Состав для низкотемпературного консервирования лейкоцитов

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБР ЕТЕ Н И Я и АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

t») 8I 3844

Совз Советских

Сои -.àëистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 06.07.79 (21) 2792541/28-13 (51) М Кл A 61 К 35/14 с присоединением заявки—

1осударствеиный комитет

СССР ао делам изобретений и открытий (23) Приоритет— (43) Опубликовано 30.01.82. Бюллетень № 4 (45) Дата опубликования описания 30.01.82 (53) УДК 616.155 (088.8) (72) Авторы отзобр етеви я

И. И. Георгадзе, Л. Х. Каличава, И. К. Махатадзе и H. Ш. Чигогидзе

Тбилисский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток (71) Заявитель (54) СОСТАВ ДЛЯ НИЗКОТЕМПЕРАТУРНОГО

КО1т СЕРИИ РОВАН ИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ

Л,N-диметилацетамид

Полиэтиленоксид м в 400

Альбумин 10%-ный

Глюкоза

Динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты

Левомицетин

2,5 — 3,5

8,0 — 12,0

30,0 — 40,0

4,0 — 7,0

0,1 — 0,2

0,01 — 0,015

Изобретение относится к медицине, а именно гематологии, и может быть использовано в вирусологии при производстве интерферона и в гемотерапии.

Известен состав для низкотемпературного консервирования лейкоцитов, содержащий криофилактические вещества, альбумин, глюкозу, антикоагулянт, левомицстин и бидистиллированную воду (1).

Однако при использовании этого состава у хранившихся в нем лейкоцитов после размораживания снижается способность продуцировать интерферон (выход жизнеспособных лейкоцитов 78%).

Целью изобретения является повышение выхода интерферон-синтезирующих лейкоцитов.

Эта цель достигается тем, что состав для низкотемпературного консервирования лейкоцитов содержит криофилактические вещества, альбумин, глюкозу, антикоагулянт, левомицетин и бидистиллированную воду.

В качестве криофилактических средств применены N,N-диметилацетамид и полиэтиленоксид м. в. 400, а в качестве антикоагулянта — динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты при следующем соотношении компонентов (в г на 100 мл дистиллированной воды);

Для получения предлагаемого состава все компоненты, взятые в указанных количествах, смешивают. Состав используют следующим образом. Перед заморажива15 нием к лейкомассе добавляют вышеуказанный состав в соотношении 1: 1. Экспозиция смеси с лейкомассой перед замораживанием равняется 5 — 15 мин. Суспензию клеток в растворе переносят в алюминиевые гоф20 рированные контейнеры с объемом 50—

250 мл. Биопродукты замораживают до †1 С, после чего переносят в жидкий азот на длительное хранение. Биопродукт размораживают в водяной бане при 40 -1 С, 25 Определение жизнеспособности лейкоцитов эозиновой пробой (по Шрэке), а затем определение их интерферонсинтезирующей активности показало, что предложенный состав по сравнению с известным обеспечива30 ет после размораживания повышенный вы813844

Формула изобретения

N,N-диметилацетамид

Полиэтиленоксид

20 м. в. 400

Альбумин 10%-ный

Глюкоза

Динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты

Левомицетин

2,5 — 3,5

8,0 — 12,0

30,0 — 40,0

4,0 — 7,0

0,1 — 0,2

0,01 — 0,015

Составитель С. Малютина

Техред Л. Куклина Корректор И. Осиновская

1осдактор Б. Федотов

Заказ 26/28 Изд. № 109 Тираж 716 Подписное

11ПО <Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, K-35, Раушская наб., д. 4/5

Тнп. Харьк. фил. пред. «Патент» ход жизнеспособных лейкоцитов (95% ) и сохраняет их способность к биосинтезу интерферона в титрах, соответствующих производственным стандартам.

Физико-химические свойства и биологическая активность интерферона из лейкоцитов, подвергавшихся длительному (1 год) низкотемпературному замораживанию посредством предложенного состава, не отличались от свойств интерферона, синтезированного свежими лейкоцитами.

Предложенный состав найдет широкое практическое применение.

Для промышленного получения человеческого лейкоцитарного интерферона требуется свежая донорская кровь (не позднее

24 — 36 ч после взятия), что создает значительные трудности для его непрерывного производства, особенно в период вспышек эпидемии гриппа и ОР3. Предложенный состав, сохраняя на длительный срок жизнеспособность лейкоцитов — продуцентов интерферона, позволит обеспечить фонд сырья для непрерывного производства человеческого лейкоцитарного интерферона.

Описанный состав может быть использован в системе здравоохранения как в вирусологической, так и гематологической практике. Возможно применение лейкоцитов, подвергнутых длительному замораживанию при помощи предложенного состава, после их размораживания для гемотрансфузии.

Состав для низкотемпературного консервирования лейкоцитов, содержащий криофилактические вещества, альбумин, глюкозу, антикоагулянт, левомицетин и бидистиллированную воду, отл и чаю щи и ся тем, что, с целью повышения выхода интерферонсинтезирующих лейкоцитов, состав содержит в качестве криофилактических средств N,N-диметилацетамид и полиэтиленоксид м. в. 400, а в качестве антикоагулянта — динатриевую соль этилендиаминтетрауксусной кислоты при следующем соот15;îøåíèè компонентов (в г на 100 мл дистиллированной воды):

Источник информации, принятый во

30 внимание при экспертизе:

1. Низкотемпературное консервирование тканей. Н. С. Пушкарь — Криобиология и криомедицина, 1977, № 3, с. 3 — 8.