Способ получения инъекционного заменителя синовиальной жидкости


 


Владельцы патента RU 2517237:

Федеральное государтсевнное бюджетное учреждение "Российский научный центр "Восстановительная травматология и ортопедия" имени академика Г.А. Илизарова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине и касается способа получения инъекционного заменителя синовиальной жидкости, включающего измельчение, экстракцию, протеолиз и осаждение шкуры сельскохозяйственных животных. Сначала готовят лиофилизат комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов и белков, далее готовят лиофилизат коллагена, на завершающем этапе готовят 2% раствор комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов и белков в дистиллированной воде и смешивают его с лиофилизатом коллагена до получения вязкости 8,0-8,2 относительно дистиллированной воды, полученный препарат упаковывают во флаконы и стерилизуют потоком быстрых электронов дозой 18+5 кГр. Изобретение обеспечивает получение целевого продукта с наименьшими затратами на его производство. 1 пр., 1 ил

.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к артрологии, и может быть использовано для лечения дегенеративно-дистрофических процессов в суставах путем периартикулярного введения искусственной синовиальной жидкости.

Известна технология синовиального протезирования препаратами экзогенного гиалуроната натрия высокой степени очистки с очень хорошими вязкоупругими свойствами (Сущук Е.А., 2007). Введение синовиальных протезов уменьшает болевой синдром, улучшает подвижность суставов, позволяет пациентам сократить употребление нестероидных противовоспалительных препаратов, а также отсрочить проведение ортопедической операции протезирования сустава.

В качестве прототипа является средство «Ферматрон» (FERMATHRON) - вязкоэластичный препарат на основе гиалуроната натрия, применяемый для инъекций в синовиальное пространство коленного сустава пациентов, страдающих слабой или умеренной степенью остеоартроза. Введение «Ферматрона» в полость сустава вызывает улучшение вязко-эластичных и защитных свойств синовиальной жидкости. Препарат представляет собой 1% раствор гиалуронана (гиалуронат натрия, натриевая соль гиалуроновой кислоты) и синтезируется путем ферментации Streptococcus equi и тщательно очищается.

Однако данный препарат рекомендуется на ранних стадиях болезни, когда обнаруживаются лишь слабовыраженные признаки разрушения хряща. Кроме того, гиалуроновую кислоту - действующее вещество ферматрона получают бактериальным синтезом, что обусловливает его высокую стоимость.

Задачей настоящего изобретения является разработка и создание препарата, оказывающего стимулирующее хондрогенез, лубрикационное и обезболивающее влияние на суставной хрящ при различных стадиях остеоартроза и способ его получения на основе гиалуроновой кислоты в комплексе с сульфатированными гликозаминогликанами и белками из шкур и коллагена из костной ткани сельскохозяйственных животных.

Указанная задача решается тем, что очищенную шкуру от сала и жира замораживают и измельчают до стружки, после этого замораживают повторно и осуществляют экстракцию нагретым до 80°С раствором 0,9% хлорида натрия, экстракт фильтруют, добавляют папаин из расчета 1 мг на 1 л экстракта, термостатируя экстракт при температуре 40°С 24 часа, затем осаждают гликозаминогликаны из протеолизата с добавлением равного объема 4% калия ацетата в этаноле, осадок отделяют декантацией и вновь растворяют в дистиллированной воде, после чего полученный раствор подвергают вакуумной сушке в течение 48 часов с достижением остаточной влажности 5%, далее готовят лиофилизат коллагена, для этого отмытую от остатков жира костную ткань подвергают декальцинации 0,5 М хлороводородной кислоты, из полученного костного матрикса экстрагируют неколлагеновые белки 8 М мочевиной с добавлением 1% 2-меркаптоэтанола, к 500 г диссоциативно экстрагированного костного матрикса добавляют 1 л 0,01 М раствора соляной кислоты, в котором растворяют 2 г пепсина, смесь периодически перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 48 часов, после чего из смеси декантированием и фильтрацией отделяют коллоидный раствор солюбилизированного костного коллагена, а нерастворившийся матрикс вновь заливают раствором пепсина в 0,01 М соляной кислоты, процедуру протеолиза повторяют до полного растворения матрикса, далее растворы коллагена на каждом этапе объединяют, полученный раствор освобождают от нерасворившихся частиц центрифугированием, высаливают хлоридом натрия, диализуют и лиофильно высушивают, определяют концентрацию коллагена, на завершающем этапе готовят 2% раствор комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов и белков в дистиллированной воде и смешивают его с лиофилизатом коллагена до получения вязкости 8,0-8,2 относительно дистиллированной воды, полученный препарат упаковывают во флаконы и стерилизуют потоком быстрых электронов дозой 18+5 кГр.

Настоящее изобретение поясняют подробным примером его осуществления и схемой, на которой иллюстрированы основные этапы осуществления способа.

Инъекционный заменитель синовиальной жидкости получают следующим способом.

На первом этапе готовят лиофилизат комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов и белков. Для этого после предварительной механической очистки шкур свиней от сала и жира шкуры замораживают и измельчают до стружки. Полученную стружку вновь замораживают, после чего прибавляют нагретый до 80°С раствор 0,9%-го хлорида натрия в тройном объеме от количества стружки. Полученный экстракт фильтруют на складчатом фильтре. После чего помещают в емкость и добавляют папаин из расчета 100 мг на 1 л экстракта. Емкость помещают в термостат при температуре 40°С на 24 часа. Осаждение комплекса гликозаминогликанов и гликопротеинов из протеолизата осуществляют добавлением равного объема 4%-го калия ацетата в этаноле. Осадок отделяют декантацией и вновь растворяют в дистиллированной воде. После этого полученный раствор комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов, белков подвергают вакуумной сушке в течение 48 часов с достижением остаточной влажности 5%.

Вторым этапом из минерализованной соединительной ткани готовят лиофилизат коллагена. Кортикальную костную ткань очищают от остатков мягких тканей, надкостницы и костного мозга. Очищенную ткань отмывают от остатков жира смесью спирт-диэтиловый эфир в соотношении 1:1, при этом количество обезжиривающей смеси должно быть втрое больше костной ткани по объему. Подготовленную таким образом костную ткань высушивают в токе воздуха в течение суток. Далее костную ткань измельчают, полученная фракция размером менее 0,5 см. Затем навеску очищенной, отмытой, измельченной костной ткани заливают пятикратным объемом раствора 0,5 М хлороводородной кислоты. Из полученного костного матрикса экстрагируют неколлагеновые белки 8 М мочевиной с добавлением 1% 2 - меркаптоэтанола. К 500 г диссоциативно экстрагированного костного матрикса добавляют 1 л 0,01 М раствора соляной кислоты, в котором растворяют 2 г пепсина, смесь при периодическом перемешивании выдерживают при комнатной температуре 48 ч, после чего из смеси декантированием и фильтрацией через марлю отделяют коллоидный раствор солюбилизированного костного коллагена, а нерастворившийся матрикс вновь заливают раствором пепсина в 0,01 М соляной кислоты. Процедуру протеолиза повторяют до полного растворения матрикса.

Растворы коллагена на каждом этапе объединяют, полученный раствор освобождают от нерасворившихся частиц центрифугированием, высаливают хлоридом натрия (при его концентрации, составляющей 25-30% от таковой в насыщенном растворе) и диализуют против дистиллированной воды и лиофильно высушивают. Аликвоту коллагенового золя прецизионно взвешивают, лиофильно высушивают и определяют концентрацию коллагена в полученном лиофилизате повторным взвешиванием.

Завершающим этапом готовят 2% раствор комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов, белков в дистиллированной воде и смешивают его с лиофилизатом коллагена до получения вязкости 8,0-8,2 относительно дистиллированной воды, равную таковой у нормальной синовиальной жидкости.

Затем препарат упаковывают во флаконы и стерилизуют потоком быстрых электронов дозой 18+5 кГр на ускорителе ЛУЭ-8-5 М, У003 MB. Этапы осуществления способа отражены на схеме.

Полученный препарат содержит (мг/100 мг):

Кальций - 0,330×10-3

Фосфор - 0,150×10-3

Общий белок - 56,0

Сиаловые кислоты - 0,350

Уроновые кислоты - 0,9

Коллаген - 27,94

Гиалуроновая кислота - 2,4

Предлагаемый способ изготовления инъекционного заменителя из неминерализованной соединительной ткани показал, что его применение в клинической практике позволяет воспроизводить его в условиях лаборатории лечебного учреждения, для его осуществления не требуется применения дорогостоящих реактивов. Кроме того, предложенный целевой продукт является многокомпонентым, оказывая действие на различные звенья патогенеза дегенеративно-дистрофических заболеваний суставов.

Способ получения инъекционного заменителя синовиальной жидкости, включающий измельчение, экстракцию, протеолиз и осаждение шкуры сельскохозяйственных животных, отличающийся тем, что сначала готовят лиофилизат комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов и белков, для этого очищенную шкуру от сала и жира замораживают и измельчают до стружки, после этого замораживают повторно и осуществляют экстракцию нагретым до 80°С раствором 0,9% хлорида натрия, экстракт фильтруют, добавляют папаин из расчета 1 мг на 1 л экстракта, термостатируя экстракт при температуре 40°С 24 часа, затем осаждают гликозаминогликаны из протеолизата с добавлением равного объема 4% калия ацетата в этаноле, осадок отделяют декантацией и вновь растворяют в дистиллированной воде, после чего полученный раствор подвергают вакуумной сушке в течение 48 часов с достижением остаточной влажности 5%, далее готовят лиофилизат коллагена, для этого отмытую от остатков жира костную ткань подвергают декальцинации 0,5 М хлороводородной кислоты, из полученного костного матрикса экстрагируют неколлагеновые белки 8 М мочевиной с добавлением 1% 2-меркаптоэтанола, к 500 г диссоциативно экстрагированного костного матрикса добавляют 1 л 0,01 М раствора соляной кислоты, в котором растворяют 2 г пепсина, смесь периодически перемешивают и выдерживают при комнатной температуре 48 часов, после чего из смеси декантированием и фильтрацией отделяют коллоидный раствор солюбилизированного костного коллагена, а нерастворившийся матрикс вновь заливают раствором пепсина в 0,01 М соляной кислоты, процедуру протеолиза повторяют до полного растворения матрикса, далее растворы коллагена на каждом этапе объединяют, полученный раствор освобождают от нерастворившихся частиц центрифугированием, высаливают хлоридом натрия, диализуют, лиофильно высушивают и определяют концентрацию коллагена, на завершающем этапе готовят 2% раствор комплекса сульфатированных и несульфатированных гликозаминогликанов и белков в дистиллированной воде и смешивают его с лиофилизатом коллагена до получения вязкости 8,0-8,2 относительно дистиллированной воды, полученный препарат упаковывают во флаконы и стерилизуют потоком быстрых электронов дозой 18+5 кГр.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для профилактики посттравматического артроза коленного сустава. Для этого после моделирования у крыс травмы коленного сустава внутрисуставным путем вводят антиоксидант этоксидол в дозе 5 мг/кг через день в количестве 5 инъекций.

Изобретение относится к новым соединениям структурной формулы I, которые обладают ингибирующей активностью в отношении фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3-киназы). В формуле I: В представляет собой группировку формулы II:, где Wc представляет собой 6-10-членный арил, q равен 0, 1, 2, 3 или 4; X отсутствует или представляет собой -(CH(R9))z-, z равен 1; Y представляет собой -N(R9)-; Wd представляет собой R1 и R2 представляют собой C1-6алкил или галогено; R3 представляет собой водород или С1-6алкил; и в каждом случае R9 независимо представляет собой водород или С1-6алкил.

Изобретение относится к фенилалкилпиперазинам формулы (I): в которой: R1 обозначает независимо друг от друга атом водорода, атом галогена, (C1-C5)алкильную группу, (C1-C5)галогеналкильную группу, (C1-C2)перфторалкильную группу, (C1-C5)алкоксильную группу или (C1-C2)перфторалкоксильную группу; R2 обозначает (C1-C5)алкильную группу или (C1-C5)алкоксильную группу, R3 обозначает (C1-C5)алкильную группу; A обозначает =CH- или =N-; в форме основания или аддитивной соли с кислотой.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ профилактики или лечения воспалительного заболевания, включающего стадии получения антитела к NR10, имеющего NR10-нейтрализующую активность, и отбора антитела, подавляющего рост IL-31-зависимой клеточной линии, и введения этого антитела пациенту с воспалительным заболеванием, которое представляет собой атопический дерматит, хронический дерматит, ревматизм или остеоартрит.

Изобретение относится к производному 2,4-диамино-1,3,5-триазина общей формулы I, обладающему свойствами ингибитора протеинкиназ, его применению, а также к фармацевтической композиции на его основе.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к композиции для лечения и предупреждения остеоартрита и остеартроза суставов. Композиция для лечения и предупреждения остеоартрита и остеартроза суставов содержит порошок или экстракт высушенного растения, выбранного из группы: лопух, одуванчик, сабельник болотный, береза, зверобой, золотарник, крапива, мята, солодка, лапчатка белая, лапчатка прямостоячая, шиповник, синюха голубая, валериана, кукуруза, расторопша, овес, репешок, бессмертник, женьшень, шалфей, звездчатка, тыква, ива, земляника, цикорий, пырей, топинамбур, черника, календула, хрен, чеснок, осина, горец птичий (спорыш), подорожник, девясил, красностебельная гречиха, цветки ромашки, мелисса, василек синий, сушеница, череда трехраздельная; лиофилизат трутневого расплода и порошок кверцетина, или дигидрокверцетина, или рутина при определенном соотношении компонентов.

Изобретение относится к соединению формулы (I): где R1 представляет собой NR7C(O)R8 или NR9R10; R2 представляет собой водород; R3 представляет собой галоген; R4 представляет собой водород, галоген, циано, гидрокси, С1-4алкил, C1-4алкокси, CF3, OCF3, С1-4алкилтио, S(O)(С1-4алкил), S(O)2(С1-4алкил), СО2Н или CO2(С1-4алкил); R5 представляет собой C1-6алкил (замещенный NR11R12 или гетероциклилом, который представляет собой неароматическое 5-7-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу); R6 представляет собой водород, галоген, гидрокси, С1-4алкокси, CO2H или C1-6алкил (возможно замещенный группой NR15R16, морфолинилом или тиоморфолинилом); R7 представляет собой водород; R8 представляет собой С3-6циклоалкил (возможно замещенный группой NR24R25), фенил или гетероарил, который представляет собой ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, содержащей азот, кислород и серу, и которое возможно конденсировано с одним 6-членным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом или с одним 6-членным ароматическим гетероциклическим кольцом, где указанное 6-членное ароматическое гетероциклическое кольцо содержит от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, содержащей азот, кислород и серу; R9 представляет собой водород или C1-6алкил (возможно замещенный пиразолилом); R10 представляет собой C1-6алкил (возможно замещенный группой фенил или гетероарил, который представляет собой ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу, и которое возможно конденсировано с одним 6-членным гетероциклическим кольцом, где указанное 6-членное ароматическое гетероциклическое кольцо содержит 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из группы, содержащей азот, кислород или серу; где вышеуказанные фенильные и гетероарильные группировки в R8, R9 и R10 независимо возможно замещены группой: галоген, гидрокси, C(O)R42, C1-6алкил, C1-6гидроксиалкил, C1-6галогеноалкил, С1-6алкокси(С1-6)алкил или С3-10циклоалкил; если не указано иное, то гетероциклил возможно замещен группой C1-6алкил, (С1-6алкил)ОН, (С1-6алкил)С(O)NR51R52 или пирролидинилом; R42 представляет собой C1-6алкил; R12, R15 и R25 независимо представляют собой C1-6алкил (возможно замещенный группой гидрокси или NR55R56); R11, R16, R24, R51, R52, R55 и R56 независимо представляют собой водород или C1-6алкил; или к его фармацевтически приемлемым солям.

Описана фармацевтическая композиция на основе полидезоксирибонуклеотидов, экстрагированных из естественных источников. Композиция содержит фракцию полидезоксирибонуклеотидов, экстрагированных из спермы рыб, где указанные полидезоксирибонуклеотиды обладают полимерными цепями с различными молекулярными массами от 70 килодальтонов до 240 килодальтонов.

Изобретение относится к новым омега-3 липидным соединениям общей формулы (I) или к их любой фармацевтически приемлемой соли, где в формуле (I): R1 и R2 являются одинаковыми или разными и могут быть выбраны из группы заместителей, состоящей из атома водорода, гидроксигруппы, С1-С7алкильной группы, атома галогена, C1-С7алкоксигруппы, С1-С7алкилтиогруппы, С1-С7алкоксикарбонильной группы, карбоксигруппы, аминогруппы и С1-С7алкиламиногруппы; Х представляет собой карбоновую кислоту или ее карбоксилат, выбранный из этилкарбоксилата, метилкарбоксилата, н-пропилкарбоксилата, изопропилкарбоксилата, н-бутилкарбоксилата, втор-бутилкарбоксилата или н-гексилкарбоксилата, карбоновую кислоту в форме триглицерида, диглицерида, 1-моноглицерида или 2-моноглицерида, или карбоксамид, выбранный из первичного карбоксамида, N-метилкарбоксамида, N,N-диметилкарбоксамида, N-этилкарбоксамида или N,N-диэтилкарбоксамида; и Y является С16-С22 алкеном с двумя или более двойными связями, имеющими Е- и/или Z-конфигурацию.

Изобретение относится к области молекулярной фармакологии и, в частности, к пептиду, представляющему собой производное последовательности интерлейкина-15 (IL-15), оптимизированное для ингибирования биологической активности этого соединения.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству для профилактики синдрома хронической усталости у мужчин. Средство для профилактики синдрома хронической усталости у мужчин выполнено в виде суппозиториев, содержащих плазму крови самца марала, сухой экстракт красного корня, L-аргинин и вспомогательные вещества при определенном соотношении компонентов.

Изобретение относится к способу получения N-замещенных ментанкарбоксамидов. Способ осуществляют путем реакции сочетания между первичными ментанкарбоксамидами и арилгалогенидами в присутствии медного катализатора.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к композиции производного бетулина с биосовместимым носителем. Композиция, содержащая диацетат бетулина с арабиногалактаном, при определенном соотношении компонентов.

Группа изобретений относится к адгезионным гидрогелевым композициям, которые предназначены для применения в полости рта. Гидрофильный чувствительный к давлению биоадгезив представляет собой нековалентный комплекс пленкообразующего полимера, по крайней мере, с одним из следующих комплементарных компонентов: полимерным сшивающим агентом, олигомерным сшивающим агентом, низкомолекулярным веществом или смесью, по меньшей мере, из двух указанных компонентов, где пленкообразующий полимер и полимерный сшивающий агент выбраны из класса гидрофильных полимеров.
Группа изобретений относится к области личной гигиены и касается композиции для чистки зубов, которая обеспечивает слущивающий эффект в отношении мягких тканей в полости рта, и ее использования.
Изобретение относится к области косметологии, а именно к косметической композиции для перорального введения, содержащей в качестве единственного активного ингредиента комбинацию ликопина, витамина C, витамина E и не менее одного полифенольного соединения, получаемого из сосновой коры, в которой отношение массового содержания полифенольного соединения к сумме массовых содержаний ликопина, витамина C и витамина E составляет от 0,3 до 0,7.

Изобретение описывает очищающее средство для кожи и рук, содержащее следующие компоненты: a) от 5 до 70 мас.% сложного алкилового эфира и/или диэфира, b) от 0 до 40 мас.% поверхностно-активного вещества, выбранного из группы, включающей этоксилаты жирных спиртов, сульфоэфиры жирных спиртов и соли сульфатированных и/или сульфированных жирных кислот, c) от 0,5 до 10 мас.% средства для придания тиксотропности, такого как органический бентонит, и более 0,1 мас.% гидрофильной пирогенной кремниевой кислоты, d) от 0 до 30 мас.% одного или нескольких абразивных агентов, e) от 0 до 5 мас.% физиологически совместимого сложного эфира угольной кислоты, f) от 0 до <10 мас.% воды, g) при необходимости одно или несколько средств для стабилизации вязкости, h) при необходимости другие косметические вспомогательные вещества.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к ранозаживляющему препарату, состоящему из стеариновой кислоты; масла касторового; стеарата цинка; 70%-ного спиртового экстракта фитосбора, включающего кору дуба, цветки календулы, цветочные корзинки ромашки аптечной, листья крапивы, взятые в соотношении 1:3:2:1 соответственно; Na-соли жирных кислот шерстяного жира; борной кислоты; вазелина; глицерина; триэтаноламина; очищенной воды; растительного масла; экстракта травы зверобоя продырявленного; масла шиповника или облепихового масла; 10%-ного масляного раствора прополиса; естественного L- аминокислотного-пептидного биокомплекса, полученного путем экстракции 2,0-3,0%-ным водным раствором NaCl нативного содержимого рубца жвачных; очищенного ланолина и его производных.
Изобретение относится к водорастворимой бактерицидной композиции. Композиция включает бактерицидную субстанцию повиаргол в количестве 2,1-7,0 мас.% и зостерин в количестве 1,1-7,0 мас.%.
Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для лечения мужского бесплодия, обусловленного аутоиммунными реакциями против сперматозоидов.
Изобретение относится к медицине, а именно к травматологии и ортопедии, и может быть использовано для хирургического лечения несросшихся переломов и ложных суставов трубчатых костей при наличии дефицита мягких тканей.
Наверх