Способ диагностики флегмоны

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ФЛЕГМОНЫ путем опредвпеяня акти&ности ферментов лейко1што| первфернческой крови, отличаю твйся т&л, что, с целью повышение точности 1и ускорения способа, в лейкошггах определ51ют активность &осстансжлекно« го кикатинамндш1ениндинуклеотядв: фер роцианид оксшоредуктазы и при сяиж НИИ ее активности диагноствцируют флегмону. «ttn

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„„1005775

3(50 А 61 В 10

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3316180/28-13 (22) 16.07.81 (46) 23.03.83. Бюл. № 11 (72) С. С. Ковер, К). И. Бернадский, H. С. Коваль, 3. Т. Радловская и В. В. Федуров. (71) Киевский государственный медицинский институт им. акад. А. А. Богомольца (53) 616.002.36 (088.8) . (56) 1. Есимов А. Ж. Особенности клинического течения воспалительных процессов челюстно-лицевой области в пожилом и старческом возрасте.—

Здравоохранение Казахстана, 1977, ¹ 3, с. 70-80.

2. Авакимян М. А. и Киселев В. А.

Активность щелочной фосфатазы нейч рофильных лейкоцитов у больных в клинике хирургической стоматологии.

Стоматология, 1977, ¹ 44, с. 85-86 (прототнп), (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ

ФПЕГМОНЫ путем определения актив» ности ферментов лейкоцитов перифери ческой крови, о т л и ч а ю ш и и с я тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, в лейкощ тах определяют активность восстановленно го никотинамидадениндинуклеотида: фер роцианид оксидоредуктазы и цри сниже нии ее активности диагностицнруют флегмону.

1 10

Изобретение о носится к медицине, в частности хирургии, а также клини ческой биохимий и может быть использовано для диагностики флегмон.

Известен способ диагностики фле .моны на основании клиниколабораторных исследований крови (lg .

Однако этот способ не всегда доста- точно информативный, так как харак.тер течения флегмон изменчив, в част ности появляются атипнчные воспалительные йроцессы со склонностью к рецидивам и тяжелым сложнениям при мало измененной картине крови. Измене ния в крови лишь совместно с другими симптомами могут являться признаками воспитальных изменений. !

Известен также способ диагностики флегмоны путем определейия активности ферментов лейкоцитов периферичеокой крови. $2) .

Недостатками известного способа являются длительность (22-24 ч) -и недостаточная токсичность.

Целью изобретения является повышение точности и ускорение способа.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу диагностики флегмоны путем определения активности ферментов лейкоцитов периферической крови в лейкоцитах определяют активность восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (НАДН): ферроцианид оксиредуктазы и при снижении ее активнооти диагностируют флегмону.

Способ осуществляют следующим образом.

Из вены берут 10 мл. крови и выливают в пробирку с 2,5 мл 3%ного раствора этилендиаминтетраацетата натрия. Пробирку устанавливают под ут лом 30 к вертикальной плоскости на

45 мин при 20 С. Затем отбирают верхний плазменный слой, содержащий лейKollHTbI Последний центрифугируют при

800 об/мин в течение 5 мин. Недостадочную жидкость сливают., а осадок лейкоцитов суспендируют в 3 мл 0,25 М раствора сахарозы на 0,05 М трис-HCR буфере, рН 7,5. Подсчет лейкоцитов ведут в камере Горяева. Суспензию

05775 2 лейкоцитов гомогенизируют в течение

3 мин в стеклянном гомогенизаторе, - помещенном в ледяную баню» Затем определяют активность HAQH: ферроциацид оксидоредуктазы спектрофотометрнчески при 30 С. Реакш онная смесь состоит из 0,167 М сахарозы, 0,05 М трио-НС6 буфера, рН 7,5,0,0017 М цианистого калия, 0,00025 М восстановленного

to никотинамидадениндинуклеотида (НАДН), 0,001 М ферроцианнда калия и 0,3 мл лейкоцитарного гомогената в конечном объеме 3 мл. Реакцию начинают прибавлением ферроцианида калия. Активность .5 фермента выражают количество наномолей ферроцйанида калия, восстановленного субстратом, (НАДН) за 1 мин на 10 лейкоцитов. Миллимолярный коэффициент экстринкцни для ферроциа20 нида калия K>(fg(. СЙ) ) при восстановлении его в ферроцианид калия

, (ГЕ(СЯЦ при 420 нм составляет 1,03.

У здоровых людей активность НАДН: ./ ферропианид. оксидорекдуктазы состав25 ляет 335 + 39 (М Zen) нмоль/мнн/10 лейкоцитов.

На основании обследования больных выявлены флегмоны легкой, средней и тяжелей формы. Активность НАДН:

30 ферроцнанид оксидоредуктазы в лейкоцитах этих больных соответственно составляла 195 + 15, 143 + 4 или

57 + 11 нмоль/мин/10 лейкоцитов.

Установлено, что чем тяжелее состояние 60J1T HOI о, тем ниже активность фермента. Различия между активностью фермента у больных всех трех форм флегмон достоверны (р (0,01).

Предлагаемый способ повышает

40 точности к агностики, а также сокращает время диагностики в 12 раз.

Высокая точность диагностики обуолавлнвается тем, что результаты иссле довання цифровые,, фиксируются спекв 5 рофотометрически с точностью до 0,005 ед. оптической ппотности. Объективность оценки ферментативной активности лейкоцитов увеличивается еще и потому, что в реакционной среде находятся тыЮ сячи лейкоцитов.

Составитель В. Мозжечков

Редактор Н. Джуган Техред Е,баритончик" Корректор И. Шулла

Заказ 1969/6 Тираж 711 Подписное

ВНИИПИ. Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, ул. г. Ужгород, ул. Проектная, 4