Способ получения меченного тритием аденина
(19)SU(11)1098232(13)A3(51) МПК 5 C07D473/34, C07B59/00, A61K31/52(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯк патентуСтатус: по данным на 27.12.2012 - прекратил действиеПошлина:
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННОГО ТРИТИЕМ АДЕНИНА
Изобретение относится к усовершенствованному способу получения меченного тритием аденина - биологически активного соединения, предшественника нуклеиновых кислот, которое может найти применение в молекулярной биологии, молекулярной генетике и экспериментальной медицине. Известен способ получения меченного тритием аденина высокой молярной активности, который заключается в проведении реакции жидкофазного восстановительного каталитического дегалоидирования 2,8-дихлораденина тритием в присутствии палладиевого катализатора при температуре 100оС в аммиаке. Недостаток известного метода состоит в использовании в качестве исходного труднодоступного 2,8-дихлораденина, проведение процесса в аммиаке при нагревании, низкий химический выход (4,5-5% ) и радиохимический выход 
5% , недостаточно высокая молярная активность получаемого аденина 1,66-1,85 ТБк/ммоль (45-50 Ки/ммоль). Цель изобретения - упрощение процесса, повышение химического и радиохимического выходов меченного тритием аденина. Поставленная цель достигается описываемым способом получения меченного тритием аденина путем обработки природного аденина, предварительно нанесенного на палладиевый катализатор, газообразным тритием при температуре 160-170оС в течение 60-120 мин. Отличительными признаками способа являются: обработка аденина, предварительно нанесенного на палладиевый катализатор, газообразным тритием в твердой фазе при температуре 160-170оС в течение 60-120 мин. Осуществление описываемого способа позволяет проводить процесс в одну стадию, используя в качестве предшественника для введения тритиевой метки природного аденина - довольно стойкого химического соединения, получить меченный аденин с молярной активностью до 2,02 ТБк/ммоль (60 Ки/ммоль), повысить химический выход до 96% , радиохимический - до 48% . П р и м е р. В реакционную ампулу из стекла объемом 7,0 см помещают 1,4 мг аденина (10 мкмоль), нанесенного на 30 мг палладиевого катализатора - 10% Pd/BaSO4. Нанесение проводят упариванием досуха на ротационном вакуумном испарителе суспензии катализатора в водном растворе аденина, подкисленного соляной кислотой. Ампулу откачивают до остаточного давления 10-3 торр, напускают 95-98% -ный газообразный тритий (260 ГБк, 7Ки). На ампулу надевают трубчатый электрический нагреватель, разогретый до 170оС. Реакцию получения меченного тритием аденина проводят при 170оС в течение 120 мин. После охлаждения удаляют непрореагировавший тритий, продукты реакции смывают с катализатора водой. Для удаления лабильного трития проводят отгонку с водой на ротационном вакуумном испарителе. Получают 21,6 ГБк (584 мКи) аденина (9,6 мкмоль, химический выход 96% , радиохимический выход 48% ) с молярной активностью 2,22 ТБк/ммоль) и радиохимической чистотой более 96% . Продукт не требует дополнительной очистки. Чистота полученного аденина была определена методом тонкослойной радиохроматографии на ПЭИ-целлюлозе (растворитель-вода) и подтверждена энзиматическим превращением аденина в АМФ и АТФ. При проведении энзиматического синтеза молярная активность меченных тритием АМФ и АТФ равнялась молярной активности исходного аденина, что говорит о высокой чистоте исходного аденина вследствие высокой ферментосубстратной специфичности. Таблица иллюстрирует предложенный способ при других температурах и времени проведения реакции Описываемый метод позволяет значительно упростить процесс получения меченного тритием аденина с высокой молярной активностью за счет проведения реакции изотопного обмена газообразного трития с природным аденином вместо проведения реакции дегидрогалоидирования специального предшественника, а также позволяет увеличить химический (в 25 раз) и радиохимический (почти в 10 раз) выходы целевого соединения. (56) Мясоедов Н. Ф. и др. Введение тритиевой метки в компоненты нуклеиновых кислот гидрогенолизом соответствующих предшественников. VII. Получение меченных тритием аденина, аденизинмоно-, ди- и трифосфатов высокой удельной радиоактивности. - "Радиохимия", 1981, т. 23, N 4, с. 607-613.
Формула изобретения
РИСУНКИ
Рисунок 1MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Номер и год публикации бюллетеня: 23-2001
Извещение опубликовано: 20.08.2001
