Питательная среда для глубинного культивирования тriсноdеrма viride 44-продуцента целлюлолитических ферментов

 

ОП ИСАНИЕ изаБ} етЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскив

Социалистических

Республик

<1>979507 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 250681 (21) 3307216/28-13

Р }М К з с присоединением заявки ЙоС 12 и 9/42

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий. (23} Приоритет—

Опубликовано 07. 12.82.Бюллетень М45

Дата опубликования описания 07.12,82 (33}УДК 663.11 (088.8) Н.Т.Шинкаренко, Н.А.Острикова, С. А. Коновалов, К

Л. И. Голгер и В. A. Качанов

j. 1 1

Всесоюзный научноисследовательский биотехнич ский... институт Главного управления микробиологическая ""..к. - "-, t

IIpoMHBiJIBHHocTH H o eTe NHHHcTpoB СССР (72) Авторы изобретения (7! ) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ГЛУБИННОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

Тй!СНООЕКНА VlRiDE 44 — ПРОДУЦЕНТА;ЦЕЛЛЮЛОЛИТИЧЕСКИХ

ФЕРМЕНТОВ

20 .5

Изобретение относится к ферментной отрасли микробиологической промышленности и может быть использовано для получения целлюлозы методом глубинного культивирования микроскопических грибов на жидких питательных средах.

Известны питательные среды для выращивания различных продуцентов целлюлозы.

Для культивирования Trichoderma

vlride известна питательная среда следующего состава,Ъ|

Свекловичный жом 5 9 (МН 4 4504 1 23

КН РО4 0,5 которая обеспечивает накопление

АФБ 5,0-5,5 ед/мл (Ц .

Известны среды для культивирования гриба Trichode rma 1ignorum

0N534 следующего состава, г/л: а ) Молочная сыворотка, разбавленная в 3 раза водопроводной водой 1000

Натрий азотнокислый 3,0

Магний сернокислый 0,5 б ) Бумага фильтровальная

Натрий азотнокислый

Однозамещенный фосФат калия 4,0

Магний сернокислый 0,5

5 Кукурузный экстракт 5,0

Вода водопроводная До веса

ЪФБ на обеих средах составляет

0,8-0,81 ед/мп |.2 j.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту, является питательная среда для глубинного культивирования Trlchoderma viride продуцентов целлюлолитических ферментов, содержащая свекловичный жом, однозамещенный фосфорнокислый калий, сульфат магния, сульфат аммония, а также эернокартофельную барду, отруби пшеничные, солодовые ростки, натрий азотнокислый и воду при следующем соотношении компонентов, вес,Ъ: жом свекловичный 3,0

Однозамещенный фосфат калия 0,2

Магний сернокислый 0,03

Зернокартофельная барда 5,0

Отруби пшеничные 0,5

Ростки солодовые 1,43

Натрий азотнокислый 0,4

Аммоний сернокислый 0,4

30 Вод, Остальное

979507

Активность целлюлозы составляет

8 ед/мл (3 ), Недостатками известной среды являются низкая ферментативная активность и большая продолжительность культивирования (6 сут ), Цель изобретения - повышение активности целлюлоз и сокращение времени культивирования продуцента.

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для глубинного культивирования Trichode rma

viride 44 ; продуцента целлюлолитических ферментов, содержащая свекловичный жом, однозамещенный фосфорнокислый калий, сульфат магния, суль. фат аммония и воду,. дополнительно со- держит сульфат хрома и лизаты кормовых дрожжей при следующем соотношении компонентов, вес.Ф:

Свекловичный жом 1,5-5,0

Лизаты кормовых дрож жей 0,3-1,0

Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,2- 0,4

Сульфат. магния 0,02-0,05

Сульфат аммония 0,2-0,5

Сульфат хрома 0,3-0,7

Вода Остальное

Использование в составе питательной среды лизатов дрожжей и сульфата хрома способствует повышению активности фермента целлюлозы в куль-! туральной жидкости и сокращению продолжительности культивирования с

6-ти до 4-х сут.

Формула изобретения

Питательная среда для глубинного

35 культивирования Tr ichodeгп;а viride

44 — продуцента целлюлолитических ферментов, содержащая свекловичный жом, однозамещенный фосфорнокислый калий, сульфат магния, сульфат ам4Q мония и воду, о т л и ч à ю щ а я с я тем, что, с целью повышения активности целлюлаз и сокращения сроков культивирования продуцента, среда дополнительно содержит сульфат хрома и лизаты кормовых дрожжей, при следующем соотношении компонентов,вес.Ъ:

Свекловичный жом 1,5-5,0

Лизаты кормовых дрожжей 0,3-1,0.

Однозамещенный фосфорнокислый калий 0,2-0,4

Сульфат магния 0,02-0,05

Сульфат аммония 0,2-0,5

Сульфат хрома 0 3 0 7

Вода Остальное

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Калунянц К.A. и др. Оптимизация состава гитательной среды для биосинтеэа целтйй1азы грибом Trichoderma чiride - Прикладная биохимия и микробиология", 12, 1979, Р 2, c . .269.

2. Лобанок A.Ã. и др. Характерис ,тика свойств целлюлазных комплексов продуцируемых грибом Trichoderma

Пример 1(контроль ), Питательная среда для выращивания продуцента целлюлозы, вес.%:

Свекловичный жом 3,0

Пшеничные отруби 0,5

Эернокартофельная барда

МаМОЗ (МН, ) 50

Mg SOÄ

КН Ð04

Солодовые ростки

Вода

5„0

О, 4

0,4

0,03

0,2

1,43

Остальное

Ферментативная активность целлюла,> зы в культуральной жидкости после

4-х суток культивирования достигает

8 ед/мл по методу Сомоджи-Нельсона.

Субстрат — фильтровальная бумага, время гидролиза 1 ч при 50ОС, IT р и м е р 2. Готовят питательную среду следующего состава, вес.В:

Свекловичный жом 1 5

Лизаты кормовых дрожжей 0 3 бО (NH q ) 50„ 0,2

КН Р0,, 0,2

М9Ь04 0,02

Сульфат хрома 0,03 ..

Вода Остальное 65

Питательную среду готовят путем последовательной загрузки всех ком.понентов при постоянном перемешива,нии. рН среды доводят ортофосфорной кислотой до значения 4,4 и стерилизу5 ют острым паром 1 ч при 0,8 ата.

Активность целлюлозы культуральной жидкости. Trichoderma viride 44 достигает 10,4 ед/мл (метод тот же ) при продолжительности культивирования

10 4 сут.

Пример 3. Готовят питательную среду следующего состава, вес.В:

Свекловичный жом 5,0

Лизаты кормовых дрожj5 жей 1,0 (Мн . )2S04 0,5

КН2Р04 . OI4

MgS04 0,05

Сульфат хрома 0,7

Вода Остальное

После 4-х суток культйвирования активность целлюлазы в культуральной ,жидкости TrIcCcoderma viride 44 достигает 12 ед/мл (метод тот же ) °

Таким образом, реализация изобретения позволяет повысить активность целлюлаз (на 50% ) и сократить сроки культивирования продуцента (на 48 ч )

Годовой экономический эффект сос30 тавляет 7321 р.

979507

Составитель Е. Воробьева

Редактор A.Ãóëüêî Техред,И.Качур Корректор(И.& чик

Заказ 9282/9 . Тираж 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

11цпсгив оМ 534 на средах с целлвлазой и лактазой.-"Прикладная биохимия ,и микробиология". 12, 1976, 9 2, с.227..

3: Опытно-промышленный регламент производства препарата целюполазы

"Целловиридин ГЗХ", Главмикробиопрэм, 1978,tпрототип ).