Способ диагностики аскариоза у свиней

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Соаетских

Социалмстическмк

Республик

<>533101

К АВТОРСКОМУ СВИДИЕЛЬСТВУ (6 t) Дополнит рьное к авт. саид-ву (22} Заявлено 28.04.74 {2I) 2015183/15 с присоединением заявки HP (23) Приоритет (51)M. Кл.

A 61 В 10/00

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий

Опубликовано 300381 Бюллетень Йо 12

Дата опубликования описания 30. 03. 81 (53) УДК 616 PPS.13. .8:617-07 (088.8) (72) Авторы изобретению

В.Т. Горин, Ю.Д. Романов, Г.Л. Иаркевич и М.И. Кищук

Белорусский научно-исследовательский институт животноводства (73) Заявитель (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ACKAPHÄOÇË У СВИНЕЙ

Изобретение относится к области ветеринарной гельминтологии, в частности к способам ранней диагностики аскаридоза у свиней.

Известны различные способы диагностики ранней фазы аскаридоза у свиней, например основанные на реакции микропреципитации с живыми личинками, реакции связывания комплемента, реакции кольцепреци- питации, реакции непрямой гемагглютинации, реакции флокуляции на .кармине, кожных аллергических реакциях, реакции оседания эритроцитов,исследовании летучих жирных кислот в мо- 15 че животных и другие способы.

Известен также способ диагностики аскаридоза, основанный на применении реакции гемагглютинации,включающий сенсибилизацию антигена и соеди- 20 нение его с антителами сыворотки крови исследуемого животного.

Антиген готовят из живых личинок аскарид, вносят его в исследуемую сыворотку с последующей инкубацией при 40 С в течение 12 ч.

Однако этот способ отличается трудоемкостью и требует больших затрат времени на получение живых личинок аскарид (не менее 67 дней), 30 при этом использование личинок для диагностических целей ограничено продолжительностью их жизни вне организма промежуточного хозяина 12 днями, в результате чего известный способ не нашел широкого применения в ветеринарной практике.

Целью изобретения является более раннее выявление (В возрасте от

14 дней и старше) личиночной стадии заболевания свиней аскаридозом при значительном сокращении материальных затрат и упрощение методики выявления заболевания.

Это достигается тем, что вместо специфического антигена, приготовленного иэ личинок аскарид, используют антиген, подобный специфическому, стандартные эритроциты свиней с Ас фактором системы А групп крови на поверхности стромы, сенсибИлиэацию которых проводят сывороткой крови исследуемых животных с последующим соединением их со стандартной антиглобулиновой сывороткой и учетом результатов реакции по титру неполных анти-Ас антител, идентичных или подобных специфическим антителам, возникающим в крови при миграции личинок Asca ris suum

Формула изобретения

Состави г ль В. Алексеенок

Редактор Н. Цалихина Техред H.Kåëóûàê Корректор М. Коста

Заказ 1585/47

Тираж 687 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Эилиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная,4

Способ осуществляют следующим образом.

Стандартную антиглобулиновую сыDopoTKQ готовят 1 раз в 2-3 года иммунизацией кроликов г -глобулинами смешанных сывороток крови от 4 5 свиней любым известным способом.

Стандартные эритроцитй с Ас фактором системы А групп крови на поверхности стромы определяют у свиней непосредственно в конкретном хозяйстве моноспецифической анти-Ас сывороткой., которая имеется в любой иммуногенетической лаборатории научно-исследовательских институтов животноводства.

Сыворотку для ранней диагностики аскаридоза получают из крови молодняка свиней 2-недельного возраста и старше. Образцы крови после предварительной обводки ставят на 1 ч в термостат при 37 С, затем сгусток крови убирают, а полученную сыворотку рц в пробирке центрифугируют 5 мин (при 2000 об/мин) для удаления остатка эритроцитов, после чего ее сливают в отдельную маркированную пробирку.

На каждый образец готовят 10 иммунологических пробирок 100. 8 мм, в которых из образцов сыворотки на физрастворе приготавливают разбавления Р 2:4:8:16:32:64:128:256:512.

В каждую пробирку добавляют по 30

1 капле 2,5Ъ-ной суспензии стандартных эритроцитов, встряхивают содержимое пробирок и помещают штативы на

30 мин в термостат при 37 С. После тщательного встряхивания штативы 35 оставляют в термостате еще на 1 ч.

В этот период происходит сенсибилизация Ar позитивных эритроцитов,т.е. фиксация на их поверхности антител, возникающих в крови больных свиней 4О при миграции личинок аскарид.

Следующии этап заключается в проявлении скрытой реакции антигенантитело. Сенсибилизированные эритроциты отмывают 2 раза физраствором от сыворотки, последовательно центрифугируя каждый раз при

2000 об/мин по 5 мин и отсасывая надоса,цочную жидкость.

К осадку добавляют 1-2 капли антиглобулиновой сыворотки, встряхивают, оставляют на 15 мин и затем все пробирки центрифугируют при

1000 об/мин в течение 2-3 мин.Расставляют пробирки в том порядке,в каком они были бы при первоначальном титровании и производят макроскопическое чтение реакции гемагглютинации по обычной пятибальной системе.

Титр сыворотки от 2 до 512 характеризует различную интенсивность заражения животного паразитами.

Предложенный способ позволяет значительно снизить затраты рабочего времени, труда и средств на диагностику ранней стадии аскаридоза у свиней, упростить методику выявления заболевания.

Применение предложенного способа позволяет выявить больных животных с 14-ти дневного возраста при достаточной его специфичности ро 80%, что дает возможность проводить эту работу непосредственно в ветеринарных лечебницах как в крупных промышленных комплексах, так и в небольших хозяйствах.

Способ диагностики аскаридоза у свиней по реакции гемагглютинации, включающий сенсибилизацию антигена и соединение его с антителами сыворотки крови исследуемого животного, отличающийся тем, что, с целью более раннего выявления аскаридоза у свиней, в качестве антигена используют стандартные эритроциты свиней с Ас фактором системы

А групп крови на поверхности стромы, сенсибилиэацию которых проводят сывороткой крови исследуемых животных с последующим соединением их со стандартной антиглобулиновой сынороткой и учетом результатов реакции по титру неполных анти-Ас антител, идентичных или подобных специфическим антителам, возникающим при миграции личинок Аsсàris suum. ъ