Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью



Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью
Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью

Владельцы патента RU 2665968:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Иркутский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью. Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью, включающий измельчение травы володушки козелецелистной, ее трехкратную экстракцию в динамических условиях, извлечения объединяют, отстаивают в течение 72 часов, фильтруют, сгущают, сепарируют, сушат, при определенных условиях. Средство, полученное вышеописанным способом, проявляет выраженную желчегонную, противовоспалительную и антиоксидантную активность. 12 табл.

 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа производства лекарственных препаратов из растительного сырья.

В последнее время заболевания органов пищеварения имеют широкое распространение в результате несбалансированного питания, стрессов, аутоиммунных заболеваний, злоупотребления алкоголем и курения [7].

Среди лекарственных средств, применяемых в медицинской практике, около 40% приходится на препараты растительного происхождения. Интерес к лекарственным растениям постоянно растет, так как по сравнению с синтетическими средствами лекарственные средства растительного происхождения действуют на организм человека более мягко и дают меньше побочных эффектов. Больным с хроническими заболеваниями растительные средства можно применять длительное время. Преимуществом лекарственных растений и препаратов из них является то, что они содержат комплекс биологически активных веществ, которые обуславливают широту их фармакологического действия на организм человека [10].

В качестве желчегонных средства используется водный настой цветков бессмертника песчаного в соотношении (1:20) [3]. Также применяют настои из цветков пижмы, столбиков с рыльцами кукурузы [10].

Нестойкость при хранении водных извлечений в виде настоев и отваров является их недостатком, срок годности ограничивается двумя сутками при температуре +4°С [2]. Использование воды очищенной в качестве экстрагента не позволяет извлекать в полной мере флавоноиды [8]. В растениях, обладающих желчегонным действием, чаще всего основными биологически активными веществами являются флавоноиды. Например, бессмертник песчаный содержит флавоноиды салипурпозид, нарингенин, апигенин, гликозиды кемпферола, пижма обыкновенная содержит флавоноиды производные лютеолина, апигенина, акацетина, кверцетина, изорамнетина [4].

Экстракты сухие представляют собой порошкообразные массы, обладающие свойством сыпучести, с содержанием влаги не более 5%. Сухие экстракты получают высушиванием густых экстрактов или непосредственно из очищенной вытяжки с использованием методов, обеспечивающих максимальное сохранение действующих веществ: распыление, лиофилизация, сублимация и др. В качестве экстрагента применяют воду очищенную, спирт этиловой различной концентрации.

Известен способ получения средства, обладающего желчегонной активностью «Способ получения средства, обладающего желчегонным действием» [патент РФ 2465000, кл. А61К 36/534, А61К 36/23, А61К 36/28, B01D 11/02, А61Р 1/16, опубл. 27.10.2012, авторы Абрамова Я.И., Чучалин B.C., Шейкин В.В.]. Способ получения средства заключающийся в том, что измельченные цветки бессмертника песчаного, траву тысячелистника обыкновенного и листья мяты перечной смешивают с плодами кориандра, экстрагируют 40% спиртом этиловым путем многоступенчатой противоточной экстракции, отстаивают, фильтруют, сгущают при определенных условиях. Средство, полученное вышеописанным способом представляет собой экстракт густой (с остаточной влажностью 25%).

Известны способы получения средств, обладающих желчегонной и противовоспалительной активностью. «Способ получения средства, обладающего желчегонной и противовоспалительной активностью» [патент РФ 2159123, кл. А61Р 1/16, опубл. 20.11.2000, авторы Чехирова Г.В., Самбуева З.Г., Ербаева Л.В., Асеева Т.А., Николаев С.М., Петров Е.В., Дашинамжилов Ж.Б.]. Способ представляет собой получение экстракта сухого из сырья корневищ и корней девясила высокого, софоры желтоватой, кровохлебки лекарственной, корневищ имбиря лекарственного, древесины бузины сибирской, плодов боярышника кроваво-красного, яблони ягодной путем экстракции 25-30% этиловым спиртом.

«Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной активностями» [патент 2557990, опубл. 27.07.2015, авторы: Лубсандоржиева П.Б., Федоров А.В., Самбуева З.Г., Николаев С.М.]. Способ представляет собой получение средства, обладающего желчегонной активностью, путем экстракции измельченной надземной части ломатогониума каринтийского 96% этанолом двукратно при комнатной температуре, затем 40% этанолом, добавляя экстрагент в количестве, равном слитому, двукратно. Извлечения объединяют, концентрируют, высушивают в вакуум-сушильном шкафу для получения экстракта сухого, при определенных условиях.

Наиболее близким к заявляемому является способ получения средства, обладающего желчегонной и противовоспалительной активностью [патент РФ 2160598, М. кл. А61К 35/78, А61Р 1/16, А61Р 29/00 опубл. 10.11.2002 г. авторов Будаева С.Б. Асеева Т.А. Николаева И.Г. и др.]. Способ заключается в экстракции травы зубчатки обыкновенной 35-45% спиртом этиловым в соотношении сырье:экстрагент =1: 12-14 с учетом коэффициента водопоглощения в течение 60 мин при температуре 60-65°С при постоянном помешивании. Процесс повторяют дважды. Аналогичным способом проводят третью экстракцию в течение 30 мин. Объединенные водно-спиртовые извлечения фильтруют, упаривают до 1/3 первоначального объема. Кубовый остаток сепарируют. Полученный продукт доупаривают приблизительно до 1/5 первоначального объема и высушивают в вакуум-сушильном шкафу.

К недостаткам способа относится то, что для экстракции используется спирт невысокой концентрации 40-45%), который не позволяет достичь максимального извлечения из сырья флавоноидов, производных лютеолина и агликонов флавоноидов. Кроме того, продолжительность первого контакта фаз 60 мин не дает достаточную эффективность экстракции для первой ступени.

Техническим результатом предлагаемого способа является увеличение выхода целевого продукта, содержания в нем биологически активных веществ и расширение спектра фармакологического действия.

Технический результат обеспечивается путем экстракции растительного сырья спиртом этиловым 60% и 70%, очистки, упаривания и сушки.

Новым в достижении технического результата является то, что в качестве растительного сырья используют траву володушки козелецелистной.

Володушка козелецелистная (Bupleurum scorzonerifolium Willd.), семейства Зонтичных (Apiaceae) - многолетнее травянистое растение 20-60 см высотой, стебли прямостоячие, одиночные или несколько. Прикорневые листья и нижние стеблевые линейно-ланцетовидные длиной 3-15 см, шириной 2-6 мм, суженые к обоим концам. Цветки мелкие, с желтым венчиком, собраны в соцветия зонтики, образующие рыхлое метельчатое соцветие. Плоды - стручки размером 2-2,5 мм продолговато-яйцевидные, с тупыми короткими ребрами [13]. Володушка козелецелистная распространена на Алтае, Туве, Центральной Сибири, на Дальнем Востоке. Встречается в луговых степях, суходольных лугах, в разнотравных лесах, по вырубкам и опушкам, по южным каменистым склонам. В траве володушки козелецелистной содержатся флавоноиды (кверцетин, лютеолин-7-глюкозид, гиперозид, рутин, виценин, апигенин, изорамнетин-3-глюкозид, изокверцетин), фенолкарбоновые кислоты (кофейная, хлорогеновая, галловая, цикориевая, феруловая, розмариновая), кумарин, катехин, эпикатехин [6]. Их максимальное количество накапливается в траве в период цветения. В народной медицине володушка козелецелелистная в виде настоев применяется при заболеваниях печени, желчного пузыря [14].

Целью настоящего изобретения является повышение выхода целевого продукта и содержания в нем биологически активных веществ, расширение спектра фармакологического действия, которые обеспечиваются трехкратной экстракцией травы володушки козелецелистной спиртом этиловым 60% и 70%, при соотношении сырье-экстрагент 1:14 в динамических условиях -перемешивание сырья, температурой экстракции 60°С, и тем, что после объединения извлечений проводят отстаивание.

Оптимальные параметры экстракции были установлены экспериментально (табл. 1-5).

Новым является то, что в качестве экстрагента используется спирт этиловый 60% и 70%. Экспериментальные данные показали, что использование концентрации спирта менее 60% и более 70% ведет к снижению выхода экстрактивных веществ, флавоноидов и фенолкарбоновых кислот (табл. 1). Содержание экстрактивных веществ определяли по методике ГФ XIII [2], суммы флавоноидов - спектрофотометрическим методом, основанном на реакции комплексообразования с алюминия хлоридом. В качестве стандартного образца использовали рутин, т.к. максимум поглощения спиртового извлечения травы володушки козелецелистной совпадает с максимумом поглощения стандартного образца рутина при 412 нм. Количество суммы фенолкарбоновых кислот определяли методом прямой спектрофотометрии, расчет процентного содержания проводили по удельному показателю поглощения кофейной кислоты равном 782 при длине волны 325 нм.

Новым является также и то, что для экстракции используют сырье с размером частиц 2 мм, т.к. использование сырья с большим размером частиц приводит к снижению выхода экстрактивных веществ, флавоноидов и фенолкарбоновых кислот (табл. 2).

Новым является - продолжительность ступеней экстракции: 1-ая ступень - 120 мин, 2-ая ступень - 60 мин, 3-я ступень - 30 мин (табл. 5), обеспечивающая увеличение выхода целевого продукта.

Новым также является использование на ступенях экстракции спирта разной концентрации (1 и 2 ступень - 60% спирт этиловый, 3 ступень - 70% спирт этиловый). Применение 60% спирта этилового на 1 и 2 ступенях экстракции обеспечивает извлечение из сырья флавоноидов в виде гликозидов. На 3 ступени применение спирта 70% дает возможность извлечь дополнительно гликозиды и свободные агликоны, которые на 1 и 2 ступени 60%) спиртом этиловым не извлекаются.

Новым является то, что перед стадией упарки и сепарирования проводится дополнительная очистка объединенного извлечения отстаиванием при температуре +5°С в течение 72 часов, а далее извлечение фильтруют через друк-фильтр.

Для расчета эффективности экстракции определяли выход экстрактивных веществ (флавоноидов) на каждой ступени экстракции, суммировали и рассчитывали выход по отношению к массе сухого сырья (табл. 6).

Расчет процентного выхода экстрактивных веществ (флавоноидов) к массе сырья (Y,%) проводили по формуле:

, где

X - рассчитанная масса сухого остатка (флавоноидов) в общем объеме по трем ступеням, г, равная 1,43720;

m - масса абсолютно сухого сырья (4,50 г).

Эффективность экстракции (S,%) по экстрактивным веществам (флавоноидам) рассчитывали по формуле:

, где

Y - выход экстрактивных веществ к абсолютно сухому сырью, %; Е - содержание экстрактивных веществ в сырье, %, равное 39,70%;

Эффективность экстракции сырья по экстрактивным веществам составляет 80,45%, по флавоноидам - 93,34%.

Также были проведены исследования по количественному содержанию суммы флавоноидов, суммы фенолкарбоновых кислот в целевых продуктах, полученных по известному способу и предлагаемому. Так, содержание по известному способу суммы флавоноидов составляет 15,52%, по предлагаемому - 19,39%; суммы фенолкарбоновых кислот по известному способу - 10,34%), по предлагаемому - 12,03% (табл. 12).

Выход целевого продукта по известному способу - 20,95%), по предлагаемому - 22,42%.

Применение для экстракции спирта этилового 60 и 70%, степени измельченности сырья 2 мм, увеличение продолжительности первой ступени экстракции до 120 минут, введение стадии отстаивания объединенного извлечения дает увеличение выхода целевого продукта и повышение содержания в нем флавоноидов и фенолкарбоновых кислот.

Новым является то, что комплекс биологически активных веществ экстракта сухого, полученного по предлагаемому способу обладает не только желчегонной и противовоспалительной активностью, а также проявляет антиоксидантное действие (табл. 7-11).

Сопоставительный анализ заявляемого решения и прототипа показывает, что заявляемый способ отличается от известного тем, что в качестве сырья используют траву володушки козелецелистной с размером частиц сырья - 2 мм; продолжительность экстракции 1 ступени - 120 минут; экстракцию на 3-ей ступени проводят 70% спиртом этиловым; проводят отстаивание объединенного извлечения при температуре +5°С; далее осуществляют очистку фильтрованием через друк-фильтр, доупарка извлечения проводится до объема, что соответствует критерию «новизна».

Новая совокупность существенных признаков обеспечивает увеличение целевого продукта и содержания в нем суммы флавоноидов на 24,94%), суммы фенолкарбоновых кислот на 16,34%), расширение сырьевой базы за счет широко произрастающей володушки козелецелистной, что соответствует критерию «промышленная применимость».

При анализе известных способов было выявлено, что в них отсутствуют сведения о влиянии отличительных признаков заявляемого способа на достижение технического результата, следовательно, изобретение соответствует «изобретательскому уровню».

Оптимальные условия экстракции были положены в основу технологического процесса.

Пример. Описание технологического процесса получения экстракта сухого володушки козелецелистной (ЭСВК).

100 г травы володушки козелецелистной (влажность 10%) с размером частиц сырья 2 мм, помещают в экстрактор и заливают 1400 мл 60%) спирта этилового. Экстракцию проводят на магнитной мешалке при температуре 60°С. Первый контакт фазы - 120 мин. Извлечение сливают в количестве 980 мл (плотность - 0,754 г/см3) и заливают сырье свежим экстрагентом - 60% спиртом этиловым в объеме равном слитому. Продолжают экстракцию в течение 60 минут. Экстрагент сливают в количестве 960 мл, сырье заливают 70% спиртом этиловым в объеме равном слитому и продолжают экстракцию в течение 30 минут. Экстрагент сливают в объеме 880 мл. Полученные извлечения объединяют и помещают в холодильник при температуре +5°С на 72 часа. Затем извлечение фильтруют через друк-фильтр. Далее фильтрат подают на упарку в ротационный испаритель. Упарку ведут при температуре реакционной массы 60°С и давлении 9,81 гПа до первоначального объема, остаток передают на операцию сепарирования. Получают очищенное извлечение в количестве 700 мл (плотность 1,030 г/см3) подают в вакуум-распылительную сушилку до остаточной влажности экстракта сухого не более 5%.

Получают экстракт сухой в количестве 22,42 г, что составляет 22,42% от массы воздушно-сухого сырья.

Экстракт сухой представляет собой аморфный порошок коричневого цвета со слабым приятным запахом и горьковатым слегка вяжущим вкусом, хорошо растворимый в горячей воде.

Параметры стандартизации конечного продукта - экстракта сухого.

Обнаружение флавоноидов и фенолкарбоновых кислот проводили методом ВЭЖХ на приборе Gilston. Навеску ЭСВК около 0,0200 г, растворяли в 10 мл 70% спирта этилового. В хроматограф вводили по 20 мкл исследуемого раствора и стандартных веществ. Условия хроматографирования: колонка Kromasil С18 (4,6×250 мм; 5 мкм); режим элюирования - изокритический; элюент - ацетонитрил-вода-кислота фосфорная конц. в соотношении 20:80:0,05. Идентифицированы флавоноиды (кверцетин, лютеолин-7-глюкозид, гиперозид, рутин, апигенин), фенолкарбоновые кислоты (кофейная, хлорогеновая, галловая, цикориевая, феруловая, розмариновая).

Количественное определение суммы флавоноидов.

Около 0,1 г (точная навеска) ЭСВК помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 70% спирта этилового, колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры. Содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл и объем раствора доводят 70% спиртом этиловым до метки, перемешивают (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мл раствора А, прибавляют 1 мл 1% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят раствор до метки 96% спиртом этиловым. Через 40 минут измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре «LEKI SS 1207» (Финляндия) при длине волны 412 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл раствора А, 1 капли 10% раствора кислоты уксусной и доведенный 96% спиртом этиловым до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО рутина, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухой экстракт в процентах (X) вычисляют по формуле:

где D - оптическая плотность испытуемого раствора; D0 - оптическая плотность раствора РСО рутина; m - масса экстракта, г; m0 - масса РСО рутина, г; W - потеря в массе при высушивании экстракта в процентах.

Примечание. Приготовление раствора РСО рутина: около 0,05 г (точная навеска) РСО рутина, предварительно высушенного при температуре 130-135°С в течение 3 ч, растворяют в 85 мл 96% спирта этилового в мерной колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора тем же спиртом до метки и перемешивают.

Содержание суммы флавоноидов в ЭСВК 19,39%.

Методика количественного определения суммы фенолкарбоновых кислот в ЭСВК.

1 мл раствора А (полученного для количественного определения содержания суммы флавоноидов) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 96% спиртом этиловым до метки.

Оптическую плотность раствора определяют на спектрофотометре «LEKI SS 1207» (Финляндия) при длине волны 325 нм в кювете с длиной рабочего слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют 96% спирт этиловый.

Содержание суммы фенолкарбоновых кислот в пересчете на кофейную кислоту и

воздушно-сухой экстракт в процентах (X) рассчитывают по формуле:

,

где D - оптическая плотность испытуемого раствора; m - масса сырья, г; W - потеря в массе при высушивании сырья, %; 782 - удельный показатель поглощения кофейной кислоты при 325 нм.

Содержание суммы фенолкарбоновых кислот в ЭСВК 12,03%.

Влажность ЭСВК 3,80%.

Желчегонная активность.

Исследования выполнены на крысах линии Wistar обоего пола массой 190-200 г, содержащихся на стандартном рационе питания при свободном доступе к воде и пище в условиях вивария. Исследования с животными проводились в соответствии с «Правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей».

Исследование желчегонной активности проводили по общепринятой методике Скакуна Н.П. и Олейник А.Н. [9]. Препараты вводили per os. ЭСВК в дозе 100 мг/кг в виде водного раствора в объеме 2 мл. Препаратом сравнения служил настой цветков бессмертника песчаного 1:10 в объеме 2 мл. Крысы контрольной группы получали воду очищенную в эквиобъемном количестве. О степени желчегонной активности исследуемых средств судили по скорости секреции желчи, общему ее объему, а также по количеству содержания в желчи билирубина, холестерина, желчных кислот (по стандартным наборам Лахема, Чехия). Результаты эксперимента статистически обрабатывали.

ЭСВК повышал скорость секреции желчи, начиная с первого часа и далее по сравнению с контролем. Общее количество выделенной желчи при введении ЭСВК превышает достоверно контроль на 32,9% (табл. 7).

ЭСВК обладает выраженной желчегонной активностью и не уступает экстракту сухому зубчатки обыкновенной в адекватной дозе (100 мг/кг) и настою цветков бессмертника песчаного (1:10).

По содержанию в желчи билирубина, холестерина и желчных кислот ЭСВК превосходит сухой экстракт зубчатки обыкновенной, что объясняется более высоким содержанием основных БАВ в экстракте (флавоноидов и фенолкарбоновых кислот).

Противовоспалительная активность.

В эксперименте использовали методики исследования противовоспалительной активности на разных стадиях процесса воспаления: альтерации - по И.А. Ойвину [5], экссудации - по Ю.Е. Стрельникову [11], пролиферации - Ф.Н. Тринусу [12]. ЭСВК вводили крысам энтерально в виде водного раствора в дозе 100 мг/кг веса крысы, крысы контрольной группы получали воду очищенную в объеме 1 мл.

О воздействии ЭСВК на альтерацию тканей и интенсивность процессов регенерации судили по динамике заживления кожно-мышечного дефекта у крыс, вызванного подкожным введением в область спины 0,5 мл 9% кислоты уксусной с одновременным введением раствора декстрана в дозе 300 мг/кг массы животного. Первое введение препаратов осуществляли за 1 ч до введения уксусной кислоты, затем ежедневно 1 раз в сутки в течение 29 дней. На 9 и 29 сутки эксперимента оценивали площадь некротизированной ткани путем нанесения контура некроза на прозрачную пленку.

Оценку влияния ЭСВК на экссудативную фазу воспаления проводили путем однократного введения в заднюю конечность животных 0,1 мл 3% формалина. Исследуемые препараты вводили за 1 ч до инъекции, а затем через 5 и 18 часов. Оценку антиэкссудативной активности определяли путем расчета процента угнетения отека к контролю.

При изучении процесса образования фиброзно-грануляционной ткани стерильные ватные шарики массой 15 мг имплантировали крысам под кожу в области спины в асептических условиях. Изучаемые препараты вводили 1 раз в сутки в течение 7 дней. Затем образовавшиеся гранулемы взвешивали на аналитических весах сразу после извлечения и после высушивания (при 70°С в течение 24 ч до постоянной массы).

Результаты эксперимента статистически обрабатывали при доверительной вероятности 95%.

Как видно из таблицы 8, ЭСВК в дозе 100 мг/кг оказывает противовоспалительное действие, о чем свидетельствуют уменьшение степени альтерации ткани и повышение интенсивности процессов регенерации в очаге воспаления. Площадь повреждения тканей на 9 и 29 день уменьшается на 54,14% и 74,54%) соответственно.

Испытанная доза ЭСВК оказывает антиэкссудативное действие, снижая отек лапки животных на 31,91% по сравнению с контрольной группой (табл. 9).

Результаты изучения влияния исследуемых препаратов на стадию пролиферации представлены в таблице 10.

Процент стимуляции образования гранулемы под влиянием ЭСВК составляет 23,3%. Стимуляция образования гранулемы экстрактом сухим возрастает по сравнению с контролем в 1,2 раза.

Антиоксидантная активность.

Определение антиоксидантной активности ЭСВК проводили in vitro на сыворотке донорской крови человека. К 2 мл сыворотки прибавляли 1 мл 10% раствора ЭСВК (на физиологическом растворе). Далее добавляли 0,1 мл 0,5 М раствора сульфата меди (II), в качестве индуктора ПОЛ, и инкубировали при t=37°C в течение 16 ч. В контрольном опыте вместо тест-препарата прибавляли 1 мл 0,05 М раствора этилендиаминтетрацетата (ЭДТА) как ингибитора ПОЛ [15].

Определяли содержание ДК и МДА [1].

ЭСВК снижал образование ДК в сравнении с контролем на 66,9%, МДА на 79,4% (табл. 11), что свидетельствует об антиоксидантной активности предлагаемого средства и превосходит позитивный контроль на 30,0%) и 61,6%) соответственно.

Литература

1. Гончаренко, М.С. Метод оценки перекисного окисления липидов / М.С. Гончаренко, A.M. Латинова // Лабораторное дело. - 1985. - №1. - С. 60-61.

1. Государственная Фармакопея Российской Федерации. XIII издание. Т.2. -М., 2015. -1004 с. Электронный ресурс] URL:

http://pharmacopoeia.ru/ofs-l-5-3-0003-15-tehnika-mikroskopicheskogo-i-mikrohimicheskogo-issledovaniya-lekarstvennogo-rastitelnogo-syrya-i-lekarstvennyh-rastitelnyh-preparatov/.

2. Государственный реестр лекарственных средств по состоянию на 02.05.2017 [Электронный ресурс] URL: http://grls.rosminzdrav.ru

3. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия: учеб. пособие / под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. - СПб.: СпецЛит, 2004. - 765 с.

4. Ойвин, И.А. Методика изучения местных нарушений капиллярной проницаемости / И.А. Ойвин, С.Л. Шетель // Материалы по патогенезу воспаления и патологии белков крови. - Душанбе, 1961. - Т. 49, №5. -С. 167-173. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Hydrangeaceae-Haloragaceae. - СПб., 1991. - С. 101

5. Петухова, С.А. Фармакогностическое исследование надземных органов володушки козелецелистной (Bupleurum scorzoneri folium willd.), произрастающей в Восточной Сибири / С.А. Петухова, В.М. Мирович // Сборник материалов IV Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Инновации в здоровье нации» - Санкт-Петербург, 2016. - С. 486 - 489.

6. Ронжин, И.В. Статистика заболеваний желудочно-кишечного тракта:

причины, симптомы, профилактика / И.В. Ронжин, Е.А. Пономарева// Молодой ученый. -2015. - №25 (103). - С. 375-379

7. Самылина, И.А. Перспективы создания сухих экстрактов / И.А. Самылина [и др.] // Фармация. - 2006. - №2 - С. 43-46

8. Скакун, Н.П. Сравнительное действие атропина и метацина на внешнесекреторную функцию печени / Н.П. Скакун, А.Н. Оленник // Фармакология и токсикология. - 1967. - Т. 30. - №3. - С. 334 - 337.

9. Соколов, С.Я. Фитотерапия и фитофармакология / С.Я. Соколов. - М.: МИА, 2000. - 973 с

10. Стрельников, Ю.С. Сравнительная характеристика противовоспалительного действия некоторых пиримидиновых производных /Ю.С. Стрельников // Фармакология и токсикология. -1960. - №6 - С. 167-173.

11.Тринус, Ф.П. Нестероидные противовоспалительные средства / Ф.П. Тринус, Н.А. Мохорт, Б.М. Клебанов. - Киев, 1975. - 240 с

12. Флора Центральной Сибири. / под ред. П.И. Малышева, Г.А. Пешковой. - Новосибирск: Наука, 1979. - С. 676.

13. Чудновская, Г.В. Володушка козелецелистная (Bupleurum scorzonerifolium Willd.) в Восточном Забайкалье / В.Г. Чудновская // Вестник ТГПУ. - 2013. - №8. - С. 43.

14.Шаварда, А.Л. Антиоксидантная активность видов флоры Алтая / А.Л. Шаварда и [др.] // Растит. ресурсы. - 1998. - т. 34. - вып. 2. - С. 1-8.

* в таблице приведены данные среднего значения 3-х определений

Примечание: К-контроль (вода очищенная); ПК-позитивный контроль (ЭДТА).

Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью, путем трехкратной экстракции в соотношении сырье-экстрагент 1:14 при температуре 60°С, отличающийся тем, что проводят экстракцию сырья травы володушки козелецелистной, измельченной до частиц размером 2 мм, 60% спиртом этиловым на первой ступени в течение 120 мин, на второй ступени 60 мин, на третьей ступени экстракцию продолжают 70% спиртом этиловым 30 мин, извлечение объединяют, отстаивают 72 ч при температуре +5°С, фильтруют, сгущают до 1/4 объема, сепарируют и сушат.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего антибактериальной и противогрибковой активностью.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения меланиновых веществ, получаемых из отходов маслоэкстракционного производства - лузги подсолнечника.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ выделения биологически активных проантоцианидинов, характеризующийся тем, что измельченные листья голубики (Vaccinium uliginosum) экстрагируют метанолом в течение 3-х часов при температуре 30-35°С, упаривают спиртовой раствор до 1/10 первоначального объема, разбавляют 4-кратным количеством воды и экстрагируют последовательно хлороформом, эфиром и этилацетатом, после чего полученный водный раствор упаривают и хроматографируют на колонке с силикагелем с размером частиц 0,040-0,063 мм, используя в качестве элюента смесь хлористого метилена с метанолом, взятых в соотношении 1:1, и выделяют биологически активную фракцию с Rf 0,29.
Изобретение относится к производству сухих экстрактов из растительного сырья, обладающих высокой пищевой ценностью и высокой биологической активностью, предназначенных для использования в пищевой, фармацевтической, косметической и других отраслях промышленности.
Изобретение относится к производству сухих экстрактов из растительного сырья, обладающих высокой пищевой ценностью и высокой биологической активностью, предназначенных для использования в пищевой, фармацевтической, косметической и других отраслях промышленности.

Изобретение относится к фармацевтической, косметической и пищевой промышленности и касается способа переработки морских водорослей. Способ переработки морских бурых водорослей, включающий дробление сырья, гомогенизацию смеси сырья в растворе с последующим извлечением водорастворимых биологически активных веществ за счет фильтрации и сушки, при этом сырье предварительно промывают водой, насыщенной озоном, гомогенизацию сырья проводят в растворе, представляющем собой воду с хлористым кальцием в концентрации его в растворе от 0,25 до 1%, дополнительное измельчение дробленых водорослей проводят в смеси сырья в растворе при оборотах роторно-пульсационного гомогенизатора, составляющих от 10 до 50% максимальных оборотов двигателя, при этом в ходе предварительной гомогенизации осуществляют порционную загрузку в гомогенизатор в пределах от 10 до 30% от общего количества смеси, после завершения загрузки и предварительной гомогенизации увеличивают частоту вращения роторно-пульсационного гомогенизатора и гомогенизируют смесь до 5 часов при температуре смеси не выше 75°С, при этом после стадии гомогенизации проводят криодеструкцию гомогената при температуре от минус 18 до минус 20 градусов в течение 20-48 часов, для чего гомогенат размещают в емкости от 0,5 до 10 л, после криодеструкции замороженный гомогенат оттаивают, после расслоения гомогената отделяют жидкость от осадка, осадок фильтруют под давлением и полученную жидкость смешивают с жидкостью, полученной на предыдущей стадии, жидкую фазу концентрируют на мембранной ячейке, удаляют хлористый кальций, осадок и жидкость сушат.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу разделения каротиноидов и хлорофиллов. Способ разделения каротиноидов и хлорофиллов из экстракта растительного сырья путем последовательного использования двух экстрагентов, при этом липофильную вытяжку листьев крапивы двудомной, упаренную до 1-2 мл, растворяют в 25 мл петролейного эфира и встряхивают до полного растворения пигментов, далее к раствору пигментов в петролейном эфире прибавляют 25 мл спирта этилового 95%, встряхивают 30 минут, после этого разделяют спиртовую фазу, содержащую ксантофиллы и хлорофиллы, и фазу петролейного эфира, содержащую каротины и следы хлорофиллов; для отделения хлорофиллов к спиртовой фазе, содержащей хлорофиллы и ксантофиллы, приливают 25 мл петролейного эфира, раствор встряхивают в течение 30 минут, менее полярные хлорофиллы экстрагируются в петролейный эфир, фазы разделяют; для удаления следов хлорофиллов из фазы петролейного эфира их отделяют омылением путем добавления к фазе петролейного эфира, содержащей каротины и следы хлорофиллов, 10 мл раствора натрия гидрохлорида 20% и 25 мл спирта этилового 95%, встряхивания в течение 30 минут, отделения спиртовой фазы, содержащей омыленные хлорофиллы.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к антиметастатическому средству. Применение жидкого экстракта рябины обыкновенной (Sorbus aucuparia L.), полученного экстрагированием листьев рябины, измельченных до размера частиц диаметром 0,3-0,5 см, 40% этиловым спиртом при температуре 75°С в течение 60 минут, в качестве антиметастатического и повышающего противометастатическое действие циклофосфана средства.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему противогрибковым действием. Средство, обладающее противогрибковым действием в отношении грибов рода Candida, представляющее собой сухой экстракт, полученный путем измельчения кроющих листьев початков антоциановой диплоидной формы кукурузы, экстракции спиртом 96% на водяной бане до кипения и кипячения в течение 14-15 минут, выпаривания при температуре 55-60°С, разведения выпаренного остатка сначала дистиллированной водой при температуре 40-50°С, затем добавления хлороформа в пропорции 4/5 части воды и 1/5 части хлороформа, охлаждения до комнатной температуры и центрифугирования со скоростью 1500 оборотов в минуту в течение 15 минут, с последующим отделением водной фракции и высушиванием ее.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению средства, обладающего антиметастатической активностью и повышающего противометастатическое действие циклофосфана.

Настоящее изобретение относится к новым биологически активным соединениям, производным бисамидов дикарбоновых кислот общей формулы I или их фармацевтически приемлемым солям, где R1 представляет собой 5-членную ненасыщенную гетероциклическую группу, содержащую 2 гетероатома, выбранных из N и/или S, необязательно конденсированную с 6-членной ненасыщенной циклической группой; R2 представляет собой группу -С(О)-R3-C(O)-, где R3 представляет собой группу -(CH2)n-, необязательно замещенную одним или двумя С1-С6 алкилами, или фенил, n представляет собой целое число от 0 до 4.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу снижения прооксидантного воздействия ультрафиолетового облучения на организм. В способе снижения прооксидантного воздействия ультрафиолетового облучения на организм, включающем ежедневное применение средства на основе вьюнка полевого в течение 6 дней за 20 минут до воздействия ультрафиолетовых лучей, согласно изобретению крысам наружно наносят мазь один раз в сутки на облучаемую поверхность слоем 0,5 мм, которая получена путем смешивания 10 г измельченной травы вьюнка полевого и расплавленного на водяной бане вазелина, добавленного до 100 г.

Изобретения относятся к биотехнологии и медицине. Предложены способ и композиция для усиления функции митохондрий в клетке субъекта.

Изобретение относится к соединению формулы I, где АА выбирается из группы, состоящей из L-Ala, L-Val, L-Trp, L-Tyr, L-Pro, L-Phe, Gly, L-Ser, L-Ile, L-Thr, L-Lys, L-Leu, L-Gln, L-Asn, L-Asp и L-Glu, одновременно обладающему тройной активностью в виде тромболизиса, антитромбоза и захвата свободных радикалов, а также к способу получения, композиции.

Изобретение относится к области фармацевтической и биологической химии. Предложено применение 2-R1-2-R2-3,4-дигидро-1,3,4-бензотиадиазепин-5(2Н)-она в качестве вещества, обладающего антиоксидантной активностью.

Изобретение относится к области фармакологии, косметологии и дерматологии и представляет собой антиоксидантную композицию, содержащую по меньшей мере одно подходящее для местного применения силиконовое масло в комбинации с эффективным количеством витамина С, витамина Е и одним или более полифенольными антиоксидантами, причем указанная композиция содержит креатин и по меньшей мере одно производное хромана или хромена с низкой молекулярной массой, обладающее антиоксидантными свойствами, и где один или более полифенольные антиоксиданты выбраны из катехинов.

Группа изобретений относится к медицине и касается средства для коррекции патологических состояний клеток органов и тканей и/или органов и тканей человека на основе гена GPX1, где клетки органов и тканей выбраны из фибробластов, кератоцитов и эпителиальных клеткок глаза, хондробластов; органы и ткани выбраны из кожи, слизистой оболочки рта или мышечной ткани, представляющего собой совокупность генотерапевтических субстанций, каждая из которых представляет генотерапевтическую субстанцию, выбранную из группы генно-терапевтических субстанций, при этом каждая представляет собой генетическую конструкцию на основе векторной плазмиды, включающей кДНК гена GPX1, с кодирующей последовательностью белка глутатионпероксидазы-1, с делециями 5' и 3'-нетранслируемых областей, а именно полученной на основе участка нативной немодифицированной кДНК гена GPX1 SEQ ID No: 1, или модифицированной кДНК гена GPX1, при этом в качестве модифицированной кДНК гена GPX1 используют SEQ ID No: 2, или SEQ ID No: 3, или SEQ ID No: 4, или SEQ ID No: 5, или SEQ ID No: 6, или SEQ ID No: 7, или сочетание этих генетических конструкций, каждая из которых содержит также регуляторные элементы, обеспечивающие транскрипцию этой последовательности в клетках органов и тканей человека, в сочетании с транспортной молекулой или без нее.

Группа изобретений относится к медицине и касается средства для коррекции патологических состояний клеток органов и тканей и/или органов и тканей человека, на основе гена GPX3, связанных с оксидативным стрессом, где клетки органов и тканей выбраны из клеток фибробластов, кератоцитов и эпителиальных клеток глаза, хондробластов; органы и ткани выбраны из кожи, слизистой оболочки рта человека или мышечной ткани человека, представляющего собой совокупность биологически активных генно-терапевтических субстанций, причем каждая из совокупности биологически активных генно-терапевтических субстанций представляет собой генетическую конструкцию на основе векторной плазмиды, включающую участок кДНК гена GPX3 и содержащую также регуляторные элементы, обеспечивающие транскрипцию этой последовательности в эукариотических клетках, а именно в клетках органов и тканей человека, в сочетании с транспортной молекулой или без нее.

Группа изобретений относится к медицине и касается средства для коррекции патологических состояний клеток органов и тканей и/или органов и тканей человека, на основе гена SOD2, связанных с оксидативным стрессом, где клетки органов и тканей выбраны из клеток фибробластов, кератоцитов и эпителиальных клеток глаза, хондробластов; органы и ткани выбраны из кожи, слизистой оболочки рта человека или мышечной ткани человека, представляющего собой совокупность биологически активных генотерапевтических субстанций, каждая из которых представляет собой генно-терапевтическую субстанцию, выбранную из группы генно-терапевтических субстанций, при этом каждая представляет собой генетическую конструкцию на основе векторной плазмиды, включающей кДНК гена SOD2, с кодирующей последовательностью белка супероксиддисмутазы-1, с делециями 5' и 3'-нетранслируемых областей, а именно полученной на основе участка нативной немодифицированной кДНК гена SOD2 SEQ ID No: 1, или модифицированной кДНК гена SOD2, при этом в качестве модифицированной кДНК гена SOD2 используют SEQ ID No: 2, или SEQ ID No: 3, или SEQ ID No: 4, или SEQ ID No: 5, или SEQ ID No: 6, или SEQ ID No: 7, или сочетание этих генетических конструкций, каждая из которых содержит также регуляторные элементы, обеспечивающие транскрипцию этой последовательности в эукариотических клетках, органов и тканей человека, в сочетании с транспортной молекулой или без нее.

Изобретение относится к водорастворимому комплексу каррагинан-гистохром при весовом соотношении указанных компонентов 5:1, обладающему пролонгированным гастропротекторным, кардиопротекторным и антиоксидантным действием.

Изобретение относится к бисульфату (3aR,5s,6aS)-N-(3-метоксил-1,2,4-тиадиазол-5-ил)-5-(метил(7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-ил)амино)гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1Н)-карбоксамида формулы (I).

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью. Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью, включающий измельчение травы володушки козелецелистной, ее трехкратную экстракцию в динамических условиях, извлечения объединяют, отстаивают в течение 72 часов, фильтруют, сгущают, сепарируют, сушат, при определенных условиях. Средство, полученное вышеописанным способом, проявляет выраженную желчегонную, противовоспалительную и антиоксидантную активность. 12 табл.

Наверх