Способ разделения липидов и полиэтиленоксидов

 

< >857096. Союз Сооотскме

Соарванстюческне

Ресаубннк

Oll-ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ЖТОУСКОЫУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (оt ) Донолннтелькое а авт. санд-ву—

Р223аявлено 07.06.79 (21) 2804558/23-04 е щйкоеанненнем заявкн J5— (2ЗЯрнорнтет—

Онублнковано 23.08. 8! Бюллетень М 31

Дата онублнжоеання оянсанкя 25.08,81 (5%)М. Кл.

С 07 С 7/10

С 08 6 65/30

С 11 В 3/00

Ьеудеретеанвй кекетет

CCCP

«е далем «еебретвей е еткумтей (53) УДК 547. 915. .5.05 (088.8) (72) Автор изобретения

A. А. Иартыненко

Институт проблем криобиологии и криамедицииы

АН Украинской ССР (71) Заявктель (54> СПОСОБ РАЗДЕЛЕНИЯ ЛИНИДОВ И ПОЛИЭТИЛЕНОКСИДОВ

Изобретение относится к органической химии, в частности к раэделещао и очистке жиров и жировых веществ (липидов ) иэ смесей с другими органическими веществами и может найти применение в химической, легкой промышленностях, фармакологии и здравоохранении.

Смеси липидов и полиэтиленоксиеО . дов применяют в различных отраслях промышленности — при изготовлении сказок, смягчителей, антнстатиков, красок в фармакологии — при изготовлении мазей, солюбилизаторов, суспензий, эмульсий; в парфюмерии — при изготовлении кремов, мыл, помад, лосьонов, в здравоохранении — при низкотемпературной консервации тканей, а также в науч вас исследованиях.

Однако возникает необходимость разделения смесей липидов и полиэтиленоксидов, например для очистки и повторного их использования, а также ана2 лиза их качественного и количественного состава.

Известны способы экстракции и выделения липидов иэ различных объектов органическими растворителями и системами растворителей. Согласно наиболее широко применяемому. способу

Фолча в модификации Блайя и Дайера линиды экстрагируют в однофазной системе растворителей хлороформ-метанол (I:2-0,8 по объему) экстракт разбавляют водой и хлороформом до получения двухфазной системы при соотношении объемов хлороформа, метанола н воды (1:1:0,9У.

Затем отделяют хлороформенный раствор лннидов и очищают его путем упаривания растворителя и повторного распределения липидов в хлороформе 11 ), Однако такие способы не обеспечивают разделения липидов и полиэтнленоксидов при их совместном присутствии в экстрагируемом материале.

Цель изобретения — повышение качества разделения липидов и полиэтиленоксидов. о

Поставленная цель достигается тем, что, согласно способу разделения липидов и полиэтиленоксидов с использованием экстракции двухфазной системой растворителей в качестве двухфазной системы растворителей используют смесь петролейного и диэтилового эфиров при объемном соотношении 1 0

0,3- 1 и водный 35-100Х от насыщения . растворйоС(при объемном соотношени .. фаз органического и неорганического растворителей 1:0,5-5.

Способ осуществляют следующим образом.

Эмульсию, в состав которой входят, липиды и полиэтиленоксиды мол.веса

400-40000 смешивают с петролейным и диэтиловым эфиром при соотношении растворителей 1:0,3-1 и объем смеси разбавляют с 0,5-5 объемами насыщенного раствора соли неорганической кислоты. Смесь встряхиваютг в течение

5-10 мин и оставляют на отстаивание.

После отстаивания растворителей отбирают нижний слой, а верхний слой промывают свежей порцией 40-100Х от насыщения раствора соли неорганической кислоты. Раствор липидов в составе верхнего слоя растворителей осво бождают от растворителя путем упаривания в токе азота. Водно-солевые растворы полиэтиленоксидов в состав нижнего слоя растворителей и промывнь х жидкостей спаривают, полиэтилен-,. оксиды растворяют в спирте и упаривают, Hp и м е р. Эмульсию липидов (по 30 мг лицитВ а, нейтральных жиров, холестерина) и полиэтиленоксидов (ПЭО)(90 мг смеси ПЭО мв, 400, м,в. 6000, м.в. 40000) в 200 мг воды помещают в делительную воронку, смешивают с 10 мл петролейного и 10 мл диэтилового эфира и прибавляют 20 мл

35Х раствора хлористого натрия, смесь встряхивают S мин, отстаивают

15 мин, после чего сливают нижний слой, а верхний промывают равным объемом 35Х NOLAN Эфирный раствор

"аипидов упаривают в токе азота до получения липидной-массы в количестве

99,5Х от исходного. Водно-солевой раствор ПЭО упаривают, а остаток растворяют в спирте и упаривают до получения ПЭО в количестве 99,2Х от исходного.

7096 4

В табл.) представлено распределение липидов и полиэтиленоксидов (ПЭО) в двухфазных системах растворителей,, Остаток, полученный после упаривания фазы органического растворителя, взвешивают, Кавеску дважды экстрагируют (1:10) петролейным эфиром и центрифугируют. Петролейный экстракт упаривают до удаления растворителя

10 ° и взвешивают содержащиеся в нем не. полярные липиды, Центрифужный осадок растворяют в 10 мл хлороформа и отбирают пробы по 0,5I мл на.определение лецитина по фосфору и холестерина

15 по реакции с уксуснокислым ангидридом. На основании полученных данных расчитывают содержание липидов в фазах полярных и неполярных растворителей.

20 Фаза неполярных растворителей (верхний эфирнь и слой):

Л = 10 (а-в) + Д

П=Н-Л

Фаза полярных растворителей нижg5. Ний Водно солевой слой

Л вЂ” 9 0-Л

П=90-П

I где Л и Л вЂ” мг липидов;

П - П - мг ПЭО;

ЗО а — мг лицитина в пробе хлороформа .в — мг холестерина в пробе хлороформа д — мг липидов в петролейном экстракте;

3S н — мг остатка из фазы растворителя.

Результаты табл.1 показывают, что в известном способе разделение липидов не достигается (в фазе неполярных растворителей содержится 84,6Х

4о а в фазе полярных растворителей 15,4Х), Также не достигается разделение полиэтиленоксидов (в фазах соответственно содержится 35,4Х и 64,6Х).

В предлагаемом же способе достигает45 ся практически полное разделение липидов и полиэтиленоксидов.

В табл.2 представлено распределение липидов и полиэтиленоксидов (ПЭО в системе раствбрителей петролейный

50 эфир-диэтилввый эфио-водный раствор хлористого натрия.

Таким образом, способ обеспечивает количественное разделение липидов и полиэтиленоксидов и осуществляется а 40-60 мин с помощью недорогостоящих реактивов и без использования сложного оборудования.

857096

Таблица растворией

ПЭО,/

84,6

35,4

64,6

99,5 0,8

0 5

99;2

Таблица 2

0,4

98,8

) ° 1

1:5

0,7

0,5

99,3

100

0,4

0,9

0,8

0,7

100

99,6

99 1

98,6

99,2

) °

1:0 5

1,4

0,8

1 2

0,4

100

I:0,3

1:5

1,0 1 1

0,6 0,3

100

98,9

99,7

1:О,э

) oePt3 шенин l:0,3-1 и водный 35-)GOX от насыщения раствор Кс Я при объемном соотношении фаз органического и неорганического растворителей 1:0,5-5.

Формула изобретения

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

Кейтс И. Техника липидологии

И., "Иир", 1975, с.72-77 (прототип).

Составитель О. Оксинойд

Редактор B. Еремеева Техред Н.Ковалева Корректор И.П)выдкая

Заказ 7133 35 Тираж 443 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, ауаская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 1. .Известная система растворителей для выделения липидов: хлороформметанол-вода (I 1:(),9 ) 2. Система растворителей предлагаемого способа: петролейный эфир-диэтиловый эфир-насьпценный раствор хлористого натрия (1:0,5-5 ) Способ разделения липидов и полиэтиленоксидов с использованием экст" ракции двухфазной системой растворителей отличающийся тем, что, с целью повьппения качества разделения этих веществ, в качестве двухфазной системы растворителей использует смесь петролейного и диэтилового эфиров при объемном соотно99, 5 .

99,2

99,3

98,8

99,6

99,0

99,4