Средство,обладающее антиагрега-ционной активностью
Социалистических
ИЗОБРЕТЕНИЯ (1 839544
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт, свид-ву 5 < К„з (22) Заявлено 06.0679 (21) 2803854/28-13 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет
Опубликовано 230681. Бюллетень Й9 23
Дата опубликования описания 2306.81
A 61 К 31 /12
Государственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий
Ю) УЖ 615.771 6 (088.8 (72) Авторы изобретения
Г. С. Левин, И.Б. Калмыкова, Ц.Л. Камене
Я.Я. Дрегерис и Я.Ф. Фрейманис
Ордена Трудового Краского Знамени инсти синтеза АН Латвийской.CCP и Научно-иссл институт гематологии и переливан (71) 3 аявители (54) СРЕДСТВО, ОБЛЗ ЦАЮЩЕЕ АНТИАГРЕГАЦИОННОЙ
АКТИВНОСТЬЮ
-нафтохинона общей формулы
И 2
I где,=се; к =инин сн сооксв
Изобретение относится к химикорармацевтической промышленности, В именно к средствам обладающим антиагрегационной активностью.
Известна ацетилсалициловая кислота ЕЛ.
Недостатком ацетилсалициловой кислоты является ее недостаточная растворимость в воде, ввиду чего она не может быть введена в кровь в достаточных концентрациях, и следовательно, для достижения присущего этому веществу эффекта иеобходимо длительное время.
Известны также препараты декатрана Г2 Однако они нередко противопоказаны больным, а их антиагрегационный эффект незначителен.
Известны производные 1,4-нафтохинона как электронно-акцепторные вещества Ц
Цель изобретения — расширение ассортимента средств, обладающих антиагрегационной активностью.
Поставленная цель достигается применением в качестве антиагрегационного средства производных 1,4..=.н., .. cH Ní.©-ссохло (g)) СН
a,=ñå; z =нн-сн сн,и нсвт (4)
СН
Производные 1,4-нафтохинона при веденной формулы являются биологи25 чески активными веществами, обладающими высокой антиагрегационной активностью в опытах in vitro u in
vivo и низкой токсичностью. Эти вещества по своей активности пре3Q восходят антиагрегационное дейст839544 вие реополиглюкина и хорошо растворимы в воде, что очень важно при их практическом использовании.
Антиагрегационная активность веществ изучена в опытах in vitro c богатой тромбоцитами плазмой человека. Исследуемые соединения вносят в кювету с плазмой в дозе 0,2 мл водного раствора, содержащего 10 мг вещества в 1 мл, перед добавлением стимулирующего агрегацию агента (эффект предупреждения агрегации тромбоцитов} или íà второй минуте после начала агрегации (для выявления дезагрегирующих свойств), В опытах in чiчо исследования проводят на модели повышенной агрегации тромбоцитов у. собак, которую вызывают массивным кровопропусканием (4Ъ к весу тела). Регистрируют динамику агрегации тромбоцитов до кровопотери, после кровопотери, через
15 и 60 мин после внутривенного введения препарата в дозе 20 мг/кг, растворенного в 5 мл 0,9%-ного раствора хлористого натрия. Контролем служат аналогичные опыты с введением того же объема 0,9Ъ-ного раствора хлористого натрия.
Пример 2. В опытах 1и vitro все исследуемые соединения (1-4) добавленные к богатой тромбоцитами плазме через 2 мин после начала агрегации, стимулированной АДФ, снижают почти вдвое интенсивность образования агрегатов ° Это проявляется и при сравнении показателей за период между 2-й и б-й, а также 2-й и 10-й минутами реакции.
Реополиклюкин в этих же условиях не снижает агрегационную активность тромбоцитов.
В табл.1 приведены результаты АДФагрегации тромбоцитов.
Пример 2. Прй введении препаратов до начала процесса агрегации и АДФ и адреналин практически утрачивают способность стимулировать агрегацию нормальных тромбоцитов.
Реополиглюкин, добавленный до внесения в плазму стимулирующих агрегацию средств, лишь незначительно снижает интенсивность АДФ-агрегации и совершенно не изменяет адреналин-агрегацию тромбоцитов.
В табл.2 представлены результаты агрегации тромбоцитов.
Пример 3. При исследовании влияния соединения 1 в опытах на собаках с повышенной агрегацией тромбоцитов, индуцированйой массив5 (0
45 ной кровонотерей, установлено, что этот препарат значительно тормозит процесс агрегации тромбоцитов in vivo уже через 15 мин после внутривенного введения (р (0,03). Это определяет сохранение уровня тромбоцитов у животных после массивной экспериментальной кровопотери.
В табл.3 представлено количество тромбоцитов и индекс агрегации у собак после кровопотери и .введения расТВороа NaС1 и соединения 1.
Пример 4. Установлено неодинаковое действие исследованных соединений на процесс свертывания крови в опытах in vitrb. Соединения 3 и 4 снижают гемокоагуляционный потенциал, но 4 ускоряет формирование фибринового сгутска, хотя эластично- сть последнего оказывается сниженной.
Соединение 3 не влияет на первые две фазы гемостаза, но вследствие замедления процесса полимеризации фибрина, снижает максимальную эластичность сгустка и общий индекс коагуляции. Соединение 2 ускоряет процесс тромбопластинообразования, а соединение 1 практически не влияет на процесс свертывания крови.
B табл. 4 представлены данные тромбоэластографии (ТЭГ) цитратной крови здоровых людей при добавлении исследуемых соединений !5:1).
Использованный в качестве контроля реополиглюкин приводит к резко(му замедлению и I! фаз гемостаза, уменьшению эластичности фибринового сгустка и общего индекса коагуляции.
Следовательно, РПГ обладает выраженным гипокоагуляционным действием, замедляя процесс тромбопластинообразования и формирования фибринового сгустка. Аналогичные результаты получены при исследовании действия соединения 1 на показатели тромбоэластограммы в опытах in vivo y собак с массивной кровопотерей (табл.5) Как видно из таблиц, соединения
1-4 обладают значительным дезагрегационным действием на тромбоциты в разных моделях in vitro u in vivo намного превосходящим эффективность реаполиглюкина. Эта эффективность сочетается с одновременным отсутстви- ем действия на свертываемость крови.
Применение предложенного средства позволит расширить ассортимент средств, обладающих антиагрегационной активность.
839544
Таблица 1
Статистические показатели эффекта, Ф +m и р
Период S, Показатель мин Н, Ъ
Препараты
2-6
0,9-ный раствор NaС1
2-10
РПГ
2-10
5,45
5 02
2-6
Соединение 1
2-10
2-10
2-6
Соединение 3
2-10
2-6
<0i001 (0,05 Соединение 4
2-10
Таблица 2
Статистические показатели эффекта, Ж
Период S, Показатель мин М, В
+m и P
3,11, 94, 66
2-6
91,0
2-10
2-6
РПГ
2-10
2-6.
Соединение 1
2-10
4,12
2-6
5,30
Адреналинагрегация
17,15
5,12
2-6
Соединение 1
2-10
О
2-6
Соединение 2
Вид агрегации
Препарат
0,9-ный раствор
NaC1
АДФ-агрегация
0,9-ный раствор
NaC1
97,84
101,45
107,10
106,08
57,70
49, 95
62,15
61,35
57,12
47,64
51,56
41,30
2-10
2-6
2-10
79,77
75,82
5,60
5,70
86к 98
93,88
86,57
80,77
6,35
27,02
8,38
7,94
7,01
10,87
11, 03
9,43
6,04
5,06
5,48
2,89
4,48
2,99
3,38
16
5
)0,05
)0,05
< 0,001 (0i 001
< 0i 001
< 0,001
<0,008
<0,08
<0,03
<О, 05
<0,001
<0,001
)0,1
)0,1
<О 001 (0,001
839544
Таблица 3
Индекс агрегации
Количество тромбоцитов, тыс. сходный
Исходное
Препарат
Пока" затели
М 209,31 151,20 106,49 57,74 7,9 12,7 16,3 12,3
31,37 33,27 37,59 7,29 1,58
4,56 4,77 2,6
Соединение 1 (20 мг в И
5 мл Физиологического «+m раствора) 362,56 145,23 230,01 82,85 6 32 11,7 5,6 6,3
92,93 52,44 122,85 15,50 1,53 2,11 1,85 2,39
0,9%-ный раствор
NaC1
После кровопотери
Через
15 мин после вливания
Через
60 ми после влива ния
После кровопотери
Через
15мин после вли вания
Через
60мин после вливания
839544
I ч 3о со
1 tC
0Ъ 1 с1
<Ч I с
<ч) о
1 I 1 1
I 1
I X
1О Ф 1 с с
CO с-1 1
I х 1 х ("Ъ СЧ I Ю
Г ъ а 1 ю о с с а-3
Cl с о с с о
Г 1
1
1 rn I а
I 0Ъ Ф с с
%II Ю
Х 0Ъ
tA tA с с с3 < Ъ (Ч I
tA С Ъ
Ю Р с с о (.Э
tt3 и а о с о о о !
33 о
td
О С Ъ I
tA Ch 1 с с
Ch СЧ I
Г Ъ
<Ч I
1О с с о
tC) Ch
Ч <Ъ I с с о 3!
О 33 с с
РЪ СЧ (Ч
<33 Ch
I I
1 (Ч е-3 I
I а tA 1 с с а о
lg о о о, И о 3Ч1
m I с с
СЧ 1
С ) (Ъ й
3Ч с.3 с с о (Ч 1О о cv с
3 О -3 1
1
1
1 х
tA о с с о о
Я х х
Э х
ttI
Р и
1
1 х
<П СЧ 1
1 1- <Ч I с с
0Ъ О
I х м Ю 1
tA СЧ 1 с
СЧ
СЧ I
1 бс а Ф
CO tC3 с а ю
Г-3
Ф
f4 1
1 о а со I с с с3 (Ч I 3
2 х
1 <юО
Ch Ф 1 сZ о I
I с-(CO 1 г» а! с с I
О 1
1
1 с3 1О 1
I Ю rt) 1 с а о
CP P О СЧ с о
t с (Ч с с у о
1
Э 1
3 I
1 о
Х 1 о
Ж 1
1 г- 1 а 1 с с 1 с3 с-3 1 с3
Ch (Ч с! с с с3 гЧ
СЧ Ф т-1 cp с-1 с с о
Ch CCt
Ю с с с34 Ю
1
o !
I Э Э 1
1 d iri I
1 Х Э 1
I P g Х
IOOe хасэ
I p (ч I
td Э
I Э Х
I U М
-И 1
1
1
1
1
I
Э 1
Я E
1
1
1
1
3 х
Ц
Э
3ч
td Гч
Э 0Ъ
td R о
1=3
hC 1
)
I.
° ф
33! 1
Э 1
Х 1
Х 1
Э 1 х
I сч
Д 1
Э 1
О 1
1
1 с3 с l с с гЪ х
I с3 (Ч а (ч Ч
1 I °
1 г1 0Ъ с с
1 ОЪ еЧ
1 -1
1
1
1 Ю CO
1 W Ch с с о о
1 гЧ
1
1
1 а 3с
1 () к-1 с
1 сР Р4
<Ч
1
1 1
Я Е
I .3.(I
1 х х х
td
А
H о о х
54
Э х о (ч
O tA
Оо
Ц с о ч
Itt Ctt
839544
Таблица 5
Статисти ческие показатели
Показатели ТЭГ
Соединение н посрастПосле кровопотери
Исходные
Через 60 ми ле вливания
1 t 1 1 ((R К Иа Cob R К Иа (с6 R К Ма
0,9Вный М 3,24 4,08 44,6 26,2 3,72 3,32 49,0 30,0 2,22 4,02 46,6 29,4 раствор,+ m 0,41 0,59 4,81 2,41 1,10 0,94 7,01 5,26 0,24 0,71 5,21 4,31
NaCI
3,12 2,34 62,0 38,8 2,22 2,40 62,4 42,0 3,22 4,8 53,0 32,0
0,66 0,76 7,52 3,71 0,52 0,69 6,21 5,76 0,78 2,17 5,06 6,35
Сое- М динение 1 4-m
Формула изобретения (i) 30 (2) Составитель С. Малютина
Редактор Г. Кацалап Техред С.Мигунова Корректор Ю. Макаренко
Заказ 4504/5 Тираж 687 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Х(-35, Раушская наб., д.4/5
Филиал ППП "Патент", r.Óæãîðîä, ул,Проектная,4
Применение 1,4-нафтохинона общей формулы О
R 25 и р где, R =с.е,т =ннсн сн cooNck н - GR - м-сН сн соон
1 со-сн сч„.,-сн,мн ©-саонв (2)
R,= сЕ,, =кн-сн сн И вЂ” сн ° нсвт (4) . снь 35 в качестве средства, обладающего антиагрегационной активностью.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. И.В. Куйбышева. "Функциональные свойства тромбоцитов в норме и при патологических состояниях",.
Обнинск, 1975, 44.
2. Л.П. Свирицкина. Влияние реополиглюкина на гемокоагуляцию при гемодинамии. Проблемы гематологии, 10 1978с 46 52 °
3. Дрегерис Я.Я., Лиепиня И.Я., Фрейманис Я.Ф. Синтез 1,4-нафтохинона. Известия AH Латвийской ССР, .ер.хим., 9 4, 1977, с. 460-464.
