Способ получения антительного чумного диагностикума
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИА ЛИСТ ИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК (М9) (11) (1), A 6! K 33i395
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н А ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
1 (21) 32" 0116/13 (22) 19, .11. 80 (46) 15.06.92. Бюл. " 22 (71) Ростовский-на-Лону государственный научно-исследовательский противочумный институт (72) B.Н. Иилютин, А.Р. Наркевич, .
С.И. Рассудов, F..В. Безуглова, А.П. Кочеткова, В .8 Дервоед и B„.А. Козлова (53)Ь6!6.07(088.8) (56) Вмутер И.A., Басова Н.Н., Канатов 6.8. и Меньшов П.И.
Чумной эритроцитарный диагности.кум. Иетод производственного изготовления и определения годности препарата. В сб.: Материалы VI научной конференции противочумных учреждений
Средней Азии и Казахстана, вып. 1, Алма-Ата, 1969, с. 135-136Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к серологическим методам лабораторной диагностики чумы.
Известен способ получения антитель" ного чумного диагностикума путем предварительной обработки носителя с последующей сенсибилизацией носителя иммунным гамма-глобулином и отмыванием целевого продукта.
Однако риагностикум, полученный известным способом, недостаточно стабилен.
Целью изобретения является повышение стабильности целевого продукта.
2 (54} (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛЬНОГО ЧУМНОГО ЛИАГНОСТИКУИА путем. предварительной обработки носителя с .последующей сенсибилизацией носителя.иммунным гамма-глобулином и отмыванием целевого продукта, о т л и ч а ю -. шийся тем, что., с целью повышения стабильностй целевого продукта, а ка" честве носителя используют частицы карбоксильного катионита размером . 2-5 мкм, при этом предварительную обработку проводят альбумином в соотношении 4 и. катионита и 1: ч. альбумина, денатурируют в смеси спирт-вода (Зт.1) в течение 5+0,1 .мин при 75+0,1 С, а.. затем .обрабатывают 25+-ным глутаровым диальдегидом при рН 8,0+0,1.
О
Цель достигается тем что при.осу"
Э ° веют ществлении способа получения антитель" ного чумного диагностикума .путем пред-, © варительной обработки носителя с лос-:, " ледующей сенсибилизацией носителя .им- © мунным гамма-глобулином и отмыванием целевого продукта отличительной особенностью является то, .что в качестве ъ носителя используют частицы карбоксильного катионита размером 2-5 мкм, при этом предварительную обработку проводят альбумином в соотношении
4 ч. катионита и 1 ч. альбумина, денатурируют в смеси спирт-вора (3: 1) в течение 5+0, 1 мин при 75+0,lo С, а
Корректор М.Ткач Pэдактор Y. Иарганова
Техред И.Иоргентал
Заказ 2810
Тираж
Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета до изобретениям и открытиям прн ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Проиэводственно-нэдательскнй комбинат "Патент". г.Ужгород, ул. Гагарина, 101
l 102103" затем обрабатывают 25%-ным глутаровым ческом перемешивании, затем 18 ч при диал ьде гидом при рН 8, 0+0, 1. ч С, центрифугируют, отмывают 3 раза
Пример 1, Частицы смолы 5 мл Физиологического раствора. Осадок
KPK-0n размером 2-5 мкм в количестве l 5 сенсибилизированного носителя суопен100 мг суспендируют в 2 мл 1М раствора дируют в 5 мл Физиологического раствоедкого натра 1.ч, затем центрифугируют, ра и эту взвесь используют для серолоа осадок отмывают последовательно гической реакции.
2 мл дистиллированной воды, 2 раза Пример 2. Методику выполняют, 2 мл 1М раствора соляной кислоты и 10 как в примере 1, только заменяют яичдалее дистиллированной водой до нейт- ный альбумин тем же количеством молочральной реакции супернатанта. Осадок ного альбумина. суспендируют в 0,5 мл воды и при пере- . Пример 3. Методику выполняют, мешивании добавляют к нему раствор как в примере 1, только заменяют яич25 мг яичного альбумина в 1 мл дис- 15 ный альбумин тем же количеством сывотиллированной воды. Смесь перемешивают роточного альбумина. Предлагаемый
18 ч при комнатной температуре,центри- способ обеспечивает получение диагносФугируют, осадок отмывают 3 раза 2 мл тикума с высокой стабильностью, котодистиллированной воды, суспендируют рый позволяет выявлять с большой чув-,0,05 мл воды и к суспензии добавляют 20 ствительностью в объемной реакции по
1,5 мл этилового спирта. Смесь пере- типу РИГА как типичные штаммы возбудимешивают при комнатной температуре Теля чумы, выращенные при 28 и 37 С, 30 мин, затем 5 мин при 75 С. Охлаж" так и дефектные по одному или более денную смесь центрифугируют, осадок антигенам. Диагностикум специфичен, отмывают 2 раза 2 мл дистиллированной 2 перекрестных реакций с гетерологичныводы и 3 раза 2 мл 0,2И фосфатного ми штаммами (возбудитель псевдотубербУфеРа (РН 8,0) и вновь суспендиРУют кулеза и кишечно-тифозное семейство в 2 мл этого бУфеРа. К полУченной взве- бактерий) Не, дает си при первмешивании добавляют в 0,05 l реакцию можно ставить в среде Физи25+-ного РаствоРа глутарового Лиальде- 3 ологического раствора, не содержащего гида, пеРемешивают еще 30 мин при ком- нормальной кроличьей сыворотки. натной температуре, центрифугируют и Активность диагностикума с полноосадок, отмывают 3 мл 0,2 И Фосфатного ценным вакуумным штаммом выращенным о
У бУфеРа (РН 8,0). Осадок суспендируют при 2Я. С, находилась в пределах в растворе 10 мг"чумного иммуноглобу 35 50 тыс. м.к . в мл, а с культурой, лина в 1 мл 0,2 И фосфатного бУйеРа . выращенной при 37"С, в пределах (РН 8 О) . Смесь выдерживают при ком- 25 тыс.м.к. в мл. натной температуре 30 мин при периоди
