Способ получения меченных тритием белков


C07K1/13 - Пептиды (пептиды в пищевых составах A23, например получение белковых композиций для пищевых составов A23J, препараты для медицинских целей A61K; пептиды, содержащие бета-лактамовые кольца, C07D; циклические дипептиды, не содержащие в молекуле любого другого пептидного звена, кроме образующего их кольцо, например пиперазин-2,5-дионы, C07D; алкалоиды спорыньи циклического пептидного типа C07D519/02; высокомолекулярные соединения, содержащие статистически распределенные аминокислотные единицы в молекулах, т.е. при получении предусматривается не специфическая, а случайная последовательность аминокислотных единиц, гомополиамиды и блоксополиамиды, полученные из аминокислот, C08G 69/00; высокомолекулярные продукты, полученные из протеинов, C08H 1/00; получение

Владельцы патента RU 2671411:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) (RU)

Изобретение относится к способу получения изотопно-меченых веществ и может быть использовано для введения радиоактивной метки в белки с целью изучения их поведения в различных системах, включая биологические. Описан способ получения меченных тритием белков при использовании в качестве метящего агента атомарного трития, получаемого при термической каталитической диссоциации молекул трития на вольфрамовой проволоке. Принципиальное отличие предлагаемого способа от ранее описанных заключается в том, что предварительно белок наносят на углеродные наноматериалы, а затем обрабатывают атомарным тритием. При проведении реакции с атомарным тритием температура стенок реакционного сосуда поддерживается в интервале 291-298 K, при охлаждении до 77 K только нижней части сосуда, на которой нет вещества. Способ позволяет получить меченные тритием белки с увеличенной удельной радиоактивностью до 9000 Ки/моль. 3 з.п. ф-лы, 4 пр.

 

Область техники

Изобретение относится к изотопно-меченным веществам и может быть использовано для введения радиоактивной метки в белки с целью изучения их использования как радиоактивного индикатора в химических, биохимических и медицинских исследованиях.

Уровень техники

Меченные тритием вещества широко используются при проведении биохимических и фармакокинетических испытаний. Разработано много способов получения меченных тритием низкомолекулярных соединений. Однако набор методов введения трития в белки ограничен.

В работе [Ротт Г.М., Семин Ю.А., Домбровский В.И., Поверенный A.M., Вязов C.O., Дорошенко Н.В. Способ получения меченного белка. SU 968036] описан способ введения трития и углерода-14 в белки с помощью формальдегида, который сначала подвергали взаимодействию с меченной тритием или углеродом-14 аминокислотой. Такой способ позволяет получать модифицированный 3Н-лизином альбумин с удельной радиоактивностью 273 мкКи/мг. При молекулярной массе альбумина 69 кДа удельная активность белка составляет 18 Ки/ммоль или 0,65 атомов трития на молекулу.

В работе [Yu.A. Zolotarev, А.К. Dadayan, Е.V. Bocharov, Yu.A. Borisov, В.V. Vaskovsky, Е.М. Dorokhova, N.F. Myasoedov New development in the tritium labelling of peptides and proteins using solid catalytic isotopic exchange with spillover-tritium // Amino Acids 2003, 24, 325-333. DOI 10.1007/s00726-002-0404-7] описан способ получения пяти- и шестичленных пептидов с помощью твердофазного каталитического замещения протия на тритий и сделан вывод о том, что этим способом может быть достигнута радиоактивность белков 1000 Ки/ммоль (до 34 атомов трития в молекуле белка), хотя примеров получения белков с такой удельной активностью не приводится. Этот подход использовали в работе [Ю.А. Золотарев, А.К. Дадаян, B.C. Козик, Е.В. Гасанов, И.В. Назимов, Р.Х. Зиганшин, Б.В. Васьковский, А.Н. Мурашов, А.Л. Ксенофонтов, О.Н. Харыбин, Е.Н. Николаев, Н.Ф. Мясоедов. Твердофазный изотопный обмен водорода на дейтерий и тритий в генно-инженерном инсулине человека // Биоорг. Хим. 2014, 40, 31-41] для введения трития в инсулин. Получен препарат с удельной радиоактивностью 40 Ки/ммоль, то есть в молекуле белка среднее содержание трития составило 1,4 атома на молекулу.

Повышение удельной радиоактивности низкомолекулярных веществ может быть достигнуто использованием углеродных наноматериалов в качестве подложки. Нанесение 4-(2-аминоэтил)пирокатехола на поверхность наноалмазов способствовало увеличению в 3 раза (с 44 до 135 Ки/ммоль) его удельной радиоактивности при введении трития с помощью каталитического гидрогенолиза в присутствии катализатора Линдлара [Шевченко В.П., Мясоедов Н.Ф., Нагаев И.Ю., Шевченко К.В., Бадун Г.А., Чернышева М.Г., Федосеев В.М. Равномерно меченный дейтерием или тритием 4-(2-аминоэтил)пирокатехол с использованием наноалмазного порошка. RU 2422436]. Однако условия проведения реакции (нагревание реакционной смеси до 180°С в течение 15 минут) не позволяет использовать данный подход к веществам, которые подвергаются деструкции в этих условиях, в частности, этот подход неприменим ко многим белкам.

Наиболее близким к заявляемому является способ введения тритиевой метки в белки с помощью метода термической активации трития [RU 2499785, 27.11.2013], в котором раствор белка наносили на стенки стеклянного реакционного сосуда и лиофильно высушивали. После чего проводили обработку атомарным тритием, полученным атомизацией молекулярного трития на вольфрамовом катализаторе при температурах атомизатора 1500-2000 К. Показано, что при проведении реакции при температуре мишени 295 К возможно получать меченный тритием альбумин с удельной радиоактивностью 3,32 ТБк/ммоль (89,7 Ки/ммоль), что соответствует введению 3 атомов трития в молекулу белка. Увеличение продолжительности обработки белка атомарным тритием не позволяет существенно увеличить его удельную радиоактивность, но приводит к снижению его радиохимического выхода. Более высокие значения удельной радиоактивности необходимы для повышения чувствительности и нижнего предела обнаружения белка в биохимических исследованиях.

С целью увеличения удельной активности меченых белков предлагается использовать метод термической активации, но предварительно белок наносить на углеродные наноматериалы: наноалмазы детонационного синтеза, углеродные одностенные нанотрубки и оксид графена.

Раскрытие изобретения

Задачей, решаемой авторами настоящего изобретения, является разработка способа получения меченных тритием белков с удельной радиоактивностью не менее 1000 Ки/ммоль.

Технический результат настоящего изобретения заключается в повышении удельной радиоактивности меченных тритием белков, получаемых с помощью метода термической активации, с 90 Ки/ммоль до 1000-9000 Ки/ммоль. Предлагаемый метод позволяет получить меченный тритием белок с прочносвязанной меткой за счет того, что связывание трития происходит по связи С-Н.

Указанный технический результат достигается благодаря тому, что для введения трития в белок его наносят не на стеклянную поверхность реакционного сосуда, а предварительно адсорбируют на углеродный материал, который затем размещают на стенках реакционного сосуда. Нанесение белка на углеродные наноматериалы обеспечивает увеличение доступности белка атомам трития при проведении процедуры введения метки, при этом для увеличения доступной для атомов трития поверхности белка используется развитая поверхность углеродных материалов таких как наноалмаз, оксид графена и углеродные нанотрубки.

Поставленная задача решается тем, что способ получения меченных тритием белков с высокой удельной радиоактивностью методом термической активации трития, включает: приготовление водной суспензии углеродных наноматериалов, нанесение на их поверхность белка, равномерное нанесение полученной суспензии на стенки сосуда с последующей лиофилизацией и удалением воздуха, причем упомянутый сосуд содержит установленную с возможностью подключения электрического тока вольфрамовую нить для активации трития, охлаждение дна сосуда, не содержащего мишень, до температуры жидкого азота (77 К), при этом стенки сосуда с нанесенной мишенью поддерживают при температуре 290-298 К, введение газообразного трития и его активацию на вольфрамовой нити в течении 5-15 с. Для введения трития предлагаемым способом можно использовать любые белки, способные адсорбироваться на углеродных материалах из водных растворов, таким образом изобретение можно применить к любым водорастворимым глобулярным белкам.

Осуществление изобретения

Сначала готовится водная суспензия углеродного наноматериала (наноалмаз, оксид графена, одностенные углеродные нанотрубки) с концентрацией 1-2 г/л, например, 5-50 мг углеродного материала суспендируют в 5-50 мл воды. 1-5 мл суспензии переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют 10-30 минут при скорости от 10000 до 14000 об./мин. Затем отбирают водную фазу и замещают отобранный объем водным раствором глобулярного белка, например, бычьего сывороточного альбумина, с концентрацией 2-5 мг/мл в объемном соотношении от 1÷3 до 3÷1 с обеспечением гомогенности раствора.

Полученную суспензию подвергают ультразвуковой обработке в течении 5±2 мин с помощью ультразвуковой ванны при максимальной мощности для увеличения поверхности сорбции, затем термостатируют при 20-25°С в течении 12-24 часов до достижения равновесной адсорбции альбумина. После термостатирования суспензию центрифугируют в течении времени достаточного для осаждения наноматериалов. В среднем указанное время составляет 10-20 минут. Определяют равновесное количество белка в растворе при помощи окрашивания Coomassie G250. Количество адсорбированного белка на поверхности углеродного материала определяют по уменьшению его концентрации в растворе. Затем отбирают раствор над наноматериалом и промывают осадок водой от несвязанного белка. Удаление свободного несвязавшегося белка от наноматериала проводят центрифугированием с отделением надосадочного раствора и добавкой новой порции воды в объеме не менее исходного объема промываемой суспензии; процедура отмывки повторяется 4-5 раз для уменьшения концентрации свободного белка не менее чем в 1000 раз от исходной. Таким образом получают суспензию наноматериала, на которую нанесен мономолекулярный слой белка.

После этого полученную суспензию в количестве от 0,001 до 0,01 мг/см2 вносят в сосуд для работы с газообразным тритием, описанный в работе [И.А. Разживина, Г.А. Бадун, М.Г. Чернышева, В.И. Коробков, А.Е. Жирнов. Полимерные пленки как индикатор спилловера водорода через газовую фазу. Радиохимия. 2017. Т. 59, N 3, С. 248-254], раскатывают по стенкам, полностью замораживают жидким азотом и высушивают с помощью лиофилизации. Сосуд с нанесенным веществом присоединяют к вакуумной установке для работы с газообразным тритием, заполняют сосуд газообразным тритием или смесью трития с водородом до давления 1,3±0,5 Па. Дно сосуда охлаждали до температуры 77-78 К, для обеспечения вымораживания побочных продуктов (аммиак, углекислый газ, вода). Для замораживания может быть использован жидкий азот. Нагревают вольфрамовый катализатор до 1750-1950 К помощью электрического тока в течении 5-20 с. После реакции систему вакуумируют, сосуд с облученной мишенью заполняют воздухом и снимают с установки. Для удаления трития из лабильных положений суспензию упаривают на роторном испарителе, твердую фазу ресуспензируют в воде.

Продолжительность нагревания вольфрамового катализатора в течение 5-20 с обеспечивает оптимальные условия по введению трития в белки: при более короткой экспозиции не успевает установиться стационарный режим атомизации, за 20 с проходит активация всего трития.

Для определения удельной радиоактивности белка с помощью аминокислотного анализа по стандартной методике Спэкмена, Штейна и Мура [Spackman D.H., Stein W.H., Moore S. // Anal. Chem. 1958. V. 30. 1185-1190] твердую фазу суспендируют в гидролизной смеси, содержащей смесь соляной и трифторуксусной кислот в соотношении объемов 2:1 с 0,001% добавкой β-меркаптоэтанола. Суспензию переносили в стеклянные ампулы, замораживали жидким азотом, откачивали воздух и запаивали. Для получения гидролизата белка ампулы помещают в печь, прогретую до 155±5°С и оставляют на 60±5 минут. По окончании гидролиза ампулы охлаждают до комнатной температуры, раствор над наноматериалом отбирают и упаривают с помощью лиофилизации. Остаток растворяют в 0,1 М соляной кислоте и проводят аминокислотный анализ. Радиоактивность белка рассчитывают как сумму радиоактивностей аминокислотных остатков. Найденная радиоактивность относится к тритию, прочно связанному в белке по связям С-Н, так как легко обменный тритий был удален в результате процедур обработки: сначала обменом в воде при комнатной температуре, затем при гидролизе белка в кислой среде при 155±5°С; после проведения такой обработки раствор упаривали досуха для удаления трития, перешедшего из белка в воду.

Используемые наноматериалы должны иметь удельную поверхность не менее 200 м2/г, размер отдельных частиц наноматериалов может быть любой.

Соотношение объемов растворов суспензии наноматериалов и белка, а также их концентрации выбирают из условия возможности покрытия материалов мономолекулярным слоем белка.

Способ позволяет получить меченный тритием белок с прочносвязанной меткой за счет того, что связывание трития происходит по связи С-Н, это подтверждается результатами аминокислотного анализа.

Реализация предложенного изобретения описана в Примерах.

Пример 1. Получение суспензии наноматериала с адсорбированным альбумином.

Водную суспензию углеродного наноматериала (наноалмаз, оксид графена, одностенные углеродные нанотрубки), содержащую 1 мг твердой фазы осаждали с помощью центрифугирования, отбирали водную фазу и добавляли 1 мл раствора бычьего сывороточного альбумина с концентрацией 2,5 мг/мл. Суспензии подвергали ультразвуковой обработке в течении 10 мин с помощью ультразвуковой ванны при максимальной мощности и термостатировали в течении суток при 25°С. Суспензии центрифугировали и определяли равновесное количество белка в растворе при помощи окрашивания Coomassie G250. Количество адсорбированного альбумина на поверхности углеродного материала определяли по уменьшению концентрации в растворе. Отбирали раствор над наноматериалом, промывали осадок водой от несвязанного белка, для чего проводили добавку новой порции воды, центрифугировали в течение 10 минут, отделяли надосадочный раствор и повторяли эту процедуру 4 раза.

Пример 2. 1 мг наноалмаза с нанесенным альбумином, полученного способом по примеру 1, суспендировали в 1 мл воды и наносили на стенки реакционного сосуда для работы с газообразным тритием, замораживали жидким азотом и высушивали с помощью лиофилизации. Сосуд с нанесенным веществом присоединяли к вакуумной установке для работы с газообразным тритием, заполняли сосуд газообразной тритий-протиевой смесью (содержание трития 31%) до давления 1,3 Па. Дно сосуда охлаждали жидким азотом. Нагревали вольфрамовый катализатор до 1800±30 К помощью электрического тока в течении 10 с. После реакции систему вакуумировали, сосуд с облученной мишенью заполняли воздухом и снимали с установки. Для удаления трития из лабильных положений суспензию упаривали на роторном испарителе, твердую фазу ресуспензировали в воде и повторяли процедуру упаривания. Твердую фазу суспендировали в гидролизной смеси, содержащей смесь соляной и трифторуксусной кислот в соотношении 2:1 с 0,001% добавкой β-меркаптоэтанола. Суспензию переносили в стеклянную ампулу, замораживали жидким азотом, откачивали воздух и запаивали. Ампулы помещали в печь, прогретую до 155°С и оставляли на 1 час. По окончании гидролиза ампулы охлаждали при комнатной температуре, вскрывали, раствор над наноалмазами отбирали и упаривали с помощью лиофилизации. Осадок растворяли в 0,1 М соляной кислоте, исследовали на аминокислотном анализаторе Amino Acid Analyzer Hitachi L-800 (Япония) по стандартной методике Спэкмена, Штейна и Мура [Spackman D.H., Stein W.H., Moore S. // Anal. Chem. 1958. V. 30. 1185-1190.]. Данные, полученные с аминокислотного анализатора и проточного счетчика (оптическое поглощение элюата по реакции с нингидрином при длинах волн 570 и 440 нм и радиоактивность элюата), обрабатывали при помощи программы «МультиХром для Windows». Радиоактивность белка, рассчитанная как сумма радиоактивностей аминокислотных остатков, составила 2,7×103 Ки/ммоль (в пересчете на 100% содержание трития в тритий-протиевой смеси, составила 8,7×103 Ки/ммоль или 300 атомов трития в молекуле белка).

Пример 3. 1 мг углеродных нанотрубок с нанесенным альбумином, полученного способом аналогичным примеру 1, суспендировали в 1 мл воды и наносили на стенки реакционного сосуда для работы с газообразным тритием, замораживали жидким азотом и высушивали с помощью лиофилизации. Введение метки проводили по методике, описанной в примере 1. Радиоактивность белка, рассчитанная как сумма радиоактивностей аминокислотных остатков, составила 1,6×103 Ки/ммоль (в пересчете на 100% содержание трития в тритий-протиевой смеси, составила 5,2×103 Ки/ммоль или 300 атомов трития в молекуле белка).

Пример 4. 1 мг углеродных оксида графена с нанесенным альбумином, полученного способом аналогичным примеру 1, суспендировали в 1 мл воды и наносили на стенки реакционного сосуда для работы с газообразным тритием, замораживали жидким азотом и высушивали с помощью лиофилизации. Введение метки проводили по методике, описанной в примере 1. Радиоактивность белка, рассчитанная как сумма радиоактивностей аминокислотных остатков, составила 1,6×103 Ки/ммоль (в пересчете на 100% содержание трития в тритий-протиевой смеси, составила 5,2×103 Ки/ммоль или 300 атомов трития в молекуле белка).

1. Способ получения меченных тритием водорастворимых глобулярных белков, включающий:

- приготовление водной суспензии углеродного наноматериала с концентрацией 1-2 г/л;

- приготовление водного раствора белка с концентрацией 2-5 г/л;

- смешение водной суспензии наноматериала с водным раствором белка в объемном соотношении от 1÷3 до 3÷1 с обеспечением гомогенности раствора;

- выдерживание полученной суспензии не менее 12 часов до достижения равновесной адсорбции белка на наноматериале;

- удаление свободного несвязавшегося белка из смеси центрифугированием;

- нанесение полученной суспензии на стенки сосуда, содержащего вольфрамовую нить, в количестве от 0,001 до 0,01 мг/см2 с последующей лиофильной сушкой до образования пленки;

- заполнение сосуда газообразным тритием или смесью трития с водородом;

- активацию трития посредством нагрева вольфрамовой нити до температуры 1750-1950 K в течение 5-20 с с одновременным охлаждением дна сосуда до температуры жидкого азота с получением пленки, содержащей меченные тритием белки, и последующим ресуспендированием пленки в воде и извлечением из сосуда полученной суспензии.

2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве углеродного наноматериала используют наноалмаз, оксид графена, одностенные углеродные нанотрубки с удельной наноповерхностью не менее 200 м2/г.

3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что центрифугирование для удаления свободного несвязавшегося белка повторяют 4-5 раз с добавлением новой порции воды не менее объема суспензии.

4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что нанесение суспензии на стенки сосуда реализуют раскатыванием по стенкам, обеспечивающим возможность равномерного распределения наноматериала с белком на его стенках.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложен полипептид, способный связываться с поверхностным антигеном вируса гепатита B (HBV) и поверхностным антигеном, презентируемым иммунными эффекторными клетками.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к выделенному антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которые специфически связываются с сайтом II ИЛ-6 человека, а также к композиции для лечения связанного с ИЛ-6 заболевания у субъекта, содержащей вышеуказанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей первый полипептид, второй полипептид, сигнальную последовательность mBIP и либо белок оболочки, либо адаптерный белок.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к проникающим в клетку пептидам, и может быть использовано в медицине путем доставки терапевтической карго-молекулы в клетку млекопитающего.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ очистки слитого белка TNFR-Fc от примесей с получением белка с заданной долей гидрофобного хроматографического пика 3, включающий: (а) внесение образца, содержащего жидкую смесь слитого белка TNFR-Fc, полученную из клеток млекопитающих, частично очищенного аффинной хроматографией, анионообменной хроматографией или той и другой, в колонку, заполненную средой для хроматографии гидрофобного взаимодействия (HIC), содержащей ароматическую функциональную группу, предварительно уравновешенной уравновешивающим (EQ) буфером, содержащим хлорид натрия в концентрации от 1 М до 1,4 М или сульфат аммония в концентрации от 0,45 М до 0,55 М; и (б) сбор элюата путем элюирования белка элюирующим буфером, содержащим хлорид натрия или сульфат аммония в той же концентрации, что и уравновешивающий буфер, где заданная доля гидрофобного хроматографического пика 3 составляет от 9% до 18%.

Изобретение относится к конъюгатам антитело-лекарственное средство для лечения солидных опухолей и гематологических злокачественных образований, в котором лекарственное средство с линкером сайт-специфичным образом конъюгировано с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом, которое связывается с антигеном-мишенью, экспрессируемом опухолевой клеткой, через встроенный цистеин в указанном антителе или его антигенсвязывающем фрагменте в положении 41 тяжелой цепи согласно нумерации Kabat, где указанное лекарственное средство с линкером представляет собой цитотоксическое средство с линкером.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к вариантам исходного альбумина, что может быть использовано в медицине. Получают полипептид, который является вариантом альбумина или его фрагментом, где этот полипептид содержит изменения в двух или более положениях, выбранных из положений: (а) 492 и 580; (b) 492 и 574; (с) 492 и 550; (d) 550 и 573; (e) 550 и 574; (f) 550 и 580 в SEQ ID NO: 2, и не содержит мутаций E492G+K573P, E492G+K573A или E492G+N503K, а также получают слитые с ним полипептиды, полинуклеотиды, кодирующие эти варианты, конъюгаты, ассоциаты и наночастицы с ним, композиции, векторы, клетки-хозяева, содержащие эти полинуклеотиды, и способы использования этих вариантов.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен условно-дефектный по репликации цитомегаловирус (CMV) для профилактики против CMV с дестабилизированными белками IE1/2 и UL51, а также способ его получения, применение и композиция.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения поверхностных белков грамм-отрицательных бактерий и культуры клеток растений.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения аполипопротеина A-I (Apo A-I) из белковой фракции. Осуществляют суспендирование белковой фракции, содержащей Apo A-I (A), имеющей рН в диапазоне от 6,4 до 10,0, в буферном растворе (B), содержащем от 15 до 30% линейного или разветвленного C1-С4 спирта (мас./мас.).

Изобретение относится к соединению, представленному формулой 1: [Формула 1] В формуле 1 R1 представляет собой бромогруппу, йодогруппу или хлорогруппу, R2 представляет собой Sn(R6)3, N=N-NR7R8, (R14-)I+R13 или борную кислоту (B(OH)2) или сложный эфир борной кислоты, выбираемый из группы, состоящей из пинаколина, 2,2-диметил-1,3-пропандиола, N-метилдиэтаноламина, 1,8-диаминонафталина, N-метилиминодиуксусной кислоты, 1,1,1-трисгидроксиметилэтана и пирокатехина, где R6 представляет собой алкильную группу, имеющую 1-7 атомов углерода, или бензильную группу, R7 и R8 соединяются вместе посредством N с образованием 3-7-членной циклической структуры, R13 представляет собой С1-6-алкилзамещенную фенильную группу, С1-6-алкоксизамещенную фенильную группу или фенильную группу или тиенил, R14 представляет собой галоген, тетрафторборатную группу, нитратную группу, трифлатную группу, сульфонилоксигруппу, толуолсульфонилоксигруппу или перхлоратную группу, R3 представляет собой водород, этильную группу, трет-бутильную группу или бензильную группу, R4 или R5 независимо представляет собой водород, бензилоксикарбонильную группу или трет-бутоксикарбонильную группу, или еще NR4R5 связываются вместе с образованием C6H5(C6H5)C=N.

Изобретение относится к меченному тритием по глициновому остатку лаурил-глицил-пролил-допамину формулы I, который может найти применение в аналитической химии и биологических исследованиях.

Изобретение относится к соединению, представленному следующей формулой: В формуле 1: R представляет собой BR3R4, BX3- или BX3-M+ (X представляет собой галоген; M+ представляет собой ион щелочного металла), R1 представляет собой метильную, этильную, н-пропильную, изо-пропильную, н-бутильную, изо-бутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, н-пентильную, бензильную, пара-метоксибензильную или пара-нитробензильную группу, R2 представляет собой водород, бензилоксикарбонил, ацетил, трифторэтилкарбокси, трет-бутилоксикарбонил, флуоренилметилоксикарбонил, трихлорэтоксикарбонил, трифторацетил, аллилоксикарбонил, бензил, пропаргилоксикарбонил, бензоил, фталоил, толуолсульфонил или нитробензолсульфонил, R3 и R4 оба объединены с B (атом бора) с образованием кольца, служащего в качестве защитной группы для B, где кольцо выбрано из группы, включающей пинакол, 2,2-диметил-1,3-пропандиол, N-метилдиэтаноламин, 1,8-диаминонафталин, N-метилиминодиуксусную кислоту, 1,1,1-трисгидроксиметилэтан и катехин, Y представляет собой I, F или Br, NO2, NH2, Sn(R6)3, замещенную или незамещенную фенильную йод группу или замещенную или незамещенную тиенильную йод группу, где заместитель(и) фенильной группы или тиенила включает C1-6 алкильные, C1-6 алкокси, гидрокси, амино и нитро группы, R6 представляет собой алкильную группу, содержащую от 1 до 7 атомов углерода.

Изобретение относится к способу получения 1-амино-3-[18F]-фторциклобутанкарбоновой кислоты ([18F]-FACBC), которая находит применение при визуализации опухолей посредством позитронно-эмиссионной томографии.

Изобретение относится к способу получения 13С-мочевины. Способ включает взаимодействие диоксида 13С-углерода (13CO2) с окисью пропилена при температуре 90-100°C в присутствии каталитической системы в составе бромида цинка и бромида тетрабутиламмония, взятых в мольном соотношении 1:2,0-6,2.

Настоящее изобретение относится к новым дейтерированным диаминопиримидинам общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям. Соединения обладают свойствами ингибирования ALK протеинкиназ и могут быть использованы для лечения и/или предупреждения онкологических заболеваний, нарушения пролиферации клеток, сердечнососудистых заболеваний, воспаления, инфекции, аутоиммунных заболеваний, трансплантации органов, вирусных заболеваний, сердечнососудистых заболеваний или метаболических заболеваний.

Изобретение относится к вариантам способа синтеза радиофармацевтического препарата, имеющего формулу, приведенную ниже, и его предшественников. В указанной формуле R1 означает алкил; R2 означает водород или галоген; W представляет собой -O-CH2; R3 представляет собой алкил, замещенный изотопом 18F, алкоксил, замещенный изотопом 18F, или алкоксиалкил, замещенный изотопом 18F, и n равно 1.

Изобретение относится к области органической химии и касается способа синтеза линолевой и линоленовой кислоты, меченной изотопами углерода 13С и 14С в положении 1, которая может быть использована в качестве средства для выполнения дыхательных тестов, в частности, в интересах диагностики функциональной активности органов пищеварения и гепатобиллиарной системы.

Изобретение относится к области органической химии. Предложен меченный тритием по всем аминокислотным остаткам 5-oxo-Pro-Arg-Pro, который может найти применение в аналитической химии и биологических исследованиях.

Изобретение относится к способу синтеза соединения формулы I ,где R1-A- представляет собой депротонированный радикал биологической молекулы с направленной доставкой (ВТМ) формулы Ia Технический результат: по сравнению с известными способами, требуется на одну стадию очистки меньше, требуется на один реагент меньше, так как конкретный реагент используется на двух разных стадиях, химический процесс упрощается, стоимость продуктов снижается.

Изобретение относится к способам формирования пористого оксидного материала и может быть использовано для разработки анодных материалов литий-ионных батарей и суперконденсаторов нового поколения, чувствительных элементов газовых сенсоров.

Изобретение относится к способу получения изотопно-меченых веществ и может быть использовано для введения радиоактивной метки в белки с целью изучения их поведения в различных системах, включая биологические. Описан способ получения меченных тритием белков при использовании в качестве метящего агента атомарного трития, получаемого при термической каталитической диссоциации молекул трития на вольфрамовой проволоке. Принципиальное отличие предлагаемого способа от ранее описанных заключается в том, что предварительно белок наносят на углеродные наноматериалы, а затем обрабатывают атомарным тритием. При проведении реакции с атомарным тритием температура стенок реакционного сосуда поддерживается в интервале 291-298 K, при охлаждении до 77 K только нижней части сосуда, на которой нет вещества. Способ позволяет получить меченные тритием белки с увеличенной удельной радиоактивностью до 9000 Кимоль. 3 з.п. ф-лы, 4 пр.

Наверх