Способ выявления белковых фракций в сыворотке крови человека

 

Изобретение относится к биохимии . .Цель изобретения - упрощение и ускорение способа за счет введения в состав красителя триаммонийной соли ауринтрикарбоковой кислоты. При выявлении белковых фракций после электрофореза одновременную фиксацию и окраску их производят в водном растворе 0,0027-0,0108%-ногохлорида желе за, 7-10%-ной уксус Э Й кислоты и 0,01-0,02%-ной триаммоний-п ной соли азфинтрикарбон 5вой кислоты, взятых в соотношении (2-5):(50-200): :(1-3).. Окраску производят в указанном растворе в течение 12-16 ч.

СО!03 СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (р 4 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTH4 (21) 3752682/28-14 (22) 13 ° 06.84 (46) 23.06.86. Бюл. У 23 (71) Астраханский государственный медицинский институт им.А.В.Луначарского (72) P.3.Алиев, В,И.Балашов, О.В.Рубальский и В.Н.Хлюстов (53) 616.07 (088.8) (56) Э.Гааль и др. Электрофорез в разделении биологических макромолекул, 1982i с.266-.267, (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКОВЫХ ФРАКЦИЙ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

„,SU„, 1239596 A 1 (57) Изобретение относится к био- . химии. Цель изобретения - упрощение и ускорение способа за счет введения в состав красителя триаммонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты. При выявлении белковых фракций после злектрофореза одновременную фиксацию и окраску их производят в водном растворе 0,0027-0,0108Х-ногу -" хлорида железа, 7-10Х-ной уксусной кислоты и 0,01-0,02Х-ной триаммоний-:

Н0А. соли ауринтрикарбоновой кислоты, взятых в соотношении (2"5):(50-200):

:(1-3).. Окраску производят в указанном растворе в течение !2-!6 ч.

Составитель М.Позняк

Редактор В.Иванова Техред. Н.Бонкало Корректор Jl.Ïàòàé Заказ 3389/43 Тираж 778 . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская; наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие,г.ужгород, ул. Проектная, 4

4 12

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимии,.

11елью изобретения является упрощение и ускорение способа за счет введения в состав красителя триаммонийной соли ауринтрйкарбоновой кислоты.

Способ осуществляется следующим образом.

При выявлении белковых фракций после электрофореэа s ПААГ одновременную фиксацию и окраску.их осуществляют в водном растворе-0,00270 0108 -ного хлорида железа, 7— !

О -.ной уксусной кислоты и 0,010,02Х-ной триаммонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты, взятых в соотношении (2-5):(50-200):(1-3) соответственно. Окраску производят в укаэанном растворе в течение 12

16 ч при этом участки геля где отсутствуют фракции белков., не окрашиваются, тем самым ликвидируется длительная операция отмывки избытка красителя.

Пример 1. Исследуют сыво ротку крови человека. Раствор для, окраски белковых фракций после электрофореэа в геле готовят не. посредственно перед употреблением ..смешиванием исходных водных растворов:. (А) 1Х раствора красителя "Алюмином" (триаимонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты), (В) 0,27 раствора железо (ill) хлорида, (C) 7Х раствора уксусной кислоты в объемном отношении А:В:С = 1:1:100.

После проведения электрофореза белков сыворотки крови человека столбик нолиакриламидного геля помещают "в укаэанный красящий раствор.

Проявление белковых фракций в раст-, воре наблюдается визуально уже через 40-60 мин. Спустя 12-16 ч ок39596 2 раска участков гелей, содержащих .белок, становится темно-фиолетовой, а .участки геля, свободные от белков, остаются абсолютно бесцветными, В таком виде гель можно подвергать анализу на содержание белков.

Длительное хранение гелей с проявленными фракциями белков осуществляется в растворе, содержащем

1р 7 . уксусной кислоты и 0,0027 железо (111)) хлорид. Качество окраски при хранении гелей в этом растворе в течение 5-8 месяцев не. изменялось.

15 Пример 2. Раствор для окраски белков готовят в следующем объемном соотношении А:В:С= 3:5:200.

Результаты окраски практически не, отличаются от приведенных парамет2р ров примера 1.

Пример 3. Раствор для окраски белков готовят в следующем объемном соотношении А:В:С=l:2:50.

Результаты окраски не отличаются

25 от приведенных параметров. примеров

1 и2.

Формула изобретения

5р Способ выявления белковых фракций в сыворотке крови человека путем электрофоретического разделения в полиакриламидном геле, фиксации полученных фракций с последующим их ок35 тем, что, с целью упрощения.и ускорения способа; фиксацию и окраску проб проводят одновременно в водном растворе 0,0027-0,0108Х-ного хлорида же4р лева, 7-,10 .-ной уксусной кислоты.и

0,01-0,02 -ной триаммонийной соли ауринтрикарбоновой кислоты, взятых в соотношений (2-53:(50-200):(1-3) соответственно.