Средство для изучения состояния иммунной системы на экспериментальных моделях

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН у !) А 6! K 35,)56

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ:, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3239923, 28-13 (22) 28.! 1.80 (46) !5.0!.84. В.ол. ¹ 2 (72} Г. А. Ермолин, А. М. Седов, С. Г. Батраков, В. А. Внуков, В. В. Сергеев и С. И. Елкина (71) Центр".ëüuûé ордена Ленина Институт усовершенствования врачей и Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова (53) 615.7 (088.8) (56) 1. ВА|ЬЙААК13 К. Аг11 fur die

gesanite Virusiorschung, !974, 44, 243-254.

2. Авторское свидетельство по заявке Ъ 2869930 28-13, кл. А 61 К 35)56, 1979.

ÄÄSUÄÄ 1066602 А (54) СРЕДСТВО Д. )Я ИЗУЧЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЪ1 НА

ЭКСПЕРИМЕНТА;1ЬНЫХ МОДЕЛЯХ (57) Применение тритерпеновы гликозидов в качестве средства для изучения состояния иммунной системы на эксперимента л ьн ыл и одел я .

Изобретение относизся к эксперименталь«ой медицине и может быть использовано для изучения состояния иммунной системы на экспериментальных моделях.

Известно применение комплекса сапонинов, выделенного из коры дерева (,)п!1Iaja saponaria М01!пе в качестве адъюванта при вакцинации крупного рогатого скота против ящура (1).

Однако препарату свойственны высокая токсичность и нежелательное побочное действие (пирогенный и гемолитический эффекты) . Кроме того, источник получения комплекса малодоступен.

Известно также применение тритерпеновых гликозидов, полученных из животного сырья, в качестве средства, обладающего 1з цитостатическим действием (2).

Целью изобретения является увеличение иммуностимулирук>щей активности и уменьшение нежелательного побочного действия препаратов, предназначенных для изуче20 ния состояния иммуннои системы на экспериментальных моделях.

Эта цель достигается применением триГерпеновых гликозидов в качестве средства для изучения состояния иммуной системы на экс пери ме итал bHblx м одел ях. 25

Комплекс тритерпеновых гликозидов представляет собой бесцветное или слегка желтоватое кристаллическое вещество с т.нл. 223-226 С, (()1) 21-67" (вода; с 0,6), хорошо растворимое в воде, теплом (45-50 (..) метаноле и пиридине, кипящем 90Р/o-Hoм з0 этаноле. ИК-спектр (KB!, 0„а„, см.1 ); 3440, 2922, 2878, 1742. 1455, 1379, 1266, 1213, 1159 1071, 1047, 987, 941, 892. Доминирующий ком«о«е«т комплекса (65Р/р от общей массы смеси) при тонкослойной хроматогра())lIH на силикагеле 60 (фирма «Мегс)(», ФРГ, Al t .1м 5715) имеет Rf 0,4 и 0,5 в системах: н-бутанол, насыщенный водой, — метанол ("):1) и изопропанол — — вода -- концентрированный водный аммиак (7:2:1) соответственно, Комплекс получа!от из кожнох!ыц!ечного мешка дальневосточной морской кубышки

Cllcum3 I !(1 13ponlca, котОрь Й измельчают, лиофильно высушивают, дважды экстрагируют пиридином, экстрагированные вещества распределяют в двухфазной системс, 4S образующейся при встряхивании смеси хлороформ — метанол — вода (10:5:3, указывается об ьемное соотношение растворителей), верхнюю фазу у.паривают, из остатка метанолом извлекают «сырые гликозиды», последние очищают перекристаллизацией из метанола. Очищенный комплекс тритерпеновых гликозидов представляет собой смесь семи гликозидов, свободную от ор1066602 ганических веществ иной природы и содержащую не более 2 /р неорганических солей.

Состав комплекса сохраняется постоянным и не зависит от масштабов его производства и времени сбора сырья.

Применяют средство в качестве иммуностимулятора на экспериментальной модели сальмонеллеза, вызываемого 531Г)1опе113

typhimuI ium.

Мышам-гибридам первого поколения

Fl (СВАХ C57BL6) подкожно вводят комплексный антиген (вакцину) Salmone! la typhimurium, получаемый в результате обработки живой культуры клеток гидроксиламином. Одновременно внутрибрюшинно вводят комплекс, тритерпеновых гликозидов.

На 13-й день всех животных заражают высоковирулснтной культурой Ьаl(ïoïol;à I.)р

himuriuIn штам Р/р 415 д0зе 103 -,-,икробиых клеток на мышь. Число погибших животных отмечают в течение 30 дн. В группе невакцинированных животных набл юдается

1000/р-ная гибель. В гру«nclx х!ы0!(-.- 1, K( торым было введено 20, 2,Г1 и 0,2, (I вакци«ы на животное, Выживгн-.м(н ть Оставляет соотвеTcTBBH«o 100, 50-60 и 20-30", У животных, которым, кроме Вякни.:ы !0,2 мк! на мышь), вводят комплекс тр Tpl)«0HoBblx Гликозидов В,д озах 0,04-41> мышь, наблюдается 00,,--Has; Выживаемость. Такой же рсзульт .:,. «абл>ода.о- В

Гoуппах животных, ксг! 01)ым н«(,1ггi1, 1:л! > 0 комплекс тритерпеновых !.л,I:i;:)3« ), :.: ..;Озе

40 мкг на lib!«11

Тритерпсновыс Гл и к(гзи „:ь.:,+::! «0!-«010

IЦ) ОИ СXO)1(ДЕН И Я ОГ)Л ЯДЯ К>; 0 1 1()ТЛ i H, ;.!. ; 33;—

ЖСННЫМ ИММУHACTH»IX 1«P 10!1!!! С Д! :1>Г"ГЗ«(. !.

За счет Новь!:Г!ен:!я эффск-"ив«ости:рс-:, Taa пpOTEêòиВ«яя доза Бя пины >, "(Hb!i>а Г 3

100 ра.>, B р(зульт;!! чс:. 0 резко .)г))аi«l«!*вается возможность се «обо i«о:О,. (йствия при сохранении иммуногс«1!Ос-, и; В .100 и более раз сокра)цастся н(прсбн >с!ь В Вакцине для ла(юраторных и;-пьг! н::,и!з! («3«ример для получения гипсримiaунн-!. ";:::0:;:ТОК) — BCP. 3TO В КОНСЧНОМ i:TO! C !!Р)11<0.:1И i К значительному снижению ра(уходов )!3:. рои>ВojcTВО Вякци ны. OTсу1 стане т0кси i« . :. i.: и нежелательного побочного,l< Йств!!н, дннНОГО СрСДСТВЯ В 3КТН BHÛX К )Н ц(. . ;; p 3 «ННХ дает возможность проводи. ь .I.)и(езьные

ЭКСПЕРИМЕНТЬ1, 3 ТЯКЖЕ ИС>!О !ЬЗОВЯТ! .- (И1 0 кий диапазон методов оценки cocT(.. 1«р r . и:.1М)ННОЙ СИСТСУIЫ ЖИВОТ:(ЫХ «3 Э) (. IСГ!!Мсi!ТЯЛЬНЫХ HH(Pe«KIJ HO««blX МОДС)ЯХ. .>СT(Лность сырья и простота пол (ения прсдла)3емого средства значи гельно L -.(I:! 0)11яют егo Ilo сравнению с известным средством. а также другими препаратами тoão же назначения.

ВНИИПИ Заказ 10725/7 Тираж б93 11одпиеное

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород. ул. Проектная, 4