Способ определения ингибирующих свойств плазмы крови

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНГИБИРУЩИХ СВОЙСТВ ПЛАЗМЫ КРОВИ путем предварительной подготовки мыией, введения им исследуемой плазмы крови и подсчета ретикулоцитов, о т л ичающийСЯ тем, что, с целью сокращения сроков, упрощения и удешевления способа, предварительная подготовка мыгаей осуществляется путем кровопускания в объеме 2-2,5% /от веса тела. сл

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (П) А

)(51) С 01 и 33/48 с йи,ц ю

ЗОБРЕТЕНИЯ .

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21 ) 3462780/28-13 (22) 02.07.82 (46) 23.10.83. Бюл.939 (72) Л.С. Горожанин и Л.A. Полумискова (71) Ивановский государственный медицинский институт им. A.Ñ. Бубнова (53) 612.119:612.112.12(088.8) (56) 1.Терегулов Р,Г.,Гизатуллин A.Ã.

Иванченко В.И., Лехмус В.И., Халитова Г.Г. Роль почечного и сывороточного факторов в механизмах стииуляции и ингибиции .эритропоэза.-В кн. ."Проблемы патофизиологии эритропоэза и циркуляции крови", Рязань, 1978, с.30-33.

2. Гудим В.Й., Москалева Г.П. Ингибитор эритропозза в условиях экспериментальной посттрансфузионной полици темии у крыс. — "Патологическая физиология и экспериментальная терапия", 1976, Р 2, с.47-51.

ОПИСАНИЕ И (54 ) (57 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНГИБИРУЮЩИХ СВОЙСТВ ПЛАЗМЫ КРОВИ путем предварительной подготовки мыаей, введения им исследуемой плазмы крови и подсчета ретикулоцитов, о т л ич а ю шийся тем, что,. с целью сокращения сроков, упрощения и удешевления способа, предварительная подготовка мышей осуществляется путем кровопускания в объеме 2-2,5% от веса тела.

1049811

ВНИИПИ Заказ 8407/41 Тираж 873 Подписное

° »

Филиал ППП "Патент", г.ужгород,ул.Проектная,4

Изобретение относится к физиологии, к проблеме гуморальной регуляции кроветворения, а именно к способам определения ингнбирующих свойств плазмы крови.

Известен способ определения ингибирующих свойств плазмы крови на мышах с фенилгидразиноной анемией. Ин- гибирующие свойства плазмы крови выявляются во всех случаях, снижение количества ретикулоцитов состав- 10 ляет в среднем 10,4 3,1% (1) .

Однако в организм животного вводится фенилгидразин, являющийся сильным ядом, оказывающим общее токсическое действие, и способным вызы- . вать дегенеративные изменения в органах, имеющих важное. значение в регуляции эритропоэза: печени, селезенке, почках, мозгу. Этим можно объяснить низкую чувствительность способа.2О

Наиболее близким к изобретению является способ определения ингибирующих свойств плазмы крови, no icoторому на модели постгипоксических полицитемических мышей после введения эритропоэтина производится под2 счет ретикулоцнтов.

Способ осуществляют следующим рбразом. Забирают кровь у животных с полицитемией и готовят плазму. Содержат мышей в барокамере пониженного давления в течение 14 « ней по

8 ч ежедневно, затем вводят мышам стандарт зратропоэтина и исследуют плазму крови в дозе 0,5 мл дважды два дня подряд, готовят мазки пе- З5 риферической крови и производят подсчет. ретикулоцитов f2) .

Недостатками способа являются сложность предварительной подготовки мышей (содержание в барокамере 49 в течение 14 дней по 8 ч ежедневно). и большой дополнительный расход животных, в результате их гибели или непригодности для последующего использования(по данным расход равен 45 в среднем 30%). Кроме того, для осуществления способа необходим эритропоэтин, получение которого отличается большой сложностью, осуществляется лишь опытным путем. До- gp роговизна эритропоэтина и большая сложность получения делают недоступным использование "стандарта" эритропоэтина, а в случаях его использования приводят к трудно сопоставимым результатам. Способ позволяет . получить результаты от введения 1 мл испытуемого материала лишь через

16 дней;

Целью изобретения является сокращение сроков, упрощение и удешевле.ние способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения ингибируюших свойств плазмы крови путем предварительной подготовки ьышей, введения им исследуемой плаз-. мы крови и подсчета ретикулоцидов, предварительная подготовка мышей осуществляется путем кровопускания в объеме 2-2,5% от веса тела. с . Предлагаемый способ выполняется следующим образом. у мыши - самца осуществляется забор крови иэ хвостовой вены, приготовление мазков периферической крови из хвостовой вены, приготовление мазков периферйческой крови, подсчет ретикулоцитов, Количество ретикулоцитов до воздействия 20%. Определяется масса тела путем взвешивания, рассчитывается объем кровопотери из условия 2-2,5% от массы тела, вызывается кровопотеря путем забора крови из хвостовой .вены. Через 5 дней после кровопотери осуществляется забор крови из хвостовой вены, приготовление мазков периферической крови, подсчет ретикулоцитов. Количество ретикулоцитов 49%. Это количество принимается за исходный фон. В пятый и шестой день после ировопотери мыши вводится подкожно по 0,5 мл исследуемой плазмы, проводится забор-крови из хвостовой вены, приготовление мазков периферической крови, подсчет ретикулоцитов. Количество ретикулоцитов у мыши снижается до 34% (исходный фон 49%). Таким образом, конечный результат можно получить через 7 дней.

По данным известного способа количество ретикулоцитов крови полицитемических постгипоксических мьиаей после введения посттрансфузионной сыворотки снижается на 34%, а по предлагаемому способу количество ретикулоцитов крови у них после введения посттрансфуэионной сыворотки снижается на 19,79+1,86%, что составляет 49%.

Таким образом, использование предлагаемого способа определения ингибирующих свойств плазмы крови на мышах с кровопотерей позволяет сокра тить сроки получения конечного результата бодее, чем в 2 раза, упростить способ при сохранении достаточно высокой его чувствительности, позволяет значительно удешевить проведение исследования. Для осуществления способа не требуется специальных средств, он может быть выполнен в любой физиологической лаборатории.