Способ диагностики бесплодия

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БЕСПЛОДИЯ , включающий определение подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала , шейки матки женщины, отличающийся тем, что, с целью повьщ1ения точности диагностики инфекционного бесплодия, дополнительно определяют цитотоксическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки на сперматозоиды после двухчасового культивирования их в условиях термостата и комнатной температуры .

СОЮЭ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

PEGIlVSËИН

6У (И)

3@В A 61 B 10/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛаМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3515183/28-13 (22) 26. 11.82 (46) 30.04.84. Бюл. 9 16 (72) E.È. Карпенко и А.В. Руденко (7 1) Киевский научно-исследовательский институт урологии и нефрологии (53) 618.177(088.8) (56) 1. Юнда И.Ю. Болезни мужских половых органов. Киев, "Здоровье", 1981, с. 184-217. (54)(57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БЕСПЛОДИЯ, включающий определение подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки женщины, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения точности диагностики инфекционного бесплодия, дополнительно определяют цитотоксическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки на сперматозоиды после двухчасового культивирования их в условиях термостата и комнатной температуры.

1088708 разом.

Сперму у обследуемых мужчин получают путем массажа или маструбации после полового воздержания в течение 4-5 дней, в период овуляции у жены (определяют путем измерения базельной температуры в течение трех месяцев), предварительно обрабатывают наружное отверстие мочеиспускательного канала дезраствором (например раствор сулемы, хлорамина), оставляют ее в стерильных условиях при комнатной температуре на 2040 мин, в течение которых сперма полностью разжимается. Затем сперму тщательно перемешивают, разливают в ряд стерильных пробирок из расчета

50

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической практике при диагностике и лечении инфекционного бесплодия в семье. 5

Известен способ диагностики бесплодия у мужчин путем микроскопического исследования эякулята.

Способ лишь констатирует факт паФ !

О тоспермии, но не устанавливает причин у б ес пл одия .

Наиболее близким является способ диагностики экскреторного бесплодия в супружеской паре (проба Шуварского), который ос нован на определении наличия и подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки, взятом через 2-3 ч после половой близости в период овуляции у женщины I1J,20

Однако недостатком пробы является то, что она не учитывает и не позволяет распознать инфекционное бесплодие, отдифференцировать его от других видов бесплодия.

Цель изобретения — повышение точности диагностики инфекционного бесплодия.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу, включающему 30 определение подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки женщины, дополнительно определяют цитотоксическое действие секрета заднего свода влагалища н шейки матки женщины на сперматозоиды после двухчасового культивирования их в усло— виях термостата и комнатной темпе ратуры. 40

Способ осуществляют следующим об5-8х105 клеток (0,01 мл) на одну пробирку. В качестве контроля используют культуру сперматозоидов фертильного мужчины, которую готовят к исследованию аналогично культуре мужчины, обследуемого в оесплодном браке ° В пробирке со сперматозоидами обследуемого и фертильного мужчины вносят по 0,01 мл содержимого заднего свода влагалища и шеечного секрета (по два параллельных ряда).

Пробирки с содержимым оставляют на

30 мин для контакта. IIo истечении срока контакта в каждую пробирку вносят по 1,0 мл стандартной питательной среды, например среда Игла или 199, содержащей 1R фруктозы, и культивируют в течение 2 ч в условиях термостата, а затем при комо натной температуре 20-25 С в темной емкости в течение 24-48 ч. Просмотр пробирок производят через 6, 12, 24, 48 ч с обязательным приготовлением мазков и окраской по Граму и 5Х-ным зозином, при этом учитывают наличие цитотоксического эффекта по увеличению количества патологически измененных и мертвых сперматозоидов, а также наличие спермагглютинации.

При просмотре проб производят высев культур жидкости подопытных и контрольных проб на дифференциальнодиагностические среды для вьделения чистой культуры микроорганизмов, их идентифицирования и определения лекарственной чувствительности.

При наличии у женщины патогенных для сперматозоидов микроорганизмов, Л-форм микроорганизмов, микоплазм, хламидий, вирусов или грибов происходит помутнение питательной среды с культурой сперматозоидов, и при микроскопии мазков видна степень поражения сперматозоидов относительно контроля.

Высев культруральной жидкости из пробирок на селективные среды позволяет вьделить микробный возбудитель, идену фицировать культуру до вида, определить лекарственную чувствительность и назначить этиотропную терапию бесплодия.

Пример. Супружеская пара В. состояли в бесплодном браке в течение 5 лет. При объективном осмотре и по данным анамнеза отклонений развития и состояния органов половой системы эндокринного характера не

1088708

Сперму мужа и фертильногo донора оставляли до полного разжижения при комнатной температуре, периодически ее перемешивая. Разжижение у обследуемого наступило через 35 мин, у донора — через 20 мин. После этого эякулят стерильно разливали в два ряда опытных и контрольных проб по 0,01 мл (в каждом ряду по 4 -5 пробирок). Затем добавляли в каждый из рядов по 0,01 мп содержимого заднего свода влагалища и шеечного канала (последний в случае малого количества разбавляют раствором Рингера) и оставляют на 30 мин для контакта. Через 30 мин в каждую.пробирку добавляли по О, 1 мл стандартной питательной среды Игла, содержащей

17. фруктозы, и инкубировали в термостате 2 ч. Через 2 ч пробирки пе45 ренести из термостата в емкость, не пропускающую освещение и остава ляли при 20-25 С. Просмотр пробирок начали через 6 ч. Предваритель- но перед культивированием определяли исходные показатели спермограммы у обследуемого и у донора. В первом . случае концентрация сперматозоидов быпа равной 5,6х10 в 1 мл:живых 50, 5 подвижных 45, мертвых 5, патологически измененных 407, спермагглютинация (+++); во втором случае концентрация сперматозоидов

30 установлено. Муж и жена ранее лечились по поводу воспалительных процес-. сов в половых органах, которые субъективно себя ничем не проявляли.

При объективном исследовании мужа 5 отмечены некоторые отклонения со стороны предстательной железы: очагбвые уплотнения, чувствительные при пальпации. У жены избьггочная секреция влагалищной слизи. Путем трехмесячного измерения базальной температуры у жены установлен день овуляции — 14 день от начала менструального цикла (при 28-дневном цикле).

За 5 дней до овуляции у жены муж 15 воздерживался от половой близости.

После обработки кистей рук и полового члена 2Х-ным раствором хлорамина муж получил эякулят в стерильную пробирку в стерильных условиях.. Па- 20 раллельно у жены брали стерильной пипеткой емкостью 1,0 мл- содержимое заднего свода влагалища в стерильную пробирку, аналогично полу- ., чали содержимое шеечного канала.

7,4 х 10ь в 1 мл: живых 76, подвижных ?2, мертвых 24, патологически измененных 16Х, спермагглютинация — .

После 6 ч инкубации отмечено слабое помутнение в опытных пробирках, в контрольных - без изменений. При просмотре мазков в опытных пробирках более выраженные изменения спермограммы в пробе с влагалищным содержимым: живых 12Х подвижных нет, мертвых 887, патологически измененных 927, спермагглютинация (++++), менее выраженные в пробе с содержимым шеечного канала: живых 24, подвижных 3, патологически измененных 76Х, спермагглютинация (++++), в контрольной пробе живых 40, подвижных 36, мертвых 60, патологически измененных 447..

Произвели высев культур жидкости подопытных и контрольных проб на дифференциально-диагностические среды для выделения чистой культуры микроорганизмов, их идентифицирования и определения лекарственной чувствительноо ги и продолжили инкубацию.

Из опытных пробирок выделили микробную ассоциацию: альфа-гемолитический стрептококк и эпидермальный стафилококк в концентрации соответственно

3 х 10 микробных тел в 1 мл и х 10 микробных тел в культуре сперматозоидов с содержимым заднего свода влагалища и 1 х 10 микробных тел как стрептококка, так и стафилококка. Из контрольных пробирок выделили альфа-гемолитический стрептококк в концентрации 2 х t0 микробных тел в 1 мл в пробирке с секретом заднего свода влагалища и i x 10 микробных тел в пробирке с секретом шеечного канала. При определении лекарственной чувствительности стрептококк оказался высоко чувствительным к бенемицину, а стафилококк — к фузидину. При просмотре проб через

12 ч как в опыте, так и в контроле, все пробирки были мутными, а при изучении мазков сперматозоиды— мертвыми (цитопатогенный эффект).

Следовательно, бесплодие в супружеской паре обусловлено инфекцией как со стороны жены — альфа-гемолитический стрептококк, так и со

0 стороны мужа — эпидермальный стафилококк (в контрольной пробе выделен только стрептококк, следовательно, этот микроорганизм имеется

1088708

Составитель И. Косова

Техред А.Кикемезей Корректор А. Тяско

Редактор П. Макаревич

Заказ 2736/2 Тираж 688 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 только в секретах половых органов жены обследуемой пары).

Мужу назначено соответствующее лечение с учетом чувствительности микрофлоры к фузидину, а жене — к бенемицину.

В тех случаях, когда данные опытной и контрольной проб совпадают, рекомендуется дополнительно производить высев из культуры сперматозоидов мужа без примеси секретов жены, что позволяет дифференцировать этиологический фактор бесплодия в супружеской паре.

Таким образом, предлагаемый спо"

5 соб позволяет достоверно диагностировать бесплодие в семье, обусловленное инфекционным агентом, изолировать последний в чистом виде, определить лекарственную его чувствительность и назначить этиотропную терапию, наиболее адекватную для мужа и жены.