой молекулярной структуры указанных соединений или промежуточных соединений. В частности, термин «стереоизомерно чистый» относится к соединениям или промежуточным соединениям, имеющим стереоизомерный избыток по меньшей мере 80% (то есть минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров) вплоть до 100%-ного стереоизомерного избытка (то есть 100% одного изомера и никаких других), более конкретно соединения или промежуточные соединения, имеющие стереоизомерный избыток 90% вплоть до 100%, еще более конкретно имеющие стереоизомерный избыток 94% вплоть до 100% и наиболее конкретно имеющие стереоизомерный избыток 97% вплоть до 100%. Термины «энантиомерно чистый» и «диастереомерно чистый» следует понимать сходным образом, но как относящиеся к энантиомерному избытку и, соответственно, диастереомерному избытку в данной смеси.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений настоящего изобретения могут быть получены за счет применения способов, известных в данной области. Например, энантиомеры могут быть отделены друг от друга за счет селективной кристаллизации их диастереомерных солей с оптически активными кислотами или основаниями. Их примерами являются винная кислота, дибензоилвинная кислота, дитолуолвинная кислота и камфорсульфоновая кислота. В качестве альтернативы энантиомеры могут быть разделены с помощью хроматографии, использующей хиральную стационарную фазу. Указанные чистые стереохимические изомерные формы также могут быть получены из соответствующих чистых стереохимических изомерных форм соответствующих исходных материалов в том случае, если реакция протекает стереоспецифично. Предпочтительно, если требуется конкретный стереоизомер, указанное соединение может быть синтезировано за счет стереоспецифичных методов получения. В этих методах преимущественно используются энантиомерно чистые исходные материалы.

Отдельно могут быть получены стандартными методами диастереомерные рацематы формулы (I). Подходящие физические методы разделения, которые могут быть преимущественно использованы, представляют собой, например, кристаллизацию и хроматографию, например колоночную хроматографию.

Для некоторых соединений формулы (I) и промежуточных соединений, используемых при их получении, абсолютная стереохимическая конфигурация может не быть установленной экспериментально. Специалист в данной области может определить абсолютную конфигурацию таких соединений, используя известные в данной области методы, такие как, например, рентгенодифракционный анализ монокристаллов.

Настоящее изобретение также подразумевает включение всех изотопов атомов, встречающихся в указанных соединениях. Изотопы включают такие атомы, которые имеют одинаковое атомное число, но разное массовое число. В качестве общего примера и без каких-либо ограничений изотопы водорода включают тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают C-13 и C-14.

Для терапевтического применения соли соединений с формулой (I) представляют собой такие, противоион которых является фармацевтически приемлемым. Однако соли кислот и оснований, которые не приемлемы фармацевтически, также могут найти применение, например, при получении или очистке фармацевтически приемлемого соединения. Все соли, фармацевтически приемлемые или не приемлемые, в любом случае включены в объем настоящего изобретения.

Подразумевается, что вышеупомянутые фармацевтически приемлемые соли, образуемые присоединением кислот и оснований, включают терапевтически активные нетоксичные солевые формы, которые соединения формулы (I) могут образовывать присоединением кислот и оснований. Фармацевтически приемлемые соли, образуемые присоединением кислот, могут быть легко получены за счет обработки основной формы соответствующей кислотой. Подходящие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например хлористоводородную или бромистоводородную кислоту, серную, азотную, фосфорную и подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гликолевая, молочная, пировиноградная, щавелевая (то есть этандионовая), малоновая, сукциновая (то есть бутандионовая), малеиновая, фумаровая, яблочная (то есть гидроксибутандионовая), винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламиновая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.

Указанные солевые формы могут быть превращены обратно в форму свободного основания за счет обработки подходящим основанием.

Соединения формулы (I), имеющие в своем составе кислый протон, также могут быть превращены в их нетоксичные солевые формы, образуемые присоединением металла или амина, за счет обработки соответствующими органическими или неорганическими основаниями. Подходящие основные солевые формы включают, например, аммониевые соли, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например литиевые, натриевые, калиевые, магниевые, кальциевые соли и подобные, соли с органическими основаниями, например бензатиновые, N-метил-D-глюкаминовые, гидрабаминовые соли, и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и подобные.

Вышеупомянутый термин «аддитивная соль» также включает сольваты, которые соединения формулы (I), а также их соли могут образовывать. Такие сольваты представляют собой, например, гидраты, алкоголяты и подобные.

Подразумевается также, что термин «соединения формулы (I)» или любые сходные термины, такие как «соединения изобретения» и им подобные, включают любые пролекарства, которые могут образовывать соединения формулы (I). Как использовано в данном описании, термин «пролекарство» включает любые фармакологически приемлемые производные, такие как эфиры, амиды и фосфаты, при условии, что полученный продукт биотрансформации производного in vivo представляет собой активное лекарственное средство, как определено для соединений формулы (I). Ссылка на публикацию Goodman и Gilman (The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8^th ed., McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, “Biotransformation of Drugs”, p.13-15), описывающую пролекарства в общем виде, включена в описание в виде ссылки. Предпочтительно пролекарства имеют прекрасную растворимость в воде, повышенную биодоступность и легко метаболизируют в активные ингибиторы in vivo. Пролекарства соединения настоящего изобретения могут быть получены путем модифицирования функциональных групп, имеющихся в соединении, таким образом, чтобы модифицированные группы расщеплялись либо в результате обычных манипуляций, либо in vivo с образованием предшествующего соединения.

Предпочтительны фармацевтически приемлемые сложноэфирные пролекарства, гидролизуемые in vivo и являющиеся производными тех соединений формулы (I), которые имеют гидрокси или карбоксильную группу. Гидролизуемый in vivo эфир представляет собой эфир, который подвергается гидролизу в организме человека или животного с образованием соответствующей кислоты или спирта. Соответствующие фармацевтически приемлемые эфиры для карбоксильной группы включают C_1-6алкоксиметиловые эфиры, например метоксиметиловые, C_1-6алканоилоксиметиловые эфиры, например пивалоилоксиметиловые, фталидильные эфиры, C_3-7циклоалкоксикарбонилоксиC_1-6алкиловые эфиры, например 1-циклогексилкарбонилоксиэтиловые; 1,3-диоксолен-2-онилметиловые эфиры, например 5-метил-1,3-диоксолен-2-онилметилметиловые; и C_1-6алкоксикарбонилоксиэтиловые эфиры, например 1-метоксикарбонилоксиэтиловые, которые могут быть образованы с участием любой карбоксильной группы в соединениях данного изобретения.

Гидролизуемый in vivo сложный эфир соединения формулы (I), содержащего гидроксильную группу, включает неорганические эфиры, такие как фосфатные эфиры и α-ацилоксиалкиловые эфиры и родственные соединения, которые в результате гидролиза эфира in vivo расщепляются с образованием предшествующей гидроксильной группы. Примеры α-ацилоксиалкиловых эфиров включают ацетоксиметокси и 2,2-диметилпропионилоксиметокси. Выбор групп, образующих гидролизуемый in vivo сложный эфир с участием гидроксила, включает алканоил, бензоил, фенилацетил и замещенные бензоил и фенилацетил, алкоксикарбонил (для образования карбонатных эфиров), диалкилкарбамоил и N-(диалкиламиноэтил)-N-алкилкарбамоил (для образования карбаматов), диалкиламиноацетил и карбоксиацетил. Примеры заместителей в бензоиле включают морфолино или пиперазино, связанные кольцевым атомом азота посредством метиленовой группы с третьим или четвертым положением в кольце бензоила. Алканоильные эфиры, например, представляют собой любые C_1-30алканоильные эфиры, в частности C_8-30алканоильные эфиры, более конкретно C_10-24алканоильные эфиры, наиболее конкретно C_16-20алканоильные эфиры, где алкильная часть может иметь одну или более двойных связей. Примеры алканоильных эфиров представляют собой деканоат, пальмитат и стеарат.

Подразумевается, что термин «соединения формулы (I)» или любые сходные термины, такие как «соединения изобретения» и подобные, также включают любые метаболиты, которые образуются in vivo после введения препарата. Некоторые примеры метаболитов в соответствии с изобретением включают в себя: (a) где соединение формулы (I) содержит метильную группу, его гидроксиметильное производное; (b) где соединение формулы (I) содержит алкоксигруппу, его гидрокси производное; (c) где соединение формулы (I) содержит третичную аминогруппу, его производное в виде вторичного амина; (d) где соединение формулы (I) содержит вторичную аминогруппу, его первичное производное; (e) где соединение формулы (I) содержит фенильный фрагмент, его фенольное производное; и (f), где соединение формулы (I) содержит амидную группу, его производную карбоновую кислоту; не ограничиваясь приведенным в описании.

Также подразумевается, что термин «соединения формулы (I)» или любые сходные термины, такие как «соединения изобретения» и подобные, включают любые N-оксидные формы соединений формулы (I), которые представляют собой соединения формулы (I), где один или несколько атомов азота окислены в форму N-оксида.

Соединения формулы (I) могут иметь связывающие, хелатирующие и/или комплексообразующие свойства по отношению к металлам и поэтому могут существовать в виде комплексов с металлами или хелатов металлов. Такие производные комплексов металлов соединений формулы (I) подразумеваются включенными в объем настоящего изобретения.

Множество подгрупп соединений формулы (I) детально определены ниже за счет ограничивающих формулировок для различных радикалов в соединениях формулы (I). Однако эти подгруппы также подразумеваются включающими другие подгруппы, с любыми изменениями ограничивающих формулировок, приведенных в дальнейшем.

Подгруппы I соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, где

(a) один или более радикалов Alk представляет собой C_1-4алкандиил;

(b) один или более радикалов Alk представляет собой C_1-2алкандиил;

(c) один или более радикалов Alk представляет собой метилен; или

(d) все радикалы Alk представляют собой метилен.

Подгруппы II соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, такие как подгруппа I, приведенная выше, где

(a) Q представляет собой C_1-6алкил, замещенный одним или двумя радикалами Ar²; C_1-6алкил, замещенный хинолинилом, морфолинилом или пирролидинолилом; -CO-Ar²; или Q представляет собой радикал, имеющий формулу

где t имеет значение 2; R⁴ представляет собой амино, моно- или ди(C_1-6алкил)амино группу;

(b) Q представляет собой C_1-6алкил, замещенный одним или двумя радикалами Ar²; C_1-6алкил, замещенный хинолинилом, морфолинилом или пирролидинолилом;

(c) Q представляет собой -CO-Ar²; или

(d) Q представляет собой радикал формулы (a), где t имеет значение 2; R⁴ представляет собой амино, моно- или ди(C_1-6алкил)амино группу;

(e) Q представляет собой атом водорода.

Подгруппы III соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, такие как подгруппы I и II, приведенные выше, где

(a) R¹ и/или R² представляют собой Ar², -CO-Ar² или гетероцикл, выбранный из пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, тиоморфолинила, пиридила, пиразинила, пиримидинила, фуранила, тетрагидрофуранила, тиенила, пирролила, тиазолила, оксазолила, имидазолила, хинолинила, хиноксалинила, бензофуранила, бензотиенила, бензимидазолила, бензоксазолила, бензтиазолила, где каждый из указанных гетероциклов необязательно может иметь 1, 2 или 3 заместителя, каждый из которых независимо от других выбран из галогенов, гидрокси, амино, циано, карбоксила, C_1-6алкила, C_1-6алкилокси, C_1-6алкилокси-C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила, моно- или ди-(C_1-6алкил)амино; или где

(b) R¹ и/или R² представляют собой Ar², -CO-Ar² или гетероцикл, выбранный из морфолинила, пиридила, пиразинила, пиримидинила, фуранила, тетрагидрофуранила, тиенила, тиазолила, оксазолила, имидазолила и хинолинила; где каждый из указанных гетероциклов необязательно может иметь 1 или 2 заместителя, каждый из которых независимо от других выбран из галогенов, гидрокси, амино, циано, C_1-6алкила и C_1-6алкилокси; или где

(c) R¹ и/или R² представляют собой Ar², -CO-Ar², морфолинил, пиридил или хинолинил; где каждый из указанных гетероциклов необязательно может иметь 1 или 2 заместителя, каждый из которых независимо от других выбран из гидрокси и C_1-6алкила; или где

(d) R¹ и/или R² представляют собой Ar², -CO-Ar², морфолинил или хинолинил.

Подгруппы IV соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, такие как подгруппы I, II и III, приведенные выше, где R² представляет собой атом водорода.

Подгруппы V соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, такие как подгруппы I, II, III и IV приведенные выше, где

(a) R³ представляет собой атом водорода и Q не является водородом;

(b) R³ представляет собой радикал формулы:

где

R⁶ выбран из атома водорода, C_1-6алкила, Ar²C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила,(C_1-6алкилокси)-C_1-6алкила, амино-C_1-6алкила, карбоксил-C_1-6алкила, аминокарбонил-C_1-6алкила;

R⁷, R⁸ и R⁹, каждый независимо от другого, выбраны из галогенов, циано, C_1-6алкила, циано-C_1-6алкила, R^10a-O-, -N(R^5aR^5b), трифторметила, R^10a-O-C(=O)-, N(R^5aR^5b)-C(=O)-, R^10a-O-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C_1-6алкила, R^10a-O-C(=O)-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C(=O)-C_1-6алкила, R^10b-C(=O)-O-, R^10b-C(=O)-O-C_1-6алкила; и R⁸ и/или R⁹ также могут представлять собой атомы водорода;

R^5a и R^5b, каждый независимо друг от друга, представляют собой атом водорода или C_1-6алкил;

R^10a представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

R^10b представляет собой C_1-6алкил; или где

(c) R³ представляет собой радикал с формулой (b), где

R⁶ выбран из атома водорода, C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила, амино-C_1-6алкила и аминокарбонил-C_1-6алкила;

R⁷, R⁸ и R⁹, каждый независимо от другого, выбраны из галогенов, циано, C_1-6алкила, циано-C_1-6алкила, R^10a-O-, -N(R^5aR^5b), R^10a-O-C(=O)-, N(R^5aR^5b)-C(=O)-, R^10a-O-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C_1-6алкила, R^10a-O-C(=O)-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C(=O)-C_1-6алкила, R^10b-C(=O)-O-C_1-6алкила; и R⁸ и/или R⁹ также могут представлять собой атомы водорода;

R^5a и R^5b, каждый независимо друг от друга, представляют собой атом водорода или C_1-6алкил;

R^10a представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

R^10b представляет собой C_1-6алкил; или

(d) R³ представляет собой радикал с формулой (b), где

R⁶ выбран из атома водорода, гидрокси-C_1-6алкила, амино-C_1-6алкила и аминокарбонил-C_1-6алкила;

R⁷, R⁸ и R⁹, каждый независимо от другого, выбраны из галогенов, C_1-6алкила, циано-C_1-6алкила, R^10a-O-, -N(R^5aR^5b), R^10a-O-C_1-6алкила, N(R^5aR^5b)-C_1-6алкила, R^10a-O-C(=O)-C_1-6алкила, R^10b-C(=O)-O-C_1-6алкила; и R⁸ и/или R⁹ также могут представлять собой атом водорода;

R^5a и R^5b представляют собой атом водорода;

R^10a представляет собой атом водорода или C_1-6алкил;

R^10b представляет собой C_1-6алкил; или

(e) R³ представляет собой радикал формулы (b), где

R⁶ представляет собой атом водорода;

R⁷, R⁸ и R⁹, каждый независимо от другого, выбраны из C_1-6алкила, R^10a-O-C_1-6алкила, и R⁸ и/или R⁹ также могут представлять собой атом водорода;

R^10a представляет собой атом водорода или C_1-6алкил; и где в случае ограничений (b), (c) и (d) Q представляет собой атом водорода.

Подгруппы VI соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, такие как подгруппы I, II, III, IV и V, приведенные выше, где Ar¹ представляет собой фенил или замещенный фенил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя, выбранные из галогенов, гидроксила, C_1-6алкила, гидрокси-C_1-6алкила, CF₃ и C_1-6алкилоксила.

Подгруппы VII соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или любую подгруппу соединений формулы (I), определенных в описании, такие как подгруппы I, II, III, IV, V и VI, приведенные выше, где Ar² представляет собой фенил или замещенный фенил, имеющий 1, 2 или 3 заместителя, независимо выбранные из галогенов, гидрокси, C_1-6алкила, циано, нитро, гидрокси-C_1-6алкила, CF₃, C_1-6алкилоксила, гидрокси-C_1-6алкилоксила, C_1-6алкилоксикарбонила, фенила и фенокси.

Предпочтительные соединения представляют собой любые соединения, приведенные в таблицах 1 и 2, более конкретно соединения с номерами 1-7, 57.

Соединения формулы (I) могут быть получены путем реакции N-алкилирования или в некоторых случаях N-ацилирования, как показано в следующих схемах реакций, где Q, Alk, R¹, R², R³, R⁴ имеют значения, определенные в соответствии с соединениями формулы (I). W обозначает уходящую группу, такую как тозил, мезил, галоген, в частности хлор или бром. Такие реакции N-алкилирования обычно проводят в соответствующем растворителе, таком как эфир, например ТГФ, диоксан; галогенированный углеводород, например дихлорметан, CHCl₃; толуол, полярный апротонный растворитель, такой как ДМФА, ДМСО, N,N-диметилацетамид, ГМФТА, N-метилпирролидон, ацетонитрил и подобные. Для связывания кислоты, которая высвобождается при реакции, можно добавлять основание, например карбонат или гидрокарбонат щелочного металла, триалкиламин, например триэтиламин, или, если требуется, сильные основания, такие как гидриды щелочных металлов, например NaH. При необходимости, можно добавлять определенный катализатор, например йодидные соли (например KI).

Соединения формулы (I) могут быть получены за счет N-алкилирования бензимидазола (II) алкилирующим агентом (III), как показано на следующей схеме реакции.

Соединения формулы (I) могут быть также получены путем N-алкилирования (где Q представляет собой Ar²-CO-) или N-ацилирования бензимидазола (IV) алкилирующим или ацилирующим агентом (V), как показано на следующей схеме реакции.

Соединения формулы (I), где R³ представляет собой радикал (b), где группа Alk представляет собой метилен, которые могут быть представлены формулой (I-a), можно получить исходя из промежуточных соединений с формулой (VI), где R¹¹ представляет собой C_1-6алкил, в частности метил или этил, реакцией восстановления, например восстановлением LiAlH₄, в промежуточные соединения (VII), имеющие гидроксиметиленовую группу. Последнюю группу можно окислить в альдегидную группу (промежуточные соединения VIII) умеренным окислителем, например MnO₂, которую далее можно сочетать с аминами, например в процессе восстановительного аминирования, для получения целевых соединений формулы (I-a).

Соединения формулы (I), где Q представляет собой радикал (a), которые можно представить формулой (I-b), можно получить N-алкилированием промежуточных соединений формулы (IX) реагентом R⁴-Alk-W, применяя такие же условия реакции, как описанные выше для реакций N-алкилирования.

Соединения формулы (I) могут быть преобразованы друг в друга за счет известных в данной области реакций трансформации функциональных групп, включая таковые, описанные далее по тексту. Нитрогруппы могут быть восстановлены в аминогруппы, которые впоследствии могут быть проалкилированы до моно- или ди-алкиламино-группы или проацилированы в арилкарбониламино или алкилкарбониламино и подобные группы. Цианогруппы могут быть восстановлены в аминометиленовые группы, которые также могут быть превращены в другие производные.

Множество промежуточных соединений, используемых для получения соединений формулы (I), представляют собой известные соединения или аналоги известных соединений, которые могут быть получены с использованием приведенных далее модификаций известных в данной области методологий, легко доступных для специалиста. Множество получений промежуточных соединений приведен далее по тексту несколько более подробно. На следующих схемах реакций радикалы Q, R¹, R², R³ имеют значения, определенные в отношении соединений формулы (I) или любых подгрупп соединений формулы (I). W обозначает уходящую группу, например тозил, мезил, галоген, в частности хлор или бром.

Промежуточные соединения формулы (II) могут быть получены, как показано на следующей схеме:

На первой стадии диаминобензол подвергают циклизации с мочевиной в подходящем растворителе, например ксилоле, с образованием бензимидазолона (XI). Последний превращают в бензимидазольное производное (XII), где W представляет собой уходящую группу, определенную ранее, в частности за счет реакции (XI) с подходящим галогенирующим агентом, например POCl₃, и следующее промежуточное соединение (XIII) реагирует с производным амина (Q-NH₂) с образованием промежуточных соединений формулы (II). Последние могут быть получены альтернативным способом, как показано ниже:

Промежуточные соединения (XII) реагируют с производным амина Q-NH₂ для получения промежуточных соединений с формулой (XIV), которые далее реагируют с реагентом W-Alk-R², таким образом образуя промежуточные соединения (II).

Промежуточные соединения формулы (IV) могут быть получены, как показано на следующей схеме:

Первоначально 2-аминобензимидазольные производные (XV) алкилируют по азоту реагентом W-Alk-R², таким образом получая промежуточные соединения (XVI), которые последовательно алкилируют для получения желаемых промежуточных соединений формулы (IV). Реакции N-алкилирования можно проводить в соответствии с теми же способами, которые определены ранее для алкилирования (II) или (IV) для получения соединений (I). Промежуточные соединения (XVI) также могут быть получены путем алкилирования промежуточных соединений (X) на первой стадии для получения промежуточных соединений (XVII), которые можно циклизовать с цианбромидом для образования промежуточных соединений (XVI):

Промежуточные соединения формулы (VI) могут быть получены, как показано ниже:

Производное нитробензола (XVIII) реагирует с R²-Alk-NH₂, образуя промежуточное соединение (XIX), где нитрогруппу восстанавливают, например, на никеле Ренея, получая промежуточное соединение (XX), которое циклизуют с цианбромидом, получая 2-аминобензимидазолы (XXI). Последние далее алкилируют по атому азота, таким образом получая промежуточные соединения (VI).

Соединения формулы (I) могут быть преобразованы в формы соответствующих N-оксидов, в соответствии с известными в данной области способами преобразования трехвалентного азота в форму его N-оксида. Указанная реакция N-оксидирования обычно может быть осуществлена за счет взаимодействия исходного вещества формулы (I) с подходящим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды включают, например, перекись водорода, пероксиды щелочных и щелочно-земельных металлов, например пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут включать пероксикислоты, такие как, например, пероксибензойную кислоту или галогензамещенную пероксибензойную кислоту, например 3-хлоропероксибензойную кислоту, пероксоалкановые кислоты, например пероксоуксусную кислоту, алкилгидропероксиды, например третбутилгидропероксид. Применяемые растворители представляют собой, например, воду, низшие спирты, например этанол и подобные, углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.

Стереохимически чистые изомерные формы соединений формулы (I) могут быть получены за счет применения известных в данной области способов. Диастереомеры могут быть разделены физическими методами, такими как селективная кристаллизация и хроматографические методы, например разделение в противотоке, жидкостная хроматография и тому подобными.

Соединения формулы (I), полученные описанными выше способами, обычно представляют собой рацемические смеси энантиомеров, которые могут быть отделены друг от друга в соответствии с известными в данной области способами разделения. Рацемические соединения формулы (I), которые в достаточной мере обладают кислотными или основными свойствами, могут быть превращены в соответствующие диастереомерные солевые формы за счет реакции с подходящей хиральной кислотой, с хиральным основанием соответственно. Указанные диастереомерные солевые формы затем могут быть разделены, например, селективной или фракционной кристаллизацией, и энантиомеры из них высвобождают обработкой щелочью или кислотой. Альтернативный метод разделения энантиомерных форм соединений формулы (I) включает в себя хроматографию, в частности жидкостную хроматографию с использованием хиральной стационарной фазы. Указанные стереохимически чистые изомерные формы также могут быть получены из соответствующих стереохимически чистых изомерных форм соответствующих исходных веществ, при условии стереоспецифического протекания реакции. Если желаемым является определенный стереоизомер, предпочтительно синтезировать указанное соединение за счет стереоспецифических методов получения. Эти методы преимущественно используют энантиомерно чистые исходные материалы.

Соединения формулы (I) проявляют антивирусные свойства. Вирусные инфекции, поддающиеся лечению при использовании соединений и методов настоящего изобретения, включают такие инфекции, которые вызываются орто- и парамиксовирусами и, в частности, респирираторным синцитиальным вирусом (RSV) человека и коров. Кроме того, множество соединений настоящего изобретения являются активными против мутировавших штаммов RSV. Дополнительно соединения изобретения демонстрируют подходящую совокупность фармакокинетических параметров и имеют привлекательные свойства с точки зрения биодоступности, включая приемлемые период полувыведения, AUC и пиковые значения и отсутствие нежелательных явлений, таких как недостаточно быстрое начало действия и задержка в тканях.

Противовирусная активность указанных соединений in vitro против RSV была проверена в анализах, как описано в экспериментальной части описания, и также может быть доказана понижением количества вируса в исследуемом образце. Противовирусная активность указанных соединений в искусственных условиях против RSV может быть доказана на экспериментальной модели, использующей хлопковых хомяков, как описано в Wide et al. (Antiviral Research (1998), 38, 31-42).

Вследствие их противовирусных свойств, особенно их свойств против RSV, соединения формулы (I) или любая их подгруппа, аддитивные соли и стереохимические изомерные формы являются подходящими для лечения индивидов, страдающих вирусной инфекцией, особенно RSV инфекцией, и для профилактики таких инфекций. Вообще, соединения настоящего изобретения можно применять для лечения теплокровных животных, инфицированных вирусами, в частности респираторным синцитиальным вирусом.

Следовательно, соединения настоящего изобретения или любая их подгруппа могут применяться в качестве лекарственных средств. Указанное применение в качестве лекарственных средств или метод лечения включает системное введение инфицированным вирусом субъектам или восприимчивым к вирусным инфекциям субъектам эффективного количества для борьбы с симптомами, связанными с вирусной инфекцией, в частности RSV инфекцией.

Настоящее изобретение также относится к применению указанных соединений или любой их подгруппы для получения лекарственных средств для лечения или профилактики вирусных инфекций, в частности RSV инфекции.

Соединения настоящего изобретения или любая их подгруппа могут быть введены в состав множества фармацевтических форм для применения. В качестве соответствующих композиций в описании могут быть упомянуты все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций настоящего изобретения эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме аддитивной соли или комплекса металла, в качестве активного ингредиента объединяют в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, такой носитель может иметь различные формы в зависимости от формы приготовления, требуемой для введения. Данные фармацевтические композиции требуются в виде стандартных дозированных форм, особенно подходящих для перорального, ректального, подкожного способов введения или для парентеральных инъекций. Например, для получения композиций в виде пероральных дозированных форм можно использовать любую обычную фармацевтическую среду, например воду, гликоли, масла, спирты и подобные в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, глины, лубриканты, связующие вещества, дезинтегрирующие агенты и подобные в случае порошков, драже, капсул и таблеток. Из-за легкости их применения преимущественно таблетки и капсулы предоставляют большинство пероральных единичных дозированных форм, в случае которых очевидно использование твердых фармацевтических носителей. Носители для парентеральных композиций обычно включают стерильную воду, по крайней мере в большей части, хотя в состав могут быть включены другие ингредиенты, например, повышающие растворимость. Могут быть получены инъекционные растворы, например, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь растворов, физиологического и глюкозы. Также могут быть получены инъекционные суспензии, в случае которых могут быть использованы подходящие жидкие носители, суспензирующие агенты и им подобные. Также включены сухие формы препаратов, которые предназначены для превращения незадолго перед использованием в жидкие формы препаратов. В композициях, предназначенных для подкожного применения, носитель необязательно включает агент, улучшающий проникновение, и/или подходящий смачивающий агент, необязательно объединенный с подходящими добавками любой природы в небольших количествах, таковые добавки не оказывают существенного вредного воздействия на кожу.

Композиции настоящего изобретения также могут применяться для оральной ингаляции или инсуффляции за счет методов и технологий приготовления лекарственных средств, известных по уровню техники для этого способа применения. Таким образом, в общем, соединения настоящего изобретения можно вводить в легкие в виде раствора, суспензии или сухого порошка, где раствор является предпочтительным. Любая система, разработанная для доставки растворов, суспензий или сухих порошков для оральной ингаляции или инсуффляции, подходит для применения настоящих соединений.

Таким образом, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, приспособленной для применения посредством ингаляции или инсуффляции через ротовое отверстие, включающей соединения формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель. Предпочтительно соединения настоящего изобретения применяют посредством ингаляции раствора в распыляемой или аэрозольной дозах.

Особенно выигрышным является получение рецептур вышеуказанных фармацевтических композиций в виде единичных дозированных форм для легкости применения и единообразия дозировки. Термин «единичная дозированная форма», как он использован в данном описании, относится к физически дискретной единице, подходящей в качестве единичной дозировки, каждая единица, содержащая предопределенное количество активного ингредиента, рассчитывается для достижения требуемого терапевтического действия в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Примеры таких единичных дозированных форм представляют собой таблетки (включая шероховатые или покрытые оболочкой таблетки), капсулы, драже, суппозитории, пакетики с порошком, облатки, растворы или суспензии для инъекций и подобные и отдельные их составляющие.

Обычно предполагается, что суточное противовирусно эффективное количество будет составлять от 0,01 до 50 мг/кг массы тела. Может быть приемлемым применение необходимых доз в качестве двух, трех, четырех или более поддоз за приемлемые интервалы на всем протяжении суток. Указанные поддозы могут быть сформулированы как единичные дозированные формы, например, содержащие от 1 до 1000 мг, в частности от 5 до 200 мг, активного ингредиента на единичную дозированную форму.

Точная дозировка и частота применения зависят от конкретно используемого соединения формулы (I), конкретного состояния, подвергаемого лечению, тяжести состояния, подвергаемого лечению, возраста, веса, пола, степени нарушения и общего физического состояния конкретного пациента, а также и других медикаментов, принимаемых больным, как это хорошо известно специалисту в данной области. Кроме того, очевидно, что указанное эффективное суточное количество может снижаться или возрастать в зависимости от восприимчивости пациента и/или в зависимости от оценки врача, предписывающего соединения настоящего изобретения. Следовательно, диапазоны эффективного суточного количества, упомянутые выше, представляют собой только рекомендации.

В качестве лекарственного средства также может использоваться комбинация другого противовирусного агента и соединения формулы (I). Таким образом, настоящее изобретение также относится к продуктам, содержащим (a) соединение формулы (I) и (b) другое противовирусное соединение, в виде комбинированного препарата для совместного, раздельного или последовательного применения при лечении вирусного заболевания. Различные лекарственные средства можно комбинировать в одном препарате вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Например, соединения настоящего изобретения можно комбинировать с бета-интерфероном или альфа-фактором некроза опухолей надлежащим образом для лечения или профилактики RSV инфекции.

ПРИМЕРЫ

Нижеприведенные примеры предназначены для иллюстрации настоящего изобретения.

Соединения были исследованы методом LC/MS с использованием следующих методик:

LCT: электрораспылительная ионизация в положительном режиме, сканирующий режим от 100 до 200 amu; Xterra MS C18 (Waters, Milford, MA) 5 мкм, 3.9 х 150 мм; скорость потока 1 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза A: 85% 6,5 мМ ацетата аммония +15% ацетонитрила; подвижная фаза B: 20% 6,5 мМ ацетата аммония +80% ацетонитрила) были использованы для изменения градиента от 100% A в течение 3 мин до 100% B за 5 мин, 100% B в течение 6 мин до 100% A за 3 мин и повторного уравновешивания 100%-ной A в течение 3 мин.

ZQ: электрораспылительная ионизация одновременно в положительном и отрицательном (импульсном) режимах, сканируя от 100 до 1000 amu; Xterra RP C18 (Waters, Milford, MA) 5 мкм, 3,9 х 150 мм; скорость потока 1 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза A: 85% 6,5 мМ ацетата аммония +15% ацетонитрила; подвижная фаза B: 20% 6,5 мМ ацетата аммония +80% ацетонитрила) были использованы для изменения градиента от 100% A в течение 3 мин до 100% B за 5 мин, 100% B в течение 6 мин до 100% A за 3 мин и повторного уравновешивания 100%-ной A в течение 3 мин.

Номера конечных продуктов в нижеследующих примерах (соединение 1 и так далее) соответствуют номерам соединений в Таблицах 1-5.

ПРИМЕР 1

Схема A

Получение промежуточного соединения a-3

Смесь a-1 (11,7 г, 0,076 моль), a-2 (7,5 г, 0,076 моль) и карбоната калия (15,9 г, 0,11 моль) в ацетонитриле (280 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем в нее добавляли воду. Продукт экстрагировали три раза CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, далее удаляли растворитель при пониженном давлении, получая a-3 с количественным выходом.

Получение промежуточного соединения a-5

Смесь a-3 (10 г, 0,037 моль) и a-4 (5,7 г, 0,037 моль) нагревали при 130°С в течение 4 часов. Затем реакционную колбу охлаждали до комнатной температуры. Добавляли H₂O и продукт экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, и последующая очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 97/3/0,5) давала 3,6 г a-5 (26%).

Получение промежуточного соединения a-7

Смесь a-5 (4,00 г, 0,01 моль) и a-6 (2,3 г, 0,01 моль) нагревали при 130°С в течение 3 часов. Затем реакционную колбу охлаждали до комнатной температуры. Добавляли H₂O и продукт экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, и последующая очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 94/6/0,5) давала 1,8 г a-7 (33%).

Получение промежуточного соединения a-8

a-7 (1,4 г, 0,0027 моль) растворяли в 70 мл CH₂Cl₂. Затем раствор охлаждали до 0°С и добавляли раствор BBr₃ (1 М в CH₂Cl₂, 10,7 мл, 0,011 моль). Далее смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и затем обработали водой. Обычная обработка давала a-8, полученное с количественным выходом.

Получение целевого соединения 1

Смесь a-8 (0,5 г, 0,001 моль), 2-хлорэтанола (0,1 г, 0,0015 моль), K₂CO₃ (0,17 г, 0,0012 моль) в сухом ДМФА (5 мл) нагревали при 80°С в течение 72 часов, после чего ее охлаждали до комнатной температуры. Экстракция этилацетатом с последующей колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 95/5/0,5) привела к получению 130 мг соединения 1 (24%).

ПРИМЕР 2

Схема B

Получение промежуточного соединения b-3

NaH (60% в минеральном масле, 6 г, 0,15 моль) добавляли порциями к раствору b-1 (20 г, 0,15 моль) в ДМФА (100 мл) в атмосфере N₂. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа и затем порциями добавляли b-2 (14,7 г, 0,075 моль), продолжая перемешивание еще в течение 2 часов. Смесь выливали в смесь льда и воды и экстрагировали продукт этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, и последующая очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 95/5/0,5) давала 14 г b-3 (38%, температура плавления 221°С).

Получение промежуточного соединения b-5

Смесь b-3 (13 г, 0,052 моль), b-4 (11,6 г, 0,052 моль), карбоната калия (10,8 г, 0,078 моль) и каталитического количества KI в ацетонитриле (600 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем в нее добавляли воду. Продукт экстрагировали три раза CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄ и удаляли растворитель при пониженном давлении, получая b-5. Очистка колоночной хроматографией (силикагель, толуол/изопропанол/NH₄OH; 85/15/1) давала 6,5 г b-5 (32%).

Получение целевого соединения 19

Смесь b-5 (0,3 г, 0,0008 моль) и b-6 (0,4 г, 0,0023 моль) нагревали при 130°С в течение 4 часов. Затем реакционную колбу охлаждали до комнатной температуры. Добавляли H₂O и продукт экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты промывали водным раствором K₂CO₃ (10%) и затем высушивали над MgSO₄. Очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 99/1/0,1) давала 0,25 г соединения 19 (85%, температура плавления: 160°С).

ПРИМЕР 3

Схема C

Получение промежуточного соединения c-3

Смесь c-1 (5,00 г, 0,033 моль) и c-2 (13,13 г, 0,066 моль) нагревали при 130°С в течение 4 часов. Затем реакционную колбу охлаждали до комнатной температуры. Добавляли H₂O и продукт экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, и последующая очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 97/3/0,1) давала 11,5 г c-3 (92%).

Получение промежуточного соединения c-5

Смесь c-3 (11,0г, 0,035 моль), c-4 (7,75 г, 0,035 моль) и карбоната калия (7,21 г, 0,052 моль) в ацетонитриле (165 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем в нее добавляли воду. Продукт экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, и последующая очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH; 98/2) дала 9,78 г c-5 (61%).

Получение целевого соединения 35

Смесь c-5 (0,5 г, 0,0011 моль) и c-6 (0,75 г, 0,0033 моль) нагревали при 130°С в течение 2 часов. Затем реакционную колбу охлаждали до комнатной температуры. Добавляли H₂O и продукт экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты высушивали над MgSO₄, и последующая очистка концентрированного фильтрата колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 93/7/0,1) давала 3,6 г соединения 35 (23%, температура плавления: 128°С).

ПРИМЕР 4

Схема D

Получение промежуточного соединения d-2

MeONa (66 мл 30%-ного раствора в MeOH, 0,34 моль) добавляли к раствору d-1 (52 г, 0,17 моль) в MeOH (500 мл) при 5°С и перемешивали в течение 2 часов при этой температуре. Затем добавляли (Boc)₂O (41 г, 0,17 моль) при этой же температуре и оставляли перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Смесь упаривали и суспензировали в смеси вода/диизопропиловый эфир. Осадок отфильтровывали и промывали смесью вода/диизопропиловый эфир и высушивали, получая 40 г d-2 (73%).

Получение промежуточного соединения d-4

Смесь d-2 (5 г, 0,0158 моль), d-3 (4,5 г, 0,0158 моль) и K₂CO₃ (5,4 г, 0,039 моль) в ацетонитриле (100 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 12 часов. Растворитель упаривали досуха. Продукт экстрагировали CH₂Cl₂. Органический слой сушили над MgSO₄, фильтровали и упаривали растворитель, получая 9 г d-4 (100%).

Получение промежуточного соединения d-6

Смесь d-4 (7,4 г, 0,015 моль), d-5 (2,9 г, 0,015 моль), K₂CO₃ (3,1 г, 0,022 моль) и каталитического количества KI в ацетонитриле (150 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 6 часов, затем охлаждали до комнатной температуры и упаривали растворитель досуха. Остаток растворяли в CH₂Cl₂. Органический слой промывали H₂O, сушили (над MgSO₄), отфильтровывали и упаривали растворитель. Остаток (10,6 г) очищали колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 92/8/0,5), получая 3 г d-6 (31%).

Получение промежуточного соединения d-7

Смесь d-6 (2,3 г, 0,0035 моль), HCl (20 мл 5Н раствора в изопропаноле) в изопропаноле (20 мл) перемешивали в течение 1 часа при 60°С. Растворитель упаривали досуха. Остаток растворяли в Et₂O. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 3 г указанного в заголовке соединения с количественным выходом. Соединение далее использовалось без очистки.

Получение промежуточного соединения d-9

Смесь d-7 (2,08 г, 0,0035 моль), d-8 (1,2 г, 0,0053 моль) и K₂CO₃ (2,0 г, 0,0143 моль) в ацетонитриле (100 мл) перемешивали при комнатной температуре 2 часа, затем кипятили с обратным холодильником в течение 24 часов. Растворитель упаривали досуха. Остаток растворяли в CH₂Cl₂. Органический слой промывали водой, сушили (над MgSO₄), отфильтровывали и упаривали растворитель. Остаток (2,3 г) очищали колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 90/10/1), выделяя 0,61 г d-9 (25%).

Получение промежуточного соединения d-10

Смесь d-9 (0,6 г, 0,0009 моль) и Pd/C (0,2 г, 10%) в MeOH (15 мл) насыщали водородом при атмосферном давлении в течение 30 минут и затем отфильтровывали через целит. Целит промывали MeOH и фильтрат упаривали, получая 0,5 г d-10 (96%). Соединение использовалось в дальнейшем без очистки.

Получение целевого соединения 55

Смесь d-10 (0,5 г, 0,0008 моль), HCl (5 мл 5Н раствора в изопропаноле) в изопропаноле (25 мл) перемешивали в течение 6 часов при 60°С, затем охлаждали до комнатной температуры. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали изопропанолом, затем диэтиловым эфиром и высушивали. Эту фракцию растворяли в воде, переводили в основание обработкой NH₄OH и экстрагировали CH₂Cl₂/MeOH. Органический слой промывали водой, сушили (над MgSO₄), отфильтровывали и упаривали растворитель. Кристаллизация из CH₃CN/EtOH давала 0,29 г соединения 55 (70%, температура плавления: 212°С).

ПРИМЕР 5

Схема E

Получение промежуточного соединения e-3

Смесь e-1 (0,0114 моль), e-2 (0,0114 моль) и K₂CO₃ (0,0399 моль) в ДМФА (50 мл) перемешивали при 70°С в течение 2 часов. Осадок отфильтровывали. Фильтрат упаривали. Остаток промывали CH₂Cl₂/MeOH. Органический слой дважды промывали водой, сушили (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток (5,1 г) кристаллизовали из 2-пропанона. Осадок отфильтровывали и высушивали. Маточный слой (3,1 г) очищали колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 90/10/0,5; 10 мкм). Собирали 2 фракции и упаривали растворитель. Выход: 1,4 г e-4 (36%) и 1,2 г e-3 (31%). Часть e-4 (0,2 г) была перекристаллизована из 2-пропанона. Осадок отфильтровывали и высушивали. Выход: 0,132 г e-4 (температура плавления > 250°С). Часть e-3 (0,1 г) была перекристаллизована из 2-пропанона. Осадок отфильтровывали и высушивали с выходом 0,062 г e-3 (температура плавления: 192°С).

Получение промежуточного соединения e-5

LiAlH₄ (0,007 моль) добавляли порциями при 5°С к раствору e-3 (0,0035 моль) в ТГФ (30 мл) в токе N₂. Смесь перемешивали при 5°С в течение 30 минут, затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем выливали в воду и отфильтровывали через целит. Целит промывали CH₂Cl₂/MeOH. Фильтрат упаривали. Остаток (1,5 г) помещали в 1Н HCl. Смесь промывали CH₂Cl₂, обрабатывали основанием 3Н NaOH. Осадок отфильтровывали, промывали водой и высушивали с диэтиловым эфиром, выход: 0,5 г e-5 (48%).

Получение промежуточного соединения e-6

MnO₂ (4,5 г) добавляли порциями при комнатной температуре к раствору e-5 (0,0015 моль) в CH₃CO₂H (0,5 мл) и MeOH (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем отфильтровывали через целит. Целит промывали CH₂Cl₂/MeOH. Фильтрат упаривали, получая 0,6 г e-6 (CH₃CO₂H соль, 100%). Этот продукт использовался непосредственно в следующей стадии.

Получение целевого соединения 58

CH₃CO₂H (4 капли), затем BH₃CN на твердой подложке (0,0013 моль) добавляли к смеси e-6 (0,0007 моль) и e-7 (0,001 моль) в MeOH (12 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов и затем отфильтровывали. Твердую подложку промывали CH₂Cl₂/MeOH. Фильтрат упаривали. Остаток (0,35 г) очищали колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 90/10/0,5; 10 мкм). Чистые фракции собирали и упаривали растворитель. Остаток (0,067 г) кристаллизовали из 2-пропанона. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 0,054 г соединения 58 (17%, температура плавления 195°С).

ПРИМЕР 6

Схема F

Получение промежуточного соединения f-3

Смесь f-1 (0,022 моль), f-2 (0,066 моль) и NEt₃ (0,066 моль) в C₂H₅OH (50 мл) перемешивали при 60°С в течение 12 часов, затем упаривали досуха и переносили в CH₂Cl₂. Органический слой промывали водой, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Выход: 7,4 г f-3 (100%).

Получение промежуточного соединения f-4

Смесь f-3 (0,022 моль) и никеля Ренея (15 г) в этаноле (110 мл) гидрогенировали при комнатной температуре в течение 1 часа и затем фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Выход: 7 г f-4 (100%). Неочищенное соединение использовалось непосредственно в следующей реакционной стадии.

Получение промежуточного соединения f-5

Смесь f-4 (0,022 моль) и BrCN (0,0242 моль) в C₂H₅OH (70 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 12 часов, затем упаривали досуха. Остаток переносили в CH₂Cl₂. Органический слой промывали K₂CO₃ 10%, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток кристаллизовали из CH₃CN. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 2,4 г f-5 (33%, температура плавления: 199°С).

Получение промежуточного соединения f-7

Смесь f-5 (0,0009 моль), f-6 (0,0009 моль) и K₂CO₃ (0,0031 моль) в ДМФА (30 мл) перемешивали при 65°С в течение 12 часов, затем выливали в H₂O/CH₂Cl₂. Органический слой отделяли, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток закристаллизовали из CH₃CN. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 0,19 г f-7 (46%, температура плавления: 199°С).

Получение промежуточного соединения f-8

LiAlH₄ (0,0012 моль) был добавлен порциями при 5°С к раствору f-7 (0,0002 моль) в ТГФ (15 мл) в токе N₂. Смесь перемешивали при 5°С в течение 2 часов, затем перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов, затем выливали в минимальное количество воды. Добавляли CH₂Cl₂ и MeOH (небольшое количество). Органический слой отделяли, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток закристаллизовали из 2-пропанона/CH₃CN/диизопропилового эфира. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 0,062 г f-8 (75%, температура плавления: 199°С).

Получение промежуточного соединения f-9

Смесь f-8 (0,0036 моль) и MnO₂ (3 г) в CH₂Cl₂ (100 мл) и MeOH (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и затем фильтровали через целит. Фильтрат упаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 96/4/0,5; 15-40 мкм). Чистые фракции собирали и упаривали растворитель, получая 1,1 г (74%).

Получение целевого соединения 59

Смесь f-9 (0,0003 моль), f-10 (0,0004 моль) и BH₃CN- на твердой основе (0,0005 моль) в MeOH (20 мл) и CH₃CO₂H (0,15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и затем отфильтровывали. Фильтрат упаривали досуха. Остаток переносили в CH₂Cl₂. Органический слой промывали K₂CO₃ 10%, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток (0,26 г) очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 91/9/0,5; 10 мкм). Чистые фракции собирали и упаривали растворитель. Остаток (0,16 г, 78%) перекристаллизовывали из CH₃CN/диизопропилового эфира. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 0,127 г соединения 59 (62%, температура плавления: 158°С).

ПРИМЕР 7

Схема G

Получение промежуточного соединения g-3

Смесь (0,003 моль), g-2 (0,0033 моль) и K₂CO₃ (0,006 моль) в ДМФА (50 мл) перемешивали при 60°С в течение 6 часов, затем выливали в ледяную H₂O. Органический слой отделяли, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток (2,4 г) очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 93/7/0,5; 20-45 мкм). Чистые фракции собирали и упаривали растворитель, получая 0,63 г g-3 (44%).

Получение промежуточного соединения g-4

Суспензию LiAlH₄ (0,0079 моль) в ТГФ (20 мл) добавляли при 5°С к раствору g-3 (0,0013 моль) в ТГФ (20 мл) в токе N₂. Смесь перемешивали при 5°С в течение 2 часов, затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и охлаждали до 5°С. Добавляли лед. Добавляли CH₂Cl₂/MeOH. Органический слой отделяли, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и упаривали растворитель, получая 0,176 г g-4 (31%, температура плавления: 186°С).

Получение промежуточного соединения g-5

Смесь g-4 (0,0002 моль) и MnO₂ (0,3 г) в CH₂Cl₂ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа 30 минут и затем фильтровали через целит. Целит промывали CH₂Cl₂. Фильтрат упаривали досуха, получая 0,126 г g-5.

Получение целевого соединения 60

Смесь g-5 (0,0003 моль), g-6 (0,0003 моль), BH₃CN на твердой подложке (0,0004 моль) и CH₃CO₂H (5 капель) в MeOH (7 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов и затем отфильтровывали. Фильтрат упаривали досуха. Остаток переносили в CH₂Cl₂/MeOH/K₂CO₃ 10%. Смесь насыщали K₂CO₃ (порошком) и экстрагировали CH₂Cl₂. Органический слой отделяли, высушивали (над MgSO₄), отфильтровывали и досуха упаривали растворитель. Остаток (0,17 г) очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH; 89/10/1). Чистые фракции собирали и упаривали растворитель. Остаток переносили в 2-пропанон. Осадок отфильтровывали и высушивали, получая 0,047 г соединения 60 (28%, температура плавления: 90°С).

Таблица 1
Соединение №	R2	plC50	MS MH+	Т.пл. (°С)/ соль	Метод получения
1		8,2	554		А
2		8	505		В
3		8	525	168 HCl	А
4		7,9	510	160	A
5		7,8	538		B
6		7,5	572	178 HCl	A
7		7,5	524	82	C
8		7,3	512	102	A
9		7,3	538	80	C
10		7,2	505		B
11		7,1	512	102 HCl	A
12		7,1	532	168	B
13		6,9	517	80	A
14		6,8	524	HCl	B
15		6,7	515	HCl	A
16		6,6	508	142	B
17		6,5	573		B
18		6,5	584	184	A
19		6,5	528	160	B
20		6,4	508	158	B
21		6,4	528	154	B
22		6,2	539	222	B
23		6,2	562	114	B
24		6,1	630	190	B
25		5,7	494		A
26		5	572	125	B
27		4,7	524	150	B
28		4,5	539	196	B
29		4,4	570	100	B
30		4,3	552	118	B
31		<4	519	182	B
32		<4	584	108	B
33		4	586	66	A

Таблица 2
Соединение №	R2	plC50	MS MH+	Т.пл. (°С)/ соль	Метод получения
34
35		8,1	605	128/ HCl	C
36		7,1	545	89	A
37		6,9	550	96/HCl	A
38		6,8	617	146	A
39		5,8	663	204	B
40		<4	605	131	B

ПРИМЕР 8: In vitro скрининг соединений формулы (I) для исследования активности против RSV. Защиту против вызываемой вирусами цитопатологии (противовирусную активность, или EC₅₀), достигаемую исследуемыми соединениями в процентах, и их цитотоксичность (CC₅₀) рассчитывали из кривых зависимости доза-эффект. Селективность противовирусного действия представлена индексом селективности (SI), вычисленным делением CC₅₀ (цитотоксическая доза для 50% клеток) на EC₅₀ (противовирусная активность для 50% клеток). Таблицы в вышеприведенной экспериментальной части определяют категории, к которым относится каждое из синтезированных соединений. Соединения, принадлежащие к категории активности «A», имеют pEC₅₀ (-lg EC₅₀, выраженного в молярных единицах), больше или равный 7. Соединения, принадлежащие к категории активности «B», имеют pEC₅₀ в диапазоне от 6 до 7. Соединения, принадлежащие к категории активности «C», имеют pEC₅₀ меньше или равный 6.

Для определения EC₅₀ и CC₅₀ исследуемых соединений использовали автоматические тетразолиевые колориметрические анализы. В каждую лунку 96-луночного плоскодонного пластикового лотка для микротитрования вносили аликвоты по 180 мкл основной питательной среды Игла (Eagle's Basal Medium), содержащей 5% FCS (0% FLU) и 20 мМ буфера Hepes. Далее исходные растворы (7,8 × конечная исследуемая концентрация) соединений добавляли по 45 мкл в серии лунок в трехкратной повторности, чтобы иметь возможность одновременной оценки их воздействия на инфицированные вирусом клетки и аналогичные им не инфицированные клетки. Пять пятикратных разбавлений проводили непосредственно в лунках микротитратора при использовании роботизированной системы. Необработанные вирусные контрольные группы и контрольные группы клеток HeLa были вовлечены в каждый опыт. Приблизительно по 100 TCID₅₀ респираторного синцитиального вируса было добавлено к двум из трех рядов в аликвотах по 50 мкл. Одинаковый объем питательной среды добавили к трем рядам для измерения цитотоксичности соединений при одинаковых концентрациях, так как это применяется при определении противовирусной активности. После двух часов инкубации по 50 мкл суспензии (4 × 10⁵ клеток/мл) клеток HeLa добавили ко всем ячейкам. Культуры выдерживали в термостате при 37°С в 5% атмосфере CO₂. Через 7 дней после инфицирования цитотоксичность и противовирусная активность были исследованы спектрофотометрически. К каждой лунке лотка микротитратора было добавлено по 25 мкл раствора MTT (бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия). Далее поддоны термостатировали при 37°С в течение 2 часов, после чего удаляли питательную среду из каждой лунки. Растворение кристаллов формазана было достигнуто за счет добавления 100 мкл 2-пропанола. Полное растворение кристаллов формазана было осуществлено после помещения лотков на планшетный шейкер в течение 10 минут. В заключение, оптические плотности были определены в управляемом компьютером восьмиканальном фотометре (Multiskan MCC, Flow Laboratories) для двух длин волн (540 и 690 нм). Оптическая плотность, измеренная при 690 нм, была автоматически вычтена из оптической плотности при 540 нм, для того чтобы устранить воздействия неспецифического поглощения.

Процент защиты против вызываемой вирусами цитопатологии (противовирусную активность, или EC₅₀), достигаемый исследуемыми соединениями, и их цитотоксичность (CC₅₀) были рассчитаны из кривых зависимости доза-эффект. Селективность противовирусного эффекта представлена как индекс селективности (SI), вычисленный делением CC₅₀ (цитотоксическая доза для 50% клеток) на EC₅₀ (противовирусная активность для 50% клеток).

1. Соединение, имеющее формулу

его аддитивные соли;
где каждый Alk независимо представляет собой C_1-6алкандиил;
Q представляет собой атом водорода; C_1-6алкил, замешенный одним или двумя радикалами Ar²; C_1-6алкил, замещенный хинолинилом, морфолинилом или пирролидинонилом; -СО-Ar² или Q представляет собой радикал, имеющий формулу

где t может принимать значение 2;
R⁴ представляет собой амино;
R¹ представляет собой морфолинил, пиридил или хинолинил,
где каждый из указанных моноциклических или бициклических гетероциклов необязательно может иметь 2 заместителя, выбранных из гидрокси и C_1-6алкила;
R² представляет собой Ar² или -СО-Ar²;
где Q не является водородом, R³ представляет собой атом водорода;
или где Q является атомом водорода, R¹ представляет собой водород или морфолинил и R³ представляет собой радикал, имеющий формулу

где R⁶ представляет собой атом водорода;
R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо выбран из С_1-6алкила, R^10a-O-C_1-6алкила и R⁸ или R⁹ также могут представлять собой атомы водорода;
R^10a представляет собой атом водорода;
Ar¹ представляет собой фенил;
Ar² представляет собой фенил или фенил, замещенный 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, гидрокси, С_1-6алкила, циано, нитро, гидрокси-С_1-6алкила, полигалогено-С_1-6алкила, C_1-6алкилоксила, гидрокси-С_1-6алкилоксила, С_1-6алкилоксикарбонила, Ar¹ и Ar¹O.

2. Соединение по п.1, в котором Q представляет собой атом водорода.

3. Соединение по п.1, в котором Q представляет собой C_1-6алкил, замещенный одним или двумя радикалами Ar²; C_1-6алкил, замещенный хинолинилом, морфолинилом или пирролидинонилом;
Q представляет собой -СО-Ar² или
Q представляет собой радикал, имеющий формулу (а), где t равно 2;
R⁴ представляет собой амино.

4. Соединение по п.1, в котором R¹ независимо представляют собой морфолинил или хинолинил и R² независимо представляют собой Ar², -СО-Ar².

5. Соединение по п.1, в котором R³ представляет собой радикал, имеющий формулу (b), где
R⁶ выбран из атома водорода;
R⁷, R⁸ и R⁹ независимо друг от друга выбраны из C_1-6алкила
и R⁸ или R⁹ также могут представлять собой атом водорода;
R^10a представляет собой атом водорода.

6. Соединение по п.1, где R³ представляет собой атом водорода или радикал, имеющий формулу (b), где
R⁶ представляет собой атом водорода;
R⁷, R⁸ и R⁹ независимо один от другого выбраны из C_1-6алкила, R^10a-O-C_1-6алкила и R⁸ или R⁹ также могут представлять собой атом водорода;
R^10a представляет собой атом водорода.

7. Соединение по п.1, в котором R³ представляет собой атом водорода.

8. Соединение, определенное в любом из пп.1-7 для использования в качестве лекарственного средства, ингибирующего репликацию респираторного синцитиального вируса (RSV).

9. Фармацевтическая композиция, ингибирующая репликацию респираторного синцитиального вируса (RSV), включающая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество соединения, описанного в любом из пп.1-7.

10. Способ получения химического соединения, определенного в любом из пп.1-7, включающий N-алкилирование бензимидазола (II) алкилирующим агентом (III), как показано на следующей схеме реакции:

где Q, Alk, R¹, R², R³ имеют значения, определенные в любом из пп.1-8, и W обозначает уходящую группу.