Способ получения производных 2-арил-iн-перимидина или их солей

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

984409

Союз Советских

Социалистических

Республик

Ф. (61) Дополнительный к патенту(22) Заявлено 18. 12. 78 (21) 2697059/23-04 (51) М. Кл. (23) Приоритет — (32) 19. 12. 77:

21.09.78 (31) 86 1 7 32 (33) cd

944434

Опубликовано 23,1282, Бюллетень № 47

С 07 D 239/70

l/A 61 К 31/505

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 5 4 7. 856 . . 7.07(088. 8) .

Дата опубликования описания 23. 12. 82 (71) Заявитель

"Зли Лилли энд Компани" (СШЛ) {54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 2-АРИЛ-1Н-ПЕРИМИДИНА

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ

1, Ф

С

20

М где R — группа

25 или м Б

1 трифторметилокили пентафторС г к,1 — трифторметильная, си-, трифторметилтиоИзобретение относится к способу получения новых производных перимидина, обладающих свойствами иммунодепрессантов, которые могут найти применение в медицине.

Известна реакция 1,8-диаминонафталина с производными бензойной кислоты с образованием 2-арил-1Н-перимидинов (13.

Цель изобретения — получение но10 вых производных перимидина, обладающих ценными иммунодепрессивными свойствами.

Поставленная цель достигается способом получения производных 2-арил15

-, 1Н-перимидина общей формулы

HN — R этилоксигруппа, находящаяся в м- или п-положении, или их солей, который заключается в том, что 1,8-диаминонафталин конденсируют с производным общей формулы где Й„имеет указанные значения и занимает указанные поЛожения;

Х вЂ” фтор, хлор, бром или водород, с последующим выделением целевого продукта в виде основания или соли.

Практическое использование иммунодепрессантов разнообразно 2 3.

Иммунодепрессанты могут быть использованы при трансплантации органов, а также в терапии аутоиммунных заболеваний (аутоимиунная гемолитическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, красная волчанка, липоидный гепатит, люпуснефтритис, гломерулонефрит, почечный синдром, синдром Гудпасче, грануломатоз Вегенера, склородерма, болезнь

Сеэари, псориаз, увеит, ревматоидный артрит, язвенный колит, тироидоз и ложный орхит

984409

Соединения формулы 1 могут вводиться перорально либо парентерально, Соединения имеют высокий терапевтический индекс, так что эффективные нетоксичные дозы в каждом случае относятся к широкому диапазону. В за- 5 висимости от испытуемой системы этот диапазон для более активных членов ряда, испытанных на мелких лабораторных животных составляет 1,625 мг/кг в сутки. Дозы других сое- 10 динений ряда больше, вплоть до

100 мг/кг в. сутки и более для мелких млекопитаюших.

Пример 1. Синтез хлоргидра,та 2-(и-трифторметилфенил)-1Н-пери- )5 мидина.

К 500 мл бензола при энергичном перемешивании и комнатной температуре одновременно добавляют раствор

31,64 г (0,20 моль) 1,8-диаминонаф- 20 талина в 500 мл бензола и раствор

20,8 г (0,20 моль).п-трифторметилбензоилхлорида в 500 мл бензола. После перемешивания в течение 30 мин ,отделяют тверцый продукт, который 2-5 растирают с метиловым спиртом, получают 24,6 r целевого продукта (35%), т. пл. 210 С (c разложением); гласс-спектр продукта m/å 312.

Элементный анализ для g

Найдено,Ъ: С 61,75," H 3,59; N 8,02

Cl 10,45, F 16,70.

Вычислено, Ъ: С 61,99; Н 3,47, N 8,03; Cl 10,17, F 16,34 °

Пример 2. Синтез хлоргидрата

2-(м-трифторметилфенил -1H-перимидина.

15,82 r (0,10 моль) 1,8-диаминонафталина и 20,8 r (0,10 моль) м-трифтор, метилбенэоилхлорида обрабатываают в соответствии с методикой примера 1. 40

В результате получают 33,3 r (95,4%) хлоргидрата 2-(м-трифторметилфенил)—

-1Н-пиримидина, т. пл. 280 С (с разложением); масс-спектр m/е 312 °

Элементный анализ для C>H„ N

Вычислено,%: С 61,93; Н 3,47, N 8,03.

Йайдено,Ъ: С 61,68, Н 3,59;

N 8,13.

Пример 3. Синтез фторгидрата 2-(п-трифторметоксифенил)-1Н- перимидина.

В 25 мл толуола растворяют 1,52 г (0,0096 моль) 1,8-диаминонафталина и затем декантируют. Растворяют

2,0 г трифторметоксибенэоилфторида (0,0096 моль) в 25 мл толуола. Оба раствора одновременно приливают к

25 мл толуола. После перемешивания реакционной смеси в течение 4 ч мето-60 дом тонкослойной хроматографии устанавливают, что реакция завершена.

Реакционную смесь фильтруют и продукт — желтое твердое вецество — сушат. Получают 2,72 r (81,4%) вещест- 6$ ва, т. пл. 199 С с раэложениеи масс.-спектр m/е 328 с меньшими пиками при 361, что указывает на следы—

ОСРС1

Элементный анализ для C,

Вычислено, В: С 62,07; П 3,47;

N 8,04; F 21,82.

Йайдено, %: С 61,81, Н 3,58;

N 8,13, F 21,59.

Пример 4. Синтез хлоргидрата 2-(и-трифторглетилтиофенил)-1Н-перимидина.

Следуя методике приглера 3, проводят реакцию 14,59 r (0,092 моль)

1,8-диаминонафталина и 22,2 r ,(0,092 моль) п-трифторметилтиобензоилхлорида. В результате получают

31,86 г продукта (91,0%), т. пл.

276 С (с разло><ением); масс-спектр

m/е 344.

Продукт суспендируют в 500 мл толуола и перемешивают в течение

2 ч, затем отделяют фильтрованием и получают 30,6 г (87,4Ъ) продукта, т. пл. 270 С (с разложением). Затем повторно суспендируют в 750 мл толуола, кипятят в течение 2 ч и отфильтровывают 29,7 г (84,8%) .

Элементный анализ для С,ВНл>С1 ЕЭИф;

Вычислено,Ъ: С 56,77; Н 3,18;

N 7,36.

Найдено,Ъ: С 56,57, Н 3,37, N 7,40.

II p и м е р 5. Синтез хлоргидрата 2-(и-пентафторэтоксифенил)-1Н-перимидина.

Следуя методике примера 3, проводят реакцию 1,04 r (0,00656 моль)

1,8-диаминонафталина и 1,8 г (0,00656 моль) п-пентафторэтоксибен-. зоилхлорида. В результате получают

2,25 г продукта (82,7Ъ), т. пл.

240О С (с раэло>лениегл); масс-спектр

m/е 378.

Элементный анализ для (,Д/1& И О

Вычислено,%: С 55,02; Н 2,92;

N 6,75; F 22,90.

Найдено,В: С 54,82; Н 3,15;

N 6,49; F 23,20.

Пример б. Синтез 2,3-дигидро-2-(и-трифторметилфенил)-1Й-перимидина.

В течение 24 ч кипятят с обратным холодильником смесь 15,,8 г (0,10 моль) 1,8-диаминонафталина и

17,4 r (0,10 моль) п-трифторметилбенэальдегида в 1 л ксилола. Раат воритель упаривают в вакууме,в результате чего получают 37,5 г продукта, который после очистки на силикагеле при элюировании толуолом дает 22,93 r (73%) продукта, т. пл. 119-122О С; масс-спектр m/е

314 °

Элементйый анализ для Н Е М

Вычислено,Ъ: С 68,78; Н 4,17, N 8,91.

984409,Найдено,%: С 68,69; Н 4,40, N 9,11.

Пример ы 7-13. Гемагглютининовая проба у мышей, пероральное введение.

Группе из пяти швейцарских мышей самцов весом около 20 г внутривенно вводили 5 х 10 эритроцитов овец.

Эритроциты для этих инъекций готовили из крови ягнят, (собранной в раствор Алсевера) путем трехкратной промывки 0,85%-ным физиологическим раствором и повторно суспендировали в 0,85%-ном физиологическом растворе.

Девять суточных доз каждого испытуемого соединения, растворенного в полиэтиленгликоле 400, вводили перорально дозами по О, 1 мл, начиная за три дня до инъекции эритроцитов. Применяли несколько доз каждого соединения с двукратным увеличением. Контроль- 20 ная группа мышей получала инъекции эритроцитов и девять суточных доз растворителя вместо лекарства. Через шесть дней после инъекции антигенов у мышей забирали кровь уколом в серд- 25 це и объединяли сыворотку из крови каждой группы машей (по пять мишей).Группы сывороток после инактивации комплемента анализировали на содержание гемагглютинина, используя сме- 30 си последовательного двукратного разбавчения физраствором испытуемой сыворотки 0,5Ъ-ной суспензией эритро .цитов овец, в пластмассовых контейне рах. После выдержки контейнеров в течение 3 ч при 37"С анализировали структуры гемагглютинации. Четырехкратное (75%-ное )или большее уменьшение антител в испытуемой сыворотке па сравнению с контрольной сывороткой считалось значительным. Результаты выражали в виде минимальной эффективной дозы (МЭД) — самой минимальной лекарственной дозы, которая дает 75%-ное или более значительное снижение антител.

Результаты испытания еримидиновых соединений формулы 1 на их способность снижать образование антител приведены в табл. 1. Азатиоприн (ииуран), который ис,пользуется в качестве клинического иммунодепрессанта, имеет МЭД

100 мг/кг 9.

П Р и м е р и 14 — 19. Методика индивидуального анализа сыворотки.

Брали группы мышей из 10 особей.

Мышей забивали, а сыворотку титровали индивидуально..Дпя каждой группы мышей вычисляли среднюю величину гемагглютинина и определяли достоверность (р ),опыта по сравнению с контрольной группой. Самая низкая доза, которая значительно (р 0,05) снижала титр антител, определяла конечную точку. Вещества вводили перо- 65 рально либо подкожно в виде десяти суточных доз, начиная за три дня до инъекции красных кровяных телец.

Вещества суспендировали в физиологическом растворе, содержащем

0,125Ъ метилцеллюлозы и 0,2Ъ неионного эмульгатора..Через семь дней после инъекции эритроцитов определяли антитела (гемагглютинин). В табл. 2 приведены результаты, полученные в опытах на индивидуальных сы" воротках с некоторыми соединениями формулы Т.

Пример и 20 — 2б. Реакция трансплантант-хозяин (ТПХ).

Клетки селезенки родственных мышей (C57Bat ) инъецировали мышам F гибридной линии (C57R M XC3H) Реципиентные мыши не отторгали клеток селезенки, поскольку гибрид признавал

С57В М -родственные антигены его гомозигодного родителя как свои. Инъекцируемые клетки, однако, вызывают реакцию на реципиентную ткань, обусловленную чужеродными СЗН антигенами..Вследствие этого селезенка реципиента становится увеличенной.

Иммунодепрессанты,подавляют или уменьшают это увеличение. Так, взвешивание селезенок дает меру ТПХ реакции и ее уменьшение под действием иммунодепрессантов.

Получали большое количество клеток селезенки без обычно используемого ручного раздражения селезенок, применяя мешалки Горинга с обращенными режущими кромками. Двух периодов (по б с) перемешивания с похлопы ванием селезенок достаточно, чтобы освободить клетки из соединительной .ткани (использовались навески — 25 селезенок мышей С57 В сС в 25 мл

Физиологического раствора). Ткань отфильтровывали через марлю различf ной толщины. Полученные суспензии клеток стандартизовали путем подсчета в камере Леви-Хаузера до содержания нулеклестированных клеток бн 10 в 1 мл. Группам из десяти мышей С 57 В aL СЗН (16-18 г интрапернтонально вводили по 1 ил суспензии донорных клеток. Лечение пероральным либо подкожным введением 0,2 мл начинали за три дня до инъекций клеток и ежедневно продолжали в течение

1-3 сут.,Контрольные животные получали лишь клетки и растворитель.

Извлекали селезенки и взвешивали спустя десять дней после инъекций.

Результаты выражены отношением веса селезенки к весу организма.

Поскольку инъекция С 57 В х С3Н клеток вызывала у реципиентных мышей небольшую спленомегалию, определение весов селезенок использовали для .нахождения 100%-ного подавления ТПХ компонента при расчете процента по984409

10 а б л и ц а 1

МЭД, мг/кг 9

Соединение

Хлоргидрат 2-(п-трифторметилфенил

-1Н-перимидина

6,25

Хлоргидрат 2- (м-трифторметилфенил —

-1Н- перимидина

100

Фторгидрат 2-(и-трифторметоксифенил) -1Н-пери."идина

Менее 100

Хлоргидрат 2-(п-трифторметилтиофенил)—

-1Н-перимидина

Менее 100

Хлоргидрат 2-(и-пентафторэтоксилфенил

-1Н-перимидина

100 давления, достигаемого иммунодепрессантами, Результаты полученные при обработке известными иммунодепрессантами,, приведены в табл. 3.

Однако сингенный и нормальный ,контрольные значения только слегка меняются от опыта к опыту, поэтому в расчетах принята средняя величина (4,8), полученная из данных для четырех отдельных сингенетических контрольных групп (5,20 0,37, 4;99 f 0,39; 4,42 g 0,13 и 4,66

0,12) мышей, по 20 особей в каждой.

Полученные результаты реакции трансплантант-хозяин с соединениями фор 15 мулы I приведены в табл. 4.

Пример 27. Подавление стимулированного артрита у крыс.

Испытан хлоргидрат 2-(и-трифтор- метилфенил)-1Н-перимидин на,способ- 20 ность подавлять у крыс опухоль задней лапы и повреждение костей, вызванное стимулированной эдемой. Чтобы количественно определить подавление опухоли задней лапы, вызванной стимулированным артритом, определяли две стадии воспаления:. а) первично и вторично инъецированная задняя лапа б) вторично неинъецированная зад- З0 няя лала, стадия, которая обычно начинает развиваться примерно спустя девять дней после заражения инъецированной лапы.

Уменьшение воспаления последнего типа есть пркаэатель иммунодепрессивной активности. Для сравнительных оце(нок применяли фенопрофен (30 мг/кг) как стандартное противовоспалительное соединение.

Стимулированный артрит вызывали у мужских особей крыс Льюиса-Вистера (200-210 r) однократной субплантарной инъекцией в правую заднюю лапу (0,1 мл) 0,5%-ной суспензии убитого теплом лиофилизованного Nycobacterium tubercuIosis в минеральном масле.

Группа из пяти крыс (TB-контрольная) получала только это лечение. Другая группа иэ пяти крыс не получала лечения (нормальная контрольная группа) . Каждое испытуемое соединение суспедировали в карбоксиметилцеллюлозе (1Ъ) и вводили крысам (группам из пяти крыс в каждой) в виде суточных пероральных доз 30 мг/кг, начиная со дня инъекции и продолжая в те- чение 17 дней после стимулирующей инъекции (17 доз) . Объем лапы измеряли в ртутном устройстве, применяя датчик давления Статама и вольтметр.

Объем зараженных и незараженных задних лап измеряли на,2, 4, 7, 9, 11, 14, 16 и 18 сутки. После забоя животных на 18-ый день делали рентгеновские снимки. Измерения объема лап у незараженных животных, начиная с

9 и по 18 дней, приведены в табл. 4.

Анализ рентгеновских снимков пока эал отсутствие поражения костей у животных, подвергнутых лечению хлоргидратом. 2-(п-трифторметилфенил)-1Н-перимидина, в то время как такое повреждение было очень заметным для

ТВ-контрольной группы.

984409

Таблица 2

Схема

Соединение

Менее 1,6

Менее 1,6

Хлоргидрат 2-(п-трифторметилфенил—

1Н-перимидин

Перорально

Подкожно фторгидрат 2-(и-трифторметоксифенил) -1Н-перимидин

12,5

Перорально

Хлоргидрат 2-(и-трифторметилтиофеннл) -1Н-перимидин

Перорально

Таблица 3

Мг селезенки/г веса организма + SE+

Лечение с помощьи известного соединения

Процент подавления (1-{б-Метокси-2-бензотиазолил)-З-фенилмочевина, 12,5 Мг/кг w 13 (перорально) 74

100

П р и м е ч а н и я: средние значения для группы из пяти мышей;

ТПХ контрольные-обработанные; TIIX контрольные—

5уП .контрольные (процент подавления рс 0,01, сравнительно с ТПХ .контрольными);

Ваап — сингенные.

Таблица 4 нт пония, п.Х

Хлоргидрат 2-{и-трифторметилфенил) -1H-перимидин (перорально) 4,75 0,42

6,62+1,17

101

12,5

5,67+0,51

4 96+0 31

6,2

3,1

5,66+0,33

8,64 1,10

1,6

Контрольная — ТПХ контрольные-обработанные к xu.i = процент подавления, ТПХ контрольные - пконтрольные, в †р С 0,001; с-р c 0,005, д -p < 0,01; е — р с 0,05.

Примечания: а

Нет(ТЧХ контрольные)

Нет 59п контрольные)

Нет (нормальные контрольные) 6,86 + 0,80

11,55 + 0,01

5,20 + 0,37

4,16 + 0,17

Конечная: доза

{р + 0,05) мг/кгпв 10

I

1 ! 1, (1 ((((() 1

0 (С Х (OeI

I й(1

-(I

1 .!

Ch LO I

Ю

Ю

»-l

1

I

I

I (»

I о

ГЧ

ГЧ с

+!

СО с

Г 1

СО

ГЧ

» 1 с

Ю

+I

Ю

Р(lA (7l с

Ю

+!

%-»

C) с (с(01 м с

Ю

+I м

СГ( с

ГЧ

1 ! Ж

1 (С

I (»

1 и

I СО

c— - I

I

1 1

I

1

1 Х

I Е»

1 ъ о

i (Ф !

»-»

I

— I

1

1 Ж

1 Х

ГЧ

Ю

ГЧ с

C)

+l

lA

ГЧ с м

СО

СГ>

Ю с

Ю н

lA

»» с

ГЧ (Ю

»-»

C)

+1 (I

ГЧ м м

ГЧ с

+1 м с

ГЧ

1 м

lA

C)

Ю

+I

CO

C) с

ГЧ

01

О1

Ю с

Ю .+!

СО м с

СЧ

СО

»:Р ( с

C)

+1 м г» с

СЧ 1

I !

Ch (1

Ю 1 с

Ю I

+1

lA с

СО

Ю

%»

Ю

+1

CB

СО с

ГЧ ( м

Ю с

Ю

+l

ГЧ

Ю с

ГЧ

СО

Ю с

C)

-н м

» » с

ГЧ (Ю с

Ю

+1

%-»

» (ГЧ ж х й(Ц о

И м

LD

C) с

Ю

+1

О\

Ch с

»»

CO

Р(Ю с

Ю

+ сУ

Ch

% м

Г 1

Ю

Ю

+! (О1

%-»

СО

Ю с

+I м

О с (»-»

1

I Ж х

1 &< I

:с I

I U

1»h

1- х ((f

ы о а (d

Х

1.» о (6 (С а Г((»0 (d Z

O 1 ж л

Ы (d х

Ф

Ц о

1- х о

Ш -» х

Э е о а

И о

0) 9

I

1 !

I

° »

И

1 (-, Х

g ж

fd

I

1 4

1 (((0

3. (.» ах ос х ы

984409

Ц

Ж 1 х

Э

& I

Ж 1 (»

Э

Е х

О» Ж о (=( аа

Ф I ! (»

1 х

»-»

ГЧ о х х о х о

Фч о х

Ж д

0 Е

О 0, х о х

S X

Р (((l0 ф о о о

I а х;

»О 2 о х ц о о и й

v x а о

Х !

9 ((! (:, Еч

И Е о о 984409

Формула изобретения

ИЫ вЂ” R

О

Составитель A. Орлов

Техред A.Âàáèíåö КорректорВ. Прохненко.

Редактор Г. Везвершенко

Заказ 9969/78 Тираж 445 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проейтная, 4

Способ получения производных

2-арил-1Н-перимидина общей формулы ! I 4 т R3P Я 4 л

И> . г Б

I I

Э

Й4 -трифторметильная, трифторметил- окси -, трифторметилтио- или пентафтор 29 этилоксигруппа, находящаяся в мили И -положении, или их солей; о т л и ч а ю щ и и с я тем, что 1,8-диаминонафталин конденсируют с производным общей формулы Р ф> где К имеет указанные значения и занимает указанные положения;

Х вЂ” фтор, хлор, бром или водород, с последующим выделением целевого продукта в виде основания или соли.

Приоритет по признакам

19.12.77 при К, -и- или м-трифторметильная группа, Х имеет указанные ,значения.

21.09.78 при R< -п- или м-трифторметилокси, п- или м-трифторметилтиоили п- или м-пентафторэтилоксигруппа.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент США Р 3528981, кл. 260-2564, опублик. 1970.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., "Медицина", 1978.