Способ получения биомассы

 

Союз Советских l

Социалистических

Республик

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (6!) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 11.04.73 (21) 1903593/28-13 (23) Приоритет 12.04 72 (32) 16825/72, (31) Великобритания (33)

Опубликовано 15.09.75 г. Бюллетень Хе 34 (51} М. !«л, С 12с 11/18

Государствеииый комитет

Совета Мииистрав СССР ао делам изобретеиий и открытий (53) УДК 663.14(088,8) Дата опубликования описания 05.04.76 (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Жан-Амадрик дю Шаффот и Клод Раймон Магно (Франция) Иностранная фирма

«Дзе Бритиш Петролеум Компани Лимитед» (Великобритания) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к выращиванию кормовых дрожжей на углеводорода« нефти.

Известен способ получения биомассы путем выращивания дрожжей вида Candida

tropicalis в условиях аэрации в питательной среде, содержащей в качестве источника углерода прямоцепочечные углеводороды с содержанием в молекуле больше 10 углеродны« атомов, источник азота и необходимые минеральные соли, с последующим выделением биомассы из культуральной жидкости.

С целью интенсификации процесса и возможности осуществления его в непрерывном режиме в неасептических условиях предлагают из вида Candida tropicalis использовать шт а м м С В М 6373.

Штамм хранится в центральном музее культур грибов в Дельте, Голландия.

Новый штамм имеет описанные ниже»ризнаки.

Морфология»а твердой среде.

При выращивании на среде, содержащей

2 г/л дрожжевого экстракта, 10 г/л глюкозы, 5 г/л пептона и 20 г/л arapa, образуются колонии с гладкой, тонкой, бело-кремовой поверхностью. При выращивании»а агаре сейборанда псевдомицелия не образует. Более

80 b колоний гладкие илп слегка скрученные.

Менее 20о скручены.

Морфология на жидкой среде.

При выращивании в трубка«Моно в жидкой среде, содержащей 10 г/л глюкозы, 5 г/л не»тона, 2 r/ë дрожжевого экстракта и дистиллированную воду, клетки штамма яйцеобразные, иногда почти круглые, 34% клеток имеют размер 5Х10 мк, 66 — 10X10 мк.

1; На среде, содержащей 100 г/л газойля, 1,84 г/л фосфорной кислоты, 1,16 г/л «лористого калия, 0,078 г/;I гпдроокиси магния, 0,024 г/л сульфата магния, 0,08 г/л сульфата железа, 0,004 г/л сульфата меди, 0,158 г/л

15 сульфата цинка, 1,8 г/л серной кислоты, 0,15 г/л дрожжевого экстракта и водопроводную воду, клетки штамма имеют яйцеобразну|о форму, иногда почти круглую, ири этом 38".о клеток имеют размеры 5 Х 5 мк, 54",о

2з 5Х10 мк и 8, o — 10Х 10 мк.

При выращивании в течении более 15 c)ток в сосудах с аэрированием и перемешиваннем морфология клеток остается неизменной. K концу этого выращивания штамм имеет более 52"". псевдомицелия.

Размножение проис«одит только почкованием.

Био«имические особенности: сораживает глюкозу, газактозу, oa«aðoaó, зо мальтозу, трегалозу;. з

484696

3 не сбраживает лактозу, мелибиозу, рафинозу, целлобиозу, генулин; усваивает глюкозу, галактозу, сахарозу, мальтозу, мелибиозу, трегалозу, ксилозу, крахмал, сс-метплглюкозид, сорбозу, 1-арабинозу, этанол, D-маннит, рибит, ацетат, сухугенат; плохо усваивает лаптат, уитрат, пируват; не усваивает лактозу, мелибиозу, рафинозу, целлобиозу, инулин, D-рибозу, рамнозу, D-арабинозу, эритрит, галактит; усваивает мочевину; пе усваивает нитрат калия, желатин; усваивает — гексадекан, и-парафиньг из газейля.

Максимальная температура для роста

40 С, оптимальная температура 32 С, температура хранения 15 — 25 С. Максимальная скорость роста на газойле 0,35.

Пример 1. Периодическое выр ащ и в а н и е.

Штамм СВ 6373 выращивают в ферментере с рабочим объемом 1 л. Сосуд аэрируют с помощью трубчатого барботера, перемешивание ведут лопастной мешалкой.

Состав среды, г/л: НаР04 1,84; КС1 1,16;

6g(OH) 2 0,078; MnSO4 0,024; FeSO4 7Н20

0,08; ZnSO4 7НзО 0,158; CuSO4 5Н20 0,0004; дрожжевой экстракт 0,015; водопроводная вода. рН среды 4,5.

Единственный источник углерода — газойль, полученный из Иранской нефти со следующими характеристиками: уд. вес 0,865; температура текучести + 10 С; содержание парафина 18 вес. в/в.

115 мл газойля добавляют на каждый 1 л среды. Ферментацию начинают добавлением

1 г/л культуры штамма СВ 6373, выращенного на газойле; и ведут ее при аэрировании со скоростью 400 об. ч. Температура процесса

32 С, рН поддерживают равным 4,5 добавлением водного аммиака, который также служит источником азота. Ферментацию прекращают через 15 ч.

Результаты приведены ниже

Штамм СВ 6373

Фаза задержки, ч

Экспоненциальпая фаза, ч 6

Скорость роста, мг/л 0,3

Бес биомассы через 15 ч, г/л 10,0

Пример 2. Непрерывное неасептическое одпостадий ное выращивание.

Штамм СВ 6373 непрерывно выращивают в ферментере в условиях (среда, температура, аэрация, перемешивание), приведенных в примере 1. Фермептер работает неасептическп

4 в течение 717 ч. Скорость разбавления 0,2.

Средняя производительность составляет 11,9 г/1 °, tt

Пример 3. Непрерыв ое неасеп5 т и ч е с-к- о е д- в у х с т а д и и и о е в ы р а щ иванне.

Штамм СВ 6373 выращивают в ферментере с рабочим объемом б,б м в среде, состав которой приведен в примере 1.

10 Источником углерода служит газойль, полученный из Иракской нефти, имеющей следующую характеристику: уд. вес 0,865; температура текучести +10 С; интервал кипения 300 — 380 С; содержание парафинов

15 18 вес. to.

На каждый литр водной питательной среды берут по 150 мл газойля в смеси и эту смесь подают в ферментер с расходом 1650 л/ч.

В ферментере поддерживают температуру

20 30 С и рН 4,2 при непрерывном добавлении газообразного аммиака. Аэрацию ведут со скоростью 120 об/ч с применением вихревого перемешивания.

Непрерывно отводят весь продуктовый по25 ток, т. е. 1650 л/ч и его пропускают во второй ферментер с рабочим объемом 12,6 м . К продуктовому потоку в 1650 л добавляют

2500 л/ч свежей воды и смесь направляют во второй фермептер, где поддерживают темпе30 ратуру 30 С; аэрацию ведут с расходом

80 oo/ч с помощью вихревой мешалки. Работу ведут непрерывно со скоростью разбавления 0,33. Ферментеры работают пеасептически.

35 Из второго фермептера непрерывно отводят продуктовьш поток 4,150 л/ч (в нем содержится 8 г/л сухих дрожжей) и его декантируют.

Затем дрожжи отделяют от отработанной среды и промывают изопропанолом для удаления остаточных углеводородов.

Предмет изобретения

Способ получения биомассы путем выращивания дрожжей вида Candida tropicalis в условиях аэрации в питательной среде, содержащей в качестве источника углерода прямоцепочечные углеводороды с содержанием в молекуле больше 10 углеродных атомов, источник азота и необходимые минеральные соли, с последующим выделением биомассы из культуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью интенсификации процесса и возможности осуществления его в непрерывном режиме B пеасептических условиях, пз вида

Candida tropica1is используют штамм СВ

Л" 6373.

Составитель Л. Минеева

Рсдактор Л. Новожилова Текрсд Т. Курилко Корректор Л. Денискина

Заказ 8212 Изд. М 1821 Тираж 529 Подписное

1ЯНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР ио делам изобретений н открьгпш

113035, Москва, Ж-35, Раушскан наб., д. 4/5

МОТ, Загорский филиал