Способ получения растительного средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием



Способ получения растительного средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием
Способ получения растительного средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием
Способ получения растительного средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием
Способ получения растительного средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием

 


Владельцы патента RU 2504391:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО ПГФА Росздрава) (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием. Способ получения средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием, состоящий в том, что экстракцию измельченной травы коровяка черного проводят 60% этиловым спиртом, методом реперколяции в батарее из 3 перколяторов с неравной загрузкой сырья, полученное извлечение отстаивают, фильтруют, упаривают и высушивают в вакуум-сушильном аппарате при определенных условиях. Средство, полученное вышеописанным способом, обладает выраженным антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием. 4 табл.

 

Изобретение относится к области медицины и фармацевтической промышленности и касается создания средства растительного происхождения на основе биологически активных веществ коровяка черного (Verbascum nigrum L.) сем. Scrophulariaceae, обладающего одновременно антикоагулянтной, гипотензивной и диуретической активностями.

Поиск и разработка новых лекарственных средств, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний сердечно-сосудистой системы, обусловлены широким распространением, сложностью патогенеза данных болезней. Наиболее распространенными болезнями из этой нозологической группы являются различные виды гипертонии, атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, тромбоэмболия и другие. Очень часто эти заболевания имеют взаимозависимый характер и сопровождаются повышенным артериальным давлением, отечностью, образованием сосудистых тромбов. В комплексной терапии заболеваний сердечно-сосудистой системы используют гипотензивные, антикоагулянтные и диуретические средства, которые назначают одновременно. В настоящее время доказана эффективность применения лекарственных препаратов из растительного сырья для лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы, при этом фитопрепараты не оказывают побочного действия и безвредны при длительном применении.

Известен ряд растительных средств оказывающих избирательное антикоагулянтное действие. Так, антикоагулянтная активность обнаружена у извлечений из растений одуванчика лекарственного [Патент RU 2085205 С1], пиона древовидного [Патент RU 93033687А], медуницы мягчайшей [Чирятьев Е.А., Русакова О.А. Виды флоры Сибири как источники антикоагулянтов прямого действия. Раст. ресурсы 1994. Т 30. №4, С.21-28], извлечений из продуктов микробной деструкции растительных веществ сапропеля [Патент RU 2101023 С1]. Гипотензивной активностью обладают извлечения из травы очанки лекарственной [Патент RU 2220735 С1], марьянника лугового [Патент RU 2222339 С2], сбора из пяти видов лекарственных растений (сушеницы топяной, плодов боярышника, шлемника байкальского, горца птичьего, плодов шиповника) [Патент RU 2182487 С2]. Диуретическая активность обнаружена у извлечений из подземных органов сабельника болотного [Патент RU 2318531 С1], травы ортосифона тычиночного [Патент RU 1737797 С1] и земляники лесной [Патент RU 2342945 C1], а так же у извлечений из сборов лекарственных растений, содержащих листья брусники, толокнянки, траву горца птичьего и другие виды [Патент RU 2008142861 А; Патент RU 2237488 С1].

Наиболее близким по направленности и комплексности действия, а также по способу получения является средство, представляющее собой очищенное извлечение из корней патринии средней, обладающее седативным, гипотензивным, антикоагулянтным, антиагрегационным и гиполипедемическим действием [Патент RU 2189241 С1], взятое нами за прототип.

Основные недостатки прототипа заключаются в том, что:

1. Растительный источник средства - патриния средняя {Patrinia in-tercetia Roem et Sehult) сем. Valerianaceae, имеет ограниченный ареал распространения и не образует плотных зарослей, что лимитирует сырьевую базу производства.

2. Источником получения препарата являются подземные органы патринии средней. Процесс заготовки корней трудоемкий, а приведение сырья в стандартное состояние энергетически и экономически затратное (отмывка корней от земли, сушка, измельчение).

3. Измельченное растительное сырье экстрагируют спиртом высокой концентрации (80%), что приводит к удорожанию препарата.

4. Технология получения средства многостадийна, имеется дополнительная стадия очистки извлечения от балластных веществ.

5. В процессе получения средства используются высокотоксичные органические растворители - хлороформ и бутанол.

6. Средство не обладает диуретическим действием.

Задачей настоящего изобретения является повышение биологической ценности, улучшение лечебных свойств и расширение спектра фармакологической активности за счет проявления диуретической активности. Предложен препарат, одновременно сочетающий в себе антикоагулянтные, гипотензивные и диуретические свойства, позволяющие применять его для профилактики и лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы (гипертоническая болезнь, ишемическая болезнь сердца и т.д.).

Для достижения указанной цели высушенную надземную часть (траву) Коровяка черного (Verbascum nigrum L. сем. Scrophulariaceae) измельчают до размера частиц не более 2 мм, экстрагируют 60% этиловым спиртом в соотношении сырье - экстрагент 1:6, методом реперколяции в батарее из трех перколяторов с неравной загрузкой сырья (20:30:50), время настаивания в каждом перколяторе по 8 часов. Полученное извлечение отстаивают при температуре не выше +10°С, в течение 2-х суток, отфильтровывают, сгущают, высушивают под вакуумом и получают сухой экстракт. Выход готового продукта составляет 38% от массы растительного сырья.

Конечный продукт имеет следующие качественные и количественные характеристики:

Анализ на содержание флавоноидов:

Сухой экстракт (0,1 г) растворяют в 10 мл 60% этилового спирта

1. К 3 мл раствора прибавляют 1 мл 2% раствора алюминия хлорида, появляется желтое окрашивание.

2. К 3 мл раствора прибавляют 10 мг кристаллического магния и 5 капель концентрированной хлороводородной кислоты, нагревают на кипящей водяной бане 3 мин, появляется оранжево-красное окрашивание.

3. 0,01 мл раствора наносят на лист хроматографической бумаги марки Filtrak FN-1 размером 40×40 см и хроматографируют восходящим методом, сначала в системе растворителей бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:2) в течение 17 часов, а после высушивания лист бумаги поворачивают на 90° и хроматографируют в 15% уксусной кислоте в течение 8 часов. Хроматограмму высушивают и просматривают в УФ свете до и после обработки парами аммиака. При этом на хроматограмме появляются 6 пятен. Значение Rf данных пятен должно соответствовать данным таблицы №1.

Количественное определение флавоноидов:

Аналитическую пробу сухого экстракта около 0,2 г (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в смеси диоксан - вода (1:1) и доводят до метки (раствор А), 10 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют 1 мл 1% раствора алюминия хлорида, доводят до метки смесью диоксан - вода (1:1) и перемешивают (раствор Б). Спустя 10 минут измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре «Спектр-2000» при длине волны 383 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 10 мл раствора А, доведенного смесью диоксан - вода (1:1) до метки в мерной колбе вместимостью 50 мл. Содержание суммы флавоноидов в сухом экстракте в пересчете на гесперидин вычисляют по формуле:

,

где D - оптическая плотность исследуемого раствора; m-масса экстракта, г; V - объем раствора А, взятый для разбавления, мл; 50 - объем раствора Б; 100 - объем раствора A; W - влажность экстракта, %; 120 - удельный показатель поглощения комплекса 100% субстанции гесперидина с реактивом при длине волны 383 нм.

Анализ содержания иридоидов:

Сухой экстракт (0,1 г) растворяют в 10 мл 60% этилового спирта. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 капель реактива Шталя (1 г п-диэтиламинобензальдегида, 5 г фосфорной кислоты и 50 г уксусной кислоты, разбавляют водой до 100 мл), доводят до кипения на водяной бане, появляется сине-голубое окрашивание.

К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 капель реактива Трим-Хилла (смесь, состоящая из 5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты, 10 мл 0,2% раствора сульфата меди и 100 мл ледяной уксусной кислоты), нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин., появляется синее окрашивание.

Количественное определение иридоидов:

Проводят по реакции с реактивом Трим-Хилла по методу Грегора и Симхена. Навеска вещества для количественного определения составляет 0,2 г.

Способ получения средства иллюстрируется следующим примером:

0,1 кг травы коровяка черного (только надземная часть) измельчают до размера частиц <0,25≤2,0. Измельченное сырье загружают в три перколятора, причем в первый перколятор помещают 20 г, во второй 30 г и в третий 50 г.Сырье в первом перколяторе заливают до «зеркала» и настаивают 8 часов. Полученные извлечения сливают и используют для экстрагирования сырья во втором перколяторе и далее каждую последнюю порцию сырья экстрагируют извлечением, полученным из предыдущего перколятора. Объем слива (мл) из каждого перколятора равен массе загруженного сырья (г). Время настаивания в каждом перколяторе 8 часов, общий расход экстрагента - 600 мл, что соответствует соотношению сырье - экстрагент 1:6. Извлечения, полученные из последнего перколятора, объединяют, отстаивают при температуре +10°С в течение двух суток, фильтруют, упаривают и высушивают в вакууме. Получают 0,038 кг готового продукта, что составляет 38% сухого экстракта от массы исходного сырья.

Сухой экстракт представляет собой гигроскопическую массу темно-коричневого цвета с характерным специфическим запахом. Содержание флавоноидов в экстракте составляет 8,2±0,4%, иридоидов 0,83±0,04%, влажность 6,5±0,5%.

Предлагаемый способ получения достаточно прост, не требует сложной системы очистки, позволяет получить продукт постоянного состава. Способ получения может быть внедрен на предприятиях по выпуску лекарственных препаратов.

Оценку антикоагулянтной активности проводили in vitro с помощью коагулометра «Minilab-701» в концентрации 1 мг/мл. Для исследования использовали кровь собаки, стабилизированную 3,8% раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Безтромбоцитную и тромбоцитную плазму получали по стандартной методике [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000].

В качестве индуктора свертывания крови использовали 0,28% раствор хлорида кальция. Эталоном антикоагулянтной активности служил гепарин, который испытывали в концентрации 1 ЕД/мл в аналогичных условиях. Эффекты всех фармакологических испытаний считали достоверными при Р≤0,05 [Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта, 2-е изд., Л.: Медицинская литература, 1963]. Полученные данные приведены в таблице 2.

Как следует из данных таблицы 2, экстракт коровяка черного оказывает антикоагулянтное действие. Он достоверно замедляет время свертывания крови на 17-18%». Биологически активные вещества экстракта не влияют на эритроцитарный компонент тромбообразования. Опыты с плазмой обогащенной тромбоцитами и безтромбоцитарной плазмой свидетельствуют о том, что экстракт коровяка черного не вызывает блокаду функции тромбоцитов, а оказывает влияние на плазменные факторы свертывания крови, сходное с действием гепарина.

Испытание на гипотензивную активность проводили in vivo на кошках [Березина М.П., Василевская Н.Е., Авербах М.С. и др. Большой практикум по физиологии человека и животных./под общей редакцией Васильева Л.Л. и Ветюкова И.А. - М.: Высшая школа, 1961. с.675], в качестве эталона сравнения использовали раствор папаверина гидрохлорида в дозе 3 мг/кг (0,1 ЛД50). Он вызывает достоверное снижение артериального давления на 34,4% продолжительностью 5 минут. Результаты в таблице 3.

Как следует из таблицы 3, сухой экстракт коровяка черного вызывает достоверное снижение артериального давления на 12% в течение 10 минут.

Диуретическую активность определяли на 30 белых беспородных крысах самцах массой 250-300 г. Сухие экстракты вводили перорально в дозе 50 мг/кг, предварительно растворяли в 5 мл воды. Сбор мочи производили через 3 и 6 часов после введения препаратов. Контрольной группе животных вводили по 5 мл воды. Препараты сравнения (сухие водные экстракты хвоща полевого и листьев брусники обыкновенной) испытывали в аналогичных условиях. Результаты представлены в таблице 4. Из представленных данных видно, что экстракты коровяка черного обладают диуретической активностью. Следует отметить, что экстракты проявляют максимальную активность в течение первых трех часов после введения препарата. Мочегонный эффект экстракта коровяка черного, полученного на 60% этаноле, за первые три часа в два раза, а за 6 часов в три раза активнее экстракта, полученного на 40% этаноле. Диуретический эффект заявленного средства за 6 часов достоверен и сопоставим с активностью экстракта из листьев брусники и в два раза выше, чем у традиционного мочегонного средства - травы хвоща полевого.

ЛИТЕРАТУРА

Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта, 2-е изд., Л.: Медицинская литература, 1963.

Березина М.П., Василевская Н.Е., Авербах М.С. и др. Большой практикум по физиологии человека и животных. / под общей редакцией Васильева Л.Л. и Ветюкова И.А. - М.: Высшая школа, 1961, с.675.

Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000.

Способ получения биологически активных веществ, обладающих антиагрегационным и гипотензивным действием Патент №2222339 от 27.01.2004.

Способ получения комплекса, обладающего фибринолитической, тромболитической и антикоагулянтной активностью Патент RU №93033687 А от 20.11.1995.

Способ получения средства, обладающего антикоагулянтной активностью Патент RU №2101023 С1 от 10.01.1998.

Способ получения средства, обладающего гипотензивной активностью Патент №2182487 С2 от 20.05.2002.

Способ получения средства, обладающего диуретической и противовоспалительной активностью Патент №2318531 С1 от 10.03.2008.

Способ получения средства, обладающего диуретической и противовоспалительной активностью Патент №2342945 С1 от 10.01.2009.

Способ получения средства, обладающего противовоспалительной и гипотензивной активностью Патент №2220735 от 10.01.2004.

Способ получения суммы экстрактивных веществ, обладающей диуретической активностью Патент №1737797 С от 30.11.1994.

Средство, обладающее антикоагулянтным действием Патент RU №2085205 С1 от 27.07.1997.

Средство, обладающее диуретической и гипоазотемической активностью (варианты), и способ его получения Патент №2008142861 А от 10.05.2010.

Средство «Патримин», обладающее седативным, гипотензивным, антикоагулянтным, антиагрегационным и гиполипидемическим действием Патент №2189241 С1 от 26.06.2001.

Средство «Чай байкальский - 6», обладающее диуретической активностью и способ его получения Патент №2237488 С1 от 10.10.2004.

Чирятьев Е.А., Русакова О.А. Виды флоры Сибири как источники антикоагулянтов прямого действия. Раст. ресурсы. 1994. Т 30, №4, с.21-28.

Способ получения средства, обладающего антикоагулянтным, гипотензивным и диуретическим действием, состоящий в том, что экстракцию измельченной до не более 2 мм травы коровяка черного проводят 60%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье-экстрагент 1:6, методом реперколяции в батарее из 3 перколяторов с неравной загрузкой сырья в соотношении 20:30:50 и времени настаивания в каждом перколяторе 8 ч, полученное извлечение отстаивают при температуре не выше 10°C, фильтруют, упаривают и высушивают в вакуум-сушильном аппарате.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к способу получения хромогенного комплекса чаги, в котором измельченную чагу заливают водой в массовом соотношении (0,5-1,5)-(3,5-4,5), замораживают при температуре минус 16±3°С в течение 1-4 часов, настаивают 1-2 часа при температуре 65-75°С, фильтруют, фильтрат подкисляют 25% хлористоводородной кислотой до рН 1,0-2,0, перемешивают, отстаивают 12-15 часов и фильтруют.

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической промышленности, касается получения концентрата хлорофиллов из ламинарии сахаристой. Способ получения концентрата хлорофиллов из измельченной ламинарии сахаристой путем ее экстракции этиловым спиртом в защищенном от света месте трехкратно, далее отделяют экстракт от шрота, извлечения объединяют, отгоняют экстрагент, к полученному остатку добавляют воду, фильтруют через бумажный фильтр, остаток на фильтре промывают двумя порциями воды, растворяют в 96% этиловом спирте, сумму хлорофиллов растворяют в стерильном оливковом масле до получения 25% концентрации суммы хлорофиллов, остаток 96% спирта этилового отгоняют под вакуумом, способ проводят при определенных условиях.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего иммуномодулирующей активностью. Способ получения средства, обладающего иммуномодулирующей активностью, характеризующийся тем, что растительную композицию, состоящую из травы пустырника обыкновенного, травы горца птичьего, цветков ноготков лекарственных, корневищ с корнями солодки голой, корневищ с корнями вздутоплодника сибирского, плодов шиповника, плодов лимонника китайского, семян льна обыкновенного, последовательно экстрагируют 60-70% этиловым спиртом дважды, 40-50% этиловым спиртом - двукратно и водой очищенной - однократно, при определенных условиях, далее водно-спиртовые извлечения концентрируют под вакуумом, водные кубовые остатки объединяют с водным извлечением, фильтруют, упаривают, очищают сепарированием, доупаривают, высушивают в вакуум-сушильном шкафу с последующим измельчением.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего тонизирующей активностью. Способ получения средства из корней женьшеня настоящего, обладающего тонизирующей активностью, путем экстракции измельченного сырья 40-80% этиловым спиртом трехкратно с использованием трех экстракторов, при определенных условиях, вначале экстрагирование осуществляют при комнатной температуре в течение 12 часов, а затем третью экстракцию при температуре 90°С в течение 30 минут, в каждом экстракторе.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается создания средства растительного происхождения на основе биологически активных веществ льнянки обыкновенной, обладающего диуретическим и антикоагулянтным действием.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения иммунотропного средства. .
Изобретение относится к косметической и фармацевтической промышленности, в частности к способу получения водно-жирового экстракта из трав и/или цветов трав. .
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно способу получения хромогенного комплекса гриба трутовика плоского. .
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения фитопрепарата из корней копеечника забытого (Hedysarum neglectum) или корней копеечника чайного (Hedysarum theinum).

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к кардиопротекторному и антиоксидантному средству. .
Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии в кардиологии, в частности к способу лечения подростков с эссенциальной артериальной гипертензией.

Изобретение относится к медицине, в частности клинической фармакологии и кардиологии, и может быть использовано для достижения целевого уровня артериального давления у больных артериальной гипертензией (АГ) 1-2 степени.

Изобретение относится к новым N, S-замещенным производным изотиомочевин общей формулы (I): где R=(CH3)2CH; C 2H5, обладающим NOS-ингибирующим, вазоконстрикторным и радиозащитным действием.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается средства, представляющее собой 2-бензоил-1-гидрокси-4,5-диметилимидазол формулы 1, обладающего антигипертензивной активностью, низкой токсичностью и не уступающего по активности эталонным препаратам с антигипертензивной активностью.
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и эндокринологии, и касается коррекции липопероксидации при гиполипидемической терапии пациентов с метаболическим синдромом.

Изобретение относится к медицине, а именно к токсикологии и кардиологии, и касается профилактики хронической токсической артериальной гипертонии и кардиопатии у экспериментальных животных.

Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано для профилактики или лечения ревматоидного артрита у пациента. .
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии и кардиологии, и касается нормализации агрегации эритроцитов при артериальной гипертонии с нарушением толерантности к глюкозе.

Настоящее изобретение относится к области органической химии, а именно к новым производным пиридинамида общей формулы I, где n равно 1; R1 и R2 вместе означают остаток, выбранный из группы, состоящей из -CH=N-NH- и -CH=CH-N=CH-, который присоединен в любом желаемом направлении к материнской структуре, или R2 и R3 вместе означают остаток, выбранный из группы, состоящей из -CH=N-NH-; -CR28=N-NH-; -S-C(=S)-NH-; -S-CR29=N-; -N=CR30-O-; -N=CH-NH-; -N=N-NH-; -O-CH2-O-; -СН2-CH2-СН2-NH, -О-СН2-СН2-О-; -N=CH-CH=N-; -CH=CH-CH=N-, который присоединен в любом желаемом направлении к материнской структуре, или R3 и R4 вместе означают остаток -CH=N-NH-, который присоединен в любом желаемом направлении к материнской структуре, или R4 и R5 вместе означают остаток -CH=N-NH-, который присоединен в любом желаемом направлении к материнской структуре, и остальные остатки R1, R2, R3, R4 и R5, взаимно независимо, в каждом случае означают Н; где R28 означает F; Cl; Вr или I; R29 и R30, взаимно независимо, в каждом случае означают -NH-C(=O)-R31; -NH2; -NH-S(=O)2-R32; -NH-C(=O)-O-R33; -S-R34; где R31, R32, R33 и R34, взаимно независимо, в каждом случае означают линейный или разветвленный, насыщенный, незамещенный алифатический С1-10 остаток; R6 означает Н или означает линейный или разветвленный, насыщенный, незамещенный алифатический С1-10 остаток; R7 означает водород или -ОН; R8 означает -СF3; или означает незамещенный трет-бутильный остаток; Т означает C-R35 и U означает C-R36, V означает N и W означает C-R38; где R35 и R36 означают Н; где R38 означает -NR40R41; -OR42 или -SR43; где R40, R41, R42 и R43, взаимно независимо, в каждом случае означают линейный или разветвленный, насыщенный, незамещенный алифатический C1-10 остаток; или означают насыщенный, незамещенный 3-, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- или 9-членный циклоалифатический остаток, или где R40 и R41 в каждом случае вместе с атомом азота в качестве члена кольца, соединяющим их вместе, образуют насыщенный 6-членный гетероциклоалифатический остаток, необязательно замещенный с помощью 1 остатка R57; где R57 означает линейный или разветвленный, насыщенный, незамещенный алифатический C1-10 остаток; в каждом случае в виде соответствующих физиологически приемлемых солей.
Наверх