Способ получения водорастворимого линейного полисахарида
ОП ИСАНИЕ
ИЗО6РЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ оц98т 322
Союз Советскнх
Соцкалнсткческкх
Реснублик (61) Дополнительное к авт. свкд-ву(22) Заявлено 08.05,81 (2! ) 3310928/23 05 (5I)M. Кл.
С 08 В 37/00
С 08 В 15/00
А 61 К 31/00 с прнсоедннением заявки М—
9вударвтвеевй квинтет ь.ььр, ав авлак вюбрвтеввв в верьпив (23) ПркоритетОпубликовано 15.12 82. Бюллетень Юе46 (53) УД К547.458.. 5(088.8) Дата опубликования описания 15. 12.82
Л. С. Гальбрайх, Л. И. Барсова, Г. А. Вих
P. М. Норейка н А. И. Шер
Ф
1 !
Московский ордена Трудового Красного Зйамени текстильный институт им. А. Н. Косыгина .,:. (72) Автори изобретения ( (71) Заявитель. (54) СПССОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМОГО
ЛИНЕЙНОГО ПОЛИСАХАРИЙА
Изобретение относится к способам получения водорастворимых линейных полисахариаов с функциональными группами кислотного характера, обладающих биологической активностью которые могут быть использованы в биопсии и медицине.
Известен способ сульфатнрования карбоксиметилцеллюлозы (КМ Б) хлорсульфо- новой кислотой (ХСК) в среде пиридина, который позволяет получать высокозамещениый (11,0 — 14;5% серы), но снльнодекструктированный сульфат карбоксиметилпеллюлозы с низкой активностью (2025 ед/мг) 11) .
Наиболее близкйм к изобретению техняческим решением по достигаемому эф-, фекту является способ сульфатирования хитозана коьтплексом триоксида серы с диметилфомамидом. Этот способ позволяет получить высокоактивные (50 - 56 ед/мг) хв препараты 12 j .
° Однако в этом случае для получения . сульфатирующего комплекса исполь.обуется газообразное и неустойчивое при хранении
2 вещество — триоксид серы, что значитель но усложняет технологический процесс.
Недостатком способа является также большая продолжительность процесса - до
12 часов.
Бель изобретения — увеличение анти коагулянтной активности водорастворимых линейных полнсахаридов и упрощение технологического процесса.
Поставленная цель достигается тем, что в способе получения водорастворимого линейного полисахарнда,, обладающего антикоагулянтной активностью; обработкой цолисахарида сульфатируюшим агентом в днметилформамиде, в качестве полиса. харнда используют карбоксиметилцеллюлозу, в качестве сульфатируюшего агентахлорсульфоновую кислоту, и обработку про-. водят 0,5 - 1,0 час 16,0 - 29,4%-ным раствором хлорсульфоновой кислоты в диметилфбрмамиде при соотношении раствора н карбоксиметилцеллюлозы 15,5-18,8: 1
nps 20 .- 25 C.
3 9813
Пример 1. Переосаждение и инклюдирование KMU. 10 r KMU раств.зряют в 100 мл 10%-ного раствора ецкого .натра. Полученный раствор фильтруют, и натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы (Ио -KMU) осаждают из раствора трехкратным объемом этилового спирта. Осадок промывают спиртом, спирт затем вытесняют ДМФА (5 раз по 100 мл). Инклюдированную +-KMU хранят в ДМФА. Iá
Сульфатирование Na KMU системой
XCK - ДМФА. 1,4 мл ХСК постепенно добавляют в реакционный сосуд к 10 мл
ДМФА при перемешивании и охлаждении (О-5 С). После этого охлаждение прекра-И шают, и реакционную смесь перемешивают еще в течение 15 мин. Затем добавляют
5 г инклюдированной NO-KMU со степенью 5 (1 re-KMLI в пересчете на сухое вещество). Реакцию проводят 16%-ным щ раствором ХСК в ДМФА из расчета
15,52 вес. ч. раствора на 1 вес. ч.hler-EMU при постоянном перемешивании при 2б С в течение 40 мин. По окончании реакции к раствору при охлаждении добавляют И
20 мл воды, 20 мл 10%-ного раствора
Nci0?I, 2 мл насьпценного раствора, и продукт реакции осаждают в 300 мл метанола. Осадок промывают метанолом и эфиром (2 раза по 50 мл), растворяют в рр
30 мл воды.и добавлением 10%-ного раствора NQOH доводят рН до 9. Полученный раствор Мсi — соли сульфата KMU (Na- g-KMU) диализуют против дистиллированной воды до отсутствия в диализаторе ионов
3.
Я и Я) . Затем раствор концентрируют
4 о упариванием при 40 С в вакууме до объема 20 мл, добавляют 0,5 мл насыщенного раствора ЯЙСЯ, и осаждают продукт в
100 мл метанола. Осадок промывают .ме- 4О танолом, эфиром и высушивают в вакууме над Р О до постоянной массы.
Получают 1, 14 г продукта, содержащего 9,5% серы, с антикоагулянтной активностью 69 ед/мг. Характеристическая вязкость раствора в 0,5 М растворе НОСЯ при 20 С1 ) g = 1,2 дл/г.
22 . 4
Получают 1,11 г продукта, содержащего 11,4% серы с антикоагулянтной ак-, тивностью 73 ед/мг,P)) j 0,4 дл/г.
Пример 3. Последовательность операций аналогична описанной в примере 1. Количество реагентов: 3, 1 мл ХСК;
1 г ЙО -KMU; 14 мл ДМФА. Условия реакции: 29,4%-ный раствор ХСК в ДМФА;
18,82 вес-. ч. раствора на 1 вес. ч. MgФ
-KMU, температура 20 С, продолжительность сульфатирования 50 мин. Для нейтрализации реакционной массы добавляют
40 мл 10%-ного раствора Фа,OH.
Получают 1,08 г продукта, содержащего 10,0% серы с антикоагулянтной активностью 74 ед/мг,(g ) = 0,72 дл/г.
Исключительно важными характеристиками биологически активных веществ, применяемых в качестве лекарственных средств, являются их токсичность. Оценку острой токсичности синтезированных сульфатов карбоксиметилиеллюлозы проводят на мышах. Установлено, что полученные продукты не обладают заметным токсическим действием. С целью изучения стабильности раствор продукта (1 мг/мл) в дистиллированной воде подвергают ускоренному старению при 60 С в течение
3 месяцев. Потеря антикоагулянтной активности в этих условиях .для продукта, полученного согласно предлагаемому способу, составляет 30%, для гепарина -20%.
Таким образом, согласно предлагаемому изобретению синтезированы производные линейного полисахарида, содержашие группы кислотного характера с антикоагулянтной активностью 69 — 74 ед/мг, не обладающие острой токсичностью и по стабильности приближающиеся к гепарину.
Предлагаемый способ является технологически более йростым, чем про,тотип, так как предполагает использование устойчивых, доступных реагентов и проведение процесса в более мягких условиях: при
20 — 25 С и небольшой продолжительносО ти процесса (до 1 ч).
Пример 2. Последовательность операций аналогична описанной в примере 1. Количества реагентов: 2,1 мл ХСК;, $9
1 г И0 KMU - 14 мл ДМФА„
Условия реакции: 21,9%-ный раствор
ХСК в ДМФА; 17,04 вес. ч. раствора на
1 вес. ч. bki -KMU, температура 29 С, продолжительность сульфатирования 60 мин.
Для нейтрализации реакционной массы до - бавляют 30 мл 10%-ного раствора NOOH
Формула изобретения
Способ получения водорастворимого линейного полисахарида, обладающего антикоагулянтной активностью, обработкой полисахарида сульфатирующим агентом в диметилформамиде, о т л и ч а ю ш и йс я тем, что, с целью повышения антикоагулянтной активности и упрощения про-. цесса, в качестве полисахарида используют карбоксиметилцеллюлозу, в качестве
5 981322 б сульфатируюшего агента - хлорсульфоиовув ). у p poesy д g
Составитель Т. Мартинская
Редактор Т. Парфенова Техред. 3. Палий Корректор Г. Решетиик
Заказ 9625/35 Тираж 514 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035„Москва, -35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
