Способ определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях и тест-система


 


Владельцы патента RU 2547577:

Шмелин Павел Сергеевич (RU)

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для повышения эффективности и достоверности определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проведения твердофазного иммуноферментного анализа. Способ определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проводимого в колонке тест-системы твердофазного иммуноферментного анализа заключается в том, что в колонке тест-системы размещают носитель, в качестве которого используют активированную твердую фазу физической сорбции - активированную пористую подложку с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, производят обработку носителя блокирующим раствором для закрытия на носителе оставшихся свободными мест неспецифического связывания, вносят тестируемые образцы, содержащие определенное количество предварительно введенных специфичных к токсиканту антител, при этом производят обработку носителя конъюгатсодержащим раствором, в качестве которого используют раствор конъюгата антивидовых антител, химически связанных с люминесцентными квантовыми точками или с липосомами, содержащими люминесцентные квантовые точки, а уровень токсикантов определяют путем освещении обработанного носителя возбуждающим излучением по интенсивности люминесценции, возбужденной в квантовых точках. Тест-система для данного способа включает колонку, в которой установлен носитель в виде активированной твердой фазы физической сорбции - активированной пористой подложки с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, при этом колонка снабжена устройством для измерения уровня люминесценции, включающим источник возбуждающего излучения и фотоприемник, причем перед фотоприемником дополнительно установлена фокусирующая оптическая система, а выход фотоприемника электрически подключен через усилитель сигнала и аналого-цифровой преобразователь к блоку управления - контроллеру, к выходу которого подключены блок индикации и через блок стабилизации источник возбуждающего излучения, при этом боковые стенки колонки выполнены из прозрачного для возбуждающего и люминесцентного излучения материала. Изобретение повышает эффективность и достоверность определения. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 пр., 1 ил.

 

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для повышения эффективности и достоверности определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проведения твердофазного иммуноферментного анализа.

Из уровня техники известен способ проведения иммуноферментного анализа, включающий адсорбцию антигенов на твердой фазе физической сорбции, инкубацию тестируемых биологических образцов, инкубацию конъюгатсодержащего раствора, спектрофотометрический анализ реакции по экстинкции раствора хромагента (RU 2014610 С1, G01N 33/53, 1994).

Также известен способ определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проводимого в колонке тест-системы иммуноферментного анализа, включающий размещение в колонке носителя в виде слоя иммуноаффинного геля с привитыми антивидовыми антителами, зафиксированного между двумя пористыми мембранами, обработку носителя блокирующим раствором для закрытия на носителе оставшихся свободными мест неспецифического связывания, иммобилизацию на носителе специфических антител, внесение тестируемых образцов, обработку носителя конъюгатсодержащим раствором и анализ обработанного носителя на изменение окраски (RU 2374649 С1, G01N 33/53, 2009). Несмотря на достаточную простоту точность визуального определения уровня токсикантов в данном способе недостаточно высокая.

Кроме того, известна тест-система для иммуноферментного определения токсикантов, включающая колонку, в которой установлен носитель в виде слоя иммуноаффинного геля с привитыми специфическими антителами, размещенного между двумя пористыми мембранами (RU 2374649 C1, G01N 33/53, 2009). Недостатком данного устройства является отсутствие средств, обеспечивающих измерение уровня токсикантов.

Технический результат, на получение которого направлено изобретение, заключается в повышении эффективности и достоверности иммуноферментного определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях, проводимого в колонке тест-системы.

Решение поставленной задачи с достижением заявленного технического результата обеспечивается тем, что в способе определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проводимого в колонке тест-системы твердофазного иммуноферментного анализа согласно изобретению в колонке тест-системы размещают носитель, в качестве которого используют активированную твердую фазу физической сорбции - активированную пористую подложку с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, производят обработку носителя блокирующим раствором для закрытия на носителе оставшихся свободными мест неспецифического связывания, вносят тестируемые образцы, содержащие определенное количество предварительно введенных специфичных к токсиканту антител, при этом производят обработку носителя конъюгатсодержащим раствором, в качестве которого используют раствор конъюгата антивидовых антител, химически связанных с люминесцентными квантовыми точками или с липосомами, содержащими люминесцентные квантовые точки, а уровень токсикантов определяют путем освещении обработанного носителя возбуждающим излучением по интенсивности люминесценции, возбужденной в квантовых точках.

При этом активированную пористую подложку приготовляют путем обработки ультразвуком выполненной из полипропилена чистой пористой подложки - фритта, помещенной в этанол - 96% этиловый спирт, с последующей промывкой - последовательным пропусканием через пористую мембрану 50% этилового спирта.

Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что в тест-системе для способа определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях, включающей колонку, в которой установлен носитель, согласно изобретению носитель выполнен в виде активированной твердой фазы физической сорбции - активированной пористой подложки с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, при этом колонка снабжена устройством для измерения уровня люминесценции, включающим источник возбуждающего излучения и фотоприемник, причем перед фотоприемником дополнительно установлена фокусирующая оптическая система, а выход фотоприемника электрически подключен через усилитель сигнала и аналого-цифровой преобразователь к блоку управления - контроллеру, к выходу которого подключены блок индикации и через блок стабилизации источник возбуждающего излучения, при этом боковые стенки колонки выполнены из прозрачного для возбуждающего и люминесцентного излучения материала.

Кроме того, между фотоприемником и фокусирующей оптической системой устройства для измерения уровня люминесценции может быть размещен светофильтр.

Благодаря наличию в растворе конъюгата люминесцентных квантовых точек (или липосом, содержащих люминесцентные квантовые точки), химически связанных с антивидовыми антителами (кроличьими антимышиными антителами), которые обладают способностью связываться со специфичными к токсиканту антителами и при освещении возбуждающим излучением люминесцируют, в заявленном изобретении, реализующем непрямой конкурентный твердофазный иммуноферментный анализ, обеспечивается увеличение интенсивности полезного сигнала люминесценции, обратно пропорционального концентрации токсинов, что повышает чувствительность способа определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях. Кроме того, наличие в заявленной тест-системе устройства для измерения уровня люминесценции, включающего источник возбуждающего излучения и фотоприемник, которые подключены к блоку управления - контроллеру, позволяет в автоматическом режиме просто и достоверно определять уровень токсикантов по степени интенсивности люминесценции, возбужденной в квантовых точках.

На чертеже схематично представлен общий вид тест-системы.

Заявленная тест-система для определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях включает колонку 1 с боковыми стенками, выполненными из прозрачного для возбуждающего и люминесцентного излучения материала, в которой установлен носитель в виде активированной твердой фазы физической сорбции - активированной пористой подложки (фритта) 2 с привитыми - ковалентно связанными молекулами токсиканта-антигена, и устройство для измерения уровня люминесценции, включающее источник 3 возбуждающего излучения, выполненный, например, в виде набора светодиодов с максимумами длин волн излучения в диапазоне 395÷500 нм, и фотоприемник 4 (фотодиод), спектральный диапазон чувствительности которого лежит в диапазоне 420÷675 нм, причем перед фотоприемником 4 дополнительно установлена фокусирующая оптическая система 5 (например, собирающая линза F=5÷30 мм), а между фотоприемником 4 и фокусирующей оптической системой 5 может быть размещен светофильтр и светофильтр 6, спектр пропускания которого соответствуют спектру люминесценции. Выход фотоприемника 5 электрически подключен через усилитель 7 сигнала и аналого-цифровой преобразователь 8 к блоку 9 управления - контроллеру, к выходу которого подключены блок 10 индикации и через блок 11 стабилизации источник 3 возбуждающего излучения.

Заявленный способ определения уровня токсикантов реализуют следующим образом.

Активированную твердую фазу физической сорбции приготовляют путем обработки (активирования) в течение 15 минут выполненной из полипропилена пористой подложки 2 ультразвуком в этаноле - 96% этиловом спирте, с последующей промывкой - последовательным пропусканием через пористую подложку 2 пропускания 500 мкл водно-спиртового раствора - 50% этилового спирта, 500 мкл воды и 700 мкл карбонатного буфера (0,1 М гидрокарбоната натрия, 0,1 М хлорида натрия, pH=8,3). Затем добавляют 150 мкл раствора токсиканта-антигена с концентрацией 2,5 г/л и 450 мкл карбонатного буфера (pH=8,3), содержащего 0,1 М гидрокарбоната натрия и 0,1 М хлорида натрия и инкубируют в течение 2-х часов при комнатной температуре. Остаток несвязавшегося токсиканта-антигена удаляют с помощью промывания пористой подложки 5 мл карбонатного буфера (pH=8,3), содержащего 0,1 М гидрокарбоната натрия и 0,1 М хлорида натрия. Для закрытия оставшихся свободными мест неспецифического связывания пористую подложку обрабатывают блокирующим раствором, в качестве которого используют 0,2 М раствор глицина в карбонатном буфере (pH=8,3), содержащем 0,1 М гидрокарбоната натрия и 0,1 М хлорида натрия, и перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. После процедуры блокирования пористую подложку промывают последовательно 5 мл ацетатного буфера (0,1 М ацетата натрия, 0,5 моль хлорида натрия, pH=4,0) и 10 мл фосфатного буфера (pH=7.4÷7.6).

Пример 1

Для определения уровня токсиканта, например концентрации зераленона, в анализируемой среде (природной воде) предварительно приготовляют - синтезируют раствор конъюгата антивидовых антител, химически связанных с люминесцентными квантовыми точками - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS, следующим образом.

Предварительно 20 мкл раствора антивидовых антител в карбонатном буфере (0,1 М гидрокарбоната натрия, 0,1 М хлорида натрия, pH=8,3) сливают с 800 мкл раствора квантовых точек CdSe/ZnS (разведение 1/10 в карбонатном буфере (0,1 М гидрокарбоната натрия, 0,1 М хлорида натрия, pH=8,3), количество квантовых точек CdSe/ZnS равно 3.2×10-4 мкмоль), и перемешивают в течение 12 часов при температуре 4°C.

Затем ранее приготовленную пористую подложку 2 с привитыми - ковалентно связанными молекулами токсиканта-антигена помещают в пустую колонку 1 типа Bond Elut (V=1 мл), предварительно промытую фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6) и хранившуюся при температуре 4°C.

К 1 мл анализируемой среды добавляют 25 мкл раствора специфичных к токсиканту-зераленону моноклональных мышиных антител, перемешивают в течение 5 минут и пропускают через подготовленную выше указанным образом колонку 1, после чего промывают колонку 1 фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6), содержащим 0,05% Tween 20.

Затем в колонку 1 вводят 100 мкл предварительно приготовленного раствора конъюгата антивидовых антител, химически связанных с люминесцентными квантовыми точками - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS (разведение 1/30 в фосфатном буфере (pH=7.4÷7.6), содержащем 0,05% Tween 20 и 0,2% бычьего сывороточного альбумина), и инкубируют в течение 6 минут. Избыток конъюгата удаляют путем промывания колонки 1 фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6) и осуществляют освещение носителя 2, содержащего люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы, световым потоком, поступающим от источника 3 возбуждающего излучения, и регистрируют возникший в результате возбуждающего излучения уровень люминесценции, величина которого пропорциональна концентрации токсиканта-зераленона в анализируемой среде.

При этом, если в анализируемой среде концентрация токсиканта-зераленона превышает концентрацию специфических антител, добавленных к анализируемой пробе, которая соответствует, например, предельно допустимой концентрации токсиканта, то происходит связывание всех специфических антител с молекулами токсиканта-зераленона, а при пропускании через носитель 2 раствора конъюгата антивидовых антител с флуоресцентными метками - люминесцентными квантовыми точками из-за отсутствия специфических антител, связанных с помощью молекул зераленона, сорбированных на носителе 2, содержащиеся в конъюгате антивидовые антитела остаются несвязанными (свободными) и удаляются после промывки из колонки 1 вместе с люминесцентными квантовыми точками - полупроводниковыми наночастицами CdSe/ZnS. В результате при облучении носителя - слоя 2 источником 3 возбуждающего излучения люминесценция не возникает.

В том случае, если в анализируемой среде концентрация токсиканта-зераленона не превышает концентрацию специфических антител, добавленных к анализируемой пробе, которая соответствует, например, предельно допустимой концентрации токсиканта, или токсикант-зераленон в анализируемой среде отсутствует, то происходит связывание избыточных специфических антител с молекулами токсиканта-зераленона, сорбированного на носителе 2 и при пропускании через носитель 2 раствора конъюгата антивидовых антител с флуоресцентными метками - люминесцентными квантовыми точками происходит связывание специфических антител, связавшихся с молекулами зераленона, сорбированными на носителе 2, с содержащимися в конъюгате антивидовыми антителами, содержащими люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS. В результате при облучении носителя 2 источником 4 возбуждающего излучения возникает люминесценция, уровень которой обратно пропорционален концентрации токсиканта-зераленона в анализируемой среде.

При этом поступающий из носителя 2 суммарный световой фронт, состоящий из полезного сигнала люминесценции и паразитного сигнала возбуждающего излучения, фокусируется оптической системой 5, проходит через светофильтр 6, который ослабляет паразитный сигнал, и отфильтрованный суммарный световой фронт с выделенным полезным сигналом поступает на фотоприемник 4 (фотодиод). Выработанный на выходе фотоприемника 4 электрический сигнал (значение напряжения которого соответствует уровню люминесценции) усиливается усилителем сигнала 7, оцифровывается с помощью аналого-цифрового преобразователя 8 и в цифровом представлении передается для регистрации на вход блока 9 управления - контроллера для регистрации уровня люминесценции, где обрабатывается путем сопоставления с предварительно занесенными в память калибровочными постоянными, и количественное значение уровня люминесценции, пропорциональное концентрации токсиканта-зераленона, и/или соответствующее значение уровня (концентрации) токсиканта заносится в память блока 9 управления - контроллера и отображается в блоке 10 индикации.

Кроме того, блок 9 управления - контроллер в соответствии с заложенным программным алгоритмом в автоматическом режиме осуществляет программируемое управление работой светодиодов источника 3 возбуждающего излучения, нормируя посредством блока 11 стабилизации напряжение источника 3 возбуждающего излучения, и обеспечивает сохранение в памяти параметров калибровочных постоянных (калибровочной кривой), значения которых определяются в процессе предварительных тарировочных измерений с использованием стандартных источников возбуждающего излучения и предварительной калибровки колонки 1 с использованием образцов анализируемой среды, содержащей токсиканты, например зераленон, известной концентрации.

Пример 2

Для определения уровня токсиканта, например концентрации зераленона, в анализируемой среде (природной воде) предварительно приготовляют поэтапно раствор конъюгата антивидовых антител с липосомами, содержащими водорастворимые люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS, следующим образом.

На первом этапе методом гидратирования тонких пленок готовят липосомы, содержащие водорастворимые люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS. Для этого 70 мг (94 мкмоль) фосфолипидов (Lipoid S75) растворяют в 1 мл хлороформа в круглодонной колбе (V=10 мл). Затем хлороформ выпаривают с помощью роторного испарителя до образования пленки фосфолипидов на стенках колбы. Образовавшуюся пленку фосфолипидов обрабатывают 6 мл воды, содержащей 5 мкмоль квантовых точек CdSe/ZnS, и перемешивают в течение 30 минут при температуре 45°C. Затем раствор обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут для достижения приемлемого размера частиц липосом (порядка 100 нм). Полученный раствор, содержащий липосомы с водорастворимыми квантовыми точками CdSe/ZnS, хранят при температуре 45°C.

На втором этапе синтезируют раствор конъюгата антивидовых антител с липосомами, содержащими квантовые точки.

Для этого к 0,4 мл раствора, содержащего липосомы с инкорпорированными квантовыми точками - полупроводниковыми наночастицами CdSe/ZnS, капельно при постоянном перемешивании добавляют 0,5 мл 2,5% раствора глутарового альдегида в воде, после чего образовавшийся раствор перемешивают в течение 4 часов при комнатной температуре. Избыток глутарового альдегида удаляют с помощью диализа в течение 2 дней при температуре 4°C. Затем капельно при постоянном перемешивании в течение 2 часов при комнатной температуре добавляют 20 мкл раствора антивидовых антител в фосфатном буфере (pH=7.4-7.6). Затем добавляют 60 мкл 3М глицина в растворе гидроксида натрия (pH=7,2) для блокирования оставшихся свободными альдегидных групп глутарового альдегида на поверхности липосом. Полученную смесь выдерживают при температуре 4°C при постоянном перемешивании. Избыток непрореагировавших компонентов удаляют с помощью диализа в течение 3 часов. Полученные конъюгаты хранят при температуре 4°C.

К 1 мл анализируемой среды добавляют 25 мкл раствора специфичных к токсиканту-зераленону моноклональных мышиных антител, перемешивают в течение 5 минут и пропускают через подготовленную аналогично примеру 1 колонку 1, после чего промывают колонку 1 фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6), содержащим 0,05% Tween 20.

Затем в колонку 1 вводят 100 мкл предварительно приготовленного раствора конъюгата антивидовых антител, химически связанных с липосомами, содержащими водорастворимые люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS (разведение 1/30 в фосфатном буфере (pH=7.4÷7.6), и инкубируют в течение 6 минут. Избыток конъюгата удаляют путем промывания колонки 1 фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6), после чего световым потоком, поступающим от источника 3 возбуждающего излучения, осуществляют освещение носителя 2, содержащего люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы, и регистрируют возникший в результате возбуждающего излучения уровень люминесценции, величина которого пропорциональна концентрации токсиканта-зераленона в анализируемой среде.

Пример 3. Для определения уровня токсиканта, например концентрации зераленона, в анализируемой среде (природной воде) предварительно приготовляют поэтапно раствор конъюгата зераленона с липосомами, содержащими гидрофобные люминесцентными квантовые точки - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS, следующим образом.

На первом этапе 70 мг (94 мкмоль) фосфолипидов (Lipoid S75) и 30 пмоль гидрофобных квантовых точек (λem=577 нм) в толуоле (52 мкл) растворяют в 1 мл хлороформа в круглодонной колбе (V=10 мл) при воздействии ультразвуком при температуре 4°C.

Затем в образовавшийся раствор добавляют 3 мл воды и хлороформ выпаривают с помощью роторного испарителя. После этого добавляют еще 3 мл воды и в течение 60 минут перемешивают раствор с образовавшимися липосомами при температуре 4°C.

Затем раствор обрабатывают ультразвуком в течение 5 минут для достижения приемлемого размера частиц липосом (порядка 100 нм). Полученный раствор, содержащий липосомы с гидрофобными квантовыми точками CdSe/ZnS, хранят при температуре 4°C.

На втором этапе осуществляют синтез конъюгата антивидовых антител с липосомами, содержащими гидрофобные квантовые точки.

Для этого к 0,4 мл раствора, содержащего липосомы с инкорпорированными квантовыми точками - полупроводниковыми наночастицами CdSe/ZnS, капельно при постоянном перемешивании добавляют 0,5 мл 2,5% раствора глутарового альдегида в воде, после чего образовавшийся раствор перемешивают в течение 3 часов при комнатной температуре. Избыток глутарового альдегида удаляют с помощью диализа в течение 2 дней при температуре 4°C. Затем капельно при постоянном перемешивании в течение 2 часов при комнатной температуре добавляют 20 мкл раствора антивидовых антител в фосфатном буфере (pH=7.4-7.6). Затем добавляют 60 мкл 3М глицина в растворе гидроксида натрия (pH=7,2) для блокирования оставшихся свободными альдегидных групп глутарового альдегида на поверхности липосом. Полученную смесь выдерживают при температуре 4°C при постоянном перемешивании. Избыток непрореагировавших компонентов удаляют с помощью диализа в течение 3 часов. Полученные конъюгаты хранят при температуре 4°C.

К 1 мл анализируемой среды добавляют 25 мкл раствора специфичных к токсиканту-зераленону моноклональных мышиных антител, перемешивают в течение 5 минут и пропускают через подготовленную аналогично примеру 1 колонку 1, после чего промывают колонку 1 фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6), содержащим 0,05% Tween 20.

Затем в колонку 1 вводят 100 мкл предварительно приготовленного раствора конъюгата антивидовых антител, химически связанных с липосомами, содержащими гидрофобные люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы CdSe/ZnS (разведение 1/30 в фосфатном буфере (pH=7.4÷7.6), и инкубируют в течение 10 минут. Избыток конъюгата удаляют путем промывания колонки 1 фосфатным буфером (pH=7.4÷7.6), после чего осуществляют освещение носителя 2, содержащего люминесцентные квантовые точки - полупроводниковые наночастицы, световым потоком, поступающим от источника 3 возбуждающего излучения, и регистрируют возникший в результате возбуждающего излучения уровень люминесценции, величина которого пропорциональна концентрации токсиканта-зераленона в анализируемой среде.

Заявленное изобретение обеспечивает возможность определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проводимого в колонке тест-системы прямого конкурентного иммуноферментного анализа уровня токсиканта с пределом обнаружения (чувствительностью) 1÷3 нг/мл.

1. Способ определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях путем проводимого в колонке тест-системы твердофазного иммуноферментного анализа, характеризующийся тем, что в колонке тест-системы размещают носитель, в качестве которого используют активированную твердую фазу физической сорбции - активированную пористую подложку с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, производят обработку носителя блокирующим раствором для закрытия на носителе оставшихся свободными мест неспецифического связывания, вносят тестируемые образцы, содержащие определенное количество предварительно введенных специфичных к токсиканту антител, при этом производят обработку носителя конъюгатсодержащим раствором, в качестве которого используют раствор конъюгата антивидовых антител, химически связанных с люминесцентными квантовыми точками или с липосомами, содержащими люминесцентные квантовые точки, а уровень токсикантов определяют путем освещении обработанного носителя возбуждающим излучением по интенсивности люминесценции, возбужденной в квантовых точках.

2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что активированную пористую подложку приготовляют путем обработки ультразвуком выполненной из полипропилена чистой пористой подложки, помещенной в этанол - 96% этиловый спирт, с последующей промывкой - последовательным пропусканием через пористую мембрану 50% этилового спирта.

3. Тест-система для способа определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях по п.1, включающая колонку, в которой установлен носитель, отличающаяся тем, что носитель выполнен в виде активированной твердой фазы физической сорбции - активированной пористой подложки с привитыми ковалентно связанными молекулами токсиканта, при этом колонка снабжена устройством для измерения уровня люминесценции, включающим источник возбуждающего излучения и фотоприемник, причем перед фотоприемником дополнительно установлена фокусирующая оптическая система, а выход фотоприемника электрически подключен через усилитель сигнала и аналого-цифровой преобразователь к блоку управления - контроллеру, к выходу которого подключены блок индикации и через блок стабилизации источник возбуждающего излучения, при этом боковые стенки колонки выполнены из прозрачного для возбуждающего и люминесцентного излучения материала.

4. Тест-система по п.3, отличающаяся тем, что между фотоприемником и фокусирующей оптической системой устройства для измерения уровня люминесценции может быть размещен светофильтр.



 

Похожие патенты:

Способ определения влияния токсичности сточных вод на водные соленые среды относится к водной токсикологии и предназначен для оценки токсичности морской среды, содержащей сточные воды. Способ состоит из определения показателей роста культуры морской одноклеточной водоросли в тестируемой воде и включает культивирование культуры морской одноклеточной водоросли, процедуру биотестирования, состоящую из отбора проб воды, внесения в контроль и в тестируемую среду инокулята культивируемой водоросли, подсчета численности клеток водоросли.

Способ биологической оценки токсичности морской среды относится к биологическим способам оценки экологического риска и анализа загрязнения водной среды и может быть использован в марикультуре, водной токсикологии, рыбоводстве. В способе в качестве биологических тест-объектов используются личинки черноморских рыб атерины (Atherina hepsetus, Atherina mochon pontica), которые помещаются в тестируемую среду и в стерилизованную морскую воду.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Более подробно группа изобретений относится к способу определения уровня токсикантов в воде, продуктах питания или физиологических жидкостях и тест-системе.

Изобретение относится к экологии, охране окружающей среды, к способам и средствам мониторинга окружающей среды и может быть использовано для контроля загрязнений водоемов полихлорированными бифенилами.

Изобретение относится к водной токсикологии и может быть использовано для биоиндикации и биотестирования загрязненных вод и отдельных поллютантов и может быть использовано в качестве дополнительного метода к биотестам обязательного применения при определении качества вод, в которых (представительным) доминирующим видом является губка (Spongia).

Изобретение относится к аналитической химии, конкретно к химическим индикаторам на твердофазных носителях, и может быть использовано для экспрессного определения металлов в водных средах и бензинах с помощью реагентных индикаторных трубок на основе хромогенных дисперсных кремнеземов.

(57) Изобретение относится к области экологии и предназначено для оценки токсичности воды и донных отложений Азовского и Черного морей. Способ включает помещение флуоресцирующих тест-объектов в контрольные и анализируемые пробы, облучение возбуждающим светом, определение флуоресцентных характеристик, по изменению которых судят о токсичности контролируемой среды.

Изобретение относится к области экологии. Способ оценки экологического благополучия прибрежных морских донных экосистем заключается в изучении морфофункциональных характеристик массовых двустворчатых моллюсков, при этом в качестве показателя благополучия используют морфофункциональные характеристики хамелей: измеряют содержание АТФ в гемоцитах, концентрацию гемоцитов в гемолимфе, уровень гистопатологий, определяемый как процентное содержание особей с гистопатологией, и об уровне загрязнения судят по изменению этих показателей в сравнении с аналогичными показателями у хамелей, обитающих в оптимальных условиях обитания, при этом, чем меньше концентрация АТФ и гемоцитов и больше уровень гистопатологий, тем менее благополучная ситуация наблюдается в морской донной экосистеме.

Группа изобретений относится к определению токсичности и может найти широкое применение в аналитической практике при определении токсичности разнообразных жидких сред без привлечения дорогостоящих и трудоемких методов анализа.

Изобретение относится к области экологии и гидробиологии и предназначено для оценки трофического статуса экосистем минерализованных озер. При оценке трофического статуса озерной экосистемы с минерализацией воды более 3 г/дм3 по уровню развития водных сообществ учитывают негативное действие уровня минерализации путем расчета величины потерянной биомассы с помощью полученной эмпирической зависимости и ее аппроксимации в виде степенной функции вида: где В' - расчетная биомасса, X - минерализация воды, а к1 и к2 - эмпирические коэффициенты. где Bp - потенциально потерянная биомасса при возрастании минерализации, В'' - расчетная биомасса при минерализации 3 г/дм3.

Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для определения степени зрелости у сортов томатов с красной, желтой, оранжевой и коричневой окраской плодов.

Изобретение относится к области пищевой промышленности и предназначено для контроля качества зефира и мармелада. Способ определения предусматривает взвешивание 2,0-5,0 г образца изделия, помещение образца в мерную колбу объемом 1000 мл, добавление 100-200 см3 дистиллированной воды с температурой 50-70°С, тщательное перемешивание до растворения образца в течение 10-20 мин на водяной бане при температуре 75-85°С, фильтрацию раствора, доведение объема до метки дистиллированной водой и центрифугирование в течение 25-40 мин при скорости 3000-3500 об/мин, после чего прозрачный раствор переносят в емкость для проведения исследований состава органических кислот и макроэлементов методом капиллярного электрофореза с косвенным детектированием.
Способ определения механических микроповреждений зерна включает покрытие зерна металлическим нанопорошком с размером частиц 5-15 нм, очистку поверхности зерна от металлического порошка, определение количества порошка, оставшегося в микротрещинах зерна, для определения степени микроповреждения зерна.

Настоящее изобретение относится к детектору микроволнового излучения для измерения внутренней температуры образца белковосодержащего вещества, например мяса. Заявлено устройство тепловой обработки, предназначенное для тепловой обработки белковосодержащих пищевых продуктов (3) и включающее детектор (1) микроволнового излучения для измерения внутренней температуры белковосодержащего пищевого продукта (3), средство перемещения для транспортировки продуктов (3) через устройство в направлении перемещения (y-направление), так что продукты (3) проходят под неподвижным детектором (1), и средства воздействия на тепловую обработку, управляемые по сигналу детектора (1).

Изобретение относится к пищевой промышленности, в частности к кондитерской отрасли, и может быть использовано для контроля качества пастильного изделия - зефира. Способ определения предусматривает взвешивание 2,0-5,0 г образца зефира.

Изобретение относится к способам стандартизации лекарственных препаратов, биологически активных добавок, премиксов, лекарственного растительного сырья, растительных масел, масляных экстрактов, изделий пищевой, химической и косметологической отраслей промышленности по содержанию основных жирорастворимых витаминов и может быть использовано в фармацевтической, химической, косметологической и пищевой отраслях промышленности для определения подлинности и степени чистоты жирорастворимых витаминов A, D2, E и β-каротина при совместном присутствии в одно- и многокомпонентных препаратах.

Изобретение относится к аналитической химии, конкретно к химическим индикаторам на твердофазных носителях, и может быть использовано для экспрессного определения металлов в водных средах и бензинах с помощью реагентных индикаторных трубок на основе хромогенных дисперсных кремнеземов.

Изобретение относится к чайной промышленности и может быть использовано при анализе черного и зеленого чая. Способ предусматривает экстрагирование полифенолов из измельченной пробы чая, определение концентрации полифенолов в экстракте колориметрическим методом с применением реактива Folin-Ciocalteu, причем при получении экстракта берут измельченную пробу чая массой 1,0-1,5 г и 50-75 см3 воды с температурой 95-100°С, настаивают в течение 5 мин при комнатной температуре и фильтруют, полученный экстракт разбавляют водой в 25 раз, отбирают 0,5-0,6 см3 разбавленного экстракта, добавляют к нему 3,0 см3 0,5 М раствора Na2CO3 и 0,3 см3 реактива Folin-Ciocalteu и через 2-3 мин измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 765 нм, концентрацию полифенолов в разбавленном экстракте определяют по градуировочному графику зависимости оптической плотности раствора танина от массовой концентрации танина в растворе, количество полифенолов чая, перешедших в водный экстракт, выражают их массовой долей в анализируемой пробе чая X, % на сухое вещество, которую рассчитывают по формуле.

Изобретение относится к области пищевой промышленности и предназначено для выявления «картофельной» болезни хлеба. Способ включает выпекание хлеба и отбор проб мякиша от свежевыпеченного хлеба и хлеба, инкубированного при 37°C в течение 16-20 ч.
Изобретение относится к области анализа биологической ценности объектов пищевого и медицинского назначения, в частности животного сырья и продукции на его основе, и может быть использовано в медицине, пищевой и парфюмерной промышленности, а также сельском хозяйстве.

Изобретение относится к аналитической аппаратуре. Устройство для экспресс-оценки качества продуктов питания включает в себя пьезоэлектрические преобразователи со щупами, генератор высокой частоты, генератор импульсов низкой частоты, смеситель, усилитель, преобразователь выходного сигнала, блок отображения информации. Смеситель выполнен с возможностью формирования на выходе сигнала для возбуждения сдвиговых поверхностных волн. Для этого первый его вход соединен с генератором низкой частоты через формирователь импульсного воздействия, выполненного с возможностью подачи низкочастотных прямоугольных импульсов, а второй вход соединен с выходом генератора высокочастотных синусоидальных колебаний. Счетчик соединен с двоично-десятичным дешифратором, выход которого соединен с входом блока отображения информации, выполненного в виде жидкокристаллического индикатора. Выход смесителя соединен с первым преобразователем из пяти, помещенным в центре контактной головки и являющимся источником поверхностных сдвиговых волн, приемниками которых одновременно являются четыре других преобразователя, установленных по окружности на одинаковом расстоянии от центрального, выходы которых соединены с усилителем в виде суммирующего усилителя. Усилитель соединен с преобразователем выходного сигнала, включающего интегратор, соединенный с входом триггера Шмидта, выход которого соединен с входом триггера для остановки счета. Достигается упрощение и повышение надежности оценки качества. 2 ил.
Наверх