Нанокристаллы кальципотриола моногидрита

Авторы патента:


Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита
Нанокристаллы кальципотриола моногидрита

 


Владельцы патента RU 2555339:

ЛЕО ФАРМА А/С (DK)

Изобретение относится к области фармацевтики и представляет собой суспензию для лечения псориаза, включающую кальципотриол моногидрата в форме нанокристаллов с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм, которые диспергированы в водной фазе, включающей неионное, полимерное ПАВ, выбранное из группы, состоящей из ПАВ в виде полоксамеров или полисорбатов, в количестве 0,01-5 мас.% в расчете на суспензию для предотвращения образования агрегатов и/или роста кристаллов нанокристаллов кальципотриола моногидрата, причем нанокристаллы кальципотриола моногидрата получены в суспензии путем обработки суспензии способом, включающим стадии уменьшения размеров частиц кристаллического кальципотриола моногидрата в водной фазе с образованием микрочастиц с распределением размера частиц в диапазоне примерно 5-20 мкм и средним размером частиц примерно 10 мкм и воздействия на суспензию трех циклов гомогенизации под высоким давлением, каждый в течение 7-15 минут, причем на первом, втором и третьем циклах давление составляет 300-800 бар, 800-1200 бар и 1200-1700 бар соответственно. Изобретение обеспечивает создание местной композиции, включающей кальципотриол в качестве активного агента, но не содержащей пропиленгликоль в качестве растворителя. 3 н. и 31 з.п. ф-лы, 8 пр., 5 табл., 9 ил.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к кальципотриолу моногидрату в форме нанокристаллов и к включению нанокристаллов в фармацевтическую композицию, предназначенную для предупреждения или лечения кожных заболеваний и состояний.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Псориаз представляет собой хроническое воспалительное заболевание кожи, которое проявляется в виде эритематозных сухих шелушащихся бляшек, возникающих в результате гиперкератоза. Бляшки чаще всего обнаруживаются на локтях, коленях и волосистой коже головы, хотя могут появляться более распространенные поражения на других частях тела, в частности, пояснично-крестцовой области. Самое распространенное лечение псориаза от легкой до умеренной степени тяжести включает местное нанесение композиции, содержащей кортикостероид в качестве активного ингредиента. Кортикостероиды, хотя и являются эффективными средствами, но имеют недостаток в виде целого ряда побочных эффектов, таких как атрофия кожи, полосы, угреподобные высыпания, периоральный дерматит, разрастание кожных грибов и бактерий, гипопигментация пигментированной кожи и розовые угри.

Однако в течение многих лет предпочтительное нестероидное лечение псориаза состояло в местном лечении соединением аналога витамина D, кальципотриолом, включенным в состав мазевой композиции (продаваемой в виде мази Daivonex® или Dovonex® компанией LEO Pharma), в которой кальципотриол присутствует в растворе, или кремовой композиции (продаваемой в виде крема Daivonex® или Dovonex® компанией LEO Pharma), в которой кальципотриол присутствует в виде суспензии или микрочастиц. Растворителем в мазевой композиции является пропиленгликоль, который имеет преимущество усиления проникновения активного ингредиента в кожу, что приводит к повышению эффективности, но который также, как известно, действует в качестве раздражителя кожи. Так, сообщалось, что включение пропиленгликоля в местные композиции часто вызывает развитие у пациентов контактного дерматита (в одном исследовании сообщалось о частоте реакций раздражения на пропиленгликоль, достигающей 12,5%, см. M. Hannuksela et al., Contact Dermatitis 1, 1975, pp. 112-116), и число реакций раздражения увеличивается, когда пропиленгликоль используется в высоких концентрациях (см. обзор J. Catanzaro and J. Graham Smith, J. Am. Acad. Dermatol. 24, 1991, pp. 90-95). Вследствие улучшенного проникновения кальципотрола в кожу в результате наряду с другими причинами присутствия пропиленгликоля было обнаружено, что мазь Daivonex® более эффективна при лечении псориатических поражений, чем крем Daivonex®, но она также вызывала раздражение кожи у значительной части пациентов с псориазом.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Кожа человека, в частности наружный слой, роговой слой, обеспечивает эффективный барьер против проникновения микробных патогенов и токсических химических веществ. Хотя данное свойство кожи в целом благоприятно, оно осложняет введение фармацевтических средств через кожу тем, что большое количество, если не большая часть, активного ингредиента, нанесенного на кожу пациента, страдающего кожным заболеванием, может не проникнуть в жизнеспособные слои кожи, где он проявляет свою активность. Для обеспечения адекватного проникновения активного ингредиента в дерму и эпидермис, в целом предпочтительно включение активного ингредиента в растворенном состоянии, обычно, в присутствии растворителя в форме спирта, например, этанола, или диола, например, пропиленгликоля. Пропиленгликоль представляет собой хорошо известный усилитель проникновения, т.е. вещество, которое способно проникать через роговой слой и «увлекать с собой» низкомолекулярные компоненты, такие как терапевтически активные компоненты в носителе, в эпидермис. Сам пропиленгликоль вызывает значительное раздражение кожи и также способен «увлекать с собой» низкомолекулярные раздражающие компоненты носителя в эпидермис, приводя к общему раздражающему эффекту обычных носителей, включая пропиленгликоль. По этой причине присутствие пропиленгликоля в качестве растворителя в композициях, предназначенных для лечения воспалительных кожных заболеваний, может обострить воспалительную реакцию.

Задача исследования, положенного в основу настоящего изобретения, состояла в предоставлении местной композиции, содержащей кальципотриол в качестве активного ингредиента, которая имеет свойства проникновения через кожу и биологическую активность, сравнимые со свойствами мази Daivonex®, но которая не содержит пропиленгликоль в качестве растворителя.

Неожиданно было обнаружено, что возможно получение кальципотриола моногидрата в форме нанокристаллов, которые являются химически устойчивыми (т.е. не разлагаются в 24-эпи кальципотриол или другие продукты разложения), поскольку, неожиданно, не образуются значимые количества аморфного кальципотриола в результате высокого усилия или сил соударения или высоких температур во время доведения до наноразмеров. Кроме того, нанокристаллы являются физически устойчивыми, поскольку не наблюдается агрегация или рост кристаллов или изменение формы кристаллов (полиморфных) в суспензии нанокристаллов после получения. Нанокристаллы легко включаются в состав композиций для местного применения в виде крема и мази, из которых кальципотриол (моногидрат) может проникать в жизнеспособные слои кожи (т.е. дерму и эпидермис) в количествах, сравнимых с проникновением кальципотриола из мази Daivonex®, и приводить к аналогичным или более высоким уровням биологической активности (по данным определения активации гена-мишени in vitro) без использования включения усилителя проникновения, такого как припиленгликоль, который является потенциальным раздражителем кожи.

Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение относится к суспензии кальципотриола моногидрата в форме нанокристаллов с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм, по данным определения динамического рассеяния света, причем суспензия дополнительно содержит водную фазу, включающую неионное, полимерное поверхностно-активное вещество в количестве, достаточном для предотвращения образования агрегатов и/или кристаллического роста нанокристаллов кальципотриола моногидрата.

В другом аспекте изобретение относится к кальципотриолу моногидрату с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм, по данным определения динамического рассеяния света, причем указанные нанокристаллы могут быть получены способом, включающим стадии

(a) уменьшения кристаллического кальципотриола моногидрата в водной фазе, содержащей неионное, полимерное поверхностно-активное вещество в количестве в диапазоне от примерно 1% до примерно 5% масс. в расчете на водную фазу, с образованием микрочастиц с распределением размера частиц в диапазоне примерно 5-20 мкм и средним размером частиц примерно 10 мкм;

(b) воздействия на суспензию, полученную на стадии (a), первого цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 300-800 бар, в течение периода времени, достаточного для получения примерно 15-40% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;

(c) воздействия на суспензию, полученную на стадии (b), второго цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 800-1200 бар, в течение периода времени, достаточного для получения примерно 40-80% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;

(d) воздействия на суспензию, полученную на стадии (c), третьего цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 1200-1700 бар, в течение периода времени, достаточного для получения примерно 90% или более кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм; и

(e) необязательно, выделения полученных нанокристаллов кальципотриола моногидрата из водной фазы.

В еще одном аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей описанные выше нанокристаллы кальципотриола моногидрата и фармацевтически приемлемый носитель.

В еще одном аспекте изобретение относится к применению композиции, содержащей нанокристаллы или наносуспензию кальципотриола моногидрата, для лечения заболеваний или состояний кожи, таких как псориаз, себопсориаз, ладонно-подошвенный пустулез, дерматит, ихтиоз или угревая сыпь.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг.1 представлен график, показывающий распределение размера частиц нанокристаллов кальципотриола моногидрата, полученных способом по настоящему изобретению, по данным определения динамическим рассеянием света.

На фиг.2a представлен график, сравнивающий рамановский спектр наносуспензии кальципотриола моногидрата в 2% полоксамере 188 с рамановским спектром кальципотриола моногидрата, не подвергнутого доведению до наноразмеров. На графике показано, что способ доведения до наноразмеров в соответствии с изобретением не приводит к какому-либо изменению формы кристаллов кальципотриола моногидрата.

На фиг.2b и 2c представлены графики, показывающие результаты анализа дифференциальной сканирующей калориметрией (DSC) двух партий нанокристаллов кальципотриола моногидрата, полученных способом по настоящему изобретению. DSC проводили при 100ºC/мин (фиг.2b) и при 100ºC/мин (сплошная линия), 300ºC/мин (точечная линия) и при 500ºC/мин (пунктирная линия) (фиг.2c). Несколько более толстая линия на графике отражает экзотермическое явление, возникающее примерно при 8ºC и, как считают, вследствие кристаллизации аморфного кальципотриола.

На фиг.3 представлен график, показывающий скорость высвобождения кальципотриола из наносуспензий по настоящему изобретению, по сравнению со скоростью высвобождения из мази Daivonex®. Из графика представляется, что скорость высвобождения значительно выше из препаративных форм в виде наносуспензии, чем из мази Daivonex®. «Крем в форме наносуспензии» представляет собой крем в соответствии с примером 3. «Наносусп. мазев. вода» соответствует Композиции A примера 2 без глицерола, тогда как «Наносусп. мазев. гли» представляет собой Композицию A примера 2.

На фиг.4a представлен график, показывающий проникновение в кожу и ток через кожу из двух мазей в форме наносуспензий, Композиции A и C Примера 2. «Мазь WSP» представляет собой Композицию A, тогда как «мазь Соннекон» представляет собой Композицию C.

На фиг.4b представлен график, показывающий проникновение в кожу и ток через кожу кальципотриола из мазей в форме наносуспензий, Композиции A, C и D по изобретению, по сравнению с мазью Daivonex®. Из графика представляется, что проникновение в жизнеспособную кожу из мазей в форме наносуспензий сравнимо с проникновением из мази Daivonex®, хотя ток значительно ниже, что приводит к меньшему системному воздействию кальципотриола.

На фиг.5 представлен график, показывающий проникновение в кожу и ток через кожу кальципотриола из крема в форме наносуспензии по изобретению, по сравнению с кремом Daivonex®. Из графика представляется, что проникновение кальципотриола из крема в виде наносуспензии в жизнеспособную кожу значительно выше из крема в виде наносуспензии, чем из крема Daivonex®.

На фиг.6 схематически показана активация гена, кодирующего кателицидин витамином D3, в человеческих кератиноцитах. Механизм активации гена кателицидина используется в биологическом анализе с использованием реконструированного человеческого эпидермиса (человеческие кератиноциты, культивированные с тем, чтобы образовать эпидермальные слои, характерные для кожи человека), на который наносятся содержащие кальципотриол композиции по изобретению, для активации кателицидина, как подробно описано ниже в примере 8.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

В настоящем контексте термин «нанокристаллы» предназначен для обозначения кристаллических частиц кальципотриола моногидрата, которые находятся в наноразмерном диапазоне, т.е. диаметром от 1 до 1000 нм. Нанокристаллы предпочтительно имеют такое распределение размера частиц, что ≥90% нанокристаллов имеют размер частиц от 100 до 900 нм, в частности от 200 до 600 нм.

Термин «наносуспензия» предназначен для обозначения нанокристаллов, как определено выше, суспендированных в водной фазе.

Термин «распределение размера частиц» предназначен для обозначения промежутка между самым маленьким и самым большим кристаллом кальципотриола моногидрата, определенных динамическим рассеянием света (также известным как фотонная корреляционная спектроскопия) с использованием аппаратов Zetasizer Nano ZS или ZS90 (выпускаемых компанией Malvern Instruments, UK) в соответствии с инструкциями производителя. Динамическое рассеяние света определяет размер твердых частиц, суспендированных в жидкости, путем освещения частиц лазером и анализа колебаний интенсивности в рассеянном свете в результате броуновского движения частиц в жидкости. Колебания интенсивности коррелируются с размером частиц в том, что более крупные частицы движутся медленнее, чем меньшие частицы, т.е. колебание интенсивности происходит медленнее.

Термин «аморфное» предназначен для обозначения твердого вещества без упорядоченного расположения его молекул, т.е. противоположность кристаллического.

«Кальципотриол» представляет собой аналог витамина D формулы

Было обнаружено, что кальципотриол существует в двух кристаллических формах, ангидрата и моногидрата. Кальципотриол моногидрат и его получения раскрыты в WO 94/15912.

Термин «химическая устойчивость» или «химически устойчивые» предназначен для обозначения того, что нанокристаллы кальципотриола моногидрата значимо не разлагаются с течением времени в 24-эпи кальципотриол или другие продукты разложения кальципотриола в суспензии или в готовом фармацевтическом продукте. В случае последнего, «химическая устойчивость» указывает на то, что не более чем 10%, предпочтительно не более чем 6%, кальципотриола моногидрата распадается в течение срока хранения продукта, обычно 2 лет, при комнатной температуре. Аппроксимацию химической устойчивости при комнатной температуре получают, подвергая нанокристаллы или композицию, содержащую их, ускоренным исследованиям устойчивости при 40ºC. Если менее чем примерно 10% вещества разложилось после 3 месяцев хранения при 40ºC, это обычно принимается как соответствующее сроку хранения 2 года при комнатной температуре.

Термин «физическая устойчивость» или «физически устойчивые» предназначен для обозначения того, что нанокристаллы кальципотриола моногидрата имеют по существу форму кристаллов, идентичную контрольному кальципотриола моногидрату, который не был подвергнут доведению до наноразмеров, по данным определения романовской спектроскопией, т.е. он не проявляет полиморфизма в результате доведения до наноразмеров. Кроме того, «физическая устойчивость» указывает на то, что нанокристаллы не проявляют агрегацию или рост кристаллов в заявленных суспензиях или фармацевтических композициях, в которые они включены.

Термин «по существу неводный» предназначен для обозначения того, что содержание свободной воды (в отличие от связанной с кристаллом воды) в лиофилизированном или подвергнутом распылительной сушке нанокристаллах кальципотриола моногидрата составляет менее чем примерно 2% масс., предпочтительно менее чем примерно 1% масс., например менее чем примерно 0,5% масс. нанокристаллов. Аналогичным образом, содержание свободной воды в «по существу неводной» мазевой композиции составляет менее чем примерно 3% масс., предпочтительно менее чем примерно 2% масс., например, менее чем примерно 1% или 0,5% масс. композиции.

Термин «солюбилизационная способность» предназначен для обозначения способности растворителя или смеси растворителей растворять данное вещество, выраженную в виде количества, требуемого для осуществления полной солюбилизации вещества.

Термин «проникновение в кожу» предназначен для обозначения диффузии активного ингредиента в различные слои кожи, т.е. роговой слой, эпидермис и дерму.

Термин «проникновение через кожу» предназначен для обозначения тока активного ингредиента через кожу в системную циркуляцию или, в случае исследований in vitro, таких как исследования, описанные ниже в примере 7, в рецепторную жидкость аппарата с ячейкой Франца, использованной в данном эксперименте.

Термин «биологическая активность» предназначен для обозначения активности производного или аналога витамина D при нанесении на кожу в композиции по изобретению. Биологическая активность композиций определяется в анализе in vitro измерением активации гена-мишени, кодирующего биологический маркер кателицидин в реконструированном человеческом эпидермисе, включающем культивированные человеческие кератиноциты, как подробно описано ниже в примере 8.

Получение нанокристаллов кальципотриола моногидрата

В последние годы проводилось все больше исследований получения нанокристаллов или наносуспензий терапевтически активных ингредиентов как способа обеспечения улучшенной скорости растворения слаборастворимых лекарственных средств. Большая площадь поверхности нанокристаллов обеспечивает более высокую скорость растворения при введении лекарственного средства. Данная технология до настоящего времени главным образом использовалась при включении активных ингредиентов в состав препаративных форм для перорального или внутривенного введения.

В литературе было описано несколько способов получения нанокристаллов лекарственных средств. В широком смысле, способы могут быть разделены на две категории, т.е. размол и гомогенизация под высоким давлением.

В публикации US № 5145684 раскрыт способ получения кристаллических наночастиц размолом в шаровой мельнице в течение 4-5 дней в присутствии модификаторов поверхности, таких как поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, лецитин или другое поверхностно-активное вещество. Вероятно, что размол в шаровой мельнице кальципотриола моногидрата в этих условиях приведет или прямо к химическому разрушению кальципотриола моногидрата, или к образованию больших количеств аморфного кальципотриола, что было бы неблагоприятно для достаточной устойчивости при хранении/сроке годности фармацевтической композиции, содержащей его, поскольку аморфный материал относительно более уязвим для химического разрушения, чем кристаллический материал.

В публикации Са № 2375992 раскрыт способ получения частиц лекарственных средств с размером частиц менее чем 5 мкм, предпочтительно менее чем 1 мкм, гомогенизацией под высоким давлением в поршневом гомогенизаторе с давлением, регулируемым через зазор, в безводной среде при температуре ниже 20ºC, в частности ниже 0ºC. Доведение до наноразмеров проводится воздействием на микронизированные частицы лекарственного средства 10-20 циклов гомогенизации под высоким давлением при 1500 бар. В способе по настоящему изобретению заявители используют водную среду для уменьшения частиц кальципотриола, поскольку использование безводной среды (жидкого парафина) не привело к какому-либо значимому уменьшению размера кристаллов кальципотриола моногидрата.

В публикации WO 2004/054549 раскрыта местная препаративная форма наночастиц спиронолактона в кремовой основе, содержащей моноглицериды в воде. Наночастицы получают с использованием гомогенизации под высоким давлением в поршневом гомогенизаторе с подачей давления через регулируемый зазор.

Было обнаружено, что гомогенизация под высоким давлением при 1500 бар в течение нескольких циклов не подходит для уменьшения частиц кальципотриола моногидрата, поскольку данная процедура ведет к агрегации кристаллов кальципотриола моногидрата даже в присутствии подходящего поверхностно-активного вещества.

В публикации WO 2008/058755 раскрывается получение нанокристаллов косметически активного вещества размолом с использованием голлендра или шаровой мельницы с последующей гомогенизацией под высоким давлением. Указано, что комбинация этих двух способов имеет преимущества перед одной гомогенизацией под высоким давлением, поскольку последняя требует много циклов гомогенизации при высоком давлении (1500 бар). Комбинированный способ обеспечивает возможность использования только одного цикла гомогенизации при более низком давлении для получения частиц наноразмера.

В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к способу получения нанокристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм, по данным определения динамическим рассеиванием света, причем способ включает стадии

(a) уменьшения размера частиц кристаллического кальципотриола моногидрата в водной фазе, содержащей неионное полимерное поверхностно-активное вещество в количестве от примерно 1% до примерно 5% масс. в расчете на водную фазу с образованием микрочастиц с распределением размера частиц в диапазоне примерно 5-20 мкм и средним размером частиц примерно 10 мкм;

(b) воздействия на суспензию, полученную на стадии (a), первого цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 300-800 бар, в течение периода времени, достаточного для получения примерно 15-40% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;

(c) воздействия на суспензию, полученную на стадии (b) второго цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 800-1200 бар, в течение периода времени, достаточного для получения примерно 40-80% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;

(d) воздействия на суспензию, полученную на стадии (c) третьего цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 1200-1700 бар, в течение периода времени, достаточного для получения примерно 90% или более кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм; и

(e) необязательно, выделения полученных нанокристаллов кальципотриола моногидрата из водной фазы.

В конечной суспензии (после стадии (d)) количество нанокристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм составляет предпочтительно 95% или более.

Способ по настоящему изобретению отличается от способа, раскрытого в публикации WO 2008/058755, комбинированием стадии первоначального уменьшения размера частиц (a) с тремя последовательными циклами гомогенизации под высоким давлением, причем каждый цикл проводится при увеличивающемся давлении. Это отличается от процедуры, раскрытой в публикации WO 2008/058755, где за размолом в шаровой мельнице активного ингредиента следует один цикл гомогенизации под высоким давлением при низком давлении (таком как 100 бар, см. Примеры 8 и 9), что приводит к желательному уменьшению размера частиц. Было обнаружено, что такая процедура недостаточна для обеспечения удовлетворительного размера частиц и распределения размера частиц кристаллов кальципотриола моногидрата, т.е. только примерно 15-40% кристаллов были бы в пределах желательного распределения размера частиц.

Кроме того, было обнаружено, что нет необходимости в проведении способа по настоящему изобретению с регулированием температуры, в отличие от процедуры, раскрытой в WO 2008/058755, где для двух из трех активных ингредиентов температуру требовалось поддерживать ниже 20ºC, а в идеале от 0ºC до 5ºC. Отсутствие необходимости в применении регулировки температуры предоставляет преимущество упрощенной процедуры. Однако удивительно, что в способе по настоящему изобретению не требуется регулирование температуры, поскольку кальципотриол чувствителен к увеличениям температуры, и следовало бы ожидать, что он был бы подвергнут химическому распаду без регулирования температуры способа уменьшения размера частиц.

Варианты осуществления изобретения

Суспензия по настоящему изобретению может содержать неионное, полимерное поверхностно-активное вещество, которое добавляется для предотвращения агрегации нанокристаллов кальципотриола и/или для предотвращения роста кристаллов. Поверхностно-активное вещество предпочтительно представляет собой такое, которое не вызывает никакой значимой солюбилизации нанокристаллов кальципотриола моногидрата, т.е. оно должно иметь низкую способность солюбилизации и может быть благоприятно выбрано из группы, состоящей из поверхностно-активных веществ в виде полоксамеров или полисорбатов и простых C6-24 алкиловых эфиров полиоксиэтилена. Полоксамер может быть выбран из группы, состоящей из полоксамера 124, полоксамера 188, полоксамера 237, полоксамера 338 и полоксамера 407. В частности, было обнаружено, что полоксамер 188 обладает низкой способностью солюбилизации в отношении солюбилизации кальципотриола, и поэтому в настоящее время является предпочтительным ПАВ для использования в наносуспензии по настоящему изобретению. При использовании полисорбата в качестве ПАВ он может быть выбран из группы, состоящей из полисорбата 20, полисорбата 40, полисорбата 60, полисорбата 61, полисорбата 80 и полисорбата 81. Предпочтительным в настоящее время простым C6-24 алкиловым эфиром полиоксиэтилена является цетомакрогол 1000.

Количество ПАВ в водной фазе может находиться в диапазоне от примерно 0,01% до примерно 5% масс. суспензии. В целом, предпочтительно, чтобы количество ПАВ в указанной водной фазе находилось в диапазоне примерно 0,6-1,2% масс. суспензии.

В зависимости от условий, применяемых во время уменьшения размеров частиц и гомогенизации под высоким давлением, нанокристаллы кальципотриола моногидрата, присутствующие в полученной суспензии, могут иметь средний размер частиц 200-350 нм, 350-400 нм или 400-500 нм, по данным определения динамическим рассеянием света.

Наносуспензия может быть лиофилизирована или подвергнута распылительной сушке до нанокристаллов, содержащих ПАВ на поверхности. Лиофилизированные или подвергнутые распылительной сушке нанокристаллы могут затем использоваться для включения в неводные композиции.

Неожиданно было обнаружено, что процедуры доведения до наноразмеров по настоящему изобретению приводят к генерированию незначительных количеств лишь аморфного кальципотриола. Специалисту в данной области техники хорошо известно, что присутствие аморфного соединения делает материал неустойчивым вследствие отсутствия молекулярного расположения в кристаллической решетке, которое подвергает материал химическому разрушению или перестройке кристаллической структуры в другую полиморфную форму (см. Chow et al., J. Pharm. Sci. 97(8), 2008, pp. 2855-2877). По данным определения дифференциальной сканирующей калориметрией с использованием прибора Perkin-Elmer DSC 8500 в соответствии с инструкциями производителя было невозможно выявить значимых количеств аморфного кальципотриола до предела выявления прибора (примерно 5%), см. фиг.2b.

В способе по настоящему изобретению кристаллы кальципотриола первоначально подвергаются размолу или предразмолу в водной фазе с использованием шариков или бусин диаметром в диапазоне 1-4 мм, например 2-3 мм. Шарики или бусины могут быть составлены из стекла или аналогичного твердого материала, такого как оксид циркония. Размол может подходящим образом выполняться в течение 2-5 часов, например 3 часов, примерно при 500-4000 об/мин, такой как скорость примерно 1000-3000 об/мин, например около 2000 об/мин.

ПАВ, используемый для размола, может подходящим образом представлять собой неионное полимерное ПАВ, которое добавляется к водной фазе, в количестве в диапазоне от примерно 1,5 до примерно 3% масс. суспензии, в частности, примерно 2% масс. суспензии. ПАВ может быть предпочтительно выбрано из группы полоксамерных или полисорбатных ПАВ, как описано выше. Суспензия в последующем используется непосредственно на стадиях гомогенизации под высоким давлением, и особенно благоприятный результат в отношении распределения размера частиц после гомогенизации под высоким давлением был получен с использованием полоксамера 188. Следует отметить, что ввиду использования в способе получения по настоящему изобретению промывания оборудования для размола водой на стадии (a) и промывания водой оборудования для гомогенизации под высоким давлением после стадии (d), концентрация ПАВ в конечной суспензии находится в диапазоне примерно 0,6-1,2% масс. суспензии.

Стадии гомогенизации под высоким давлением (b)-(d) проводятся с использованием поршневого гомогенизатора с давлением, регулируемым через зазор, например, гомогенизатора Emulsiflex C3 (выпускаемого компанией Avestin), в соответствии с инструкциями производителя.

Было обнаружено, что для доведения до наноразмеров кристаллов кальципотриола моногидрата благоприятно, чтобы первый цикл гомогенизации под высоким давлением стадии (b) проводился при давлении примерно 500-650 бар. Время, требуемое для получения 15-40% нанокристаллов кальципотриола моногидрата с желательным распределением размера частиц, составляет 7-15 минут, например 8-12 минут, составляя такой период, как примерно 10 минут.

Второй цикл гомогенизации под высоким давлением стадии (c) может подходящим образом проводиться под давлением примерно 1000-1100 бар. Время, требуемое для получения 40-80% нанокристаллов кальципотриола моногидрата с желательным распределением размера частиц, находится в диапазоне 7-15 минут, например 8-12 минут, составляя такой период, как примерно 10 минут.

Третий цикл гомогенизации под высоким давлением стадии (d) может подходящим образом проводиться под давлением примерно 1400-1500 бар. Время, требуемое для получения 90% или более нанокристаллов кальципотриола моногидрата с желательным распределением размера частиц, находится в диапазоне 7-15 минут, например 8-12 минут, составляя такой период, как примерно 10 минут.

Если нанокристаллы кальципотриола моногидрата предназначены для включения в неводную препаративную форму, то они могут подходящим образом быть подвергнуты лиофилизации или распылительной сушке (до содержания воды (свободной воды) менее чем примерно 2% масс., такого как менее чем примерно 1% или менее чем примерно 0,5% масс. нанокристаллов.

Нанокристаллы кальципотриола моногидрата или суспензия, содержащая нанокристаллы, могут быть включены в фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель, который совместим с активным ингредиентом.

При смешивании с фармацевтически приемлемыми эксципиентами для получения композиции, как описано ниже, количество неионного полимерного ПАВ находится предпочтительно в диапазоне примерно 0,03-0,06% масс. композиции.

В одном варианте осуществления композиция по настоящему изобретению представляет собой мазь. В соответствии с современной классификацией FDA (Администрации пищевых продуктов и лекарственных средств США) мазь представляет собой полутвердую лекарственную форму, которая может содержать воду и летучие вещества в количестве до 20% масс. и которая содержит более чем 50% масс. углеводородов, восков или полиолов в носителе. Таким образом, в соответствии с изобретением мазь может представлять собой композицию вода-в-масле, и в этом случае сама наносуспензия может добавляться к липофильным компонентам композиции с тем, чтобы композиция содержала до 10% масс. или, предпочтительно, до 5% масс. водной фазы. Альтернативно, композиция может представлять собой неводную мазь, которая содержит менее чем примерно 2%, предпочтительно менее чем 1% свободной воды по массе композиции.

Мазевый носитель может подходящим образом содержать парафин, выбранный из парафинов, состоящих из углеводородов с длинами цепей в диапазоне C5-60 и их смесей. Часто используемый мазевый носитель представляет собой вазелин или белый мягкий парафин, который составлен из углеводородов с различной длиной цепи, достигающей пика примерно при C40-44, или смеси вазелина и жидкого парафина (состоящего из углеводородов с различной длиной цепи, достигающей пика примерно при C28-40). Хотя вазелин обеспечивает окклюзию обрабатываемой поверхности кожи, снижая трансдермальную потерю воды и потенцируя терапевтический эффект активного ингредиента в композиции, он имеет тенденцию вызывать ощущение маслянистости и/или липкости, которое сохраняется достаточно длительное время после нанесения, и он нелегко распределяется по поверхности кожи. Поэтому может быть предпочтительным использование парафинов, состоящих из углеводородов с несколько меньшей длиной цепи, таких как парафин, состоящий из углеводородов с длинами цепей, достигающих пика при C14-16, C18-22, C20-22, C20-26, или их смесей. Было обнаружено, что такие парафины более косметически приемлемы в том, что они менее липкие и/или маслянистые после нанесения и легче распределяются по поверхности кожи. Поэтому ожидается, что они приведут к лучшему соблюдению пациентами назначенного лечения. Подходящие парафины этого типа выпускаются компанией Sonneborn и продаются под торговым названием Соннекон, например, Соннекон CM, Соннекон DM1, Соннекон DM2 и Соннекон HV. Данные парафины подробнее описываются и характеризуются в WO 2008/141078, которая включена в настоящее описание путем ссылки. (Углеводородная композиция парафинов была определена газовой хроматографией.)

Для придания желательной вязкости композиции по настоящему изобретению она может подходящим образом включать липофильный увеличивающий вязкость ингредиент, такой как воск. Воск может представлять собой минеральный воск, составленный из смеси углеводородов с высокой молекулярной массой, например, насыщенных C35-70 алканов, таких как микрокристаллический воск. Альтернативно, воск может представлять собой растительный или животный воск, например сложные эфиры C14-32 жирных кислот и C14-32 жирные спирты, такие как пчелиный воск. Количество увеличивающего вязкость ингредиента может варьироваться в соответствии с придающей вязкость силой ингредиента, но может обычно находиться в диапазоне примерно 1-20% масс. композиции. Когда увеличивающий вязкость ингредиент представляет собой микрокристаллический воск, то он обычно присутствует в количестве в диапазоне примерно 5-15% масс., например, примерно 10% масс. композиции.

Для поддержания достаточной физической устойчивости композиции, в частности во избежание разделения в ней водной и липидной фаз, может быть предпочтительным включение эмульгатора вода-в-масле с величиной HLB (водно-липидного баланса) 3-8. Примерами таких эмульгаторов являются простые C8-22 алкиловые эфиры полиоксиэтилена, например, простой стеариловый эфир полиоксиэтилена, простой цетиловый эфир полиоксиэтилена, простой олеиловый эфир полиоксиэтилена или простой лауриловый эфир полиоксиэтилена. Количество эмульгатора обычно находится в диапазоне 2-10% масс./масс. композиции.

Композиция может дополнительно содержать смягчающий агент, который может действовать для смягчения утолщенного эпидермиса псориатических бляшек. Подходящий смягчающий агент для включения в композицию по настоящему изобретению может представлять собой силиконовый воск или летучее силиконовое масло, поскольку было дополнительно обнаружено, что присутствие силикона содействует проникновению кальципотриола в кожу. Было также обнаружено, что композиции, включающие силикон, приводят к меньшему раздражению кожи. Подходящие силиконовые масла для включения в композицию по настоящему изобретению, могут быть выбраны из циклометикона и диметикона. Количество силиконового масла, включенное в композицию по настоящему изобретению, обычно находится в диапазоне от примерно 1 до примерно 10% масс., например, примерно 5% масс. композиции.

Считается, что присутствие в мази Daivonex® пропиленгликоля является основным фактором, вызывающим раздражение кожи, испытываемое многими пациентами. Однако было обнаружено, что сам кальципотриол может у некоторых пациентов вызвать небольшое раздражение (A. Fullerton and J. Serup, Br. J. Dermatol. 137, 1997, pp. 234-240 и A. Fullerton et al., Br. J. Dermatol. 138, 1998, pp. 259-265). Поэтому может быть благоприятным включение в композицию по настоящему изобретению соединения против раздражения, такого как глицерол, сорбит, сахароза, сахарин, ментол, эвкалиптол или никотинамид. Глицерол был описан в качестве вещества, которое способно защитить кожу от раздражающих веществ (J. Bettinger et al., Dermatology 197, 1998, pp. 18-24), и, как было обнаружено заявителями, снизить высвобождение интерлейкина IL-1α дозозависимым образом: так, было обнаружено, что присутствие 15% масс. глицерола в мази кальципотриола приводит к значительно более низкому уровню высвобождения IL-1α, чем включение 10% масс. глицерола, что, в свою очередь, приводит к значительно более низкому уровню высвобождения IL-1α, чем включение 5% масс. глицерола.

Однако в дополнение к эффекту против раздражения, неожиданно было обнаружено, что глицерол способен потенциировать биологическую активность кальципотриола в том, что, как было обнаружено, экспрессия кателицидина (в анализе, описанном ниже в примере 4) увеличивается низким количеством глицерола в композиции (т.е. кателицидин больше экспрессируется, когда количество глицерола составляет 5% масс., чем когда количество глицерола составляет соответственно 10% или 15%): это подразумевает, что в отношении включения глицерола, необходимо достичь баланса между благоприятным эффектом против раздражения и благоприятным потенцирующим эффектом. Заявители обнаружили, что включение примерно 5-10% масс. глицерола в присутствии композиции приводит к значительному эффекту против раздражения, а также к значительному потенциированию биологической активности кальципотриола.

Известно, что кальципотриол представляет собой вещество, которое крайне чувствительно к кислотным условиям (pH ниже примерно 7,0 в водных композициях или кислотных реагирующих веществах в неводных композициях), которые способствуют быстрому разрушению кальципотриола. Для обеспечения адекватной химической устойчивости вещества в течение периода хранения композиции может быть желательным включение соединения, способного нейтрализовать кислотные примеси, которые могут присутствовать в одном или более эксципиентов композиции и которые вредны для химической устойчивости кальципотриола. Если композиция является водной, то нейтрализующее кислоту соединение может быть выбрано из буфера, такого как фосфатный буфер, который может быть включен в количестве 0,025-0,065% масс. композиции. С другой стороны, если композиция является неводной, то нейтрализующее кислоту соединение может преимущественно представлять собой амин, такой как триэтаноламин, трометамол, моноэтаноламин или диэтаноламин, включенный в композицию в количестве 0,1-2% масс. композиции.

В другом варианте осуществления композиция по настоящему изобретению представляет собой крем, который может содержать компоненты, аналогичные мази, но который обычно представляет собой эмульсию масло-в-воде, содержащую значительное количество воды.

В определенном варианте осуществления композиция по настоящему изобретению содержит:

0,003-0,008% масс./масс. кальципотриола моногидрата

2-8% масс./масс. простого стеарилового эфира полиоксиэтилена

2-10% масс./масс. воды

0,001-0,005% масс./масс. полоксамера 188

70-90% масс./масс. парафинового носителя.

Композиция по настоящему изобретению может также содержать другие компоненты, обычно используемые в кожных препаративных формах, например антиоксиданты (например, альфа-токоферол), консерванты, эдетат натрия, пигменты, смягчающие кожу агенты, заживляющие кожу агенты и кондиционирующие кожу агенты, такие как мочевина, аллантоин или бисаболол, см. Руководство CTFA (Ассоциации косметических средств, средств гигиены и ароматизаторов) Cosmetic Ingredients Handbook, 2nd Ed., 1992.

Композиция по изобретению может применяться при лечении псориаза, себопсориаза, ладонно-подошвенного пустулеза, дерматита, ихтиоза, розовых угрей и угревой сыпи и связанных с ними кожных заболеваний местным применением эффективного количества композиции в соответствии с изобретением у нуждающегося в таком лечении пациента. Указанный способ предпочтительно включает местное нанесение однократно или дважды в день терапевтически достаточной дозировки указанной композиции. Для этого композиция в соответствии с изобретением предпочтительно содержит примерно 0,001-0,5 мг/г, предпочтительно примерно 0,002-0,25 мг/г, в частности 0,005-0,05 мг/г нанокристаллов кальципотриола моногидрата. Предусматривается, что композиция по настоящему изобретению может преимущественно применяться для поддерживающего лечения указанных кожных заболеваний, т.е. продолжающегося лечения после исчезновения видимых симптомов, для задержки рецидива симптомов.

Для обеспечения более эффективного лечения псориаза и других кожных заболеваний в острой фазе, может быть желательным включение одного или более дополнительных терапевтически активных ингредиентов в композицию. Примеры таких дополнительных активных ингредиентов включают без ограничения противовоспалительные лекарственные средства, такие как кортикостероиды, такие как бетаметазон и его сложные эфиры, например, сложный эфир валерата или дипропионата, клобетазол или его сложные эфиры, такие как пропионат, гидрокортизоны или их сложные эфиры, такие как ацетат; нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, такие как напроксен, индометацин, диклофенак, ибупрофен, дексибупрофен, кетопрофен, флурбипрофен, пироксикам, лорноксикам или набуметон, ингибиторы фосфодиэстеразы 4 (например, соединения, раскрытые в WO 2008/077404, WO 2008/104175, WO 2008/128538 или WO 2010/069322) или ингибиторы p38 MAP-киназы (например, соединения, раскрытые в WO 2005/009940 или WO 2006/063585).

Изобретение далее иллюстрируется следующими примерами, которые никоим образом не предназначены для ограничения объема изобретения, определяемого формулой изобретения.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

Получение нанокристаллов кальципотриола моногидрата

4 г полоксамера 188 растворяли в 196 мл лабораторной воды при перемешивании и pH доводили до 8,5 добавлением соответствующего количества NaOH.

3,5 г стеклянных шариков диаметром 2 мм отвешивали в два флакончика, обеспеченных винтовым колпачком. В каждый флакончик добавляли 0,035 г кальципотриола моногидрата, после чего в каждый флакончик добавляли 1,05 г 2% раствора полоксамера 188. Кальципотриол моногидрат измельчали встряхиванием на орбитальном шейкере (VXR Basic IKA Vibrax) при 2000 об/мин.

После размола флакончики и стеклянные шарики, использованные для размола, промывали 24,0 г лабораторной воды при pH 8,5 и суспензию кальципотриола моногидрата выливали во флакончик с синей крышкой. Суспензию переносили в гомогенизатор высокого давления Emulsiflex C3 (Avestin), и флакончик с синей крышкой промывали 4,9 г лабораторной воды при pH 8,5. Гомогенизацию под высоким давлением проводили при 500 бар в течение 10 минут при 1000 бар в течение 10 минут и при 1400 бар в течение 10 минут. После гомогенизации под высоким давлением цилиндр аппарата Emulsiflex промывали 4,9 г лабораторной воды при pH 8,5, после чего определяли распределение размера частиц динамическим рассеиванием света с использованием аппарата Zetasizer Nano ZS90, при этом распределение размера частиц находилось в диапазоне 200-600 нм, а средний размер частиц находился в диапазоне 350-400 нм.

Путем использования рамановской спектроскопии, сравнивающей рамановский спектр нанокристаллов с рамановским спектром кальципотриола моногидрата, который не был подвергнут доведению до наноразмеров, было определено, что полученные нанокристаллы представляют собой кальципотриол моногидрат.

Количество аморфного кальципотриола, генерированное в данном способе, определяли на двух партиях нанокристаллов кальципотриола, полученных способом с использованием анализа DSC при скорости нагревания 100ºC, 300ºC и 500ºC/мин в атмосфере N2. Прибор, использованный для анализа, представлял собой Perkin Elmer DSC 8500.

Результаты показаны на фиг.2b и 2c, демонстрирующих экзотермическое явление с началом примерно при 8ºC. Считается высоко вероятным, что экзотермическое явление вызвано кристаллизацией аморфного кальципотриола. Представляется, что количество тепла, испускаемого во время процесса кристаллизации, очень мало, в действительности, очень близко к пределу выявления. Поскольку количество тепла, испускаемого во время процесса кристаллизации пропорционально количеству аморфного соединения, присутствующего в образце, заявители сделали вывод, что в двух партиях присутствовали лишь незначительные количества аморфного кальципотриола.

Пример 2

Мази, содержащие нанокристаллы кальципотриола моногидрата

Мази композиции, показанной ниже в таблице 1, получали смешиванием ингредиентов липидной фазы (углеводороды + простой стеариловый эфир полиоксиэтилена(2) + α-токоферол) при нагревании до 80-85ºC и медленном перемешивании. Водную фазу получали растворением динатрия эдетата и динатрия дигидрофосфата в соответствующем количестве водной наносуспензии кальципотриола моногидрата (полученной, как описано в примере 1), с содержанием кальципотриола моногидрата, доведенным до 50 мкг/г. К суспензии добавляли глицерол при смешивании и нагревании до 35-40ºC и pH смеси доводили до 8,5 в соответствии с целесообразностью 1N HCl или NaOH.

Водную фазу добавляли к липидной фазе при взбивании в течение 30 мин, после чего полученную мазь медленно охлаждали до температуры ниже 32ºC, ею заполняли алюминиевые тубы и хранили при комнатной температуре.

Таблица 1
Ингредиент (мг/г) Соед. A Соед. B Соед. C Соед. D Соед. E Соед. F
Нанокристаллы кальципотриола моногидрата 0,05 0, 05 0,05 0,05 0,05 0,05
Динатрий дигидрофосфат 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26 0,26
Парафин, жидкий 50 50 50 50 50 50
Простой стеариловый эфир полиоксиэтилена(2) 50 50 50 50 50 50
Динатрий эдетат 0,065 0,065 0,065 0,065 0,065 0,065
Полностью рацемический α-токоферол 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02
Глицерол 100 - 100 100 100 100
Вода, очищенная 50 150 50 50 50 50
Полоксамер 188 0,03 0,03 0,03 0,03 - -
Полоксамер 407 - - - - 0,03 -
Полисорбат 80 - - - - - 0,03
Парафин, белый мягкий 749,6 - - 699,6 749,6 749,6
Циклометикон - - - 50 - -
Белый Petrolatum Jelly (Соннекон DM1) - 649,6 649,6 - - -
Микрокристаллический воск (Multiwax 180 MH) - 100 100 - - -

Композиции тестировали на химическую устойчивость в течение 3 месяцев при 40ºC/75% RH (относительной влажности). Результаты показывают удовлетворительную устойчивость кальципотриола в условиях теста.

Пример 3

Крем, содержащий нанокристаллы кальципотриола моногидрата

Крем композиции, указанной ниже в таблице 2, получали плавлением цетомакрогола 1000, цетостеарилового спирта, жидкого парафина при 80ºC. Водную фазу получали растворением динатрий дигидрофосфата и хлораллилгексаминия хлорида в очищенной воде при 80ºC. К раствору добавляли глицерол при смешивании и pH смеси доводили до 8,5 в соответствии с целесообразностью 1N HCl или NaOH.

Водную фазу смешивали с липидной фазой при гомогенизации и охлаждали до 55ºC. Остающуюся воду добавляли при энергичном перемешивании и полученный крем охлаждали до 25ºC при перемешивании с медленной скоростью.

Соответствующее количество наносуспензии кальципотриола моногидрата (полученной, как описано в примере 1) с доведением содержания кальципотриола моногидрата до 50 мкг/г добавляли к крему при смешивании в течение 30 минут при <30ºC. Полученным кремом заполняли тубы и хранили до дальнейшего применения.

Таблица 2
Ингредиент (мг/г) Соединение G Соединение H Соединение I
Нанокристаллы кальципотриола моногидрата 0,05 0,05 0,05
Цетомакрогол 1000 30 30 30
Цетостеариловый спирт 60 60 60
Хлораллилгексаминий хлорид 0,5 0,5 0,5
Глицерол 30 30 30
Динатрий дигидрофосфат 2 2 2
Полоксамер 188 0,03 - -
Полоксамер 407 - 0,03 -
Полисорбат 80 - - 0,03
Парафин, жидкий 50 50 50
Парафин, белый мягкий 170 170 170
Вода, очищенная До 1 г До 1 г До 1 г

Кремовые композиции тестировали на химическую устойчивость в течение 3 месяцев при 40ºC/75% RH. Результаты показывают удовлетворительную устойчивость кальципотриола в условиях теста.

Пример 4

Неводная мазь, содержащая нанокристаллы кальципотриола моногидрата

Наносуспензию кальципотриола моногидрата, полученную, как описано в примере 1, подвергали лиофилизации в течение ночи. Лиофилизированные, по существу, безводные нанокристаллы использовали для получения мази диспергированием нанокристаллов в жидком парафине и добавлением белого мягкого парафина к дисперсии.

Композиция неводной мази представлена ниже в таблице 3.

Таблица 3
Ингредиент Содержание
Нанокристаллы кальципотриола моногидрата 50 мкг
Парафин, жидкий 50 мг
Парафин, белый мягкий 750 мг
Полоксамер 188 0,05 мг

Неводную мазь тестировали на химическую устойчивость в течение 3 месяцев при 40ºC/75% RH. Результаты показывают удовлетворительную устойчивость кальципотриола в условиях теста.

Пример 6

Высвобождение из наносуспензионных композиций по сравнению с мазью Daivonex ®

Высвобождение in vitro кальципотриола из композиций, описанных в примерах 1 и 2, определяли в диффузионных ячейках из плексигласа с использованием мембраны Spectra/Porv 6 для разделения рецепторной и донорской камер (n=6 ячеек на партию). Определяли высвобождение кальципотриола в реципиентную фазу, состоящую из 0,04M изотонического фосфатного буфера, pH 7,4 и изопропанола (70:30 об./об.). Образцы анализировали ВЭЖХ/УФ.

Результаты, которые представлены ниже на фиг.3, показывают, что скорость высвобождения кальципотриола из наносуспензионных мазей и крема по настоящему изобретению значительно выше, чем скорость высвобождения из мази Daivonex®.

Результаты, представленные на фиг.3, показывают, что скорость высвобождения значительно выше из наносуспензионных препаративных форм, чем из мази Daivonex®.

Пример 7

Исследование проникновения в кожу in vitro

Для исследования проникновения кальципотриола в кожу и через кожу из композиций по изобретению проводили эксперимент диффузии через кожу. В данном исследовании использовали кожу полной толщины из ушей свиней. Уши держали замороженными при -18ºC перед использованием. В день перед экспериментом уши помещали в холодильник (5±3ºC) для медленного размораживания. В день эксперимента волосы удаляли, используя ветеринарную машинку для стрижки. Кожу очищали от подкожного жира, используя скальпель, и два куска кожи отрезали от каждого уха и помещали на диффузионные ячейки Франца в сбалансированном порядке.

Статические диффузионные ячейка типа Франца с доступной площадью диффузии 3,14 см2 и рецепторными объемами в диапазоне от 8,6 до 11,1 мл использовали по существу таким же образом, как описано в T.J. Franz, "The finite dose technique as a valid in vitro model for the study of percutaneous absorption in man" в Current Problems in Dermatology, 1978, J.W.H. Mall (Ed.), Karger, Basel, pp. 58-68. Удельный объем измеряли и регистрировали для каждой ячейки. Магнитный брусок помещали в рецепторный отсек каждой ячейки. После установки кожи каждую рецепторную камеру заполняли физиологическим солевым раствором (35ºC) для гидратации кожи. Ячейки помещали в термически регулируемую водяную баню, которая была помещена на магнитную мешалку, установленную на скорость вращения 400 об/мин. Температуру циркулирующей воды в банях поддерживали на уровне 35±1ºC, что в результате обеспечивало температуру примерно 32ºC на поверхности кожи. Через один час солевой раствор заменяли рецепторной средой, 0,04M изотоническим фосфатным буфером, с pH 7,4 (35ºC), содержащим 4% бычий сывороточный альбумин. Условия погружения поддерживали во все отрезки времени в течение периода исследования, т.е. концентрация активных соединений в рецепторной среде была ниже 10% растворимости соединений в среде.

Проникновение в кожу in vitro каждой тестируемой композиции тестировали в 6 повторениях (т.е. n=6). Каждую тестируемую композицию наносили на кожную мембрану в 0 часов в предназначенной дозе 4 мг/см2. Для нанесения использовали стеклянный шпатель и остаточное количество композиции определяли с тем, чтобы получить количество композиции, действительно нанесенной на кожу.

Эксперименту по проникновению через кожу давали возможность продолжаться в течение 21 часа. Затем образцы брали из следующих компартментов:

Роговой слой брали отслоением с помощью ленты 10 раз, используя ленту D-Squame® (диаметр 22 мм, CuDerm Corp., Dallas, Texas, USA). Каждую полоску ленты накладывали на тестируемую область, используя стандартное давление в течение 5 секунд, и удаляли с тестируемой области одним нерезким непрерывным движением. Для каждой повторной ленты, направление отрыва варьировалось. Затем аналогичным образом из кожи брали пробы жизнеспособного эпидермиса и дермы.

Брали и анализировали образцы (1 мл) рецепторной жидкости, остающейся в диффузионной ячейке.

Концентрацию кальципотриола в образцах определяли жидкостной хроматографией - масс-спектрометрией.

Результаты представлены на фиг.4a, на которой показано проникновение в жизнеспособную кожу из Композиции A и C с использованием двух различных парафиновых носителей, и на фиг.4b, на которой показано, что проникновение в жизнеспособную кожу из несуспензионных мазей сравнимо с проникновением из мази Daivonex®, хотя ток значительно ниже, что приводит к меньшему системному воздействию кальципотриола.

Другие результаты представлены на фиг.5, которая представляет собой график, показывающий, что проникновение кальципотриола из композиции G в жизнеспособную кожу значительно выше из наносуспензионного крема, чем из крема Daivonex®.

Пример 8

Биологическая активность композиций

Как показано ниже на фиг.6, кателицидин представляет собой антимикробный пептид, экспрессированный в человеческих кератиноцитах. Сильную экспрессию кателицидина вызывает инфекция кожи или разрушение кожного барьера. При псориазе уровень кателицидина увеличивается в коже поражений пациентов с псориазом. Было обнаружено, что экспрессия гена, кодирующего кателицидин, может быть вызвана витамином D3 или аналогами витамина D, такими как кальципотриол (см. публикации TT Wang et al., J. Immunol. 173(5), 2004, pp. 2909-2912; J. Schauber et al., Immunology 118(4), 2006, pp. 509-519; Schauber and Gallo, J. Allergy Clin. Immunol. 122, 2008, pp. 261-266; M. Peric et al., PloS One 4(7), 22 July 2009, e6340) посредством связывания с рецептором витамина D. Эти данные использовались для разработки анализа, в котором захват и биологическую активность кальципотриола в человеческих кератиноцитах из тестируемых композиций определяли измерением уровня индукции гена, кодирующего кателицидин.

При этом анализе содержащий нанокристаллы кальципотриола моногидрата крем, полученный, как описано выше в примере 3 (композиция G), наносили местно в трех повторениях на реконструированный человеческий эпидермис, состоящий из нормальных человеческих кератиноцитов, культивированных в течение 12 дней на поликарбонатных фильтрах площадью 0,5 см2 (выпускаемые компанией SkinEthic® Laboratories, Nice, France) в количестве 10 мкл. Ткань обрабатывали в течение одного или двух дней в присутствии цитокинов IL-17A (20 нг/мл), IL-22 (20 нг/мл) и TNF-α (5 нг/мл) с последующим отделением эпидермиса от поликарбонатного фильтра и мгновенным замораживанием в жидком азоте. РНК экстрагировали из клеток и кДНК синтезировали обычными процедурами. Затем выполняли количественную ПЦР (кПЦР), используя следующие анализы от Applied Biosystems: CAMP Hs0018038_m1 и GAPDH Hs99999905_m1. Уровни экспрессии кателицидина нормализовали к GAPDH и относительное количественное определение проводили сравнением с мазью и кремом Daivonex®.

Результаты представлены ниже в таблице 4.

Таблица 4
Композиция 1-й день активации1 2-й день активации1
Мазь Daivonex® 2,3 4,1
Крем Daivonex® 1,0 2,2
Композиция G 2,5 4,7
1 Кратность активации относительно крема Daivonex®, 1-й день.

Результаты, представленные в таблице 4, показывают, что нанесение Композиции G привело к активации гена-мишени, аналогичной активации, полученной мазью Daivonex®, хотя активация гена-мишени была примерно вдвое больше активации кремом Daivonex®. Таким образом, результаты указывают на эффективность, которая так же высока, как активность, достигнутая мазью Daivonex®, полученной с препаративной формой, которая не содержит пропиленгликоль, и которая имеет более благоприятные косметические свойства.

Композиции A, C и D, полученные как описано выше в примере 2, наносили местно в трех повторениях на реконструированный человеческий эпидермис, состоящий из нормальных человеческих кератиноцитов, культивированных в течение 12 дней на поликарбонатных фильтрах площадью 0,5 см2 (выпускаемые SkinEthic® Laboratories, Nice, France) в количестве 10 мкл. Ткань обрабатывали в течение двух дней с последующим отделением эпидермиса от поликарбонатного фильтра и мгновенным замораживанием в жидком азоте. РНК экстрагировали из клеток и кДНК синтезировали обычными процедурами. Затем выполняли кПЦР, используя следующие анализы от Applied Biosystems: CAMP Hs0018038_m1 и GAPDH Hs99999905_m1. Уровни экспрессии кателицидина нормализовали к GAPDH и относительное количественное определение проводили сравнением с мазью и кремом Daivonex®.

Результаты представлены ниже в таблице 5.

Таблица 5
Композиция Кратность активации1
Мазь Daivonex® 1,0
Композиция A 2,6/2,1
Композиция C 1,3/4,1
Композиция D 4,1/6,8
1Относительно мази Daivonex®.

Результаты, представленные в таблице 5, показывают, что композиции по изобретению приводят к более высокой активации гена-мишени, т.е. они обладают более высокой биологической активностью, чем мазь, имеющаяся в продаже.

Пример 5

Исследование при местном применении у мини-свиней

Переносимость композиций A, C и D примера 2 при местном применении оценивали при ежедневном нанесении на кожу мини-свиньям в течение 4 недель. Мазь Daivonex® использовали для сравнения. Каждый день животных подвергали воздействию тестируемых продуктов в течение 8 часов.

Исследование проводили у 10 самок мини-свиней Gottingen SPF. У каждого животного было 6 участков нанесения, и оно получало объем 250 мг тестируемой препаративной формы на участок нанесения. Клинические признаки регистрировали ежедневно и кожные реакции в участках нанесения оценивали в баллах один раз в день перед началом нанесения и, кроме того, в день вскрытия, в отношении эритемы и отека. Потребление корма регистрировали ежедневно, а массу тела еженедельно. В конце периода обработки выполняли макроскопическое патоморфологическое всех животных и образцы кожи брали для патогистологического исследования.

Результаты показывают, что во время исследования не наблюдались побочные связанные с обработкой клинические признаки, хотя наблюдались кожные реакции (эритема) 1-2 степени. За исключением композиции A, эритемы были менее выражены, чем эритемы, наблюдавшиеся для мази Daivonex®. Результаты свидетельствуют о том, что композиции по изобретению могут лучше переноситься пациентами, чем мазь Daivonex®.

1. Суспензия для лечения псориаза, включающая кальципотриол моногидрата в форме нанокристаллов с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм по данным определения динамического рассеяния света, которые диспергированы в водной фазе, включающей неионное, полимерное ПАВ, выбранное из группы, состоящей из ПАВ в виде полоксамеров или полисорбатов, в количестве 0,01-5 мас.% в расчете на суспензию для предотвращения образования агрегатов и/или роста кристаллов нанокристаллов кальципотриола моногидрата, причем нанокристаллы кальципотриола моногидрата получены в суспензии путем обработки суспензии способом, включающим стадии:
(a) уменьшения размеров частиц кристаллического кальципотриола моногидрата в водной фазе, содержащей неионное, полимерное поверхностно-активное вещество в количестве в диапазоне от примерно 1 до примерно 5 мас.% в расчете на водную фазу, с образованием микрочастиц с распределением размера частиц в диапазоне примерно 5-20 мкм и средним размером частиц примерно 10 мкм;
(b) воздействия на суспензию, полученную на стадии (a), первого цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 300-800 бар, в течение 7-15 минут для получения примерно 15-40% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;
(c) воздействия на суспензию, полученную на стадии (b), второго цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 800-1200 бар, в течение 7-15 минут для получения примерно 40-80% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм; и
(d) воздействия на суспензию, полученную на стадии (c), третьего цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 1200-1700 бар, в течение 7-15 минут для получения в суспензии примерно 90% или более кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм.

2. Суспензия по п. 1, где полоксамер выбран из группы, состоящей из полоксамера 124, полоксамера 188, полоксамера 237, полоксамера 338 и полоксамера 407.

3. Суспензия по п. 2, где ПАВ представляет собой полоксамер 188.

4. Суспензия по п. 1, где полисорбат выбран из группы, состоящей из полисорбата 20, полисорбата 40, полисорбата 60, полисорбата 61, полисорбата 80 и полисорбата 81.

5. Суспензия по любому из пп. 1-4, где количество ПАВ в указанной водной фазе находится в диапазоне от примерно 0,6 до примерно 1,2 мас.% в расчете на суспензию.

6. Суспензия по п. 1, где нанокристаллы кальципотриола моногидрата имеют средний размер частиц 200-350 нм, 350-400 нм или 400-500 нм по данным определения динамическим рассеянием света.

7. Способ получения суспензии нанокристаллов кальципотриола моногидрата по любому из пп. 1-6, причем способ включает стадии:
(a) уменьшения размеров частиц кристаллического кальципотриола моногидрата в водной фазе, содержащей неионное, полимерное поверхностно-активное вещество, выбранное из группы, состоящей из ПАВ в виде полоксамеров или полисорбатов, в количестве в диапазоне от примерно 1 до примерно 5 мас.% в расчете на водную фазу, с образованием микрочастиц с распределением размера частиц в диапазоне примерно 5-20 мкм и средним размером частиц примерно 10 мкм;
(b) воздействия на суспензию, полученную на стадии (a), первого цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 300-800 бар, в течение 7-15 минут для получения примерно 15-40% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;
(c) воздействия на суспензию, полученную на стадии (b), второго цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 800-1200 бар, в течение 7-15 минут для получения примерно 40-80% кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм;
(d) воздействия на суспензию, полученную на стадии (c), третьего цикла гомогенизации под высоким давлением, составляющим примерно 1200-1700 бар, в течение 7-15 минут для получения в суспензии примерно 90% или более кристаллов кальципотриола моногидрата с распределением размера частиц в диапазоне 200-600 нм.

8. Способ по п. 7, где стадия уменьшения размера частиц (a) проводится размолом в шаровой мельнице во влажном состоянии с использованием шариков или бусин диаметром в диапазоне 1-4 мм, такого как 1,5-2,5 мм или 2-3 мм.

9. Способ по п. 7, где полоксамер выбран из группы, состоящей из полоксамера 124, полоксамера 188, полоксамера 237, полоксамера 338 и полоксамера 407.

10. Способ по п. 9, где ПАВ представляет собой полоксамер 188.

11. Способ по п. 7, где полисорбат выбран из группы, состоящей из полисорбата 20, полисорбата 40, полисорбата 60, полисорбата 61, полисорбата 80 и полисорбата 81.

12. Способ по п. 7, где ПАВ добавляется на стадии (a) в количестве в диапазоне от примерно 1,5 до примерно 3 мас.% суспензии, в частности примерно 2 мас.% суспензии.

13. Способ по п. 7, где первый цикл гомогенизации под высоким давлением стадии (b) проводится при давлении примерно 500-650 бар.

14. Способ по п. 7, где второй цикл гомогенизации под высоким давлением стадии (c) проводится при давлении примерно 1000-1100 бар.

15. Способ по п. 7, где третий цикл гомогенизации под высоким давлением стадии (d) проводится при давлении примерно 1400-1500 бар.

16. Способ по п. 7, где стадии гомогенизации под высоким давлением (b)-(d) проводятся с использованием поршневого гомогенизатора с давлением, регулируемым через зазор.

17. Фармацевтическая композиция, предназначенная для лечения псориаза, содержащая нанокристаллы кальципотриола моногидрата по любому из пп. 1-6 и фармацевтически приемлемый носитель.

18. Композиция по п. 17, где количество неионного полимерного ПАВ находится в диапазоне примерно 0,03-0,06 мас.% композиции.

19. Композиция по п. 17, где носитель включает по меньшей мере один парафин, выбранный из парафинов, состоящих из углеводородов с длинами цепей от C5 до C60, причем длины цепей достигают пика при C14-16, C18-22, C20-22, C20-26, C28-40 и C40-44, или их смесей.

20. Композиция по п. 17, дополнительно включающая эмульгатор вода-в-масле, выбранный из простых C8-22 алкиловых эфиров полиоксиэтилена, например простого стеарилового эфира полиоксиэтилена, простого цетилового эфира полиоксиэтилена или простого лаурилового эфира полиоксиэтилена.

21. Композиция по п. 17, дополнительно включающая ингредиент, увеличивающий вязкость.

22. Композиция по п. 21, где увеличивающий вязкость ингредиент представляет собой воск.

23. Композиция по п. 17, дополнительно включающая силиконовый воск или летучее силиконовое масло.

24. Композиция по п. 23, где летучее силиконовое масло представляет собой циклометикон или диметикон.

25. Композиция по п. 17, дополнительно включающая антираздражающее соединение.

26. Композиция по п. 25, где антираздражающее соединение представляет собой глицерол, сорбит, сахарозу, сахарин, никотинамид, ментол или эвкалиптол.

27. Композиция по п. 17, дополнительно включающая соединение, способное нейтрализовать кислотные примеси, вредные для химической устойчивости кальципотриола моногидрата в композиции.

28. Композиция по п. 27, где указанное соединение представляет собой амин, такой как триэтаноламин, трометамол, моноэтаноламин или диметаноламин.

29. Композиция по п. 17, которая представляет собой мазь.

30. Композиция по п. 29, которая представляет собой по существу безводную мазь.

31. Композиция по п. 17, которая представляет собой крем.

32. Композиция по п. 17, содержащая примерно 0,001-0,5 мг/г, предпочтительно примерно 0,002-0,25 мг/г, в частности 0,005-0,05 мг/г нанокристаллов кальципотриола моногидрата.

33. Композиция по п. 17, дополнительно содержащая один или более дополнительных терапевтически активных ингредиентов.

34. Композиция по п. 33, где дополнительные активные ингредиенты выбраны из группы, состоящей из противовоспалительных лекарственных средств, таких как кортикостероиды, такие как бетаметазон и его сложные эфиры, например сложный эфир валерата или дипропионата, клобетазол или его сложные эфиры, такие как пропионат, гидрокортизоны или их сложные эфиры, такие как ацетат; нестероидных противовоспалительных лекарственных средств, таких как напроксен, индометацин, диклофенак, ибупрофен, дексибупрофен, кетопрофен, флурбипрофен, пироксикам, лорноксикам или набуметон, ингибиторы фосфодиэстеразы 4 или ингибиторы p38 MAP-киназы.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к электрохимической установке для формирования наноразмерного покрытия и может быть использовано в полупроводниковой и электронной промышленности.

Изобретение относится к оптической и оптоэлектронной технике, а именно к устройствам предохранения фоточувствительных элементов оптических и оптоэлектронных систем от разрушающего воздействия мощного излучения.

Изобретение относится к области химии, в частности к методикам наноструктурирования и модификации свойств поверхности. Изобретение может быть использовано для изменения смачиваемости поверхности кремния путем изменения пористости поверхности, в том числе для получения гидрофильных или гидрофобных поверхностей на основе кристаллического кремния.

Изобретение относится к способу получения электретных тонкодисперсных частиц или крупнозернистого порошка. Способ получения электретных тонкодисперсных частиц включает стадии, в которых фторсодержащий материал, который содержит винилиденфторид-гексафторпропилен-тетрафторэтиленовый тройной сополимер, эмульгируют в жидкости, которая не смешивается с фторсодержащим материалом, для получения эмульгированных или микрокапсульных частиц, затем подвергают эмульгированные или микрокапсульные частицы облучению электронным пучком, воздействию радиоактивного излучения, или обработке коронным разрядом.
Изобретение относится к области получения просветляющих покрытий для различных оптических объектов. Техническим результатом изобретения является упрощение технологии, уменьшение агрегирующих воздействий на дисперсную фазу суспензии, повышение адгезии покрытий.

Изобретение относится к твердосмазочным материалам на основе ультрадисперсных наноалмазов, применяемых в качестве добавки к нефтяным смазочным маслам для защиты контактных поверхностей узлов рения от износа и для снижения коэффициента трения.

Изобретение относится к области наноструктурированных биосовместимых материалов, в частности к пористому кремниевому наноносителю. Способ включает следующие этапы - получение пор под действием электролиза в пластине толщиной 700-730 мкм и площадью до 32 см2 монокристаллического кремния, являющейся анодом, p-типа проводимости, легированной бором с концентрацией около 10-19 см-3, с удельным сопротивлением 3-7·10-3 Ом·см, поверхности которой ориентированы параллельно кристаллографическим плоскостям в стеклоуглеродном стакане, являющемся катодом.

Изобретение относится к способу синтеза фуллерида металлического нанокластера и к материалу, включающему фуллерид металлического нанокластера. Способ синтеза фуллерида металлического нанокластера включает механическое сплавление металлических нанокластеров с размером частиц между 5 нм и 60 нм с кластерами фуллеренового типа путем измельчения в планетарной мельнице, при котором молекулы фуллерена в фуллериде металлического нанокластера сохраняются.

Изобретение относится к области нанотехнологий, в частности к получению наноструктур на поверхности полупроводника. Способ модификации полупроводниковой пленки согласно изобретению заключается в том, что воздействуют на полупроводниковую пленку непрерывным лазерным излучением с энергией кванта превосходящей ширину запрещенной зоны в диапазоне мощности от 5 до 10 Вт, при диаметре лазерного пучка на поверхности пленки от 30 до 100 мкм, так чтобы интенсивность воздействия не превышала 106 Вт/см2, при сканировании поверхности пленки со скоростью от 40 до 160 мкм/с.

Изобретение относится к области металлургии, а именно к катодным материалам на основе нанокристаллических частиц Fe-Ni. Катод для электрохимического получения водорода выполнен в виде стальной подложки с нанесенным на ее поверхность нанокомпозитным покрытием железо-никель.

Изобретение относится к области медицины, конкретно к способу получения нанокристаллического силикатзамещенного карбонатгидроксиапатита (КГА), который включает смешение растворов солей кальция, фосфата и силиката, отстаивание, фильтрование, промывку от маточного раствора и сушку, при этом смешивают растворы четырехводного нитрата кальция, безводного двузамещенного фосфата аммония, пятиводного метасиликата натрия при соотношении концентраций Ca/(P+Si) равном 1,70, и доле силикат-ионов в общем количестве осадкообразующих анионов ( X S i O 4 4 − = C S i O 4 4 − / ( C P O 4 4 − + C S i O 4 4 − ) ) , составляющей не более 30 мол.

Изобретение относится к составам сырьевых смесей на цементной основе, применяемых для производства теплоизоляционных строительных материалов, отличающихся повышенной пожаростойкостью.
Изобретение относится к области нанокапсулирования при получении нанокапсул сульфата глюкозамина в оболочке из ксантановой камеди. Согласно способу по изобретению сульфат глюкозамина порциями добавляют в суспензию ксантановой камеди в бутиловом спирте, содержащую препарат Е472с в качестве поверхностно-активного вещества.

Изобретение относится к области аналитической химии. Предложен способ получения сепарационного материала, содержащего носитель на основе диоксида кремния и наночастицы золота.

Изобретение относится к области химии, в частности к методикам наноструктурирования и модификации свойств поверхности. Изобретение может быть использовано для изменения смачиваемости поверхности кремния путем изменения пористости поверхности, в том числе для получения гидрофильных или гидрофобных поверхностей на основе кристаллического кремния.

Изобретение относится к катодному органо-неорганическому гибридному материалу для вторичных литий-ионных источников тока состава (C6H4N)*xV2O5*yH2O, где х=0.10-0.12, y=0.7-0.9 в виде наносвитков длиной от 100 до 500 нм и диаметром от 10 до 20 нм с площадью поверхности 60 м2/г и диаметром пор 20-30 нм.

Изобретение относится к новой высококонцентрированной водной наноразмерной полиуретановой дисперсии. Описан способ получения высококонцентрированной водной наноразмерной полиуретановой дисперсии, не содержащей органический растворитель, с концентрацией основного вещества 30-60%, представляющей собой продукт взаимодействия: A) по меньшей мере одного полиизоцианата, содержащего по меньшей мере две изоцианатные группы; B) одного или нескольких полиолов с молекулярной массой (ММ) от 1000 до 18000, имеющих по меньшей мере две гидроксильные группы; C) одного или нескольких соединений по меньшей мере с двумя OH-функциональными группами, которые содержат по меньшей мере одну карбоксильную группу, которая может быть превращена полностью или частично в карбоксилатную группу в присутствии оснований; D) возможно одного или нескольких полиолов и/или глицидиловых эфиров полиолов со средней молекулярной массой менее 500, содержащих 2 и более гидроксильные и/или эпоксидные группы; E) одного или нескольких третичных аминов; F) одного или нескольких полиаминов, содержащих по меньшей мере одну NH2-группу, при этом подвергают одновременному взаимодействию компоненты (A), (B) и (C) до степени конверсии изоцианатных групп 70-98%, при необходимости вводят в реакционную массу компонент (D), затем полностью или частично нейтрализуют карбоксильные группы компонента (C) компонентом (E), диспергируют в воде, вводят компонент (F), нагревают дисперсию и выдерживают при температуре от 20 до 90°C в течение от одного до четырех часов.
Изобретение относится к нанотехнологии и заключается в способе получения нанокапсул албендазола с оболочкой из альгината натрия. Албендазол небольшими порциями добавляют в суспензию альгината натрия в гексане в присутствии препарата Е472с при перемешивании, приливают четыреххлористый углерод, полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре.
Изобретение относится к способу получения нанокапсул лозартана калия в оболочке из ксантановой камеди. Согласно способу по изобретению лозартан калия добавляют по порциям в суспензию ксантановой камеди в бензоле в присутствии препарата Е472с при перемешивании 1000 об/сек.

Изобретение относится к твердосмазочным материалам на основе ультрадисперсных наноалмазов, применяемых в качестве добавки к нефтяным смазочным маслам для защиты контактных поверхностей узлов рения от износа и для снижения коэффициента трения.
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для улучшения функционально-эстетических результатов пластической хирургии посттравматических деформаций век.
Наверх