Способ определения содержания азота в биологических материалах

 

1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛШИЯ СОДЕРЖАНИЯ АЗОТА В БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛАХ , предусматривающий минерализацию навески материала серной кислотой и перекисью водорода , введение смеси реактивов для проведения , цветной реакции, содержащей нитропруссид натрия, колориметрирование и количественное определение азота, отличающийс я тем, что, с целью ускорения процесса, при минерализации одаовременно с серной кислотой и перекисью водорода используют сульфат калия, а для проведения цветной реакции в смесь дополнительно вводят щелочной раствор салицилата натрия с сегпетовой солью и пшохлорит натрия. 2.Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что количественное соотношение материала , серной кислоты, перекнси водорода и сульфата калия составляет 1:20:10:2. 3.Способ по п. 1, отличающийся тем, что количественное соотношение мииерализата , щелочного раствора салицилата натрия с сегаетовой солью и нитропруссидом натрия, также гипохлорита натрия составляет 0,5:47: :2.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН..SU„„1026053 А

У15Р G 01 и 33 12

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВЩ ЕТЕЛЬСТВУ с

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3412151/28-13 (22) 17.03.82 (46) 30.06.83. Бюл. Р 24 (72) Г. Л. Солнцева, P. И. Хламова, Э. С. Олейникова, И. И. Афанасьева и О. В. Храпункова (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт мясной промышленности (53) 637.523 (088.8) . (56) 1. Балаховский С. Д. и др. Методы химического анализа крови. Медгиз, 1953, с. 320321.

2. Авторское свидетельство СССР N 798590, кл. 6 01 и 33/12, 1979. (54) (57) 1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ АЗОТА В БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛАХ, предусматривающий минерализацию навески материала серной кислотой и перекисью водорода, введение смеси реактивов для проведения цветной реакции, содержащей нитропруссид натрия, колориметрирование и количествен-., ное определение азота, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения процесса, при минерализации одновременно с серной кислотой и перекисью водорода используют сульфат калия, а для проведения цветной реакции в смесь дополнительно вводят щелочной раствор салицилата натрия с сегпетовой солью и гипохлорит натрия.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а" ю шийся тем, что количественное соотношение материала, серной кислоты, перекиси водорода и сульфата калия составляет 1:20:10:2.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что количественное соотношение минерали-I зата, щелочного раствора салицилата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия, а также гипохлорита натрия составляет 0,5:47:

:2,5.

1026053

Изобретение относится к способам определе. ния содержания азота в мясопродуктах и может быть использовано при контроле качества готовых продуктов в мясной промышленности и потребкооперации. 5

Известен способ определения азота в крови, предусматривающий фенолгипохлоритный метод колориметрического определения малых количеств аммиака (1j.

Этот способ определения содержания азота 10 является длительным (процесс минерализации составляет около 7 ч) и трудоемким вследствие использования специального оборудования для перегонки аммиака.

Известен также способ определения содержа- 15 ния азота в биологических материалах, предусматривающий минерализацию навески материала серной кислотой и перекисью водорода, вве,дение смеси реактивов для проведения цветной реакции, содержащей нитропруссид натрия, 20 колоримегрирование и количественное определение азота (2), Однако известный способ определения содержания азота также является длительным (продолжительность 2,6 ч).

Цель изобретения — ускорение процесса.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения содержания азота в биологических материалах, предусматривающему минерализацию навески материала серной

30 кислотой и перекисью водорода, введение смеси реактивов для проведения цветной реакции, содержащей нитропруссид натрия, колориметрирование и количественное определение азота, при минерализации одновременно с серной кислотой и перекисью водорода используют суль- 35 фат калия, а для проведения цветной реакции

I в смесь дополнительно вводят щелочной раствор салицилата натрия с сегнетовой солью и гипохлорит натрия.

При этом коЛичественное соотношение материала, серной кислоты„перекиси водорода и сульфата калия составляет 1:20:10:2.

Кроме того, количественное соотношение минерализата, щелочного раствора салицилата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия, а также гипохлорита натрия составля ет 0,5:47:2,5.

Длительность предлагаемого способа 2 ч.

Пример.. Навеску мясопродукта в количестве 0,5 г переносят в колбу Кьельдаля, приливают 10 мл концентрированной серной кислоты, добавляют l г сульфата калия и минерализуют при температуре кипения, периодически добавляя 30%-ную перекись водорода в количестве не более 5 мл. Процесс минерализации заканчивается после того, как минерализат станет совершенно бесцветным и прозрач- ным, и составляет в среднем 1 ч, После охлаждения минерализат переносят в мерную колбу на 250 мл и разбавляют дистиллированной водой, доводя объем до метки.

В стакан или плоскодонную колбу емкостью

100 мл вносят 0,5 мл разбавленного минерализата, затем добавляют 47 мл реактива, для приготовления которого смешивают 50 мл ще-лочного раствора салицилата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия при рН < 12,6, постепенно добавляя дистиллированную воду в количестве 410 мл и 20 мл 2 н, гидроокиси натрия.

Затем приливают 2,5 мл реактива, содержащего гипохлорит натрия 0,125 o-ной концентрации, и перемешивают содержимое колбы.

Максимум интенсивности окраски достигается через 30 мин, после чего измеряют оптическую плотность на спектрофотометре СФ вЂ” 4А при длине волны 655 нм или на фотозлектроколориметре ФЭК-56М (красный светофильтр

N 9), Измерения проводят против воды в кювете прибора.

Контрольный раствор готовят одновременно с опытным, заменяя минерализат соответствующим количеством воды.

Стабильность окраски цветных растворов сохраняется в течение 2 ч.

Концентрацию азота находят по калибровочному графику согласно величине оптической плотности концентрации испытуемого раствора.

Для построения калибровочного графика исп зльзуют стандартный раствор сернокислого аммония, в 1 мл которого содержится 0,1 мг азота.

Расчет производят- по формуле с ° 250 х = — -10 —.— е — — 100 (%), При получении смеси реактивов для проведе-50 ния цветной реакции используют раствор гипохлорита натрия, а нитропруссид натрия смешивают с щелочным раствором салицилата натрия и сегнетовой соли, при этом количественное соотношение раствора минерализата, щелочного раствора салицилата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия и раствора гипохлорита натрия составляет 0,5:47:2,5. где х — количество азота в исследуемой пробе, %; — — — концентрация азота, найденная по с

100 калибровочному графику в соответствии с полученной оптической плотностью (мг нз 100 мл);

250 — объем минералиэата после первого разведения, мл;

1026053

Составитель И. Кутукова

Техред Т.Маточка

Корректор С. Шекмар

Редактор А. Курах

Заказ 4550/ 36 Тираж 873

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

rio делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Подни снос

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3. е — навеска пробы, r;

100 — множитель для перевода в проценты.

Длительность предлагаемого способа определения содержания азота в биологических мате риалах составляет 2 ч.

Использование предлагаемого способа позволяет сократить время определения содержания азота с 2,6 до 2 ч, т.е. приблизительно в

0,8 раза, а также повьппает безопасность работы.