Способ подавления опухолевого роста



 


Владельцы патента RU 2491930:

Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" (ФГУП "ГНЦ "НИОПИК") (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для подавления опухолевого роста. Для этого применяют бинарную каталитическую систему, содержащую натриевую соль октакарбоксифталоцианина кобальта и аскорбиновую кислоту. При этом до введения бинарной каталитической системы внутривенно вводят 3-амино-1,2,4-триазол в нетоксической дозе. Изобретение обеспечивает подавление роста злокачественных новообразований, малочувствительных к действию бинарной каталитической системы. 2 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, более конкретно к онкологии, а именно к подавлению роста злокачественных опухолей.

В настоящее время по данным ВОЗ рак является одной из основных причин смерти в большинстве районов мира, включая и развитые страны, где он стоит на втором месте после сердечно-сосудистых заболеваний и составляет 15-20% от общего ежегодного числа смертельных случаев. Химиотерапия является одним из важнейших методов лечения, в арсенал которой входит более 40 фармакологических препаратов, обладающих цитотоксическими свойствами и направленных на подавление роста опухолевых клеток.

Широко известны способы с применением цитостатиков разного механизма действия, например цис-дихлордиаминоплатины и других платиновых комплексов. Обладая широким спектром действия, эти лекарственные средства используется для лечения солидных опухолей различной локализации [Cancer Treat Rep. 1982 Jan; 66(1): 135-46; Вопросы онкологии, 1989, 35,3, с.325-330]. Основным недостатком цитостатиков является недостаточная избирательность противоопухолевого действия, что проявляется как побочное действие на клетки желудочно-кишечного тракта, кроветворение, нефротоксичность [Вопросы онкологии, 1975, 21, 8, с.95-105].

В настоящее время получила распространение фотодинамическая терапия опухолей, в которой используются фотосенсибилизаторы - свободные тетрапиррольные макроциклические лиганды или их комплексы с металлами, например алюминиевый комплекс сульфированного фталоцианина Al[Рс(SO3H)2-3]. Применение этого способа возможно только в случае опухолей поверхностной локализации, точнее - доступных для лазерного световода [Итоги науки и техники. М.; ВИНИТИ, 1990, 3, с.5-6].

Наиболее близок к предлагаемому изобретению способ с применением бинарной каталитической системы (БКС), содержащей октакарбоксифталоцианин кобальта (терафтал, ТФ) и биогенный восстановитель (аскорбиновую кислоту, АК), в соотношении концентраций компонентов 1:10. Применение этого способа позволяет подавить пролиферацию опухолевых клеток in vitro и тормозить рост широкого круга перевиваемых опухолей у мышей: солидных опухолей (меланомы В 16, аденокарциномы молочной железы Са-755) и асцитных опухолей (карциномы Эрлиха, асцитной гепатомы 22), [Рос. хим. журнал. - 1998. - Т.XLII, №5. - с.140-146..].

В ходе клинических испытаний установлена способность каталитической системы «терафтал+аскорбиновая кислота» вызывать стабилизацию процесса у больных с исчерпанными возможностями специфической терапии при таких резистентных к воздействию цитостатиков злокачественных опухолях как рак почки, рак коры надпочечников, злокачественный карциноид и ряде других. Положительный лечебный эффект (стабилизация процесса, минимальная регрессия опухоли) отмечены у 25 больных из 95 (26,3%). [РБЖ. - 2005. - №1, т.4. - с.105-107].

Эти данные свидетельствуют о недостаточном лечебном эффекте БКС, что заставляет искать дополнительные способы повышения ее эффективности.

Задачей изобретения является изыскание более эффективного способа с применением указанной БКС для подавления опухолевого роста.

Для решения поставленной задачи предлагается использовать способ подавления роста опухоли с использованием бинарной каталитической системы терафтал и аскорбиновая кислота, причем до введения БКС внутривенно вводят 3-амино-1,2,4 триазол (3-АТ) в нетоксической дозе.

Испытания заявляемого способа подавления опухолевого роста на цитотоксическую и противоопухолевую активность были проведены на культурах опухолевых клеток (in vitro) и на мышах с перевиваемыми опухолями (in vivo).

Определение активности препаратов на культурах опухолевых клеток (in vitro).

Методика 1. Определение цитостатической активности комбинации БКС (ТФ+АК) в условиях преинкубации с 3-АТ проводили с использованием биотеста, основанного на ингибировании пролиферации лейкозных клеток человека 2-х линий (линия U937 и К562), обусловленного воздействием цитотоксических агентов.

Для культивирования лейкозных клеток использовали среду RPMI 1640, содержащую 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 100 мкг/мл гентамицина и 20 мкМ глютамина. Культивирование клеток проводили в стандартных условиях: при 37°С в увлажненной атмосфере, содержащей 5% двуокиси углерода.

При постановке цитостатического биотеста в лунки плоскодонного 96-ти луночного микропланшета ("Costar", США) вносили по 200 мкл суспензии клеток (концентрация) 2·104 клеток/лунку/200 мкл с добавлением к началу фазы логарифмического роста тестируемых препаратов в объеме 20 мкл/лунку.

Цитостатическую активность тестируемых препаратов оценивали колориметрическим методом, основанным на способности митохондриальных дегидрогеназ живых тест-клеток восстанавливать экзогенно вносимый растворимый бромид 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия (МТТ, "Sigma Chemical Co", США) в нерастворимый кристаллический формазан. При этом в каждую лунку 96-ти луночного микропланшета вносили по 20 мкл раствора МТТ в концентрации 5 мг/мл, после чего центрифугировали клеточные культуры, удаляли из лунок весь объем культуральной среды. Для солюбилизации окрашенных продуктов реакции (кристаллов формазана) в каждую лунку микропланшета вносили по 60 мкл диметилсульфоксида ("Sigma") и инкубировали микропланшеты при комнатной температуре и непрерывном встряхивании. Результаты учитывали по поглощению при длине волны 530 нм на миниридере «Uniplan» (Россия)

Уровни ингибирования пролиферации клеточных культур препаратами, тестируемыми на цитостатическую активность, вычисляли по формуле

И П ( % ) = 100 % П о П к × 100 %

где ИП - уровень ингибирования пролиферации,

По - уровень пролиферации в опыте (с препаратами); поглощение красителя в опытных образцах;

Пк - уровень пролиферации в контроле (без препаратов); поглощение красителя в опытных образцах.

Количественным критерием эффективности препаратов in vitro служит показатель IC50, соответствующий концентрации препаратов, при которой достигается 50% выживаемость клеток.

Статистическую обработку результатов проводили методом проб анализа.

В табл.1 представлены данные, полученные при исследовании ингибирования пролиферации in vitro опухолевых клеток в присутствии комбинации ТФ+АК с 3-АТ.

Таблица 1
Ингибирование пролиферации опухолевых клеток in vitro в присутствии комбинации ТФ+АК после преинкубации с 3-АТ в течение 1 часа
Линии клеток IC50 БКС, мкМ
БКС БКС+(3-АТ)
U937 33±0.7 15±1.3
К562 25±0.5 12±08

Методика №2.

Определение влияния 3-АТ на противоопухолевый эффект БКС (ТФ+АК) выполнялось на мышах с перевиваемыми опухолями (in vivo).

Испытания были проведены на подкожно трансплантированной меланоме В16 (пример). Лекарственную форму терафтал-ЛИО растворяли в стерильном физиологическом растворе до получения 0,2% концентрации. 5% аптечный раствор аскорбата натрия растворяли в стерильной дистиллированной воде или изотоническом растворе натрия хлорида до концентрации 2,2%. Субстанцию 3-АТ сухой рассыпки во флаконах (Sigma) растворяли в стерильном физиологическом растворе до получения 5% концентрации. Путь введения - внутривенный.

Торможение роста опухоли (солидной) рассчитывали по формуле:

T P O = V с р . к о н т р о л я V с р . о п ы т а V с р . к о н т р о л я × 100 %

где Vcp - средний объем опухоли (контроль и опыт), рассчитанный как произведение трех измерений и выраженный в мм3.

Результаты, полученные на мышах с опухолями, оценивают с помощью общепринятых показателей противоопухолевой активности при наличии в качестве контроля мышей, не получавших противоопухолевой терапии [Трещалина Е.М., и др. В кн.: Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общей ред. Член-корр. РАМН проф. Р.У. Хабриева. - 2 изд., перераб. и доп. - М.: ОАО изд. «Медицина», 2005 г. стр.637-651]..

Пример. Опухоль, меланому В 16, прививали мышам подкожно (п/к). Прививочная доза 50 мг взвеси опухолевой ткани в 0,5 мл питательной среды 199 на мышь. Использованы мыши-самки. Вес мыши - не менее 18 г. Начало лечения - через 72 ч после прививки опухоли.

У мышей контрольной группы без лечения на 8, 11 и 14 сутки после трансплантации средний объем опухоли составлял 470±146 мм3, 2735±640 мм3 и 5308±1332 мм3.

В группе мышей, получивших лечение ТФ в разовой дозе 40 мг/кг и через 1 час АК в разовой дозе 88 мг/кг на 5, 8 и 11 сутки после лечения средний объем опухоли составлял 223±141 мм3, 2097±813 мм3 и 4992±2003 мм3, соответственно.

По отношению к группе контроля в группе ТФ+АК торможение роста опухоли не достигло достоверных отличий и составило, соответственно 53%, 23% и 6%. Гибели от токсичности не наблюдали.

В группе мышей, получивших предварительно за 2 часа до начала применения БКС 3-АТ в дозе 1000 мг/кг, на 5, 8 и 11 сутки после лечения средний объем опухоли составлял, соответственно 147±78 мм3, 1323±661 мм3 и 3347±1207 мм3.

По отношению к группе контроля в группе 3-АТ+ТФ+АК торможение роста опухоли достигло достоверного отличия на 5 сутки после лечения и составило 69%, оставаясь в течение 11 суток на значимом уровне 52 и 37%.

По отношению к группе ТФ+АК торможение роста опухоли было увеличено в 1,3-2,4-6,0 раз соответственно срокам регистрации эффекта.

Гибели от токсичности не наблюдали.

Таблица 2
Динамика роста п/к меланомы В16 и эффективность воздействия при сочетании 3-АТ и ТФ+АК
Группа Доза Средний объем опухоли (мм3) с доверительным интервалом ТРО% на сутки после лечения
8 11 14 5 8 11
Контроль роста опухоли (физ.р-р) 0,2 мл/мышь 470 [324÷616] 2735 [2095÷3375] 5308 [3976÷6640] - - -
ТФ+АК 40+88 мг/кг 223 [82÷364] 2097 [1284÷2910] 4992 [2989÷6995] 53 23 6
3-АТ+2ч+[ТФ+АК] 1000+[40+88] мг/кг 147 [69÷225] 1323 [662÷1984] 3347 [2140÷4554] 69* 52 37
Примечание: *отличие от контроля достоверно, р<0,05.

Таким образом, использование предлагаемого способа позволяет усилить эффективность подавления роста относительно малочувствительного к действию каталитической системы ТФ+АК злокачественного новообразования, а именно: добиться подавления пролиферации раковых клеток (in vitro) и увеличения торможения роста опухолей у мышей в 1,3-6,0 раз по сравнению с прототипом в зависимости от сроков регистрации эффекта.

Способ подавления опухолевого роста с применением бинарной каталитической системы, содержащей натриевую соль октакарбоксифталоцианина кобальта и аскорбиновую кислоту, отличающийся тем, что до введения бинарной каталитической системы внутривенно вводят 3-амино-1,2,4-триазол в нетоксической дозе.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые содержат кислую сернокислую соль (2-гидроксиэтокси)амида 6-(4-бром-2-хлорфениламино)-7-фтор-3-метил-3Н-бензоимидазол-5-карбоновой кислоты и сольваты, их кристаллические формы и аморфные формы, к применению указанных композиций в качестве лекарственного средства; и к способам получения указанных композиций.

Изобретение относится к полиморфной форме соединения (IX), характеризующейся картиной дифракции рентгеновских лучей, включающей характеристические пики приблизительно 7.269, 9.120, 11.038, 13.704, 14.481, 15.483, 15.870, 16.718, 17.087, 17.473, 18.224, 19.248, 19.441, 19.940, 20.441, 21.469, 21.750, 22.111, 23.319, 23.763, 24.120, 24.681, 25.754, 26.777, 28.975, 29.609, 30.073 градусов 2 .

Изобретение относится к способу лечения рака у пациента, где способ включает введение в организм пациента ингибирующего рак количества первого соединения формулы Способ лечения рака у пациента, включая человека, где указанный способ включает введение в организм пациента ингибирующего рак количества первого соединения формулы I или его физиологически приемлемой соли, где Х представляет СН или N, каждый R1 независимо представляет водород или -CH2COR5 ; R5 представляет гидрокси, необязательно гидроксилированный алкокси, амино или алкиламидо; каждый R2 независимо представляет группу ZYR6; Z представляет связь или C1-3 алкиленовую или оксоалкиленовую группу, необязательно замещенную группой R7; Y представляет связь, атом кислорода или группу NR6; R6 является атомом водорода, группой COOR8, алкильной, алкенильной, циклоалкильной, арильной или аралкильной группой, необязательно замещенной одной или более группами из COOR8, , , OR8, =NR8, =O, OP(O)(OR8 )R7 и OSO3M; R7 является гидрокси, необязательно гидроксилированной, необязательно алкоксилированной алкильной или аминоалкильной группой; R8 является атомом водорода или необязательно гидроксилированной, необязательно алкоксилированной алкильной группой; М является атомом водорода или одним эквивалентом физиологически приемлемого катиона; R 3 представляет C1-8 алкиленовую группу, 1,2-циклоалкиленовую группу или 1,2-ариленовую группу, необязательно замещенную R 7; и каждый R4 независимо представляет водород или C1-3 алкил.

Изобретение относится к новым алкилтиопиримидинам, имеющим формулу III, или их фармацевтически приемлемым солям. .

Изобретение относится к соединениям формулы: U1-M-U2,где U1 и U2 имеют общую формулу (I) где G означает: а значения M, X1, Х 2, R2, R3, R3', R 4, R4', R5, R5', R6, R6', R7, Z1 , Z2, Z3, Z4, Q2 приведены в пункте 1 формулы.

Изобретение относится к способу увеличения терапевтической эффективности куркуминоидов и их аналогов. .

Изобретение относится к химии гетероциклических соединений, а именно к замещенным O-[ -(азол-1-ил)алкил]-N-фенилкарбаматам общей формулы I: где Z и Y означают атом азота или CH-группу, или одновременно являются цепью C-CH=CH-CH=CH-C составляющую вместе аннелированное кольцо; m означает целое число от 1 до 3; R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу с числом атомов углерода от 1 до 4, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, сульфамоилгруппу, n означает целое число атомов от 0 до 2;к их солям с фармацевтически подходящими кислотами, обладающим антиагрегационной активностью.
Изобретение относится к области ветеринарии. .

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается способа лечения образования биопленок P.aeruginosa у пациента или способа лечения хронической инфекции P.aeruginosa у пациента путем введения комбинации, включающей (а) 4-[3,5-бис(2-гидроксифенил)-[1,2,4]триазол-1-ил]бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и (б) антибиотик, выбранный из группы, включающей гентамицин, амикацин, тобрамицин, ципрофлоксацин, левофлоксацин, цефразидим, цефепим, цефпиром, пиперациллин, тикарциллин, меропенем, имипенем, полимиксин В, колистин и азреонам.

Изобретение относится к области получения органических веществ, а именно дигидрохлорида 5-амино-3-аминометил-1,2,4-триазола формулы (I) и может быть использовано в производстве лекарственных и биологически активных веществ, химических реактивов.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) или их фармацевтически приемлемым солям, где Q является фенилом или пиридинилом; А является пиразолилом или триазолилом, где каждый А является независимо дополнительно незамещенным или замещенным 1 или 2 заместителями, представленными Ra, или А является формулой (a); Va является C(R4), V b является N или C(R5) и Vc является N; иди Va является N, Vb является C(R 5) и Vc является N или C(R6); R 4 является водородом, R5 является водородом, С1-6алкилом, -ORb, -SRb, арилом, выбранным из фенила, гетероарилом, выбранным из тиенила, или циклоалкилом, выбранным из циклопропила; R6 является водородом или арилом, выбранным из фенила; R7 является водородом или С1-6алкилом; R3 является водородом, С1-3алкилом, -OH, -S(O)2R 1, или гетероарилом, выбранным из тетразолила, где гетероарил соединен с атомом азота через углеродный атом кольца; Rb , Rx, Ry, Rza, Rzb , Rw, Re, Rk, Rm, Rn, Rq и Rl, в каждом случае, являются независимо водородом, С1-3алкилом или С 1-3галогеналкилом; и Rf в каждом случае, является независимо водородом, С1-3алкилом или -OH (остальные заместители принимают такие значения, как определено в формуле изобретения).

Изобретение относится к медицине, а именно к андрологии, и может быть использовано для коррекции гиперэстрадиолемии и нормогонадотропного гипогонадизма у мужчин. .

Изобретение относится к комбинации для лечения жидких и солидных опухолей, которая включает 4-[3,5-бис(2-гидроксифенил)[1,2,4]триазол-1-ил]бензойную кислоту и цисплатин или их фармацевтические приемлемые соли.
Наверх