Способ интенсификации энергетического обмена

 

СПОСОБ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА, включающий введение животным биостимулятора энергетического обмена, отличающ и и с я тем, что, с целью повышс.ция концентрации адениннуклеотидов в ткани, в качестве биостимулятора в организм животного внутрибрюшинно вводят янтарнокислый аммоний в дозе 10-50 мг на 1 мг живой массы в сутки.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„„1090405

3(59 А 61. К 31/19

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

%86 jill V 1 Ыь

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

CO

CO

Ю фь

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3482062/28-13 (22) 12.08.82 (46) .07.05.84. Бюл. М - 17 (72) Ю.Г. Каминский, Е.А. Косенко, О.А. Чельманова, Е.Я. Кудрявцев и

M.Н. Кондрашова (71) Институт биологической физики

АН СССР (53) 615.1(088.8) (56) 1. Tornheim К. et al. — ."Biol.

Chem", 1972, v. 247, Ф 1, р. 162169.

2. Zimmer Н.G . "Science", 1980, v. 207, М - 4286, р. 319-321 (прототип). (54) (57) СПОСОБ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА, включающий введение животным биостимулятора энергетического обмена, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повышения концентрации адениннуклеотидов в ткани, в качестве биостимулятора в организм животного внутрибрюшинно вводят янтарнокислый аммоний в дозе

10-50 мг на 1 мг живой массы в сутки.

1090405

Изобретение относится к медико— биологическим исследованиям и предназначено для интенсификации энергообмена в печени старых млекопитаю—

35 щихся. 5

Известен способ интенсификации энергетического обмена в мышечном экстракте, включающий введение дезоксиглюкозы и непрерывное измерение концентрации адениннуклеотидов. При 10 этом в процессе реакции происходит снижение содержания адениннуклеотидов с последующим самопроизвольным его восстановлением 1 3.

Недостатком способа является то, 15 что эксперимент проводится на экстракте, приготовленном из вьделенного органа животного. Кроме того, токсичность дезоксиглюкозы, приводит к повреждению тканевых клеток. 20

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ интенсификации энергетического обмена, заключающийся в повышении концентра- 25 ции адениннуклеотидов в сердце молодых животных с помощью рибозы. Способ включает в себя следующие операции. введение анестезированным животным изопротеренола для предварительного 30 снижения тканевой концентрации адениннуклеотидов, внутривенное введение раствора рибозы (1,2 г на крысу массой 250 г), приводящее к повышению концентрации адениннуклеотидов до первоначального уровня, последующее вьделение тканевого экстракта из исследуемого органа и измерение KQHцентрации адениннуклеотидов в экстракте ферментативным методом 52 3, Однако способ характеризуется недостаточно высокой достигаемостью уровня энергетического обмена, а также необходимостью анестезирования животного во время длительного 45 введения рибозы (в течение 24 ч), травмирующего животное в течение эксперимента, и очень большая действующая доза рибозы, а также кратковременное ее действие (4 ч).

Более того, для предварительного снижения концентрации адениннуклеотидов в исследуемых органах используют органические соединения синтетического происхождения, не имеющиеся в организме.

Целью изобретения является повышение концентрации адениниуклеотидов в ткани.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу интенсификации энергетического обмена в качестве биостимулятора в организм животного внутрибрюшинно вводят янтарнокислый аммоний в дозе 10-50 мг на

1 кг живой массы в сутки.

В предлагаемых дозах янтарнокислый аммоний не оказывает влияние на физиологическое состояние и поведе— ние животных в результате того, что основная часть вводимой дозы препарата выводится через почечные канал ьцы.

На чертеже представлены концентрации адениннуклеотидов в печени крысы: а-в печени молодой крысы; б — в печени старой крысы; в — в печени старой крысы через сутки после

6-дневного сеанса введения физиологического раствора; r — в печени старой крысы через сутки после 6-дневного сеанса введения янтарнокислого аммония. По оси ординат — концентрации адениннуклеотидов в наномоль на

1 г ткани. Вертикальная черта над каждым столбиком — среднеквадратичная ошибка среднего значения (для

14-26 животных в каждой группе). Как видно из фиг. 1, янтарнокислый аммоний увеличивает суммарное содержание адениннуклеотидов у старых крыс до уровня у молодых животных.

Пример 1. Самцам крыс линии

Вистар возрастом 2 года ежедневно в течение 6 дней вводили внутрибрюшинно раствор янтарнокислого аммония в дозе 10 мг на 1 кг живой массы, растворенного в О, 25 мл воды, на животное. Через 24 ч после последнего введения препарата животных забивали, быстро удаляли переднюю долю печени и сдавливали ручным прессом, предва—

)рительно охлажденным в жидком азоте, Залитую жидким азотом ткань измельчали в ступке до порошка, заливали

7 объемами охлажденной 8 -ной хлорной кислоты в 407-ном этаноле и экстрагировали 15 мин при †10.

Смесь центрифугировали 20 мин при

3000 и -10 для удаления осадка.

Затем экстракт нейтрализовали едким калием и измеряли концентрации индивидуальных адениннуклеотидов в экстракте ферментативным методом.

Для оценки действия препарата сравнивали содержание адениннуклеотидов в печени инъецированных и интактных старых животных. В качест1090405

Номер опьгга

Группа животных

Обработка животных

Количество животных в группе

Доза

Молодые, 3-4 мес

Старые, 2 года

Старые, 2 года

Нет

Нет

0,25 мл

Внутрибрюшинно, физраствор, 6 дней

10 мг на 1 кг 2

Старые, 2 года

Внутрибрюшинно, янтарнокислый аммоний, 6 дней

20мг на 1 кг ?

50мг на 1 кг 16 ве контроля использовали физиологическийй раствор. В параллельной серии опьггов животным внутрибрюшинно вводили 0,25 мл физраствора. Полученные данные представлены в таблице (опыт

Р 4) . Вводимый янтарнокислый аммоний увеличивает содержание адениннуклеотидов в печени 2-х летних крыс íà 7Х

I причем различие между контролем и

10 опытом статистически недостоверно.

Пример 2. Условия выполнения способа те же, что и в примере 1, но вводимая доза янтарнокислого аммония 20 мг на 1 кг живой массы. Полученные данные представлены в таблице

15 (опыт Ф 5) . Как видно из таблицы, янтарнокислый аммоний увеличивает суммарное содержание адениннуклеотидов на 277, т.е. до уровня у молодых животных. Таким образом, янтарнокислый аммоний действует как биостимулятор энергетического обмена.

Пример 3. Условия выполнения способа те же, что и в примере 1, 25 только вводимая доза янтарнокислого

5 Старые, 2 года То же

6 Старые, 2 года То же аммония 50 мг на 1 кг живой мас сhl

Данные представлены в таблице (опьг1

N - 6) и указывают на то, что янтарнокислый аммоний увеличивает уровень адениннуклеотидов на 257, приближая его к уровню молодых животных.

Использование предлагаемого способа по сравнению с известными позволяет повысить интенсивность энергетического обмена в печени старых животных, приближая его к уровню молодых животных, путем повышения уровня адениннуклеотидов; использовать в малых дозах нетоксичное и дешевое вещество — янтарнокислый аммоний природного происхождения, в то время как в известных способах используются дорогостоящие импортные препараты; вводить препарат неанестезированным животным в течение 1-5 ч в отличие от прототипа, в котором введение осуществляют в течение 24 ч.

Данные, характеризующие предлагаемый способ, сведены в таблицу.

1090405

Продолжение таблицы

Содержание в печени мкмоль/г

Номер опыта

Сумма АН

АТФ

1,88+0, 14 0,96+0,06 0,30+0, 03 3, 14+0, 22

1,46+0,03 0,62+0,02 0,29+0,02 2,37+0,04

1,61+0,03 0,60+0,02 О, 20+0,01 2,40+0,02

1,63+0þ 20 Ою 65+0â 19 Оэ 25+0э 10 2ь 53+0þ 20

1,85+0,30 0,82+0,15 0,31+0,15 2,98+0,07

1,74+0,08 0,86+0,03 0,31+0,01 2,91+0, 12

Составитель Б.Кузьмичев

Редактор Г.Гербер Техред Л.Коцюбняк Корректор

Заказ 3548 Тираж 688 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4