Способ выявления белков
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (n)951121!
-., ч
//
Р(61) Дополнительное к авт. сеид-ву (22) Заявлено 29.10.80 (2!.) 3229035/28-13 (51} М Кп 3
G 01 N 33/48 с присоединением заявки ¹
Государственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет
Опубликовано 15.08.82. Бюллетень ¹ 30
153}УДК 616.07 (088.8,) Дата опубликования описания 15.08.82 (72) Авторы изобретения
T.Ï.ÕîëHöÿ, Г.Ф.Касымова, Н.И.Корякина, В.К.Буриченко, A.Х.Алиходжаев и N.Þñóïoâ (} (Институт химии им. В.И.Никитийа::.
1 (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКОВ
На)8 н
=«Llw o, (1)
3%3S
30
Изобретение относится к медицине, а именно к способам аналитической биохимии,для обнаружения белков в полиакриламидных гелях и прн анализу белков. . Известен способ выявления белков путем электрофоретического разделения их в полиакриламидном геле с пос= ледующим окрашиванием красителем Г1).
Однако известный способ требует длительного процесса окрашивания бел.— ковых эон в полиакриламидных гелях (IIIIAI ), длительного процесса отмывания избытка красителя " ПААГ, длительного процесса отмывания гелей ведет 15 к вымыванию минорных фракций белков, что снижает качество анализа белков, многократной смены растворителя и в связи с этим большой расход уксусной кислоты и сложного удаления фона красителя, что затрудняет денситометрирование белков.
Цель изобретения — ускорение способа. .Цель достигается тем, что при осуществлении способа выявления белков путем электрофоретического разделения их в полпакриламидном геле с последующим окрлн:мнением красителем, в качестве кра;ит=.лн используют 1-(5-нитро-2-тиаэолилазо)-2-нафтол-3,6-дисульфокислоту.
Способ реализуется следующим образом.
Белки выявляют с помощью электрофоретичесыого разделения их в полиакриламидном геле, после чего проводят окрашивание красителем, при этом в качестве красителя применяют 1-(5-нитро-2-тиазолилаэо)-2-нафто -3,6-дисульфокислоту
Пример . Электрофореэ белков (алибумина, рибонуклеазы, гистона) в полиамидных гелях проводили .по методу Панима и Чолкли в трубках диаметром 5 мм и высотой 100 мм, а также в блоках ПААГ размером (1к150 150).
После электрофореэа гели окрашивали
0,2Ъ-ным раствором 1-(5-нитро-2-тяаэолилаэо)-2-нафтол-3,6-дисульфокислоты. в смеси метанол-вода-уксусная кислота (5:5:1). Параллельно для
9511?1
Формула изобретения
Составитель Ю.Алмазов
Редактор Н. Воловик Техред Ж.Кастелевич Корректор "- Король
Заказ 5933/46 Тираж 387 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5
Филиал ППП "Патент", r.Óæroðîä, ул.Проектная, 4 сравнения окрашивались гели 0,2Ъ-ными растворами амидо черного 10 Б и кумасси голубого R-250. Применение красителя для обнаружения белков в полиакриламидных гелях позволяет определять белки при концентрации
10 -10-"ОМ. После 6 мин окрашивания уже четко видны окрашенные белковые зоны в блоке ПААГ, окрашиваемом красителем, без отмывания избытка красителя с геля.
Предложенный способ позволяет сократить время выявления белков до
6 мин, в то время как при использовании известного способа требуется
30-60 мин и 15 ч для отмывания фона красителя, предложенный способ исключает, процесс отмывания, снижает расход растворителя и повьпиает производительность.
Способ выявления белков путем электрофоретического разделения их в полиакриламидном геле с последующимокрашиванием красителем, о т л и ч а10 ю шийся тем, что, с целью ускорения способа, в качестве красителя используют 1(-5-нитро-2-тиазолилазо)-2-нафтол-3,6-дисульфокислоту.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Маурер Г. Диск-электрофорез.
М., "Мир", 1971, с. 90.
