Способ определения @ -ацетилглутамина
Изобретение относится к аналитической химии, а именно-к способу определения N-ацетилглутамина. Цель изобретения - повьшение селективности способа. Определение N-aцeтиJiглутамина осуществляют путем обработки 5%-ным раствором гидроокиси калия при 85-90°С. В полученный раствор вводят 6-8 н. раствор соляной кислоты до рН 1,0-1,5 и ацетон или диметилсульфоксид. Проводят потенциометрическое титрование О,1 н. раствором гидроокиси калия. Продоло жительность анализа 1,5 ч, относительная ошибка +1%. 1 табл. (Л
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСН ИХ
РЕСПУБЛИК
А1 (19) (11) (g1) 4 G 01 N 31/16
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЙ:.,И
Н А В ТВЕРСКОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ
b1=
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ
) р ( г
1 (21) 3924391/23-04 (22) 29.05.85 (46) 23.1 1.86. Бюл. N 43 (72) А.Я. Веверис, Б.А. Спинце и Э.E. Пицкайне (53) 543.24.087(088.8) (56) Сиггия С., Ханна Дж.Г. Количественный органический анализ по функциональным группам. М.: Химия, 1983, с. 149-179. Ту-6-09-77-83 от 28.04.83. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ N-АЦЕТИЛГЛУТАМИН А. (57) Изобретение относится к аналитической химии, а именно-к способу определения N-ацетилглутамина. Цель изобретения — повышение селективности способа. Определение N-ацетилглутамина осуществляют путем обработки 57.-ным раствором гидроокиси калия при 85-90 С. В полученный раствор вводят 6-8 н. раствор соляной кислоты до рН 1,0-1,5 и ацетон или диметилсульфоксид. Проводят потенциометрическое титрование О, 1 н. раствором гидроокиси калия. Продолжительность анализа 1,5 ч, относительная ошибка +1K. 1 табл.
1272231
Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способам определения содержания веществ методом потенциометрического титрования, и может использоваться в аналитических и биохимических лабораториях при контроле чистоты N-ацетилглутамина.
Цель изобретения — повышение селективности способа.
Способ заключается в следующем., Навеску образца помещают в колбу со шлифом объемом 100 мл, вводят
5-7Х-ный раствор гидроокиси калия или натрия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат или на терморегулируемую водяную баню. Смесь выдерживают при 85-80 С в течение 60-70 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл дистиллированной воды споласкивают горлышко колбы и пробку. В полученную смесь вводят
6-8 н. соляную кислоту до установления рН в интервале 1,0-1,5. Затем вводят 20 мл ацетона или диметилсульфоксида и перемешивают. В полученный раствор погружают стеклянно- каломельную электродную пару и проводят потенциометрическое титрование О, 1 н. водным раствором гидроокиси калия или натрия до появления на кривой трех скачков потенциала — первый из них соответствует оттитрованию избытка соляной кислоты (V ), второй — совместному оттитрованию двух карбоксильных групп
N-ацетилглутаминовой кислоты (V2),. а третий — оттитрованию хлорида аммония (V3 ). .При анализе чистых препаратов N-ацетилглутамина имеет место равенство Ч/2 = V . Примеси з уксусной кислоты титруются совместно с N-ацетилглутаминовой кислотой и
V /2 > V,,содержание N-ацетилглутамина рассчитывают по Ч, и содержа"
3 ние уксусной кислоты по разности
V -2 V = V уксусная кислота. При
z наличии примесей хлорида аммония
Ч > Ч /2 содержание Н-ацетилглутамипа рассчитывают по V /2, а количество примеси хлорида аммония находят по разности V3 — V /2 = Продолжительность анализа 1,5 ч, относительная ошибка +1X, относительное стандартное отклонение +1,57. Пример 1, Навеску(0,07135 r) обрабатывают 5 мл 57-ного раствора гидроокиси калия, стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 90 С в течение 70 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко и пробку. В анализируемый раствор вводят 6 н. соляную кислоту до установления рН 1,0, затем добавляют 20 мл ацетона и потенциометрически титруют 0,1025 н. водным раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала на кривой. По кривым определяют, что »28 мл а 3,68 мл (V /2 = U ), и рассчитывают по формулам содержание N-ацетилглутамина соответственно 99,5 и 98,47. Пример 2. Навеску (0,08581 r) обрабатывают 5 мл 77-ного водного раствора гидроокиси- натрия, 1 стаканчик плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 85 С в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко и пробку. В анализируемый раствор вводят 8 н. соляную кислоту до установления рН 1,5, затем добавляют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 0,09763 н. раствором гидроокиси натрия до появления трех скачков потенциала. По кривым титрования определяют, что — 9,38 мл, а Ч = 4,65 (V /2 =V ) и по формулам рассчитывают содержание N àöåòèëãëóòàìèíà соответственно 99,5 и 100,47. Пример 3. Навеску (0,0722 г) искусственной смеси — 0,01015 r хлорида аммония (14,17) и 0,06205 г N-ацетилглутамина (85,9X) обрабатывают 5 мл 67-ного раствора гидроокиси калия. Колбу плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 87 С в течение 65 мин. Затем стаканчик охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и 2-3 мл воды споласкивают горлышко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 7 н. соляную кислоту до установления рН 1,2, затем добавляют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 1272231 0,1025 н. раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала. По кривым титрования определяют, что Чг = 6,36 мл, à Vз,, = -=5 06 мл (V /2 < V), и рассчитывают по формулам S сбдержание N-ацетилглутамина 85,0Х хлорида аммония 14,37., V /2 = 3,18 мл. Пример 4. Навеску (0,08427 г) искусственной смеси — 0,01115 г уксусной кислоты (13,2) и 0,07312 г М-ацетилглутамина (86,8Х) обрабатывают 5 мл 6,5Х-ного раствора гидроокиси натрия. Колбу плотно закрывают пробкой и помещают в термостат. Смесь выдерживают при 88 С в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку и споласкивают 2-3 мл воды горлышко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 6н. соляную кислоту до установления рН 1,3, затем добавляют 20 мл ацетона и потенциометрически титруют 0,09763 н. раствором гидроокиси натрия до появления трех скачков потенциала. По кривым титрования определяют, что V> -= = 9,81 мл, а Ч = 3,97 мл (V>/2 >Чз) и рассчитывают по формулам содержание N-ацетилглутамина 86,6Х, уксуснОЙ кислОТЫ 13 0Х If р и м е р 5. Навеску (0,0817 r) обрабатывают 5 мл 7Х-ного раствора гидроокиси калия, колбу плотно закрывают пробкой, помещают в термостатз и выдерживают при 85"С в течение 60 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры, открывают пробку,2-3 мл воды споласкивают горлышко колбы и пробку. В анализируемый раствор вводят 7 н. соляную кислоту до установления рН 1,5, затем добавпяют 20 мл диметилсульфоксида и потенциометрически титруют 0,1025 н. раствором гидроокиси калия до появления трех скачков потенциала. По кривой титрования определяют, что Ч = 8,06 мл, .à V = 4,50 мл (Vz /2 ) vV>), и рассчитывают по формулам содержание N àöåòèëãëóòàìèíà 95,2Х, примесей хлорида аммония 3,2Х. V ° /2 = 4,03 мл. Примеры реализации способа представлены в таблице. Формула из обре тения Способ определения N-ацетилглутамина путем обработки анализируемой пробы при 85-90"C раствором щелочи и последующим титрованием полученного раствора гидроокисью калия или натрия, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности способа, в качестве раствора щелочи используют 5-7Х-ный раствор щелочи, а перед титрованием раствор подкисляют соляной кислотой до рН 1,0-1,5 и вводят в него ацетон или диметилсульфоксид. 1272231! !, х 3 а 00 а C»I С! 5 VCC F ! COO х к О1 о а а о о + а CV а а сЧ an О 3 аСа »» а а О О О Оъ» л а О Ch хФе 1 I сч а м I Oa a»I » с»\ I I CO л а ° 1 1. с» О Ф iО Ch а м CO СО о . о о о о CI о сс » о l» сс с) х о 1 ю а о Ф7 D. х 3 1Х I (с !» х 2 м а an с0 Я а0 сс а Х I-И о л о л Ф ж о О CI М х х 1 1 к к О л 1! ! 1 ! I се % 1» ц х» 1, . ас- j CI a0 ф С», йА,.б а! f51» " i. Ц ОД!о Ф1 rði39 Ос. О+ 1 а ! о (! к —.— т— ! 1;! jOacW ! 1 1 I 1 1 I 1 1 00 О Э л а а а а о - о сч о о м а а а О О\ О\ О\ О1 О Ch Ch м сс о сч О Л О1 Ю о сч в о ф ф л ф о о о о а а » а о о о о а а » ° » ссс о о О о an i o В CO CO Ch ж Я g Л g o Я 1 1 к 3 к х л к м О К сс л О\ м а О С! сч I 1 I о 1 + а CO 1 1 I Ch а о 1 1 I 1 ° n м сч м л со с! Ch Ch M о о л о о о о о о о о Ю f, ОХ о v и 4 i5 2 я 3 х к ! сс! В с а :! 0IC 5 I0C О l»»C l Щ С1ДФ Од 0а Q IC a0 0а О Х Е О С- IC a0 у 26uÎæ5а » а о х сс и Э х6 е х х а ааа о CI ф ! А 1272231 О 1(. Cl (Х КОО » (СЪ С Ъ СЧ Ф ф Ю » O » в CO (ЕС Ф С»\ (СЪ ! I 1 ! 1 ! I МЪ Л Ю т ° е Оъ Ch Ф е еч » » В (ЕЪ 1О (Е О\ Ch Ch I I 1 1 t I,. ! e5 О 1 0 +(Ф ! Cc ! о О (СЪ О Ф а» О О с О О Ф О О Ф (ес СЧ»О с ((Ъ СЧ Ф (Ч Л 0((Ф Ф Л Л CO О О О О О » » » » О О О О О О С»( О (Ч (О О О О О О с6 х c» cC а аХ 0 О Х е(е((m Я х.! СЧ ch С»Ъ О (Ч (Ъ О Ц О >Ъ I CC$ О Ж О (х 93 cc(О Э М IC Х И hf К ) l ее м Ct ф CCC й) о (c(I- О Х I cI! 33 f X Э Э.(6 I » Э (6 Ih (» а «0 а 0 C(((. a хэ5 I X 0 f. I э а I ZfV Э c«o I 1 и ! Э О х О Э б« ff (I 1 Л Ю ° \ 1 б 1 I 1 О (О I (е(! 1 1 ! 1 I ! Ф Ф (Ъ О (СЪ С Ъ 1О » » » Ю О С»Ъ О т-! l I I 1 + + I СЧ СЧ Л О (/\ Ch ! СЧ Ch О «h СЪ «0 0(О\ Ch «h Ch Ch (О (Ф ! 0 . 0 ац С((f» О О (» О И О f 0 Э 0 О Э 0 0 Х .4I f 4 5 5 4 i5 ЛП 4* О (съ О О О (е(О О О О сО»е 1О Л ((Ъ О О ((Ъ ((Ъ ((Ъ 3 О Ф О(Ф Ф «0 CO Ch Г» % I g Й - .ЕЧ СС(g K
