Способ получения диагностикума

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ и АВТОРСИОМУ СЭИДИТЕДЬОВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 30.06.76 (21)2378399/2Ç 13 (51) М. Кл, А 61 К 35/18 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Государственный нокнтет

Саоотв Ннннстроо СССР по девам наобретоннй н отнропнн (43) Опубликовано 05. 11.77. Бюллетень №41 (53) УДК 615.373.34 (088. 8) (45) Дата опубликования описания15.11.77

А. А. Нов п.ова, H. Н, Басова, М. В. Далин, E. А. Ильницкая, A. Н. Лобанова и Д. А. Закгейм (72) Авторы изобретения

Иентрапьный институт эпидемиологии (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИКУМА

l5

25

Изобретение относится к медицине, а именно иммунологии.

Известен способ получения дифтерийного диагностикума, заключающийся в том, что эритроциты обрабатывают формалином, отмывают физиологическим раствором, обрабатывают дубильной кислотой, отмывают танизированные эритроциты, сенсибилизируют анатоксином и фиксируют формальдегидом 11).

Известен также способ получения столбнячного диагностикума, заключающийся в тех же операциях (2). Способ получения столбнячного диагностикума отличается от способа получения дифтерийного диагностикума только технологическими режимами в соответствии со специфическими особенностями препарата.

Однако эти способы не обеспечивают высокой чувствительности, специфичности и стабильности препарата.

Целью изобретения является повышение чувствительности, специфичности и стабильности препарата.

Для этого формалинизированные эритроциты обрабатывают детергентом до и после танизации, а для сенсибилизации используют прогретую фракцию анатоксина, выделенную путем молекулярного фильтрования через мембраны

XM-300, ХМ100А и РМ-30 «Диафло».

Повышение способности сенсибилизировать эритроциты у коммерческих очищенных препаратов анатоксинов и их специфических компонентов достигается в результате предварительного прогревания их при температуре 60

65 С в течение 30 — б0 мин с последующим быстрым охлаждением при 0 С в смеси воды и льда.

В качестве сенситинов используют молекулярнооднородные белковые компоненты дифтерийногя или столбнячного анатоксинов, извлеченные из препаратов анатоксинов посредством молекулярной фильтрации с мембранами

ХМ-300, ХМ-100А, РМ-30 «Диафло».

Пример. Формалинизированные эритроциты барана или лошади последовательно отмывают нейтральным 0,85о/ ь-ным раствором хлорида натрия, затем раствором твина, снова 0,85%— ным раствором хлорида натрия. Полученный осадок ресуспендируют и соединяют с изотоническим раствором, в котором растворена дубильная кислота. После контакта эритроциты осаждают, осадок промывают 0,85%-ным раствором хлорида натрия с детергентом (твином), затем без детергента. Ресуспендированные эритроциты соединяют с анатоксином или специфическим компонентом его для взаимодействия в тепле в течение 4 — 5 ч. Затем в смесь

5789б7 формула изобретения (.оставитель С Малютина

Техред О. Луговая Корректор /1. Мельниченко

Редактор И. Марковская

Заказ 4274<8 Тираж 677 !!одписно<

LIHHHllH Государственного комитета (:овета Министров (:(ГР по делам изобретений и открытий! 1 3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 415

Филиал ИП11 «11атент», г. Ужгород, ул. 11роектная, 4 добавляют формальдегид, последуюшее отмывание эритроцитов и хранение готового препа-. рата производят в присутствии формальдегида.

Аналогичным образом, минуя лишь обработку эритроцитов анатоксином, готовят контрольный препарат.

После проверки готовой серии диагностикума в РПГА со стандартной сывороткой эритроциты осаждают, доводят до 10 — 50о/в-ной густоты наполнителем, быстро замораживают и лиофилизируют. Наполнителем служит раствор

«Гемодез», разведенный до концентрации поливинилпирролидона 1,50/0, с добавлением сахарозы до концентрации 7,5в/о. Температура замораживания будет — 60, ?О С. Продолжительность высушивания — 30 — 35 ч при постепенном повышении температуры до 20 С. Ампулы и флаконы герметизируют под вакуумом.

Перед употреблением содержимое ампулы (флакона) разводят нейтральным 0,85о/о-ным раствором хлорида натрия с формалином и проверяют специфическую активность готового препарата в РПГА со стандартной противодифтерийной или противостолбнячной антитоксической сывороткой.

% Способ получения диагностикума, заключающийся в том, что эритроциты обрабатывают формалином, отмывают физиологическим раствором, обрабатывают дубильной кислотой, отмывают танизированные эритроциты, сенсибилизируют анатоксином и фиксируют формаль1 дегидом, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности, специфичности и стабильности препарата, формалинизированные эритроциты обрабатывают детергентом до и после танизации, а для сенсибилизации исполь13 зуют прогретую фракцию анатоксина, выделенную путем молекулярного фильтрования через мембраны ХМ-ЗОО, ХМ-lOOA и РМ-30 «Диафло».

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Лабораторный регламент № 12, 1974.

2. Лабораторный регламент № 13, 1974.