Способ прогнозирования возникновения гастроэнтерологического заболевания у детей

 

Изобретение относится к медицине , а именно к гастроэнтерологии, и может быть применено для прогнозирования возникновения гастроэнтерологических заболеваний у дестей. Цель изобретения - повьшение точности способа. У ребенка натощак собирают слюну в количестве 3,5 мл. Слюну центрифугируют 15 мин при 3000 об/ /мин. Б центрифуге известными методами определяют концентрацию молочной кислоты и гистамина. При значеi нии отношения эти показателей 1,4 и ниже прогнозируют возникновение заСЛ болевания .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ .РЕСПУБЛИК (б11 g С 01 N 33/50

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H ABTOPCHGMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 383651 1 /28-14. (22) 04.01.85 (46) 23.10.86. Бюл. Р 39 (71) Горьковский научно-исследовательский педиатрический институт (72) .Л.Г.Комарова, Л.В.Коркоташвили и И.Н.Власова (53) 616.07(088.8) (56) Дорофейчук B.Ã. и др.Дисбактериоз-фактор риска гастроэнтерологических заболеваний. Вопросы детской гастроэнтерологии. Эпидемиология.организация медицинской помощи. Профилактт1ка. Респ. сборник. — Горький, 1983, стр. 39-48. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ . ВОЗНИКНОВЕНИЯ ГАСТРОЗНТЕРОЛОГИЧЕСКОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ У IIETFA (57) Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологин, и может быть применено для прогнозирования возникновения гастроэнтерологических заболеваний у детей. Цель изобретения — повышение точности способа. У ребенка натощак собирают слюну в количестве 3,5 мл. Слюну центрифугируют 15 мин при 3000 об/

/мин. В центрифуге известными методами определяют концентрацию молоч" ной кислоты и гистамина. При значеС2 нии отношения эти показателей 1,4 и Е ниже прогнозируют возникновение saболевания.

1265613

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для прогнозирования возникновения гастроэнтерологических заболеваний у детей. 5

Цель изобретения — повышение точности способа (на 287) за счет определения в слюне содержания молочной кислоты и гистамина.

Способ осуществляют следующим об- !Р разом.

У ребенка утром натощак собирают слюну в количестве 3,5 мл. Слюну центрифугируют в течение 15 мин при

300 об/мин. В центрифугате определяют концентрацию молочной кислоты и концентрацию гистамина известными методами.

Ход определения. В центрифужные пробирки наливают 2 мл-27-ной трихлоруксусной кислоты и 0,4 мл слюны, перемешивают и центрифугируют

10 мин. Берут 1 мл центрифугата, прибавляют 0,5 мл 207-ного Си504, 5 мл II О и 0,5 r окиси кальция (про- 25 каленной), тщательно перемешивают стеклянной палочкой д появления голубого окрашивания, оставляют стоять в течение 30 мин, центрифугируют. Затем в охлажденные в ледяной бане про- Зр бирки помещают 0,5 мл центрифугата, 2 капли 57-ного CuS04, 3 мл химически чистой концентрированной Н БО

4 (для пробы Соваля), тщательно перемешивают. В контроль берут 1 мл

Н О, 4 капли 5%-ного CuS04,6 мл Н SO

2 4

Ставят пробирки на 5 мин в кипящую баню, потом в ледяную и добавляют по 2 капли (в контроль 4 капли) параоксидифенила. Размешивают палочкой, 4р начиная с контрольной пробы. Пробирки помещают в баню при 33-36 С на

30 мин после чего — в кипящую баню на 90 с (встряхивают в бане) и опять охлаждают на льду. Колориметрируют 45 на ФЭК-56 в кюветах 5 мм при зеленом фильтре. Содержание молочной кислоты находят по стандартной кривой в мг ., построенной по растворам молочной кислоты с известной концентрацией.

Для перевода результата в ммоль/л умножают результат на коэффициент

0,111.

Для определения содержания гистамина проводят предварительную обработку слюны: к 2,5 мл слюны приливают равный объем перегнанного ацетона и энергетичпо встряхивают.

Смесь отгоняют до половины объема под вакуумом на водяной бане при температуре 50 С, охлаждают в холодильнике в течение 1 ч и после этого центрифугируют в течение 20 мин при 3000 об/мин. В пробирку со шлифом наливают

1 мл центрифугата, добавляют 1 мл

1н. НС10„-, 0,2 мл 5н. NaOH, 1 r

NaC1 и 4 мл бутанол-хлороформной смеси. Пробы энергетично встряхивают 3 мин, а затем центрифугируют

10 мин при 1500 об/мин. Водную фазу отсасывают пипеткой, к органической фазе приливают 2 мл 0,1н. NaOH, насыщенного NaCl, встряхивают 2 мин и центрифугируют 10 мин,3,5 мл органической фазы переносят в другие пробирки, содержащие 2,5 мл 0,01н.

НС1, встряхивают 3 мин и центрифугируют 10 мин. Кислотную фазу в количестве 1 мл, содержащую гистамин, отсасывают в отдельную пробирку.Затем в эту пробирку приливают 0,2 мл

1н. NaOH, перемешивают и добавляют

0,1 мл 0,1 †но раствора ортофталевого альдегида в метаноле, снова перемешивают. Через 4 мип приливают

0,1 мл 1,5 M раствора фосфорной кислоты для стабилизации флюорофора.

Объем проб доводят водой до 5 мл и флюориметрируют. Величину флюоресценции измеряют при длине волны испускания 470 нм, используя для возбуждения флюоресценции светофильтр с максимумом пролускания 365 нм.

Параллельно с опытом проводят анализ стандартного раствора и контрольной пробы. Стандарт: 0,05 и

0;1 мкг/мл гистамина доводят до

1,5 мл Н О, приливают 0,5 мл 1н.

НС10 и проводят через все этапы опыта. Контроль: 1,5 мл II О 0,5 мл 1í. НС10 и проводят через все пробы. Расчет:

А 0,1 мкг

6,17(мкмоль/л) где А — интенсивность флюоресценции пробы за вычетом контроля;

Б — интенсивность стандартной пробы за вычетом контроля;

6,17 †коэффициент пересчета.

В качестве критерия неблагоприятного прогноза берут уровень индекса молочная кислота/гистамин ниже

1,4. Частота встречаемости сниженно1265

Таким образом, индекс МК/Г, равный 0,89, что ниже нормы в 3,6 раза, является объективным доказательством риска гастроэптерологического заболевания.

Иальчик в течение 1 r находился под диспансерным наблюдением, неоднократно осматривался врачом-педиатром. В связи с появлением жалоб на непостоянные боли в животе о» был

30

Составитель Л.Артюшина

Техред И Попович Корректор И.Демчик

Редактор Н.Яцола

Заказ 5655/39 Тираж 778. Подписное

BHHHIIH Гасударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 го индекса молочная кислота/гистамин в группе здоровых детей 337, а у

;детей с гастроэнтерологической патологией 69X..

Пример 1. Валера К., 4 года, отнесен к группе часто болеющих детей. В анамнезе у него частые (67 раз в год) острые распираторные заболевания, грипп, отит, аденоиды

II степени. Сам факт частой заболева- о емости считается риском по гастроэнтерологической патологии (вероятность

40Ж).

Для уточнения степени риска мальчику было дополнительно проведено 15 .исследование слюны по предлагаемому способу. Для этого определены в слюне концентрации молочной кислоты и гистамина и их соотношение, которые соответственно равны 1,11 ммоль/л 20 (норма 1,7 ммоль/л) 1,24 мк-моль/л (норма 0,99 мк-моль/л), 0,89 (норма 3,25). госпитализирован в клин ку где на 35 основании всестороннего комплексного обследования был поставлен клинический диагноз: хронический гастродуоденит.

p z м e p 2 Иарина A. 6 лет 4 посещает детский комбинат. Девочка отнесена к группе здоровых В анам613 незе инфекционные заболевания отсутствуют. Распираторные заболевания 12 раза в год. Физическое развитие соответствует возрасту. С целью прогнозирования возникновения гастроэнтерологического заболевания, у девочки была исследована слюна, определено в ней содержание молочной кислоты и гистамина, которые соответственно равны 1,23 ммоль/л и 0,87. Соотношение ИКГ/Г равно 1,23 /0,87 = 1,41.

Таким образом, индекс ИК/Г, равный

1,41 указывает ча отсутствие риска возникновения гастроэнтерслогического заболевания.

При катамиестическом наблюдении отмечено, что девочка никаких жалоб не предъявляет, в том числе гастроэнтерологических. Повторное исследование слюны по предлагаемому способу показало, что индекс ИК/Г слюны равен 1,56. Заключение врача-педиатра: здорова.

Предлагаемый способ позволяет повысить точность прогнозирования на

28Х. На осуществление способа не требуется больших затрат времени, он может быть проведен в течение 4-5 ч (известный способ — несколько дней). Формула из обре те ния

Способ прогнозирования возникновения гастроэнтерологпческого заболевания у детей путем исследования слюны, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в слюне определяют содержание молочной кислоты и гистамина и при значении отношения этих показателей

1,4 и ниже прогнозируют возникновение заболевания.