Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новобразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента



Владельцы патента RU 2521196:

Кочурова Екатерина Владимировна (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента. Венозную кровь и ротовую жидкость забирают у пациента в любой последовательности. В качестве биомаркера в ротовой жидкости используют раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА). В качестве биомаркера в плазме крови используют нейронспецифическую енолазу/neuron-specific enolase. При содержании в ротовой жидкости РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме нейронспецифической енолазы/neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 нг/мл диагностируют саркому челюсти. При содержании в ротовой жидкости РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме нейронспецифической енолазы/neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 нг/мл диагностируют плоскоклеточный рак челюсти. По полученным результатам прогнозируют тактику лечения пациента. Предлагаемое изобретение обеспечивает высокочувствительный и точный способ дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день его обращения. 1 з.п. ф-лы, 6 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, и может быть использовано в качественной экспресс-диагностике злокачественных новообразований органов полости рта в условиях стоматологических, онкологических и хирургических лечебных заведений.

Известен способ диагностики злокачественного новообразования органов полости рта по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, включающий исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема пищи пациентом и после полоскания полости рта пациента кипяченой водой комнатной температуры, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа на основе моноклональных антител, выполнение забора венозной крови пациента, получение плазмы крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа плазмы крови, с последующим анализом результатов исследований (см. Кочурова Е.В. Значение онкомаркеров слюнной жидкости при плоскоклеточном раке органов полости рта. Автореферат диссертации к.м.н., Москва, 2008 г., с.28).

Однако известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- обладает недостаточной точностью дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день обращения,

- обладает недостаточной чувствительностью дифференциальной диагностики,

- недостаточность вероятности выявления процесса злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних,

- сложность подготовки пациента в определенных временных рамках для забора диагностического материала.

Задачей изобретения является создание способа качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента.

Техническим результатом является достижение значительного повышения точности дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день обращения, достижение высокой чувствительности дифференциальной диагностики, достижение высокой вероятности выявления процесса злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, а также значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора диагностического материала.

Технический результат достигается тем, что предложен способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, включающий исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента, при этом выполнение забора ротовой жидкости у пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема пищи пациентом и после полоскания полости рта пациента кипяченой водой комнатной температуры, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа на основе моноклональных антител, выполнение забора венозной крови пациента, получение плазмы крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа плазмы крови, с последующим анализом результатов исследований, при этом венозную кровь и ротовую жидкость в любой последовательности забирают у пациента для исследований злокачественного новообразования, в качестве биомаркера в ротовой жидкости выбирают раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА), а в качестве биомаркера в плазме крови пациента выбирают нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 ед/мл, диагностируют саркому челюсти пациента, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 ед/мл, диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента. При этом при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавляют в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, забирают плазму крови в виде над осадочной жидкости, размещают в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживают в жидком азоте при температуре минус 190°C.

Способ осуществляют следующим образом. Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забирают у пациента для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования. Выполняют забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавляют ротовую жидкость физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполняют повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости пациента размещают в кювету и выполняют стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

Выполняют забор венозной крови пациента, получают плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. При этом при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавляют в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, забирают плазму крови в виде над осадочной жидкости, размещают в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживают в жидком азоте при температуре минус 190°C.

Выполняют стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ плазмы крови.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбирают раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определяют его количественное содержание в ротовой жидкости пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в ротовой жидкости раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) группы клинического контроля принимают уровень 77,6-142,8 нг/мл.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 196,8-318,4 нг/мл, то диагностируют саркому челюсти пациента.

Если определяют содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1228,2-1762 нг/мл, то диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента.

В качестве биомаркера при качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований верхней и нижней челюстей по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбирают нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определяют ее количественное содержание в плазме крови пациента. При этом за количественное содержание биомаркера в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase группы клинического контроля принимают уровень 4,6-9,0 нг/мл.

Если определяют содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 34,67-57.67 нг/мл, то диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента.

Если определяют содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 нг/мл, то диагностируют саркому челюсти пациента.

Затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

При этом в процессе выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным комбинированным, в том числе химиолучевым лечением пациента дополнительно осуществляют контрольные определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, по результатам которых судят об эффективности выбранного лечения пациента.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, отличительными являются:

- выполнение забора венозной крови и ротовой жидкости в любой последовательности у пациента для качественных экспресс- исследований злокачественных новообразований,

- выбор в качестве биомаркера в ротовой жидкости раково-эмбрионального антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА), а в качестве биомаркера в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase,

- диагностирование при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 ед/мл саркомы челюсти пациента,

- диагностирование при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 ед/мл плоскоклеточного рака челюсти пациента,

- прогнозирование по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента тактику лечения пациента,

- при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавление в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, забор плазму крови в виде над осадочной жидкости, размещение в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживание в жидком азоте при температуре минус 190°C.

Экспериментальные исследования предложенного способа качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента в клинических условиях показали его высокую эффективность. Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента при своем использовании обеспечивает достижение значительного повышения точности дифференциальной диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента в день обращения, обеспечивает достижение высокой чувствительности дифференциальной диагностики, обеспечивает достижение высокой вероятности выявления процесса злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей пациента, как на ранних стадиях заболевания, так и на более поздних, а также обеспечивает значительное упрощение подготовки пациента в определенных временных рамках для забора диагностического материала.

Реализация предложенного способа качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Пациент В., 55 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование верхней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1762 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 57,67 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали плоскоклеточный рак верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на первичный очаг и пути регионарного метастазирования, а затем хирургическое иссечение опухоли с последующей пластикой дефекта.

Пример 2. Пациент У., 72 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование нижней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1582,2 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 38,67 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали плоскоклеточный рак верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на первичный очаг и пути регионарного метастазирования, а затем хирургическое иссечение опухоли с последующей пластикой дефекта.

Пример 3. Пациент З., 44 года, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование нижней челюсти слева».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественных экспресс-диагностики злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. При этом в связи с преклонным возрастом пациента возникла необходимость кратковременного хранения его венозной крови, поэтому перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавили в пробирку с 1 мл 0,14 М цитрата натрия, центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, забрали плазму крови в виде надосадочной жидкости, разместили в пробирке «эпиндорф» и сразу заморозили в жидком азоте при температуре минус 190°C. Впоследствии готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациента раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 1228,2 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 46,9 нг/мл при 99,9% диагностической чувствительности. На основе полученных результатов диагностировали плоскоклеточный рак нижней челюсти слева. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено комбинированное лечение: предоперационная лучевая терапия на первичный очаг и пути регионарного метастазирования, а затем хирургическое иссечение опухоли с последующей пластикой дефекта.

Пример 4. Пациентка Е., 28 лет, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование верхней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациентки для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациентки в утренние часы не ранее чем через 2 часа после приема ею пищи и после полоскания полости рта пациенткой кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациентки размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки ракового раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 302,7 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 34,2 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали саркому верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое иссечение опухоли с последующей химиотераптей.

Пример 5. Пациентка Л., 52 года, поступила в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование верхней челюсти слева».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациентки для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациентки в утренние часы не ранее чем через 2 часа после приема ею пищи и после полоскания полости рта пациенткой кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациентки центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациентки размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациентки.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования верхней челюсти слева по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациентки.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 318,4 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase 26,3 нг/мл. На основе полученных результатов диагностировали саркому верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое иссечение опухоли с последующей химиотераптей.

Пример 6. Пациент И., 48 лет, поступил в отделение с предположительным диагнозом: «злокачественное новообразование нижней челюсти справа».

Ротовую жидкость и венозную кровь в любой последовательности забрали у пациента для качественных экспресс-исследований злокачественного новообразования. Выполнили забор ротовой жидкости пациента в утренние часы до приема им пищи и после полоскания полости рта пациентом кипяченой водой комнатной температуры. Ротовую жидкость пациента центрифугировали при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и выполнили повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут. Выполнили забор венозной крови пациента и получили плазму крови в виде надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут. Готовый для исследования материал ротовой жидкости и плазмы крови пациента размещали в отдельные кюветы и выполнили стандартный иммуноэлектрохемилюминисцентный анализ на аппарате Elecsys 2010 фирмы «Рош-Москва» (Швейцария) на основе моноклональных антител.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в ротовой жидкости выбрали раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) и определили его количественное содержание в ротовой жидкости пациента.

В качестве биомаркера для качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования нижней челюсти справа по количеству содержания биомаркеров в плазме крови выбрали нейронспецифическую енолазу / neuron-specific enolase и определили ее количественное содержание в плазме крови пациента.

В результате выполненного анализа установили содержание в ротовой жидкости пациентки раково-эмбриональный антигена/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА) в количестве 196,8 нг/мл, а также установили содержание в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы / neuron-specific enolase в количестве 30,4 нг/мл при 99,9% диагностической чувствительности. На основе полученных результатов диагностировали саркому верхней челюсти справа. Клинический диагноз также подтвердили морфологической верификацией биопсийного материала опухоли и/или лимфатического узла при необходимости. В связи с полученными данными пациенту было назначено хирургическое иссечение опухоли с последующей химиотераптей.

Установленный клинический диагноз впоследствии подтвердился результатами выполненной морфологической верификации предварительно взятого у пациента биопсийного материала из очага поражения.

Установленный клинический диагноз впоследствии подтвердился результатами выполненной морфологической верификации предварительной взятого у пациента биопсийного материала из очага поражения.

При этом при использовании предложенного способа качественной экспресс-диагностики злокачественного новообразования челюсти по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента в процессе выполнения или после окончания оперативного вмешательства с предоперационным комбинированным, в том числе химиолучевым, лечением пациентов дополнительно осуществлялись контрольные определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациентов, по результатам которых судили об эффективности выбранного лечения пациентов.

1. Способ качественной экспресс-диагностики злокачественных новообразований костей верхней и нижней челюстей по содержанию биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента, включающий исследования плазмы венозной крови и ротовой жидкости пациента, при этом выполнение неинвазивного забора ротовой жидкости у пациента в утренние часы до или не ранее чем через 2 часа после приема пищи пациентом и после полоскания полости рта пациента кипяченой водой комнатной температуры, центрифугирование ротовой жидкости пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут, разбавление ротовой жидкости физиологическим раствором в соотношении 1:10 и повторное центрифугирование при 1500 об/мин в течение 5 минут, размещение готового для исследования материала ротовой жидкости пациента в кювету и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа на основе моноклональных антител, выполнение забора плазмы крови пациента в качестве надосадочной жидкости после центрифугирования венозной крови пациента при 1500 об/мин в течение 5 минут и выполнение стандартного иммуноэлектрохемилюминисцентного анализа плазмы крови с последующим анализом результатов исследований, отличающийся тем, что венозную кровь и ротовую жидкость в любой последовательности забирают у пациента для исследований злокачественного новообразования, в качестве биомаркера в ротовой жидкости выбирают раково-эмбриональный антиген/carcino-embryonal antigen (РЭА/СЕА), а в качестве биомаркера в плазме крови пациента выбирают нейронспецифическую енолазу/neuron-specific enolase, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 196,8-318,4 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы/neuron-specific enolase в количестве 26,3-34,2 ед/мл, диагностируют саркому челюсти пациента, при содержании в ротовой жидкости пациента РЭА/СЕА в количестве 1228,2-1762 нг/мл и содержании в плазме крови пациента нейронспецифической енолазы/neuron-specific enolase в количестве 38,67-57,67 ед/мл, диагностируют плоскоклеточный рак челюсти пациента, затем по полученным результатам определения содержания биомаркеров в плазме крови и в ротовой жидкости пациента прогнозируют тактику лечения пациента.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при необходимости кратковременного хранения венозной крови пациента перед выполнением анализа ее в количестве 5 мл добавляют в пробирку с 1 мл 0,14М цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 минут, забирают плазму крови в виде надосадочной жидкости, размещают в пробирке «эпиндорф» и сразу замораживают в жидком азоте при температуре минус 190°C.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к медицине и касается способа определения в образце индивидуума белка нейтрофильного происхождения липокалина, связанного с желатиназой (NGAL), для определения острого повреждения почек у индивидуума, где преобладающее количество мономерной и/или гетеродимерной форм белка NGAL, по сравнению с димерной формой белка NGAL, указывает, что белок NGAL происходит из почек индивидуума и что у индивидуума наблюдается острое повреждение почек, тогда как равное или преобладающее количество димерной формы белка NGAL, по сравнению с мономерной или гетеродимерной формой белка NGAL, указывает, что белок NGAL происходит из нейтрофилов индивидуума и что указанный индивидуум не имеет острого повреждения почек; набора для определения в образце относительных количеств мономерной, димерной и гетеродимерной форм NGAL; применения набора в указанном способе.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ определения неспецифической устойчивости патогенных микроорганизмов к антибиотикам и факта присутствия бактериальных биопленок на основании измерения каталитической активности фосфодиэстераз, расщепляющих циклический дигуанозинмонофосфат, с пороговой чувствительностью 50 пг/мл, включающий: 1) выделение фосфодиэстеразы-мишени из лизированных бактериальных клеток; 2) связывание фосфодиэстеразы биотинилированными антителами, специфичными к некаталитическим доменам фосфодиэстеразы; 3) аффинную очистку комплексов, сформированных фосфодиэстеразой-мишенью и биотинилированным антителом при помощи парамагнитных частиц, содержащих нейтравидин или его аналоги, связывающие биотин; 4) взаимодействие комплексов фосфодиэстераза/биотинилированное антитело, иммобилизованных на парамагнитных частицах, с комплексами, содержащими с-di-GMP в форме G-квадруплексов с интеркалированным красителем, сопровождающееся падением интенсивности флуоресценции по мере разрушения комплексов интеркалирующего красителя c-di-GMP; 5) измерение падения флуоресценции при гидролизе c-di-GMP и разрушении комплекса c-di-GMP с интеркалирующим красителем с последующим количественным определением активности фосфодиэстеразы на основании калибровочных кривых, построенных с использованием известных количеств рекомбинантного фермента фосфодиэстеразы, идентичного исследуемой мишени; 6) выявление повышенного уровня фосфодиэстеразной активности, обнаруживаемого тестируемыми антибиотикоустойчивыми бактериальными штаммами, способными к формированию биопленок, по сравнению с уровнем фосфодиэстеразной активности, обнаруживаемым для контрольных штаммов бактерий того же вида, не обладающих антибиотикоустойчивостью и способностью к формированию биопленок.

Изобретение относится к области иммунологии, а именно к иммуноферментному анализу, конкретнее к способу детекции форм фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) c размером более чем 110 аминокислот в биологическом образце.

Изобретение относится к области медицины, в частности к биохимии, фармакологии, биологии, и может быть использовано для тестирования биологически активных веществ с учетом групповой принадлежности крови.
Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохирургии и нейротравматологии, и может быть использовано для определения прогноза ранних исходов лечения у больных со среднетяжелой и тяжелой черепно-мозговой травмой.

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и касается способа прогнозирования возникновения рака легкого у больных хронической обструктивной болезнью легких.

Изобретение относится к биотехнологии. .

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ экспресс-диагностики острых кишечных инфекций (ОКИ), включающий выявление маркеров-индикаторов этиологии ОКИ, с использованием иммунологического лабораторного исследования, отличается тем, что этиологию ОКИ устанавливают у детей ранней возрастной категории, предпочтительно у новорожденных, при этом определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-10 и наличие хронической фетоплацентарной недостаточности (ХФПН), после чего рассчитывают вероятность (Р) бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о бактериальной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует об отсутствии бактериальной этиологии ОКИ, и необходимости проведения второго этапа диагностики, на котором определяют концентрацию в копрофильтрате цитокина - интерлейкина IL-4, выявляют срок прикладывания к груди, а также вид вскармливания, при этом рассчитывают вероятность (Р) вирусной либо вирусно-бактериальной этиологии ОКИ, причем значение Р больше 50% свидетельствует о вирусной этиологии ОКИ, а меньше 50% свидетельствует о вирусно-бактериальной ОКИ. Изобретение обеспечивает повышение точности выявления этиологии острой кишечной инфекции и упрощение процедуры диагностирования. 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к детской неврологии. Способ включает выявление клинических признаков заболевания, определение в периферической крови ребенка уровня эритроцитов с микроядрами. Новым в способе определения степени тяжести заболевания у детей с ДЦП является то, что оценку клинических признаков заболевания проводят по шкале моторики Ривермид, а затем с помощью иммуноферментного анализа определяют количественное содержание фактора некроза опухоли (TNF-α) в слюнной жидкости у детей, больных детским церебральным параличом, сопоставляют с клиническими признаками и при значении эритроцитов с микроядрами 0,55±0,14% и повышении уровня TNF-α слюнной жидкости до 13,23±5,2 пг/мл устанавливают среднюю степень тяжести заболевания, а при значениях эритроцитов с микроядрами 1,27±0,87% и выше, и уровне TNF-α слюнной жидкости 25,41±5,42 пг/мл и выше - тяжелую степень заболевания. Изобретение позволяет получить простой, неинвазивный, доступный в использовании экспресс-способ определения степени тяжести заболевания и назначить своевременное лечение. 5 ил., 8 табл.

Изобретение относится к иммунологическим методам анализа и может быть использовано для массового скрининга врожденных заболеваний у новорожденных. Для этого в лунке микропланшета иммобилизуют первые иммуноспецифические компоненты к тиротропину, иммунореактивному трипсину, тироксину и 17α-ОН-прогестерону в виде дискретных микрообластей, размещают в лунке бумажный диск образца сухой крови, экстрагируют детектируемые маркеры из сухого пятна крови путем добавления в лунку буфера, содержащего даназол и 8-анилинонафталин-1-сульфоновую кислоту и антитела к 17α-ОН-прогестерону, которые связывают с экстрагируемым 17α-ОН-прогестероном для одновременного образования иммунного комплекса с антивидовыми антителами в соответствующей микрообласти, затем добавляют в лунку микропланшета реакционный раствор вторых иммуноспецифических компонентов, содержащий смесь биотинилированных антител к тиротропину, иммунореактивному трипсину и тироксину и конъюгат 17α-ОН-прогестерон-белок-биотин для получения иммунных меченных биотином комплексов в дискретных микрообластях, удаляют бумажный диск сухого образца крови, добавляют конъюгат стрептавидина с Pt-копропорфирином для образования фосфоресцирующих биотин-стрептавидиновых комплексов в микрообластях на дне лунки микропланшета и детектируют эмиссию фосфоресценции метки, последовательно сканируя дискретные микрообласти сфокусированным лазерным пучком. Использование данного способа позволяет специфически и количественно детектировать биомаркеры в образце сухого пятна капиллярной крови новорожденных, что позволяет одновременно диагностировать три врожденные патологии новорожденных. 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 10 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и может быть использовано в качестве дифференциальной дооперационной диагностики типов быстрого роста лейомиомы матки. Для этого в периферической венозной крови женщины с быстрорастущей лейомиомой матки определяют показатель относительного содержания CD3+CD56+CD158i лимфоцитов. При его значении, равном 0,8% или менее, диагностируют «истинный» рост лейомиомы матки, а при значении более 0,8% - «ложный» рост миомы. Использование данного способа дает возможность проводить дооперационную диагностику типов быстрого роста лейомиомы матки у женщин репродуктивного возраста, что позволит своевременно разработать оптимальную тактику ведения больной и сделать выбор между консервативным и оперативным методами лечения. 1 табл., 3 пр.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы и устройства для определения количества процессированного полипептида нейротоксина в растворе путем вычитания количества частично процессированного и непроцессированного нейротоксина из количества общего нейротоксина. Предложены наборы, содержащие систему первого антитела захвата, второго антитела захвата и антитела обнаружения, средства для вычисления количества зрелого полипептида нейротоксина и соответствующие инструкции. Предложенная группа изобретений позволяет эффективно определять количество процессированного нейротоксина в препарате. 6 н. и 18 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.
Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинской диагностике, и описывает способ прогнозирования выживаемости у больных с метастазами колоректального рака в печени после ее резекции. Способ включает исследование опухолевых биоптатов печени после ее резекции с помощью иммуногистохимического метода и анализ характеристик микроокружения опухоли, а именно величины площади стромы, наличия и величины площади лимфоцитарной инфильтрации, наличия и количества сосудов с гладкомышечным актином в их стенке в опухолевой строме метастаза печени в трех полях зрения микроскопа, при этом поля зрения выбирают по максимально выраженной иммуногистохимической реакции и при наличии не менее чем в двух полях зрения микроскопа величины площади стромы 50% и более от общей площади поля зрения, величины площади лимфоцитарной инфильтрации 50% и более от опухолевой стромы, наличия сосудов с полноценно развитой гладкой мускулатурой в их стенке пациента определяют в группу благоприятного прогноза общей выживаемости, а при величине площади стромы менее 25% от общей площади поля, отсутствии лимфоцитарной инфильтрации или ее площади менее 10% от площади стромы и отсутствии сосудов с гладкомышечным актином в опухолевой строме метастаза печени не менее чем в двух полях зрения микроскопа пациента определяют в группу неблагоприятного прогноза. Способ повышает точность прогноза общей выживаемости после резекции печени по поводу метастатического колоректального рака и может быть использован в хирургии и онкологии. 7 пр., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ повышения антагонистической активности моноклонального антитела, содержащего константную область IgG1 человека и направленного против специфической молекулы-мишени, включающий модификацию аминокислотной последовательности шарнирной области. Кроме того, рассмотрен способ скрининга антагонистического моноклонального антитела, основанный на использовании способа повышения антагонистической активности по изобретению, моноклональное антитело, полученное способом по изобретению, и кодирующая его нуклеиновая кислота. Данное изобретение позволяет модулировать антигенсвязывающую активность путем изменения только шарнирного участка константной области антитела. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 17 ил., 3 табл., 12 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описано моноклональное антитело, которое специфически связывается с липоарабиноманнаном кислотоустойчивых бацилл, в частности с липоарабиноманнаном туберкулезной бациллы. Описанное антитело является моноклональным антителом, содержащим вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, соединенные через линкер. Вариабельная область тяжелой цепи содержит CDR1-CDR3, показанные в (а)-(с), и легкой цепи содержит CDR1-CDR3, показанные в (d)-(f): (а) CDR1 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:1, (b) CDR2 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:2, (c) CDR3 тяжёлой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:3, (d) CDR1 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:4, (e) CDR2 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:5, и (f) CDR3 лёгкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности SEQ ID No:6. Также описаны реагент, набор и устройство, содержащие описанное антитело. Изобретение расширяет арсенал средств для обнаружения микобактерий. 11 н. и 7 з.п. ф-лы, 19 ил., 5 табл., 12 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно офтальмологии, и описывает способ прижизненного определения морфофункциональных характеристик соединительно-тканных оболочек глазного яблока. Способ характеризуется тем, что при хирургии выделяют фрагмент теноновой капсулы, который измельчают и замораживают в парах жидкого азота до -180°C, для оценки на проточном цитофлюориметре распределения CD маркеров на поверхности клеток теноновой капсулы замороженный материал размораживают в парах азота, переносят в центрифужную пробирку, отмывают физраствором и центрифугируют, удаляют супернатант и отмывают второй раз физраствором, а затем добавляют к осадку физраствор и полученную тканевую суспензию измельчают с выделением клеточных элементов теноновой капсулы, в полученной суспензии определяют CD маркеры. Способ обеспечивает высокую чувствительность и специфичность определения популяций и субпопуляций клеток теноновой капсулы. Объективность интерпретирования результатов позволяет использовать заявленный способ для разработки более эффективных методов профилактики и лечения патологии органа зрения, в которых активно участвуют соединительно-тканные структуры глаза. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к вирусологии, и может быть использовано при диагностике вируса герпеса 6 типа. Способ определения авидности иммуноглобулинов класса G к вирусу герпеса 6 типа заключается в том, что сыворотку вносят в лунки двух стрипов иммобилизованного антигеном вируса герпеса 6 типа планшета, одновременно инкубируют в течение 60 минут, после чего ячейки первого стрипа обрабатывают водным раствором 4 М мочевины, затем оба стрипа промывают и вносят в них конъюгат моноклональных антител к IgG антителам человека, стрипы инкубируют в течение 40 минут, после промывания окрашивают 0,05% водным раствором тетраметилбензидина и выдерживают 20-25 минут при комнатной температуре, реакцию останавливают раствором 0,5 М серной кислоты, после чего определяют оптическую плотность с помощью спектрофотометра и на основании полученных данных проводят расчет индекса авидности. Использование способа дает возможность эффективно определять индекс авидности IgG антител к вирусу герпеса 6 типа, что позволяет устанавливать длительность и стадию инфекционного процесса. 2 табл., 3 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2014-06-27 2014-06-27T01:15:02
Наверх